Protocolo de Servicio Laboratorio de Resonancia Magnética Nuclear
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- Rosa María Maestre Molina
- hace 6 años
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1 1. OBJETIVO Describir los requisitos necesarios para el análisis de muestras tanto externas como internas en el laboratorio de resonancia magnética nuclear. 2. ALCANCE Aplica al Laboratorio de. al departamento de Vinculación y Extensión y al Cliente (Interno y externo). 3. POLITICAS DE OPERACIÓN. Toda muestra que requiera un servicio interno dentro del área debe de estar autorizada por el responsable de la investigación. Toda muestra proveniente de un servicio de vinculación debe ingresar, sin excepción, a través de la Jefatura de Vinculación (ver procedimiento VIN-PR-01). Los tipos de servicio externo así como los requerimientos administrativos se detallan en el Procedimiento para el servicio de Vinculación y Extensión VIN-PR-01. Si la muestra no está disuelta en disolvente deuterado, ésta deberá estar completamente libre de cualquier disolvente y entregarse en un vial cerrado, claramente identificado, de forma indeleble, con una referencia (clave) que deberá ser la misma consignada en la solicitud de análisis. En caso de que la muestra corresponda a una mezcla de compuestos, indicar las proporciones de la misma. Mencionar si la muestra corresponde a un compuesto impuro, señalar si el compuesto de interés es el componente mayoritario o en qué proporción se encuentra o bien, si hay interés por todos los componentes. Indicar el disolvente deuterado que se utilizará para el análisis. Indicar si se requiere presaturación, si la muestra es soluble en el disolvente que lo requiera. Tener en cuenta que las cantidades requeridas para los diferentes experimentos son las deseables para preparar 600 ml de disolución de las siguientes concentraciones: Elaboró Revisó Autorizó Responsables del Proceso: Cristina Rodríguez Narváez / Raúl Villamil Ramos Blanca E. Domínguez M Ma. Yolanda Ríos Gómez Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 1 de 8
2 1H, 13C y 2D: 0.2 M NOESY: 0.1 M Heteronúcleos: 0.5 M (Cantidad mínima dependiendo de la abundancia natural y la constante giromagnética del núcleo a detectar). Indicar las ventanas espectrales de interés, tanto para experimentos de detección directa como indirecta, para los experimentos bidimensionales. Indicar la referencia interna o externa necesaria, así como la ventana espectral a estudiar en función de la referencia, para los experimentos en que se requiera la detección de un heteronúcleo. Especificar la rampa de temperatura a emplear, para los experimentos de temperatura variable y verificar que esta es posible en el disolvente solicitado. Ponerse en contacto con laboratorio, cuando la muestra sea inestable, para establecer las condiciones del análisis de la misma. Las muestras analizadas se devuelven al cliente disueltas y en el vial o tubo en el que fueron recibidas. Indicar la forma en que se requieren los resultados: archivo electrónico (FID) o impresos. En caso de que el cliente requiera utilizar el equipo, debe estar capacitado por un técnico del área. El cliente interno o usuario interno debe de apegarse al reglamento del laboratorio de resonancia magnética nuclear. No se procesan muestras en los horarios y fechas señaladas en el calendario de actividades de mantenimiento preventivo y correctivo. 4. Equipos y experimentos. El laboratorio de, cuenta con los siguientes equipos: Varian Mercury 200MHz (4.7 T). Con una sonda de detección directa de banda ancha con dos canales de radiofrecuencia 1 H- 19 F/ 15 N- 31 P (5 mm) y amplificador de banda alta de 75 W, banda baja 125 W, Shim: 14 canales. Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 2 de 8
3 Experimentos 1D: 1 H, 13 C, 19 F con variedad de condiciones. Capaz de sintonizar los siguientes heteronúcleos: 2 H, 7 Li, 11 B, 15 N, 17 O, 27 Al, 29 Si, 31 P, 71 Ga, 77 Se 119 Sn, 125 Te, 195 Pt, 199 Hg. Experimentos 2D: COSY, NOESY, HETCOR, DEPT y unidimensionales selectivos. Nota: Sólo se mencionan los más comunes. Varian Inova 400MHz (9.4 T) Con una sonda de detección inversa con dos canales de radiofrecuencia 1H {15N-31P} PFG (5mm y 3mm). Temperatura variable (0 a +50 C). PFG 30 Gauss/cm. Amplificador de banda alta de 50 W, Banda baja de 300 W. Shims: 18 canales. Con unidad de control de temperatura -180 C a 200 C. (Nota: Los experimentos con disolventes comunes se operan entre 0 y 50 C) Experimentos 1D: Útil para experimentos unidimensionales de 1 H, 13 C, 19 F y DEPT con variedad de condiciones y selectivos. Experimentos 2D: