UN MODELO EXPERIMENTAL INDUCIBLE EN RATÓN PARA CONDUCIR ESTUDIOS EN QUIMIOPREVENCIÓN Y ANTICARCINOGÉNESIS

Transcripción

1 UN MODELO EXPERIMENTAL INDUCIBLE EN RATÓN PARA CONDUCIR ESTUDIOS EN QUIMIOPREVENCIÓN Y ANTICARCINOGÉNESIS DR. ENRIQUE ZAMORANO-PONCE, D.SC. LABORATORIO DE GENÉTICA TOXICOLÓGICA (GENETOX) DEPTO. DE CIENCIAS BÁSICAS FACULTAD DE CIENCIAS UNIVERSIDAD DEL BÍO-BÍO

2 IDEAS PRINCIPALES Mapa conceptual de Antimutágenos Características generales de una cripta colónica Definición de Quimioprevención Peumus boldus, M. Efecto de infusión sobre capacidad antioxidante medida por MDA en hígado de ratón Efecto de infusión en la prevención de daño genético inducido por AOM Efecto de infusión en la prevención de formación de FCA en colon de ratones

3 ANTIMUTÁGENOS DESMUTÁGENOS BIOANTIMUTÁGENOS AGENTES ACTÚAN SOBRE LOS MUTÁGENOS AGENTES BLOQUEADORES AGENTES QUE ACTÚAN SOBRE REPARACIÓN DE ADN AGENTES QUE ACTÚAN SOBRE LA REPLICACIÓN DEL ADN AGENTES SUPRESORES ANTIOXIDANTES AGENTES DE REPARACIÓN DE ADN PROMOTORES DE REPARACIÓN AGENTES QUE > LA FIDELIDAD EN LA DUPL. DE ADN INHIBIDORES DE ERRORES DE DUPLICACIÓN DE ADN SISTEMAS ENZIMÁTICOS ATRAPADORES DE OXÍGENO (RL) Focos de Criptas Aberrantes y su aplicación en Genética Toxicológica, Universidad Católica de Asunción, Paraguay agosto de 2011

4 Tomado de Nature, 2009

5 QUIMIOPREVENCIÓN La quimioprevención fue originalmente definida por Sporn en el año 1976 para indicar la potenciación farmacológica o fisiológica mediante las cuales la progresión de una lesión preneoplásica puede ser estabilizada, detenida o revertida La quimioprevención puede ser definida como el uso de agentes naturales o farmacológicos que PREVIENEN el desarrollo de daño en el ADN, mutaciones en la molécula y como consecuencia el inicio de la carcinogénesis, o bien por DETENER o REVERTIR la progresión de células premalignas en las cuales ese daño ha ocurrido

6 LA INFUSIÓN DE Peumus boldus M. BOLDO PREVIENE LA FORMACIÓN DE FOCOS DE CRIPTAS ABERRANTES INDUCIDAS POR AZOXYMETANO EN RATONES Enrique Zamorano-Ponce 1, P.Lagos 1, J.Alarcón 2, J.Fernández 1 1 Laboratorio de Genética Toxicológica, Departamento de Ciencias Básicas, Universidad del Bío-Bío, Sede Chillán 2 Laboratorio de Productos Naturales, Departamento de Ciencias Básicas, Facultad de Ciencias, Universidad del Bío-Bío-sede Chillán

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8 ALCALOIDES FLAVONOIDES BOLDINA CATEQUINA

9 HIPÓTESIS La infusión de boldo disminuye la peroxidación lipídica inducida por dos tratamientos con azoxymetano medida por la técnica del MDA en hígado de ratones Dada la casi nula solubilidad en agua de boldina, el efecto observado de la infusión total se debería a la actividad de catequina y no a Boldina

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14 CONCLUSIÓN 1 Tanto la infusión completa de Boldo, como sus constituyentes boldina y catequina dados separadamente disminuyen la peroxidación lipídica inducida por dos tratamientos con azoxymetano

