Protocolo de Análisis por Espectrometría de Masas de Alta Resolución. Código LEM-PR-01 Fecha 15/Octubre/2015 Versión 1
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- Victoria San Segundo Sánchez
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1 OBJETIVO. Establecer los mecanismos y requisitos necesarios para realizar análisis de muestras tanto externas como internas en el laboratorio de espectrometría de masas. ALCANCE. Aplica al Laboratorio de Espectrometría de Masas, al departamento de Vinculación y Extensión, y al Cliente (Interno y externo). I. INTRODUCCIÓN La actividad que desarrolla el laboratorio de espectrometría de masas de alta resolución está orientada esencialmente al procesamiento de muestras en cantidades realmente pequeñas además de obtener información característica. La parte importante de esa actividad es la elucidación estructural de moléculas a través de la determinación de sus masas moleculares y de las masas de algunos fragmentos característicos de su estructura. Esta técnica permite estudiar compuestos de naturaleza diversa: orgánica, inorgánica o biológica. Para tal fin, es necesario ionizar las moléculas y obtener los iones formados en fase gaseosa. Este proceso tiene lugar en una fuente de ionización y actualmente, existen diferentes técnicas que permiten llevarlo a cabo. El registro que se obtiene se denomina Espectro de Masas y representa las abundancias iónicas de los fragmentos e ión molecular generados, respecto a su relación masa/carga. Elaboró Revisó Autorizó Responsable del Proceso Victoria Labastida Galván, Gabriela Vargas Pineda Blanca E. Domínguez M Ma. Yolanda Ríos Gómez 1 de 5
2 Existen diferentes análisis en función de la técnica de ionización: Análisis mediante EI (Ionización electrónica) Análisis mediante CI (Ionización química) Análisis mediante FAB (Bombardeo con átomos rápidos) Análisis mediante ESI (Electrospray) Análisis mediante APCI (Ionización Química a Presión Atmosférica) Determinación de masa exacta Estudios de fragmentación selectiva Los análisis en todas las técnicas de ionización se pueden obtener en modo positivo y negativo. Para poder realizar los análisis anteriores, el Centro de Investigaciones Químicas UAEM cuenta con el Espectrómetro de Masas JEOL MS-700 de Alta Resolución. Los tipos de servicio externo así como los requerimientos administrativos se detallan en el Procedimiento para el servicio de Vinculación y Extensión VIN- PR-01. II. CARACTERÍSTICAS REQUERIDAS DE LAS MUESTRAS PARA ANÁLISIS. Toda la información que puede generar el laboratorio de espectrometría de masas de alta resolución depende en gran medida de la muestra enviada. Esta no sólo tiene que ser la adecuada, sino que además debe cumplir los requisitos que aseguren su idoneidad y en consecuencia la calidad de nuestro trabajo. - La muestra debe ir claramente identificada, de forma indeleble con una referencia (clave de máximo 6 caracteres) que debe ser la misma que conste en la solicitud de análisis. - La muestra se entregará principalmente sin disolver e indicando la cantidad que se aporta (generalmente 1 a 5 mg es suficiente). - La pureza de la muestra es determinante para obtener un buen resultado, especialmente en los análisis de determinación de masa exacta, para evitar interferencias. - El equipo es de introducción directa, por lo que es importante que se tenga en cuenta la pureza de la muestra. - Los disolventes volátiles son los más adecuados. En caso de muestras insolubles las técnicas de ionización que se pueden aplicar son más reducidas. Evitar en lo posible disolventes como DMF o DMSO. 2 de 5
