workshop calidad de la producción y granos con valor agregado

Transcripción

1 workshop calidad de la producción y granos con valor agregado Existe un diagnóstico sobre micotoxinas en soja en Argentina? 28 de junio 2006 Rosario Santa fe Ana Pacin Fundación de Investigaciones Científicas Teresa Benedicta de la Cruz Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires Centro de Investigación en Micotoxinas Universidad Nacional de Luján apacin@gmail.com

2 MICOTOXINAS + -

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6 HONGOS + - MEDIO AMBIENTE MATRIZ ALIMENTICIA

7 MICOTOXINAS

8 Frecuencias relativas de aislamiento de mohos en soja en la Provincia de Buenos Aires en 1999 Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. SOJA Y MICOTOXINAS FLORA FÚNGICA-VARIEDADES-PRÁCTICAS AGRONÓMICAS Frecuencia y Densidad Relativa Altermaria Alternata Penicillium citrinum Fr % DR % Fusarium croockwellense Fusarium graminearum Aspergillus flavus Fusarium heterosporum Penicillium funiculosum Aspergillus niger Fusarium acuminatum Fusarium culmorum Fusarium semitectum

9 Mohos asociados con variedades de soja en un ensayo a campo en Argentina en 1999 Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. SOJA Y MICOTOXINAS FLORA FÚNGICA- VARIEDADES-PRÁCTICAS AGRONÓMICAS Especies Fr % Alternaria Alternata 48,08 5,97 Penicillium citrinum 32,69 4,73 Citrinina DR % Posibles toxinas que pueden sintetizar las especies halladas en 1999 Ácido tenuazónico, alternariol, monometil ester, alter toxinas Deoxinivalenol, nivalenol, zearalenona, butenólido, fusarina Fusarium graminearum 11,54 1,41 C, 3 y 15 acetil DON, di acetil DON Fusarium croockwellense 11,54 0,79 Zearalenona, tricotecenos tipo B, fusarina C Aspergillus flavus 9,62 0,84 Aflatoxina B1, ácido ciclopiazónico Penicillium funiculosum 3,85 0,23 Patulina Fusarium heterosporum 3,85 0,23 Toxina T-2, HT-2, T-2 tetraol Fusarium semitectum 1,92 0,06 Zearalenona, bauvericina Fusarium culmorum 1,92 2,31 Zearalenona, tricotecenos tipo B, fusarina C, butenólido Fusarium acuminatum 1,92 0,17 Butenólido, tricotecenos tipo A Aspergillus niger 1,92 0,06 Malforminas, ocratoxina A

10 Ocurrencia a campo 2004, 39 muestras, 3 contaminadas por DON (promedio de las positivas 43.3 µg/kg) 2005, 95 muestras, 2 contaminadas por DON debajo del límite de cuantificación (7 µg/kg) 2006, 4 muestra

11 2003, 23 muestras 8.70% DON; 8.70% ZEA, 17.39% OCRA, Ocurrencia silo bolsa 13.04% Fumonisinas B 1 B , 7 pellets; 3 harinas (2, FB 1 )

12 2003, 23 muestras ZEA y DON en silo bolsa 2003 µg/kg muestras soja DON ZEA

13 2003, 23 muestras OCRA en silo bolsa ,8 0,7 0,6 0,5 µg/kg 0,4 0,3 0,2 0, muestras soja

14 2003, 23 muestras Fumonisinas B 1 B 2 en silo bolsa µg/kg muestras soja

15 2003, 23 muestras DON ZEA OCRA FB1 FB , , , ,3 0 0

16 DON ZEA OCRA Fumonisinas 1-Deoxinivalenol (DON) - Zearalenona (ZEA) TLC Romer Method # MY8402s, Version 94.2 Límite de detección: Deoxinivalenol TLC 25 µg/kg; Zearalenona TLC 25 µg/kg 2-Deoxinivalenol (DON) - Toxina T2 GC 2001 Version Croteau y col., Límite de detección DON 7 µg/kg; Toxina T-2 6 µg/kg 3-Ocratoxina A Ochraprep IFU Límite de detección 0.01 µg/kg 4-Zearalenona AOAC Official Method , Límite de detección 4.7 µg/kg 5-Fumonisinas. AOAC Official Method , Límite de detección FB1 10 µg/kg; FB2 18 µg/kg

