De: Wanda I. Almodóvar Ada N. Alvarado Ortiz. Re: Informe de viaje al exterior a Costa Rica, de septiembre de 2003

Transcripción

1 9 de octubre de 2003 Dr. John Fernández Van Cleve Decano Director Colegio de Ciencias Agrícolas P/C: Ariel Ramírez Ramírez Decano Asociado y Subdirector Servicio de Extensión Agrícola De: Wanda I. Almodóvar Ada N. Alvarado Ortiz Especialista en Fitopatología Agente Agricola a/c Plaguicidas y Coordinadora de IPM y Líder Proyecto SR-PMC Re: Informe de viaje al exterior a Costa Rica, de septiembre de 2003 Actividades: Participar en adiestramiento sobre Identificación y Manejo de la Sigatoka Negra en plátano y guineo. Se visitó CORBANA (Corporación Bananera Nacional) en Guápiles, Costa Rica. Objetivos: Observar y aprender a reconocer los síntomas causados por la Sigatoka Negra a nivel de campo y laboratorio. Estudiar y poner en practica técnicas de diagnóstico rápido. Estudiar manejo de la enfermedad.

2 Actividades Realizadas: Durante los días de septiembre se visitaron siembras de guineo donde se observaban claramente todos los estadíos o etapas de desarrollo de esta enfermedad. Estos predios no habían sido tratados con fungicidas por lo que podía observarse plantas con síntomas leves hasta severamente afectadas. El personal técnico de CORBANA procedió a explicarnos que el desarrollo de la enfermedad en el follaje consta de 6 estadíos. De igual forma nos explicaron las diferencias entre estos. El estadío 1 es una mancha pequeña, imperceptible que solo puede ser detectada al observar la hoja a trasluz, pero que es de suma importancia en el diagnóstico y toma de decisiones para el control. Para un diagnóstico rápido y efectivo es importante saber cómo y donde observarla: La persona debe colocarse de espalda a la planta y se debe buscar el margen izquierdo de la tercera hoja. Observando el envés de la hoja a trasluz se pueden observar los tres primeros estadíos. Los estadíos de 3-6 son más fáciles de observar a simple vista. A continuación un resumen de las diferentes etapas: Estadío 1: es una pequeña mancha rojiza (peca). Se observa mejor en las hojas 2 y 3. Estadio 2: se caracteriza por una raya marrón rojiza que puede observarse por ambos lados de la hoja. Estadío 3: la raya se torna más ancha y el color comienza a cambiar de rojo a marrón oscuro. Estadío 4: se caracteriza por manchas marrón oscuras en el envés de la hoja y manchas negras en el has de la hoja. Estadío 5: se observa un halo clorótico alrededor de la mancha negra observada en el has de la hoja. Estadío 2

3 6: se observa la formación de un centro blanco grisáceo con bordes negros y apariencia hundida en la mancha. Durante las visitas al campo el personal de CORBANA se esforzó por asegurarse que pudiéramos observar todos los estadíos y aprender las diferencias básicas entre los mismos. Esto es de suma importancia para las diferentes técnicas de diagnóstico que más adelante se practicaron en el laboratorio. De igual forma observamos los síntomas en plántulas. Los síntomas se diferencian de las plantas adultas. Se observan manchas ovaladas localizadas pricipalmente entre las venas principales. En las plantas adultas se observa una mancha causada por ácaros sobre las venas principales, la cual es muy parecida a la que causa la Sigatoka Negra en plantas jóvenes. Técnicas de Diagnóstico Se trabajó intensamente con varias técnicas de laboratorio para el diagnóstico de esta enfermedad. 1. Marcar síntomas en el envés de la hoja con esmalte transparente Con esta técnica se obtiene prácticamente una huella del organismo que esté presente. Es muy útil para realizarla directamente en el campo al tomar las muestras, ya que sellamos las estructuras del hongo presente en la lesión, que pueden desprenderse durante el manejo de la muestra hasta el laboratorio. Luego de traer las muestras al laboratorio, se toman 6 muestras de hojas de cada estadío. Se observan las hojas por el envés y se marca cada estadío. Se pasa una capa de esmalte transparente por las áreas que marcó y se deja secar. Una vez seco, se levanta la 3