COSY, gcosy, NOESY, TOCSY, ROESY, HMQC, ghmqc, HMBC, ghmbc, HSQC, ghsqc, CIGAR, HSQCTOCSY. Nota: Sólo se mencionan los más comunes. Varian Mercury 400 MHz (9.4 T) Con sonda directa de banda ancha con dos canales de radiofrecuencia 1H-19F / 15N-31P (5 mm). Desempeño Premium shielded. PFG 20 Gauss/cm. Amplificador de banda alta de 75 W, banda baja 125 W, Shim: 23 canales. Unidad de control de temperatura -150 a 200 C (Nota: Los experimentos con disolventes comunes se operan entre 0 y 50 C). Equipado con Auto-muestreador con capacidad para 9 muestras. Experimentos 1D: 1 H, 13 C, 19 F con variedad de condiciones. Adaptado para la sintonía de heteronúcleos: 2 H, 7 Li, 11 B, 15 N, 17 O, 27 Al, 29 Si, 31 P, 71 Ga, 77 Se 119 Sn, 125 Te, 195 Pt, 199 Hg. Experimentos 2D: COSY, NOESY, HETCOR, DEPT y unidimensionales selectivos. (Nota: Sólo se mencionan los más comunes). Varian VNMRS 700MHz (16.45 T) Sonda para triple resonancia 1 H, 13 C, { 15 N/ 31 P} (5mm) PFG y Temperatura variable, optimizada para una alta sensibilidad de 1 H, gradiente de campo en eje Z con blindaje activo. Desempeño Premium Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 3 de 8
4 shielded. Sonda enfriada Cold Probe triple resonancia 1 H, 13 C, { 15 N/ 31 P} (5mm) PFG y Temperatura Variable, gradiente de campo en eje Z con blindaje activo. Con modulador de fase para generar pulsos con forma y módulo de temperatura variable -150 a +250 C. Nota: Los experimentos con disolventes comunes se operan entre 0 y 50 C. Equipo optimizado para una alta sensibilidad 1 H con una homogeneidad de RF. Puede emplear soluciones amortiguadoras como disolvente. Con capacidad para realizar estudios de triple resonancia para muestras químicas y bioquímicas. Experimentos 1D: Experimentos unidimensionales de 1 H, 13 C y DEPT con variedad de condiciones y selectivos. Experimentos 2D: COSY, gcosy, NOESY, TOCSY, ROESY, HMQC, ghmqc, HMBC, ghmbc, HSQC, ghsqc, CIGAR, HSQCTOCSY. Experimentos 3D: HNCA, HNCO, HNCACO, CBCACONH, HCCHTOCSY, NOESYHSQC, TOCSYHSQC, DOSY, STD, CBCANH, etc. Nota: Sólo se mencionan los más comunes 5. Descripción de procedimiento Servicio Interno Secuencia etapas de Actividad Responsable 1.1 El solicitante debe calendarizar tiempo en el equipo adecuado según el experimento requerido, de acuerdo a la programación de trabajo del laboratorio y en estricto orden de recepción. 1. Recepción de muestras de servicio interno. 1.2 El solicitante tiene que entregar al Técnico de laboratorio de RMN la muestra a analizar junto con el formato de solicitud de análisis (RMN-FO-02), previamente autorizado por el Investigador responsable y debidamente requisitado según los puntos mencionados en las Políticas de operación o en su defecto, si el solicitante desea adquirir las muestras lo hará personalmente, siempre y cuando se encuentre capacitado en el equipo y técnica solicitada. (formato de capacitación RMN-FO-03). Profesor- Investigador del CIQ o alumnos asociados 2. Verificación de requisitos Si el Técnico de laboratorio de RMN es quien procesa las muestras. Debe verificar que todos los campos del formato de solicitud de análisis se encuentren llenos conforme a los análisis solicitados Técnico de laboratorio de RMN Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 4 de 8
5 3. Adquisición de muestras 3.1.Admitida la muestras para el análisis, registrar en la bitácora correspondiente al equipo utilizado (Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Mercury 200 MHz, Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Inova Unity 400 MHz., Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Mercury Plus 400 MHz o Bitácora de adquisición de muestras para el equipo VNMRS 700 MHz) la siguiente información conforme se adquiera el experimento: Fecha; nombre del solicitante, clave, experimento solicitado; hora de inicio y término de adquisición; disolvente utilizado; nombre de investigador y observaciones cuando lo requiera 3.2. Si el solicitante adquiere sus muestras, además de registrarlas como el el punto 3.1, debe de colocar en observaciones el nombre del usuario que utilizó del equipo. Técnico de laboratorio de RMN 4. Entrega de resultados 4.1. Concluidos los experimentos solicitados, guardar en el ordenador, en la carpeta del investigador correspondiente y entregar los archivos electrónicos (FID), de requerir el cliente interno, se entregan impresiones de dichos experimentos, por los cuales deben de firmar de recibido en la misma bitácora donde se adquirieron en el campo de observaciones. Nota: Si el usuario adquiere sus experimentos, es único responsable de guardar e imprimir los mismos. Profesor- Investigador del CIQ o alumnos asociados Técnico de laboratorio de RMN y Profesor- Investigador del CIQ o alumnos asociados Servicio Externo. (Procedimiento VIN-PR-01) Secuencia etapas de Actividad Responsable 1. Recepción de muestras de servicio externo. 