11 Número de publicación: Int. Cl. 7 : A61K 31/ Agente: Torner Lasalle, Elisabet

Transcripción

1 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 Número de publicación: Int. Cl. 7 : A61K 31/8 A61P 3/00 12 TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA T3 86 Número de solicitud europea: Fecha de presentación: Número de publicación de la solicitud: Fecha de publicación de la solicitud: Título: Compuesto azasteroide para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. Prioridad: JP Titular/es: Sankyo Company Limited -1, Nihonbashi-Honcho 3-chome Chuo-ku, Tokyo , JP 4 Fecha de publicación de la mención BOPI: Inventor/es: Kojima, Koichi y Kobayashi, Tomowo 4 Fecha de la publicación del folleto de la patente: Agente: Torner Lasalle, Elisabet ES T3 Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 DESCRIPCIÓN Compuesto azasteroide para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. Campo técnico La presente invención relata el uso de un compuesto para producir una preparación farmacéutica para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata Antecedentes El inhibidor de testosterona α reductasa se conoce como un agente terapéutico para la hipertrofia prostática benigna que reduce la medida de la próstata mediante un mecanismo de acción que inhibe el crecimiento celular de la próstata como consecuencia de un exceso de hormonas masculinas (y principalmente dihidrotestosterona). Además, los inhibidores de la testosterona α reductasa como la Finasterida se venden como agentes terapéuticos para la hipertrofia prostática benigna en Los Estados Unidos de América y en Europa. Se están llevando a cabo estudios para desarrollar algunos inhibidores de la testosterona α reductasa como agentes terapéuticos para el cáncer de próstata. Los efectos de reducción de la próstata se corresponden con la potencia de la actividad inhibidora de la testosterona α reductasa. A diferencia de la hipertrofia prostática benigna, los efectos terapéuticos sobre el cáncer de próstata no se corresponden con la potencia de la actividad inhibidora de la testosterona α reductasa por si sola, ya que hay muchos más factores implicados en la proliferación del cáncer de próstata. La aplicación de la Patente Japonesa (Kokai) No. Hei relata un número de compuestos azateroides que tienen efectos inhibidores de la testosterona α reductasa. Los compuestos utilizados en la presente invención también se han utilizado en JP Hei , EP , y EP Divulgación de la invención Los inventores de la presente invención han llevado a cabo durante muchos años una investigación exhaustiva sobre la síntesis de derivados que tienen actividad inhibidora de la testosterona α reductasa y su actividad farmacológica. Los inventores encontraron que los compuestos utilizados en la presente invención tienen unos efectos terapéuticos o preventivos excelentes contra el cáncer de próstata y realizaron la presente invención. El objetivo de la presente invención es proporcionar un uso para el compuesto mencionado anteriormente para producir un producto farmacéutico para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. La composición para tratar o prevenir el cáncer de próstata usado en la presente invención contiene como ingrediente activo N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil)]-3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17B-carboxamida, o una sal farmacológicamente aceptable del mismo u otro derivado de éste, y preferentemente se toma oralmente. Así, la presente invención proporciona el uso de la N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil)]-3-oxo-4-aza-α-androst- 1-ene-17β-carboxamida, sus sales farmacológicamente aceptables u otro derivado de ésta para producir un producto farmacéutico para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata, y preferentemente se toma oralmente. El término sus sales farmacológicamente aceptables significa las sales del compuesto utilizadas