17 Aflatoxinas Totales µg/kg Año 2000 Totales Negativas 1 a 20 µg/kg 21 a 50 > de 50 Pellet de Soja ,90% 7,40% 1,70% Poroto de Soja ,40% 3,68% 1,92% Año 2001 Totales Negativas 1 a a 50 > de 50 Pellet de Soja ,90% 4,50% 0,50% 0,10% Poroto de Soja 86 87,30% 9,80% 2,64% 0,26% Año 2002 Totales Negativas 1 a a 50 > de 50 Pellet de Soja ,90% 7,90% 1,20% Expeller de Soja 57 97,10% 2,50% 0,40% Soja desactivada ,20% 6,00% 3,20% 1,60% Soja extrusada 79 81,00% 19,00% Año 2003 Totales Negativas 1 a a 50 > de 50 Pellet de Soja ,70% 4,50% 0,80% Expeller de Soja ,20% 4,50% 2,30% Soja desactivada ,00% 9,70% 2,30% Soja extrusada ,75% 6,70% 1,55% Año 2004 Totales Negativas 1 a a 50 > de 50 Pellet de Soja ,00% 5,00% Expeller de Soja ,00% 2,70% 1,30% Soja desactivada ,10% 1,50% 0,50% 0,90% Soja extrusada ,00% 4,70% 1,30% Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005

18 Toxina T-2 µg/kg Año 2000 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,50% 5,56% 7,50% 1,45% Poroto de Soja ,80% 11,52% 13,60% 6,08% Año 2001 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,20% 9,80% 3,10% 0,90% Poroto de Soja 86 65,10% 14,65% 15,93% 4,32% Año 2002 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,00% 16,50% 26,80% 5,70% Expeller de Soja 57 73,30% 10,30% 13,80% 2,60% Soja desactivada ,50% 7,70% 11,80% Soja extrusada 79 50,70% 21,50% 27,80% Año 2003 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,40% 2,00% 2,10% 4,50% Expeller de Soja ,70% 6,80% 17,50% 2,00% Soja desactivada ,60% 3,50% 8,30% 2,60% Soja extrusada ,10% 10,50% 2,40% Año 2004 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,40% 11,00% 3,80% 1,80% Expeller de Soja ,60% 10,90% 3,30% 0,20% Soja desactivada ,00% 7,50% 4,10% 2,40% Soja extrusada ,30% 10,70% 5,60% 4,40% Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005

19 Zearalenona µg/kg Año 2000 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,00% 9,30% 11,30% 1,40% Poroto de Soja ,40% 20,16% 2,72% 2,72% Año 2001 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,00% 13,30% 26,60% 5,10% Poroto de Soja 86 67,40% 21,63% 6,05% 4,92% Año 2002 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,30% 4,00% 17,90% 6,80% Expeller de Soja 57 91,20% 2,90% 5,60% 0,30% Soja desactivada ,80% 3,70% 11,00% 1,50% Soja extrusada 79 91,05% 3,85% 5,10% Año 2003 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,55% 1,85% 22,80% 5,80% Expeller de Soja ,95% 0,00% 1,05% 0,00% Soja desactivada ,70% 15,20% 2,10% Soja extrusada ,00% 10,30% 4,70% Año 2004 Totales Negativas 1 a a a 500 Pellet de Soja ,40% 4,20% 1,60% 2,80% Expeller de Soja ,60% 4,70% 2,70% Soja desactivada ,60% 1,30% 1,40% 1,70% Soja extrusada ,90% 5,90% 10,20% Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005

20 ELISA muestras ( ) Pellet de Soja Poroto de Soja Soja desactivada Soja extrusada 211

21 Distribución de la contaminación según matriz Porcentaje de contaminación por Aflatoxinas Totales 7,13% 8,57% 6,41% 9,15% Pellet de Soja Poroto de Soja Soja desactivada Soja extrusada

22 Distribución de la contaminación según matriz Porcentaje de contaminación por Toxina T-2 18,81% 26,30% 17,88% Pellet de Soja Poroto de Soja Soja desactivada Soja extrusada 37,01%

23 Distribución de la contaminación según matriz Porcentaje de contaminación por Zearalenona 10,00% 12,31% 62,65% 15,04% Pellet de Soja Poroto de Soja Soja desactivada Soja extrusada