15 Es posible que la infusión de Boldo, así como Boldina o Catequina disminuyan el daño genético inducido por dos inyecciones de azoxymetano? Técnica de electroforesis en células individuales o ensayo del cometa, según Singh (1988) con leves modificaciones. Células de médula ósea de ratón

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17 AOM

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19 AOM AOM AOM AOM

20 CONCLUSIÓN 2 Tanto la infusión de Boldo como sus constituyentes Boldina y Catequina dados separadamente disminuyen daño genético inducido por AOM medido por el ensayo de electroforesis de células individuales o ensayo de cometa

21 Es posible que la infusión de Boldo, boldina y catequina teniendo efecto antigenotóxico también inhiban la formación de focos de criptas aberrantes inducidas por azoxymetano? Modelo experimental de inducción de focos de criptas aberrantes por azoxymetano en células de colon de ratones

22 weeks Groups Untreated 2 Infusión 5% twice a day 3 Catequina 50 mg/kg 4 Boldine 50 mg/kg 5 Infusión, 5% 6 Boldine 50 mg/kg 7 Catequina 50 mg/kg

23 a b c d

24 Table I. Pretreatment Treatment Groups (n = 10) Dose none none 1 - none water ( -control) a 2 - infusion a none 3 5%, 30 days a boldine a none 4 50 mg/kg none azoxymethane b 5 15mg/kg Catechin none 6 50 mg/kg infusion a azoxymethane b 6 5%, 10 weeks a / 15 mg/kg b boldine a azoxymethane b 7 50 mg/kg a ; 15 mg/kg b A B Oral administration (gavage) twice a day during four week before the first administration of AOM and until the experiment ended at week 10 th. Intraperitoneal,(1 week apart; 15 mg/kg x 2, intraperitoneal).

25 Pretreatment Treatment Total Nº of ACF a X± SD None none 0,24 ± 1,2 None water 0,37 ± 1,7 None boldo 0,42 ± 2,1 None boldine 0,30 ± 2.0 None Catechin 0.27 ± 1,7 None azoxymethane 29,9 ±3,2 Infusion azoxymethane 13,2 ± 3,3 Boldine azoxymethane 8,8 ± 0,4 Catechin azoxymethane 6,5 ± 1,1 a Values expressed as mean ± standard deviation (S.D.). significantly different from control (water) (p < 0.01). significantly different from group treated only with AOM (p < 0.001)

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27 CONCLUSIONES La infusión de boldo, posee la capacidad de disminuir la peroxidación lipídica, el daño genotóxico y la formación de focos de criptas aberrantes inducidas por dos inyecciones de AOM BOLDINA por ser una molécula de muy baja solubilidad en agua no estaría explicando ninguno de los efectos anteriores de la infusión. Pruebas de HPLC respaldan la inexistencia de boldina en el infuso CATEQUINA sería la molécula putativa que explicaría los efectos encontrados para la infusión y puede ser así una molécula interesante.

28 FIJACIÓN DE CONCEPTOS vía Peer Instruction

29 La técnica de Malondialdehído fue empleada para: a) Medir daño genotóxico en células de médula ósea b) Evaluar micronúcleos en células de médula ósea c) Medir lipoperoxidación lipídica en hígado d) Evaluar focos de criptas aberrantes

30 La Técnica de Cometa permite: a) Evaluar daño genético b) Evaluar mutaciones en el ADN c) Evaluar micronúcleos en células de médula ósea d) Ninguna de las anteriores es correcta

31 Los resultados presentados en este estudio se explicarían por: a) El efecto de boldina presente en la infusión b) El efecto de Catequina y boldina presente en la Infusión c) El efecto de Catequina presente en la infusión d) Ninguna de las anteriores es correcta

32 Referidos a formación de FCA, los resultados permiten afirmar que : a) Boldina inhibe formación de FCA b) Catequina no posee efecto inhibitorio c) El efecto de la infusión se debe a Boldina d) Ninguna de las anteriores es correcta

33 MUCHAS GRACIAS