en la presente invención que se pueden convertir en sus sales, los ejemplos de estas sales preferentemente incluyen sales de metales alcalinos como una sal de sodio, una sal de potasio y una sal de litio, sales de metales alcalinotérreos como una sal de calcio, una sal de magnesio y las sales de metales como una sal de aluminio, una sal de hierro y un sal de zinc. Además, el compuesto utilizado en la presente invención, cuando se deja en contacto con la atmósfera, puede absorber un poco de humedad, y como consecuencia puede asociarse con agua de absorción o se puede convertir en el correspondiente hidrato. Estos compuestos también se incluyen en la presente invención. El compuesto utilizado en la presente invención se puede preparar de acuerdo con el proceso que se muestra a continuación. 6 2

3 Procedimiento A 1 dónde R 1 representa H y R 2 representa un grupo para-metoxi El procedimiento A es un método para preparar el compuesto deseado (I) mediante la condensación de un derivado del ácido carboxílico (II) con un derivado de amina (III). El paso A1 es la preparación del compuesto (I), mediante la reacción del compuesto (II) o su derivado reactivo con el compuesto (III). La reacción se lleva a cabo de acuerdo con los métodos convencionales utilizados en la síntesis de péptidos, por ejemplo un método azida, un método de éster activo, un método de ácido anhídrido mezclado o un método de condensación. En los métodos de más arriba, el método azida se lleva a cabo tal y como se describe a continuación. El compuesto (II) o un éster del mismo se hace reaccionar con hidrazina en un solvente inerte (por ejemplo, dimetilformamida) a temperatura ambiente aproximadamente obteniéndose un a hidrazida de aminoácido. La hidrazida de aminoácido se hace reaccionar con un compuesto de ácido nitroso obteniéndose un derivado de azida, y a continuación el derivado de azida se trata con un derivado de amina (III). El compuesto de ácido nitroso que se utiliza aquí puede ser, por ejemplo, nitrito de metales álcalis como el nitrito de sodio o nitritos de alquilos como el nitrito de isoamilo. La reacción se lleva a cabo preferentemente en un solvente inerte, y el solvente que se incluye aquí puede ser, por ejemplo, amidas como la dimetilformamida y la dimetilacetamida, sulfóxidos como el sulfóxido de dimetilo y pirrolidonas como la N-metilpirrolidona. La reacción por dos pasos [preparación del derivado de azida y amida (I)] normalmente se lleva a cabo en un pote de reacción. La temperatura de la reacción es de -0ºC hasta 0ºC para la reacción de formación y desde -ºC hasta ºC para la reacción posterior, y el tiempo de reacción es desde minutos hasta 1 hora para la reacción de formación y desde horas hasta días para la reacción posterior. El método del éster activo se lleva a cabo mediante una reacción del compuesto (II) con un agente de esterificación activo obteniéndose un éster activo, seguido por la reacción del éster activo con un derivado de amina (III). Ambas reacciones de llevan a cabo preferentemente en un solvente inerte, y el solvente que se puede utilizar aquí puede incluir, por ejemplo, hidrocarbonos halogenados como cloruro de metileno y cloroformo, éteres como dietiléter y tetrahidrofurano, amidas como la dimetilformamida y la dimetilacetamida, y nitrilos como acetonitrilo. El agente de esterificación activo que se utiliza aquí puede ser, por ejemplo, compuestos N-hidroxilos como la N- hidroxisuccinamida, el 1-hidroxibenzotriazol y el N-hidroxilo- norborneno-2, 3-dicarboximida o compuestos disúlfidos como dipiridildisulfida; la reacción de esterificación activa se lleva a cabo preferentemente en la presencia de un agente de condensación como el diciclohexilcarbodiimida, el carbonildiimidazol o la trifenilfosfina. La temperatura de reacción está comprendida entre -ºC y 0ºC en la reacción de esterificación activa y aproximadamente de temperatura ambiente en la reacción del compuesto de éster activo