ESTUDIO HISTOPATOLOGICO BASICO DE LA MEDULA OSEA

Transcripción

1 ESTUDIO HISTOPATOLOGICO BASICO DE LA MEDULA OSEA 1. Introducción. Estudio morfológico y funcional de la médula ósea. Patologia no neoplásica 2. Inmunohistoquímica del tejido hematopoyético 3. Síndromes linfoproliferativos /Linfoma no Hodgkin. Linfomas de Hodgkin. Neoplasias de Células plasmáticas. 4. Neoplasias Mieloproliferativas 5. Síndromes de fallo medular I 6. Síndromes de fallo medular II. Síndromes mielodisplásicos. Neoplasias mielodisplásicas -Mieloproliferativas 7. Leucemias agudas 8. Integración y presentación de casos

2 BIOPSIA DE MEDULA OSEA EN EL DIAGNOSTICO DE HEMOPATÍAS MARCO CLINICO Y METODOLOGICO ALCANCES Y LIMITACIONES CONSIDERACIONES TECNICAS EVALUACION SISTEMATICA

3 MARCO CLINICO Y METODOLOGICO Indicaciones: Diagnostico y estadificación y seguimiento de de SLP/LNH Sospecha de metástasis Diagnóstico, estadificación y seguimiento de tumores de células redondas pediátricos Neoplasia mieloproliferativas crónicas Síndromes de fallo medular Investigación de fiebre de origen desconocido /enfermedades granulomatosas. Sospecha de síndrome hemofagocítico Sospecha de neoplasias de células plasmáticas /amiloidosis primaria Sospecha de tesaurismosis Leucemias agudas En cualquier caso donde este indicado el aspirado medular y no se obtenga material QUIEN?

4 ALCANCES Y LIMITACIONES ALCANCES: Evaluación topográfica Evaluación del estroma medular Inmunohistoquímica Cuantificación en procesos patológicos* LIMITACIONES Detalle citológico pobre (comparado con citología) Estadíos de maduración no homologables a los definidos por citología Fe intracelular No se detectan morfológicamente los basófilos (gránulos hidrosolubles)

5 CONSIDERACIONES TECNICAS Fijación Formol Buffer Bouin (formol-ac.acético- Ac-Pícrico) B5 Comerciales Decalcificadores EDTA* Ac Fórmico Ac. Corhidrico Ac. Nítrico Comerciales COLORACIÓN HE Reticulina Fe Giemsa PAS Tricrómico

6 CONTROLES Fragmento de amígdala sometido a los mismos tiempos de fijación y decalcificación Se preparan bloques individuales en parafina que se reservan y luego se incluyen en el mismo bloque del cilindro óseo

7 EVALUACION HISTOLOGICA SISTEMATICA DE LA MEDULA OSEA ADECUACIDAD DEL ESPECIMEN RELACION CELULARIDAD / TEJIDO ADIPOSO SITUACION TOPOGRAFICA DE LAS PROGENIES RELACION MIELOERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE ERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE MIELOIDE CARACTERÍSTICAS DE LA SERIE MEGACARIOCITICA TEJIDO LINFOIDE MEDULAR Y PLASMOCITOS EVALUACION DE LA TRAMA RETICULAR EVALUACION DEL HIERRO MEDULAR EL INFORME SERA UN REFLEJO DE NUESTRA EVALUACION SISTEMATICA

8 ADECUACIDAD DEL ESPECIMEN CRESTA ILIACA POSTEROSUPERIOR NIÑOS: CILINDRO DE MAS DE 1 CM. ADULTOS: CLINDRO DE MAS DE 2 CM. MUESTRA DE BUENA CALIDAD: PERPENDICULAR AL HUESO CORTICAL (ESTE ULTIMO NO DEBERIA REPRESENTAR MAS DEL 15% DE LA LONGITUD DEL CILINDRO) LA MEDULA OSEA SUBCORTICAL ES HIPOCELULAR EN RELACION A LA UBICADA EN PROFUNDIDAD NO REPETIR EL SITIO DE LA TOMA EN TRES A CUATRO SEMANAS

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11 EVALUACION HISTOLOGICA DE LA MEDULA OSEA ADECUACIDAD DEL ESPECIMEN RELACION CELULARIDAD / TEJIDO ADIPOSO SITUACION TOPOGRAFICA DE LAS PROGENIES RELACION MIELOERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE ERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE MIELOIDE CARACTERÍSTICAS DE LA SERIE MEGACARIOCITICA TEJIDO LINFOIDE MEDULAR Y PLASMOCITOS EVALUACION DE LA TRAMA RETICULAR EVALUACION DEL HIERRO MEDULAR