1.1 Proporcionar en todos los casos una fecha probable de entrega de resultados que se determina con base en la prioridad del servicio, el tipo de estudio solicitado y la carga de trabajo del laboratorio Entregar las muestras junto con la copia y el original del formato de solicitud de análisis de muestras externas (RMN-FO- 01) de RMN previamente foliado y debidamente lleno al técnico de laboratorio de RMN. Jefatura de Vinculación 2. Verificación de requisitos Verificar que todos los campos del formato de solicitud de análisis se encuentren llenos conforme a los análisis solicitados Firmar de recibido, fecha y hora tanto el formato de análisis Técnico de laboratorio de RMN Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 5 de 8
6 3. Adquisición de muestras 4. Entrega de resultados de muestras externas de RMN como la copia. Devolviendo el original a Jefatura de Vinculación y manteniendo la copia Identificar los tubos de resonancia correctamente, de acuerdo a las muestras se colocan en la mesa de preparación. 3.2 Disolver la muestra en 600 μl o 250 μl del disolvente deuterado correspondiente, según el experimento que se requiera. 3.3.Registrar en la bitácora correspondiente al equipo utilizado (Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Mercury 200 MHz, Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Inova Unity 400 MHz., Bitácora de adquisición de muestras para el equipo Mercury Plus 400 MHz o Bitácora de adquisición de muestras para el equipo VNMRS 700 MHz) la siguiente información conforme se adquiera el experimento: Fecha; nombre del solicitante, clave, experimento solicitado; hora de inicio y término de adquisición; disolvente utilizado; nombre de investigador o empresa y observaciones cuando lo requiera 4.1. Concluidos los experimentos solicitados, guardar en el ordenador, en la carpeta del investigador o Empresa correspondiente 4.2. Realizar la impresión de los experimentos, si es que el cliente lo solicitó Recuperar la muestras y colocarlas en el vial en el que llegó la misma 4.3. Enviar vía electrónica los archivos electrónicos (FID) de los experimentos a Jefatura de Vinculación Entregar las impresiones junto con los viales de las muestras, así como la copia del formato de solicitud de análisis de muestras externas de RMN al área de vinculación, para acuse de recibo Verificar que se hayan recibido los archivos electrónicos de los experimentos solicitados así como las impresiones, si es el caso y sellar tanto la copia como el original del formato de solicitud de análisis de muestras externas de RMN 4.6. Notificar al cliente que su servicio externo ha sido concluido y que sus resultados están ya disponibles (impresos o electrónicos, según sea el caso) 4.7. Entregar los resultados impresos y/o electrónicos según se hayan solicitado siempre y cuando cumplan con los puntos 3.3. y 3.4 de la política de operación. Técnico laboratorio de RMN Técnico laboratorio de RMN de de Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 6 de 8
7 6. Documentos de referencia. Manual de Calidad (SGC-MC-01). Plan de calidad de laboratorio de RMN (RMN-PC-01). Documentos externos: Manuales de operación del fabricante, Inova Unity 400 MHz, Mercury 200 MHz, Mercury plus 400 MHz y VNMRS 700 MHz. Instructivo de trabajo para el equipo Mercury plus 400 MHz (RMN-IT-01) Instructivo de trabajo para el equipo Mercury 200 MHz (RMN-IT-02) 7. Registros Nombre Código Conservación Solicitud de análisis de RMN RMN-FO-01 2 años Bitácora de registro de análisis de RMN RMN-BI-01 2 años Bitácora de registro incidencias de RMN RMN-BI-02 2 años Bitácora de registro de pruebas de desempeño de RMN RMN-BI-03 2 años Bitácora de monitoreo y mantenimiento preventivo de RMN RMN-BI-04 2 años Hoja de verificación y calibración SGC-FO-10 Constante Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 7 de 8
8 8. Glosario Servicio interno: está restringido a las muestras provenientes de proyectos de investigación cuyos responsables principales son profesores-investigadores del CIQ y alumnos asociados a dichos proyectos Servicio de vinculación: lo ofrece el CIQ para apoyar el desarrollo de la investigación en la UAEM, en otras instituciones de educación superior y a la industria. Documento controlado por medios electrónicos. Toda impresión o descarga es un documento no controlado. Página 8 de 8
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