con el derivado de amina (III), y el tiempo de reacción es de desde minutos hasta 80 horas para ambas reacciones. En la reacción del éster activo con la amina, se puede añadir 4-dimetilaminopiridina al sistema de reacción. El método de anhídrido del ácido mezclado se lleva a cabo mediante la preparación de un anhídrido del ácido mezclado del compuesto (II), seguido por la reacción del anhídrido del ácido mezclado con un derivado de amina. La reacción para preparar el derivado anhídrido del ácido mezclado se lleva a cabo mediante una reacción del compuesto (II) con un agente para formar un derivado anhídrido ácido [por ejemplo, ácidos carbónicos halogenados de alquilo (C1-C4) inferiores, como clorocarbonato de estilo y clorocarbonato de isobutilo, haluros de alcanoilo inferiores como cloruro de pivaloilo, ácidos cianofosfóricos de diarilo o dialquilo inferiores como cianofosfato de dietilo 3

4 y cianofosfato de difenilo o haluros de sulfonilo como cloruro de 2,4,6-triisopropilbenzensulfonilo, cloruro de paratoluensulfonilo y cloruro de metansulfonilo] en un solvente inerte (por ejemplo los hidrocarbonos halogenados, amidas y éteres descritos más arriba). La reacción se lleva a cabo preferentemente en la presencia de aminas orgánicas como trietilaminas y N-metilmorfolinas, y la temperatura de reacción está comprendida entre -ºC y 0ºC y el tiempo de reacción es de minutos hasta horas. La reacción del derivado anhídrido ácido mezclado con el derivado de amina (III) se lleva a cabo preferentemente en un solvente inerte (por ejemplo, hidrocarburos halogenados, amidas y éteres descritos más arriba) en la presencia de aminas orgánicas. La temperatura de reacción está comprendida entre 0ºC y 80ºC y el tiempo requerido para la reacción es de 1 hora hasta 48 horas. La reacción se lleva a cabo en coexistencia del compuesto (II), el compuesto (III) y un agente para formar el derivado anhídrido del ácido mezclado sin el aislamiento de un derivado del anhídrido del ácido mezclado. 1 2 El método de condensación se lleva a cabo mediante una reacción del compuesto (II) con un derivado de amina (III) directamente en presencia de un agente de condensación como la diciclohexilcarbodiimida, el carbonildiimidazol o el ioduro/trietilamina de 2-cloro-1-metilpiridinio. La presente reacción de lleva a cabo de forma similar a la que se describe en la preparación del éster activo. En el caso en qué un grupo hidroxilo protegido esté presente en R 1 y R 2, el grupo protector se puede eliminar de acuerdo con métodos convencionales. El compuesto de material sin tratar (II) o su éster activo se conoce o se prepara de acuerdo con métodos conocidos [por ejemplo, J Med. Chem., 27, 1690 (1984); J Med Chem., 29, 2298 (1986)]. Además, el compuesto (III) se conoce o se prepara de acuerdo con los métodos conocidos [por ejemplo: Synthesis, 93 (1976); J Org Chem, 36, (1971); Angew Chem, 82, 138 (1970); 3 Synthesis, 24 (1978); Synthetic Commun., 18, 777 (1988); Synthetic Commun., 18, 783 (1988); Organic Reaction, 3, 337 (1946); Org Synthesis, 1, 48, (1971); 4 Tetrahedron,, 211 (1974); y J Org Chem, 37, 188 (1972)], y, por ejemplo, un compuesto de material sin tratar de la presente investigación que contenga un motivo H 2 N-C(Me)-Ph(R 1 )(R 2 ) se prepara de acuerdo con el método descrito en Synthesis, P.24 (1978). El esquema de reacción se muestra a continuación: 0 6 (dónde R 1 y R 2 tienen el mismo significado tal y como se define más arriba, Me representa un grupo metilo y Ph representa un grupo fenilo), y incluye una reacción de Grignard, una reacción de azidación de un grupo hidroxilo y una reacción de reducción. 4