12 CELULARIDAD MEDULAR SE EXPRESA COMO % DE CELULARIDAD HEMATOPOYETICA Y TEJIDO ADIPOSO EN LOS ESPACIOS MEDULARES % DE TEJIDO HEMATOPOYETICO: RELACION INVERSA CON LA EDAD EXCEPTO EN ANCIANOS, MENOS DEL 20% => HIPOPLASIA EXCEPTO EN MENORES DE 20 AÑOS, MAS DEL 80% => HIPERPLASIA AFIP

13 2005 Haematologica 2005; 90: Jürgen Thiele, Hans Michael Kvasnicka, Fabio Facchetti, Vito Franco Jon van der Walt, Attilio Orazi

14 10 años DISTRIBUCION NORMAL

15 70 años DISTRIBUCION NORMAL

16 HIPOCELULARIDAD

17 HIPERCELULARIDAD

18 ALGO MAS DE ARQUITECTURA MEDULAR GLOBAL NO obliteración celular del espacio paratrabecular (variable y dependiente de la celularidad global) Distribución fractal del tejido hematopoyético

19 EVALUACION HISTOLOGICA SISTEMATICA DE LA MEDULA OSEA ADECUACIDAD DEL ESPECIMEN RELACION CELULARIDAD / TEJIDO ADIPOSO SITUACION TOPOGRAFICA DE LAS PROGENIES RELACION MIELOERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE ERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE MIELOIDE CARACTERÍSTICAS DE LA SERIE MEGACARIOCITICA TEJIDO LINFOIDE MEDULAR Y PLASMOCITOS EVALUACION DE LA TRAMA RETICULAR EVALUACION DEL HIERRO MEDULAR

20 SITUACION TOPOGRAFICA DE LAS PROGENIES SERIE MIELOIDE: PARATRABECULAR Y PERIVASCULAR SERIE ERITROIDE: LEJOS DE LAS TRABECULAS, EN ISLAS DISTRIBUIDAS APARENTEMENTE AL AZAR, CERCA DE ESTRUCTURAS VASCULARES, CON UN MACROFAGO CENTRAL SERIE MEGACARIOCITICA: NUNCA PARATRABECULAR. SIEMPRE EN RELACION A UN SINUSOIDE

21 CARACTERISTICAS DE LA SERIE MIELOIDE NORMAL PARATRABECULAR AFIP

22 MIELOPOYESIS NORMAL PERIVASCULAR MIELOPOYESIS NORMAL PARATRABECULAR MPO

23 SITUACION TOPOGRAFICA SERIE ERITROIDE: CENTRAL, ALEJADA DE LAS TRABÉCULAS CD68PGM1

24 TOPOGRAFIA NORMAL EN SERIE MEGACARIOCITICA SINUSOIDE

25 EVALUACION HISTOLOGICA SISTEMATICA DE LA MEDULA OSEA ADECUACIDAD DEL ESPECIMEN RELACION CELULARIDAD / TEJIDO ADIPOSO SITUACION TOPOGRAFICA DE LAS PROGENIES RELACION MIELOERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE ERITROIDE CARACTERISTICAS DE LA SERIE MIELOIDE CARACTERÍSTICAS DE LA SERIE MEGACARIOCITICA TEJIDO LINFOIDE MEDULAR EVALUACION DE LA TRAMA RETICULAR EVALUACION DEL HIERRO MEDULAR

26 RELACION MIELOERITROIDE SUELE SER MENOR EN LA BIOPSIA QUE EN LOS ASPIRADOS MEDULARES VARIABLE: 3:1 a 6:1 AFIP

28 CARACTERISTICAS DE LA SERIE ERITROIDE NORMAL (NORMOBLASTICA) Proeritroblasto Eritroblasto basófilo Eritroblasto policromatófilo Eritroblasto Ortocromático (normoblasto) Reticulocito AFIP Eritrocito

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30 LA MAYOR PARTE DE LAS MITOSIS QUE SE VEN EN MO NORMAL = SERIE ROJA PROERITROBLASTOS

32 SERIE MIELOIDE MADURACION NORMAL SENTIDO DE LA MADURACION TRABECULA OSEA

33 SERIE MIELOIDE MADURACION NORMAL PARED VASCULAR SENTIDO DE LA MADURACION

35 CARACTERISTICAS DE LA SERIE MEGACARIOCITICA NORMAL AFIP

36 TOPOGRAFIA Y MORFOLOGIA NORMAL EN SERIE MEGACARIOCITICA Nunca paratrabecular Siempre en relación a un sinusoide SINUSOIDE

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39 TEJIDO LINFOIDE MEDULAR Linfocitos intersticiales maduros Relación T:B= 4-5:1 Relación CD4/CD8: 0,5-0,3 Linfocitos NK genuinos: Muy escasos CD20 CD3 Precursores B (hematogonias) CD56 Agregados linfoides AFIP

