Fitoplasmas y virus que afectan a frutales de pepita y hueso

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Irene Domínguez Casado
hace 8 años
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1 Fitoplasmas y virus que afectan a frutales de pepita y hueso Equipo investigador IRTA: Assumpció Batlle Amparo Laviña Jose Aramburu Colaboración con el Programa de Fruticultura del IRTA: Lérida, Gerona (Mas Badia) y Reus (Mas Bover). Con técnicos de Laboratorios de Sanidad Vegetal, técnicos de distintas cooperativas frutícolas y técnicos de las ADVs. IRTA, Patología Vegetal, Cabrils, Barcelona

2 Proyectos R+D en frutales, participantes y colaboradores. Fondos públicos INIA SC C2 INIA RTA INIA RTA INIA RTA INIA-TRT COST FA0807 Euphresco 2010 INIA-RTA Ester Torres. Laboratorio Sanidad Vegetal, DAAM Luis Asín (IRTA, Lleida) Pere Vilardell (Estación Mas Badia, Girona) Miquel Peris (IRTA,Lleida) Vicente Medina (UDL, Lleida) Dionisio Berra. Laboratorio Agrario de Fraisoro, Guipúzcoa Elena Landeras, Lab Sanidad Vegetal. Oviedo. Asturias Remedios Santiago, Lab.Sanidad Vegetal, Badajoz, Extremadura Rafael Balduque y MªJosé Rubio (CITA, Zaragoza) -Entidades y empresas colaboradoras: Certiplant, Agromillora, Viveros Orero, Viveros Provedo, PLANASA, Grup Actel, Cooperativa Fruits de Ponent, Cooperativa Crex y CAVAL (Extremadura)

Laboratorio Sanidad Vegetal, DAAM Luis Asín (IRTA, Lleida) Pere Vilardell (Estación Mas Badia, Girona) Miquel Peris (IRTA,Lleida) Vicente Medina (UDL, Lleida) Dionisio Berra.

3 Líneas de investigación en fitoplasmas. -Fitoplasmas del grupo ribosómico 16Sr-X que afectan a frutales de pepita y hueso Ca. Phytoplasma pyri o Pear decline (decaimiento peral) -Líneas de Investigación Ca.P.prunorum o European stone fruit yellows (enrollamiento clorótico del albaricoquero, leptonecrosis ciruelo, amarilleamientos melocotonero) Apple proliferation or Ca.P.mali -Epidemiología: Evolución de la incidencia. Identificación, dinámica poblacional y biología de los vectores, Identificación de plantas huésped. -Caracterización biológica y molecular de aislados. -Mejora técnicas de detección de fitoplasmas -Desarrollo y evaluación de métodos de control

P.mali -Epidemiología: Evolución de la incidencia. Identificación, dinámica poblacional y biología de los vectores, Identificación de plantas huésped.

4 Resultados (1.-Identificación de vectores) -Transmision de Pear decline por Cacopsylla pyri en España -Identificación de C.pruni y ciclo de ESFY en frutales de hueso -Identificación de C.picta y C.melanoneura como vectores de proliferación del manzano

5 2.-Resultados (Técnicas de detección) de fitoplasmas del grupo 16Sr-X mediante PCR y PCR a tiempo real Metodología del muestreo: época, tejido Comparación de técnicas: PCR a tiempo real, PCR nido Comparación de métodos de extracción : Extracción con E.Z.N.A. Extracción con CTAB Extracción con PGB Figura 2. Comparación de los métodos de extracción y amplificación. -Evaluación de distintos métodos de PCR a tiempo real : -Cinco con sondas TaqMan -Uno con tinción SYBR

extracción : Extracción con E.Z.N.A. Extracción con CTAB Extracción con PGB Figura 2.

6 3.-Caracterización molecular de aislados de Ca.P.prunorum y Ca.P.pyri, mediante secuenciación de los genes imp, acef, pnp, y secy -Se han determinado distintos aislados de Ca.P. prunorum y de Ca.P.pyri. Se están utilizando para evaluar tolerancia o resistencia en material vegetal. -Se han determinado 9 aislados de Ca.P.prunorum en Europa, 4 en España. -Variabilidad genética determinada con el estudio del gen Imp Trabajo realizadoen colaboración con el INRA de Burdeos. Ca.P.Pyri -Se ha identificado un recombinante de Ca.P.pyri, causante del Pear decline que presenta dos genes de Ca.P. prunorum causante de los ESFY. Se ha encontrado en peral y en melocotonero. -Secuenciación del genoma completo de Ca.P.prunorum

-Variabilidad genética determinada con el estudio del gen Imp Trabajo realizadoen colaboración con el INRA de Burdeos. Ca.P.

7 4.-Control de fitoplasmas del grupo 16r-X 4.1. Se ha evaluado la susceptibilidad/ resistencia en material vegetal de Pyrus y Prunus. Se han determinado distintos grados de tolerancia pero no resistencia. 4.2.Control de vectores. Identificación de sustancias volátiles para ser utilizadas como atrayentes de psilas 4.3. Se esta evaluando el saneamiento mediante termoterapia de agua caliente La micorrización con hongos seleccionados incrementa la tolerancia a la infección con fitoplasmas

Identificación de sustancias volátiles para ser utilizadas como atrayentes de psilas 4.3.

8 Puesta a punto de técnicas de detección de virus de frutales por RT-PCR. Etiología de algunas enfermedades transmisibles. Programas de selección sanitaria de material vegetal. Control sanitario bancos de Germoplasma de nogal, almendro y algarrobo. -INIA-TRT Proyecto Cefrut -INIA RFP INIA RFP Detección de 6 virus mediante RT_PCR Detección de virus en árboles con distintas enfermedades ACLSV -Todos las muestras positivas por indexaje también lo fueron por técnicas de laboratorio.

-INIA-TRT2006-004 -Proyecto Cefrut -INIA RFP 2009-0013 -INIA RFP 2013-0014 -Detección de 6 virus mediante RT_PCR Detección de

9 4.-Oferta Tecnológica Identificación y caracterización biológica y molecular de fitoplasmas y virus. Estudio de la epidemiologia en una determinada zona. Identificación de vectores y plantas huésped. Diseño de métodos de control. Puesta a punto de técnicas de detección de PCR y PCR a tiempo real. Diseño de cebadores para reconocimiento de distintos aislados de fitoplasmas y virus. Ensayos con distintos productos que incrementen la tolerancia a fitoplasmas y/o virus (BTH, Fosetil-Al, AIA, AIB, SA) o inhiban su multiplicación (péptidos). Ensayos de control sostenible de vectores, con la utilización de atrayentes de psilas como trampas.

Diseño de cebadores para reconocimiento de distintos aislados de fitoplasmas y virus.

10 Impacto del cambio climático en las enfermedades producidas por fitoplasmas -Ampliación del limite geográfico del fitoplasma y de los vectores a zonas donde no estaban presentes por exceso de frio. -Mayor permanencia del fitoplasma en la parte aérea del árbol durante todo el año, lo que implica una mayor concentración del mismo -En especies sensibles mayor concentración implica mayor expresión y virulencia de síntomas. Detección del PD a lo largo del año Transmisión a través de injerto de yemas tomadas en febrero Parcela 8 (Blanquilla) Parcela 3 (Limonera)

-Mayor permanencia del fitoplasma en la parte aérea del árbol durante todo el año, lo que implica una mayor concentración del mismo -En

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