5 Breve descripción de la figura La Fig 1 muestra un efecto antitumoral contra un cáncer de próstata humano en el Ejemplo 1. Eje Vertical: Índice relativo del volumen tumoral (expresado en logaritmo) Eje Horizontal: Número de días después de la administración inicial Puntos en cruz: Grupo Control Puntos en negro: Grupo de administración de Finasterida Puntos en círculos: Grupo de administración del Compuesto 1 1 Compuesto 1; N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil)]-3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17β-carboxamida Mejor modo de llevar a cabo la investigación A continuación se describirá la presente invención con más detalles con referencias a Ejemplos y Ejemplos de Referencia, sin embargo el alcance de la presente invención no se limita a ello. Ejemplo Prueba 1 de actividad antitumoral Se obtuvo un tumor sólido localizado debajo de la piel mediante el repicado subcutáneo de la cepa LNCaP del cáncer de próstata de un sistema de cultivo celular administrado por American Type Cilture Collection (ATCC) de a 6 veces en ratones desnudos machos y hembras. Esta cepa de cáncer de próstata humano se utilizó en la prueba. Un fragmento sólido de esta cepa de 3 mm cuadrados se transplantó debajo de la piel de la región axilar de los ratones desnudos BALB/cA Jcl-nu (Nippon Clea, machos, 8 semanas de edad). Los ratones en los que el tumor había quedado con fiabilidad después de días, se asignaron al azar en grupos de 8 a animales. Se administraron oralmente N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil)]-3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17β-carboxamida (el compuesto 1, 0 mg/kg) o Finasterida (0mg/kg) a los ratones con una dosis de 0.1 ml/ g de peso corporal una vez al día por la mañana durante 28 días consecutivos. Se midió el diámetro del tumor dos veces a la semana, y se calculó el volumen del tumor V (V=ab 2 /2) a partir del eje mayor (a) y del eje menor (b). El índice de volumen relativo para cada ratón se representó como Vn/Vo. El tanto por ciento de inhibición del crecimiento del tumor (%) se determinó a partir del índice de volumen relativo para cada ratón. Tanto por ciento de inhibición del crecimiento del tumor (%) = (1-Vn/Vo)x0 Vn: volumen del tumor el noveno día Vo: volumen del tumor el primer día de administración 4 Resultados Los datos del índice de volumen relativo se muestran en la Figura 1. 0 La Finasterida se vende en Los Estados Unidos de América y Europa como fármaco para el tratamiento de la hipertrofia prostática benigna y actualmente de llevan a cabo estudios clínicos para su uso como fármaco para el tratamiento del cáncer de próstata. La Figura 1 muestra que la Finasterida, sin embargo, no exhibe ninguna actividad inhibidora del crecimiento del tumor, pero el compuesto 1, exhibe actividad inhibidora del crecimiento del tumor donde el porcentaje de inhibición del tumor máximo en 28 días es del %. Como consecuencia, el compuesto 1 es útil como agente terapéutico para el cáncer de próstata. 6 Ejemplo 2 Prueba 2 de actividad antitumoral Se utilizaron ratones macho desnudos (de 4 a semanas de edad) sin la glándula Thymus en esta prueba. Los ratones desnudos se criaron bajo condiciones asépticas. Las células LNCaP del cáncer de próstata las administró American Type Culture Collection (ATCC). Las células

6 LNCaP (x 6 ) se transplantaron subcutáneamente a los ratones desnudos para formar un tumor sólido y después utilizarlos en la prueba. 1 2 Se hizo una incisión en los abdómenes inferiores de los ratones desnudos, aproximadamente 2 cm, bajo anestesia para exponer la próstata. La membrana de la próstata se abrió cuidadosamente, y se insertó un fragmento tumoral LNCaP dentro. La apertura en la membrana de la próstata se cerró con sutura absorbible. La próstata se retornó a la cavidad abdominal, y la incisión en el abdomen inferior se suturó con sutura absorbible. Estos ratones se asignaron arbitrariamente en grupos de animales. Estos grupos se designaron como el grupo del compuesto 1 al que se había administrado el compuesto 1( mg/kg), el grupo Fiansterida al que se le había administrado Finasterida ( mg/kg) y el grupo control al que no se había dosificado. Se confirmó que el tumor transplantado se había quedado en el