4 capa de esmalte y se monta sobre una laminilla en la misma posición que estaba sobre la hoja. Una vez cubierto con un cubreobjetos se observa bajo el microscopio. 2. Lactofenol Para esta técnica solo se utilizan los estadíos 2,3 y 4. Se levanta con un escalpelo la epidermis del envés de la hoja y luego se colocan (separados por estadío) en un beaker con lactofenol al 20%. Luego se calienta el medio hasta que las muestras se tornan traslúcidas. Cada pedazo se coloca en una laminilla, y se cubre con azul de metileno para poder observar mejor las estructuras presentes del hongo. Es necesario colocar la muestra de manera que no quede flotando. Luego se observa la laminilla bajo el microscopio. Se identifican las laminillas por estadío para luego saber en cuales es más fácil conseguir estructuras para su identificación. 3. Aclaración de Tejido Luego de realizado el muestreo, se seleccionaron muestras de los estadíos 2, 3 y 4. Se realizan de 10 a 15 cortes de hoja (1/4 x 1/2 ) por cada estadío. Los cortes del estadío 2 se colocaron en un beaker, se cubrieron con una solución de KOH al 10%. Y se dejaron de un día para otro en esta solución de KOH. Se realizó el mismo procedimiento para los etapas 3 y 4. Al día siguiente cada grupo de muestras se lavó 5 veces con agua corriente por 10 minutos. Luego se tiñeron los tejidos por 1 minuto con una solución de cotton blue al 0.5% y una solución de 1:1 de ácido láctico y glicerol. Se hicieron observaciones bajo el microscopio. En adición al procedimiento antes descrito se realizó una variante de este método utilizando 3 diferentes concentraciones de KOH para la aclaración del tejido en cortes de hoja y segmentos de epidermis de hojas de los estadíos 2, 3 y 4. 4

5 4. Cinta Adhesiva Luego de traer las muestras al laboratorio se observan las hojas por el envés. Una vez se tiene claro la diferencia entre los estadíos, se coloca un pedazo de cinta adhesiva sobre la lesión y luego con cuidado se remueve y se coloca sobre una laminilla, para su observación bajo el microscopio. En adición a las técnicas antes mencionadas el personal de CORBANA nos explicó el procedimiento que utilizan para obtener in vitro la fase sexual (ascosporas) de la Sigatoka Negra, preparación de inóculo y técnicas para la inoculación de plantas en invernadero (ver hoja adjunta). También tuvimos la oportunidad de practicar la pesca de esporas para obtener cultivos monospóricos. Estos cultivos son utilizados en estudios de evaluación de resistencia a los fungicidas usados en el control de esta enfermedad. Durante el jueves, 25 de septiembre visitamos la finca comercial Cartagena, cercana a la costa Atlántica en Costa Rica. Observamos un sistema de siembra comercial de guineo. En esta finca se utiliza el sistema de cables para la cosecha y acarreo de los racimos y un sistema de drenaje del agua en el campo. En relación a las técnicas de manejo de la Sigatoka Negra se nos explicó el sistema de poda sanitaria donde se corta la parte de la hoja (o la hoja en su totalidad) que esté afectada por la enfermedad. Las hojas se dejan en el suelo y se asperjan con urea al 10%. De esta manera se reduce el periodo de viabilidad del inóculo, el cual es de 3 a 4 meses si se mantiene la hoja en la planta, a uno de 5 a 6 semanas. El control químico consiste en aplicaciones aéreas de fungicidas, de forma alternada. Otra técnica de control cultural es el manejo de la humedad en el suelo, promoviendo el drenaje del agua al sembrar en domos. Esto es muy importante ya que en este lugar la lluvia es abundante. 5

6 Recomendaciones Dada la importancia económica del cultivo de plátanos y guineos en Puerto Rico, es de suma importancia que nos preparemos para la eventual llegada de la Sigatoka negra a nuestra isla. Por esta razón es de suma importancia educar a nuestros profesionales agrícolas al igual que a nuestros agricultores y público en general sobre la identificación de la Sigatoka negra. Para esto nuestras recomendaciones son las siguientes: 1. Ofrecer adiestramientos sobre identificación a los Agentes Agrícolas y Agrónomos del DAPR. 2. Preparar una campaña educativa con fotos e información básica sobre la enfermedad. Queremos agradecer la oportunidad que nos dieran de visitar Costa Rica a tomar este adiestramiento. De igual forma queremos agradecer al personal de CORBANA por las atenciones que tuvieron para nosotras durante nuestra visita. Anejo 6