40 Precursores B (hematogonias) TdT+. Dispersas e intersticiales (en HE no se identifican) Numerosas: Niños Expansión marcada en médulas en regeneración postquimioterapia AFIP

41 DIFERENCIAS ENTRE NODULOS LINFOIDES REACTIVOS Y LINFOMAS EN MEDULA OSEA BENIGNO DISTRIBUCION AL AZAR USUALMENTE BIEN CIRCUNSCRIPTAS CELULARIDAD POLIMORFA VASCULARIZACION USUALMENTE PROMINENTE CENTROS GERMINALES OCASIONALMENTE NO SE OBSERVAN EN LOS EXTENDIDOS MALIGNO PARATRABECULAR CONTORNO IRREGULAR, POCO CIRCUNSCRIPTAS CELULARIDAD UNIFORME (EN GENERAL)* VASCULARIZACION POCO PROMINENTE * NO CENTROS GERMINALES* SE OBSERVAN EN LOS EXTENDIDOS

42 CD3 CD79a VASO AGREGADOS / NODULOS LINFOIDES REACTIVOS Comunes en: Edad avanzada Patología autoinmune /reumatológica

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44 PLASMOCITOS: INTERSTICIALES O PERIVASCULARES CD138 Aumentan con la edad Generalmente no mas del 5% pero muy variable

46 EVALUACION DE LA TRAMA RETICULAR La evaluación se realiza en áreas hematopoyéticas Tomar como referencia para determinar la bondad técnica la presencia de fibras perivasculares. GRADO 0: NORMAL. LINEAS DIPERSAS SIN INTERSECCIONES O MUY ESCASAS INTERSECCIONES GRADO 1: RED LAXA DE FIBRAS FINAS, CON MUCHAS INTERSECCIONES, ESPECIALMENTE EN AREAS PERIVASCULARES GRADO 2: INCREMENTO DIFUSO Y DENSO CON GRAN CANTIDAD DE INTERSECCIONES. OCASIONALMENTE DEPOSITOS DE COLAGENO Y/U OSTEOESCLEROSIS GRADO 3: TRAMA DE FIBRAS GRUESAS, PARALELAS Y AGRUPADAS, CON DEPOSITO DE COLAGENO Y OSTEOESCLEROSIS WHO 2008 Haematologica 2005; 90:

47 MF= 0: NORMAL. LINEAS DIPERSAS SIN INTERSECCIONES O MUY ESCASAS INTERSECCIONES

48 MF= 1: RED LAXA DE FIBRAS FINAS, CON MUCHAS INTERSECCIONES, ESPECIALMENTE EN AREAS PERIVASCULARES

49 MF= 2: INCREMENTO DIFUSO Y DENSO CON GRAN CANTIDAD DE INTERSECCIONES. OCASIONALMENTE DEPOSITOS DE COLAGENO Y/U OSTEOESCLEROSIS

50 MF= 3: TRAMA DE FIBRAS GRUESAS, PARALELAS Y AGRUPADAS, CON DEPOSITO DE COLAGENO Y OSTEOESCLEROSIS

51 MF= 3

52 Blood 2008;111:

54 EVALUACION DEL HIERRO MEDULAR COLORACION CON AZUL DE PRUSIA LA EVALUACION EN LOS EXTENDIDOS OFRECE MAS INFORMACION QUE LA BIOPSIA EN CUANTO A Fe EN ERITROBLASTOS ES MAS REPRODUCIBLE EN INCLUSION EN PLASTICO QUE EN PARAFINA LOS PROCEDIMIENTOS DE DECALCIFICACION PUEDEN DISMINUIR LA CANTIDAD DE HIERRO DE MANERA NO CONTROLADA

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57 Ejemplo de informe. MO normal, 75 años Cilindro óseo constituido por hueso cortical compacto, periostio, tejido adiposo y siete espacios medulares subcorticales evaluables. El tejido adiposo representa el 60% del volumen en los espacios medulares y la celularidad hematopoyética un 40%. La situación topográfica de las progenies se halla básicamente conservada. La relación mieloeritroide es de 3:1: La serie roja muestra maduración normoblástica y la serie blanca secuencia madurativa conservada hacia elementos en banda y segmentados. Los megacariocitos se hallan en número acorde con la celularidad, con conformación preservada. No se observan agregados linfoides y los escasos linfocitos dispersos exhiben fenotipo predominante T. Los plasmocitos representan un 4% de la celularidad medular y no muestran signos de restricción clonal en esta muestra. La trama reticular no muestra alteraciones. Tampoco se observan signos de fibrosis colágena. El hierro de depósito no se halla significativamente incrementado. No se observan signos de compromiso neoplásico ni hallazgos de relevancia infectológica

58 DIAGNOSTICO Médula ósea, punción biopsia: Ausencia de signos morfológicos de compromiso por..(contestar la pregunta del hematólogo) Léase descripción