ratón si el tumor había crecido suficiente para ser medido desde el exterior del cuerpo del ratón, y después se empezó la administración del compuesto (1) y la Finasterida. El compuesto (1) y la Finasterida se administraron oralmente diariamente a los niveles de dosis que se han descrito anteriormente. El volumen del tumor trasplantado se calculó de acuerdo con la fórmula que se muestra en el Ejemplo 1. Además, se necropsiaron los ratones inmediatamente cuando murieron como consecuencia del cáncer y se pesó el tumor. Se confirmó la presencia de metástasis al mismo tiempo. La sección del tejido de la metástasis se preparó mediante el empotramiento en parafina después de fijar el % de formalina. Las secciones del tejido se tintaron con hematoxilina y eosina y a continuación se examinó la metástasis. Se llevó a cabo un test T de Student sobre los pesos de los tumores transplantados para todos los grupos. Además, se llevó a cabo el Test de Fischer en los casos de metástasis en cada uno de los grupos. Se llevaron a cabo las pruebas de Mann-Whitney U-test y el test T de Student en los dos grupos utilizados para la comparación con respeto a los efectos de prolongación de la vida. Se llevó a cabo la prueba del chi cuadrado (X 2 ) de acuerdo con Pearson en particular sobre el índice de supervivencia el día 63 después del transplante tumoral. Se tomó un porcentaje de riesgo de menos de un % como significativo para estas pruebas. Resultados TABLA 1 Grupo experimental Índice de supervivencia (%) 3 Grupo Control 0 Compuesto 1 6 Finasterida 22 Tal y como se muestra en la Tabla 1, el compuesto 1 exhibe una índice de supervivencia mejor en comparación con el grupo de la Finasterida. 4 Ejemplo de referencia 1 N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil)]-3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17β-carboxamida 0 6 Se añadieron sucesivamente 1.0 g de ácido 3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17β-carboxílico, 1.6 g de trifenilfosfina y 1.4 g de 2,2 -dipiridildisulfuro a 3.0 ml de tolueno seco y la mezcla se removió a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se sometió a cromatografía de columna de 3 g de gel de sílice y se eluyó con cloruro de acetona/metileno (1:9 a 1:1) para obtenerse 1.11 g de un derivado éster de 2-piridiltio. Se añadieron sucesivamente.0 g del derivado de éster de 2-piridiltio sintetizado de forma similar a la que se describe más arriba y.0 g de 1-(metoxifenil)-1-metiletilamina a ml de cloruro de metileno seco y la mezcla se removió a temperatura ambiente durante 3 días. La mezcla de reacción se diluyó con 0 ml de cloruro de metileno, se lavó con ácido clorhídrico 1N, agua, hidrogenocarbonato de sodio y una solución saturada salina sucesivamente. La capa de cloruro de metileno se secó sobre sulfato de magnesio y después de concentró bajo presión reducida. El residuo se sometió a una cromatografía de columna sobre 1.0 g de gel de sílice y se eluyó con acetona/cloruro de metileno (1:9 a 1:1) obteniéndose.2 g del compuesto del título. Espectro MNR (CDCl 3 ) δ ppm: 0.68 (3H, s), 0.98 (3H, s) (16H, m), 1.70 (3H, s), 1.72 (3H, s), 3.3 (1H, t, J=9 Hz), 3.80 (3H, s),.48 (1H, br),.76 (1H,br.),.83 b(1h, d, J= Hz), 6.82 (1H, d, J= Hz), 6.88 (2H, d, J=9 Hz), 7.32 (2H, d, J=9 Hz) Espectro IR νmax cm 1 (KBr): 2969, 2938, 1672, 199, 114, 14, 1248, 1181, 3, 82 6