3 - Cuando la muestra sea inestable es necesario ponerse en contacto con el laboratorio para establecer las condiciones del análisis de la misma. - Por la naturaleza del análisis realizado, únicamente es posible recuperar el material excedente del estudio. Cualquier duda relacionada con el tipo de experimento o técnica solicitada podrá ser consultada directamente con las responsables del área Dra. Diana G. Vargas Pineda, dgaby@uaem.mx e Ing. Victoria Labastida Galván labasvg04@uaem.mx L EAVIMETRÍA III. PROCEDIMIENTO PARA EL SERVICIO INTERNO El servicio interno está restringido a las muestras provenientes de proyectos de investigación cuyos responsables principales son profesores del CIQ y los estudiantes asociados a dichos proyectos. El solicitante del análisis debe anotar en la bitácora que se localiza en el laboratorio de espectrometría de masas. El usuario debe rellenar todos los campos referentes a la solicitud del análisis. La entrega de resultados será de acuerdo a la demanda de muestras de la técnica solicitada y al buen funcionamiento del equipo. Los resultados se envían por correo electrónico, cuando el solicitante recupera su muestra de análisis firma de recibido por los resultados en la bitácora. IV. PROCEDIMIENTO DE SERVICIO EN VINCULACIÓN. El servicio de vinculación lo ofrece el CIQ para apoyar el desarrollo de la investigación en la UAEM, en otras instituciones de educación superior y a la industria. Las muestras bajo esta categoría deberán ingresar, sin excepción, a través de la Jefatura de Vinculación. (Ver procedimiento VIN-PR-01) 3 de 5
4 El solicitante contactara a Vinculación, quien se encargara de dar informes de costos, así como la recepción y entrega de resultados de muestras. Recepción de la muestra: 1. Consiste básicamente en determinar si la muestra cumple o no los requisitos de calidad necesarios para ser procesada. Estos requisitos incluyen: la correcta identificación de la muestra, la valoración sobre si existe una cantidad adecuada para el estudio solicitado. 2. En el momento que es admitida la muestra se envía al laboratorio de espectrometría de masas para su procesamiento. Entrega de la muestra: El laboratorio de espectrometría de masas de alta resolución entregara los resultados y muestra(s) a Vinculación, quien pondrá firma y fecha de recepción a la solicitud del análisis para su posterior entrega a los solicitantes. IV. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS. (INTERNAS Y EXTERNAS) Una vez que la muestra se recibe en el laboratorio de espectrometría de masas, el manejo de la misma incluye: Preparación de las muestras. En este proceso es preciso considerar: El tipo de muestra enviada La técnica solicitada. El tipo de muestra enviada determina si requiere o no pretratamiento (pruebas de solubilidad o conducirla a algún tipo de acidez o alcalinidad). De modo general, en función del tipo de muestra y técnica de ionización solicitada, el laboratorio utiliza los medios adecuados de preparación de muestra. Las muestras admitidas para análisis se registran en la bitácora del Espectrómetro de masas JEOL MStation 700 estableciendo la siguiente información: Nombre del solicitante, clave de la muestra, técnica solicitada, masa esperada. Los viales correctamente identificados conteniendo las muestras se colocan en la mesa de trabajo. Se coloca la muestra en el equipo, el cual debe estar en la técnica de ionización solicitada. La duración del mismo depende de cada técnica de ionización que se haya solicitado en el experimento. 4 de 5
5 Los datos del experimento son almacenados digitalmente en la carpeta identificada con la clave de cada usuario. Los resultados se pueden entregar impresos y/o en formato PDF. GLOSARIO Servicio interno: está restringido a las muestras provenientes de proyectos de investigación cuyos responsables principales son profesores-investigadores del CIQ y alumnos asociados a dichos proyectos. Servicio de vinculación: lo ofrece el CIQ para apoyar el desarrollo de la investigación en la UAEM, en otras instituciones de educación superior y a la industria. DOCUMENTOS DE REFERENCIA. Manual de Calidad (SGC-MC-01). Plan de calidad de laboratorio de Espectrometría de Masas de Alta Resolución (LEM-PC-01). Documentos externos: Manuales de operación del fabricante para el Espectrómetro JEOL MStation 700. REGISTROS Nombre Solicitud de análisis de espectrometría de masas Bitácora de registro de análisis Código LEM-FO-01 LEM-BI-01 5 de 5
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