24 Simultaneous determination of aflatoxins, Zearalenone, deoxynivalenol and T-2 Toxin in Argentinian soybean C.E. López, L.C. Bulacio, S.L. Amigot, M.S. Biasoll, A.G. Luque, S.S. Ramadán, L.L. Ramos, M. Sortino, M.E. Tosello, C.L. Fulgueira Mycoglobe, Carlos Paz, Córdoba, Marzo 2006 AOAC ELISA 40 muestras de soja del sur Santa Fe µ/kg Toxina Rango Media % positivas Toxina T-2 76,3 a 284,7 175,2 90,0 Zearalenona 42,5 a 166,3 99,7 77,5 Deoxinivalenol 2,60 a ,7 60,0 Aflatoxinas 3,3 a 7,4 4,4 17,5

25 Simultaneous determination of aflatoxins, Zearalenone, deoxynivalenol and T-2 Toxin in Argentinian soybean C.E. López, L.C. Bulacio, S.L. Amigot, M.S. Biasoll, A.G. Luque, S.S. Ramadán, L.L. Ramos, M. Sortino, M.E. Tosello, C.L. Fulgueira Mycoglobe, Carlos Paz, Córdoba, Marzo 2006 Porcentaje de contaminación - ELISA 17,5 60,0 90,0 Toxina T-2 Zearalenona Deoxinivalenol Aflatoxinas 77,5

26 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Agradezco especialmente al licenciado Manuel Zelaya

27 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Aislamiento e identificación de la frecuencia y la densidad de la flora fúngica campaña Variedades de soja Diferentes localidades

28 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS 348 nuestras 32 cultivares (6 criaderos) 12 localidades (9 provincias)

29 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Provincia Localidad Contaminación % Formosa Reconquista 81,3 Santa Fe Rafaela 76,8 Córdoba Tres Pozos 65 Córdoba Manfredi 58,8 Chaco Las Breñas 39,2 Entre Ríos Concepción del Uruguay 35,6 Buenos Aires Belloq 33,4 La Pampa General Pico 28,6 Tucumán Banda Río Sali 27,8 Misiones Cerro Azul 24,1 Buenos Aires Barrow 21,5 Buenos Aires Balcarce 14,2

30 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Balcarce Barrow Bellocq C del Uruguay Ocho cultivares Gral. Pico Manfredi Rafaela Tres Pozos Tucumán A3901 A4303 A5409 AW2886 AW4500 DM3100 DM4600 DM4800 Hay cultivares y localidades con mayor porcentaje de contaminación

31 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Balcarce Barrow Bellocq C. del Uruguay Grado madurez III IV y V Gral. Pico Manfredi Rafaela Tres Pozos Tucumán III III III IV IV IV IV V Grados IV y V, y localidades mayor porcentaje de contaminación

32 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Cultivares con diferentes fechas de siembra Porcentaje de contaminación Manfredi 1-2 diciembre 30-diciembre A5409 A6411 A3901 A8000 Fecha de siembra, en la misma localidad y para los mismos cultivares

33 La información sobre la contaminación por flora fúngica se expresa según González HHL y col Frecuencia Fr = número de muestras con una especie X 100 número total de muestras Densidad relativa Dr = número de aislamientos de una especie X 100 número total de aislamientos

34 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Frecuencia flora toxicogénica 88,79% Fusarium 174,12% Alternaria Aspergillus Penicillium 4,02% 11,20% 21,55% 83,90% Trichoderma Otros géneros*

35 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Densidad relativa flora toxicogénica 0,61% 1,02% 18,03% 23,40% 7,09% 49,85% Otros géneros* Fusarium Alternaria Aspergillus Penicillium Trichoderma

36 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Fr % DR % Fr % DR % Fusarium 88,79 23,65 Alternaria alternata 83,91 18,21 F. acuminatum 0,29 0,02 Aspergillus 21,55 7,16 F. avenaceum 0,86 0,05 A. flavus 10,92 4,66 F. equiseti 43,68 11,14 A. niger 4,6 0,21 F. graminearum 3,74 0,27 A. ochraceus 0,57 0,07 F. heterosporum 1,44 0,1 A. parasiticus 3,45 2,01 F. oxysporum 1,44 0,57 A. wentii 0,29 0,03 F. poae 0,86 0,17 A. tamarii 0,29 0,01 F. proliferatum 0,29 0,01 A. versicolor 0,29 0,02 F. sambucinum 0,86 0,65 Penicillium 11,21 1,04 F. semitectum 33,62 10,48 P. Chrysogenum 0,57 0,02 F. subglutinans 0,29 0,01 P. citrinum 2,87 0,29 F. verticillioides 0,57 0,02 P. Funiculosum 2,01 0,41