7 Aplicaciones industriales El compuesto utilizado en la presente invención tiene una excelente actividad antitumoral y una débil toxicidad. Así pues, es útil para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. El compuesto o sus sales farmacológicamente aceptables utilizadas en la presente invención se utilizan como una composición para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. El compuesto por si solo o las mezclas del compuesto con excipientes, diluentes y similares apropiados farmacológicamente se puede administrar como comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos o jarabes. Estas preparaciones farmacológicas se preparan mediante técnicas estándares que conocen bien aquellos especialistas en el uso de aditivos. Los aditivos son excipientes (por ejemplo, excipientes orgánicos, como derivados del azúcar, por ejemplo lactosa, sucrosa, glucosa, manitol y sorbitol; derivados del almidón, como almidón de patata, almidón de maíz, a-almidón, dextrina y almidón de carboximetilo; derivados de la celulosa como celulosa cristalina, hidroxipropilcelulosa poco substituida, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa, carboximetilcelulosa de calcio y carboximetilcelulosa de sodio con puentes salinos internos; goma arábica; dextran; y Pululan; y excipientes inorgánicos como derivados de silicatos, por ejemplo ácido silícico anhídrido ligero, silicato de aluminio sintético y aluminato del ácido meta-silícico de magnesio sintético; fosfatos, por ejemplo fosfato de calcio, carbonatos, por ejemplo carbonato de calcio; y sulfatos, por ejemplo sulfato de calcio); lubricantes (por ejemplo, ácido esteárico; sales de metales del ácido esteárico como estearato de calcio y estearato de magnesio; talco; sílice coloidal; ceras como ceras de abejas y espermaceti; ácido bórico, ácido adípico; sulfatos como sulfato de sodio, glicol; ácido fumárico; benzoato de sodio; leucina DL; sales de sodio del ácido alifático; laurilsulfatos como laurilsulfato de sodio y laurilsulfato de magnesio; ácidos silícicos como el ácido silícico anhídrido y hidrato de ácido silícico; y los derivados de almidón mencionados anteriormente); aglutinantes (por ejemplo, pirrolidina de polivinilo, Macrogol y los mismos compuestos que se describen en los excipientes de más arriba); desintegradores (por ejemplo, los mismos compuestos que se han descrito en los excipientes de más arriba; y almidones y celulosas modificados químicamente como Crosscarmelosa de sodio, almidón de carboximetilo de sodio y pirrolidina de polivinilo con puentes); estabilizadores (por ejemplo, para-oxibenzoatos como metilparaben y propilparaben; alcoholes como clorobutanol, alcohol benzílico y alcohol de feniletilo; cloruro de benzalconio; fenoles como fenol y cresol; timerosal; ácido deshidroacético; y ácido sórbico); correctores (por ejemplo, agentes endulcorantes, acidulantes y aromas químicas de uso convencional); y diluyentes. La dosis varia dependiendo de la condición y la edad del paciente. Por ejemplo, es deseable administrar mg/kg de peso corporal (preferentemente 0.01 mg/kg de peso corporal) como límite inferior y mg/kg de peso corporal (preferentemente 1 mg/kg de peso corporal) como límite superior, de una a varias veces al día dependiendo de los síntomas. Las preparaciones se muestran a continuación. Sin embargo, el alcance de la invención no se limita a estos ejemplos. Ejemplo de preparación 1 Cápsulas 4 0 Compuestos del Ejemplo de Referencia 1.0 mg Lactosa 18.7 Almidón de maíz 70.0 Estearato de Magnesio mg Los polvos descritos más arriba se mezclaron y tamizaron a través de un tamiz de puntos y después los polvos resultantes se encapsularon en una cápsula de gelatina del No. 3 de mg obteniéndose una cápsula. Ejemplo de Preparación 2 Comprimidos 6 Compuestos del Ejemplo de Referencia 1.0 mg Lactosa 14.0 Almidón de maíz 2.0 Estearato de Magnesio mg 7

8 Los polvos descritos más arriba se mezclaron y se formó un comprimido utilizando una máquina de hacer comprimidos obteniéndose un comprimido de 0 mg. El comprimido se pude cubrir con azúcar, si es necesario

9 REIVINDICACIONES 1. El uso de N-[1-metil-1-(4-metoxifenil)etil]-3-oxo-4-aza-α-androst-1-ene-17β-carboxamida, o su sal farmacológicamente aceptable u otro derivado suyo para la fabricación de una preparación farmacéutica para el tratamiento o la prevención del cáncer de próstata. 2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 en qué dichas preparaciones farmacéuticas se encuentra en una forma apta para la administración oral

10