37 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Frecuencia Fusarium 3,74 43,68 33,62 F. equiseti F.semitectum F. graminearum F.oxysporum F.sambucinum F.heterosporum F. acuminatum F. avenaceum F.proliferatum F.verticillioides F.poae F.subglutinans

38 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS Densidad relativa Fusarium 0,27 11,14 10,48 F. equiseti F. semitectum F. graminearum F.oxysporum F. sambucinum F. heterosporum F. acuminatum F. avenaceum F. proliferatum F. verticillioides F. poae F. subglutinans

39 ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº , CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS TRICOTECENOS son 12, 13 epoxi-tricote 9 eno. Grupo A (sin carbonilo en el C8): Toxina T-2, HT-2, mono-acetoxiscirpenol, diacetoxiscirpenol, tricodermin, scirpentriol Grupo B (con carbonilo en C8): nivalenol, fusarenona X, deoxinivalenol, monoacetatodon, tricotecin Especies F. graminearum Micotoxinas deoxinivalenol, nivalenol, zearalenona, acetil DON, di acetil DON, fusarin C, fusarenona X, di acetil nivalenol F. avenaceum moniliformina, fusarin C F. culmorum deoxinivalenol, zearalenona, nivalenol, fusarin C, moniliformina F. poae nivalenol, diacetoxiscirpenol, fusarin C, fusarenona X, T-2; HT-2, neosolaniol, fusarin C F. equiseti diacetoxiscirpenol, zearalenona, nivalenol, di acetil nivalenol, fusarenona X F. sporotrichioides toxina T-2, HT-2, neosolaniol, diacetoxiscirpenol, moniliformina, butenolido, fusarin C F. acuminatum toxina-t2, HT-2, diacetoxiscirpenol, moniliformina, neosolaniol, butenolido F. subglutinans zearalenona F. verticillioides fumonisinas, fusarin C, moniliformina F. oxysporum moniliformina F. heterosporum Toxina T-2, HT-2, T2 tetraol F. semitectum bauvericina, diacetoxiscirpenol

40 Flora fúngica toxicogénica aislada en semilla de soja 1999 (Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. Soja y Micotoxinas Flora Fúngica-Variedades-Prácticas Agronómicas ) 2002 (Leticia Elvira Broggi, Héctor Horacio Lucas González, Silvia Liliana Resnik y Ana Pacin Alternaria Alternata prevalence in cereals grains and soybean seeds from Entre Rios Argentina ) y (Manuel J Zelaya, Hector HL Gonzalez, Silvia L Resnik, Maria J Martinez Contaminnant mycoflora of soybean RR harvested in different production areas in Argentina ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº ) Fusarium acuminatum Fusarium heterosporum Penicillium funiculosum Penicillium citrinum Fusarium graminearum Aspergillus niger Aspergillus flavus Fusarium semitectum Altermaria Alternata Flora fúngica en soja Fr % 2003/04 Fr % 2002 Fr %

41 MICOTOXINAS

42 Cultivares Grado madurez MICOTOXINAS Fecha de siembra Condiciones ambientales? Región

43 Para analizar micotoxinas en soja 1. Origen de la muestra 2. Muestra representativa 3. Método validado 4. Datos del método a. Recuperación b. Límite de detección c. Límite de cuantificación

44 Para mejorar la identificación y cuantificación de micotoxinas en soja Estudios colaborativos en matrices alimenticias

45 Para diagnosticar y prevenir micotoxinas en soja 1. Identificar flora fúngica 2. Evaluar capacidad toxicogénica 3. Estudiar la distribución de la contaminación por micotoxinas 4. Identificación de variedades resistentes

46 Para diagnosticar y prevenir micotoxinas en soja 1. Evaluar los sistemas de almacenamiento 2. Estimar la persistencia de micotoxinas o sus metabolitos en las matrices alimenticias elaboradas

47 y en Argentina Intervenir, no solo ser depositarios de la legislación elaborada Estimar la exposición de la población

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