Citometría de flujo con fluorescencia en urianálisis XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

Transcripción

1 Citometría de flujo con fluorescencia en urianálisis XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

2 Agenda Tecnología Beneficios automatización Aplicaciones Estudios Innovación UN-series

3 Tecnología XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

4 CFF en URI (I) La orina marcada es transportada a través del canal mediante un fluido envolvente. Las partículas presentes en la orina se disponen una detrás de la otra, gracias a la fuerza hidrodinámica que ejerce el fluido transportador a través del canal. La disposición en fila de a uno de las partículas, permite un recuento y clasificación precisos. La velocidad del flujo está en el rango de metros por segundo, consiguiendo una elevada velocidad de recuento (miles de partículas por segundo). XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

5 CFF en URI (II) Uso de Marcadores de Polimetina en la CFF: Gracias a la amplia capacidad de absorción y a la potente fluorescencia de los marcadores, se pueden detectar incluso a niveles de ultratrazas, permitiendo un elevado ratio de detección de las partículas de orina marcadas selectivamente. Marcaje óptimo y selectivo de las distintas partículas de la orina, gracias a los distintos grupos moleculares reactivos presentes en los distintos marcadores. El sistema de reactivos empleado permite una tinción óptima, gracias a: Valor de ph óptimo Pretratamiento de las membranas celulares Previene tinciones inespecíficas Acelera la tinción selectiva Disuelve las sales presentes Temperatura óptima para la tinción XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

6 CFF en URI (III) Al atravesar el haz láser, las partículas marcadas emiten un pulso momentáneo de fluorescencia. Este pulso de fluorescencia se mide mediante fotomultiplicadores. Dispersión frontal (FSC) tamaño de la partícula. Dispersión lateral (SSC) superficie y la complejidad interna de la partícula. Intensidad de fluorescencia (FI) capacidad de tinción de cada partícula. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

7 CFF en URI (IV) La características ópticas son diferentes entre cada partícula patrón único que permite su clasificación y recuento. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

8 CFF en URI (V) Caso clínico Pielonefritis Hombre, 91 años Molestias: fiebre <Hallazgos Clínicos> El paciente presentaba una fiebre de 38ºC y no había tenido apetito desde hacía 2 días. Al momento de la revisión, su recuento de leucocitos fue de WBC/µL y proteína C reactiva de 11,45 mg/dl. El examen de orina mostró piuria evidente y fue hospitalizado para su tratamiento. El cultivo de orina fue positivo para Escherichia Colii (10 6 /ml). La condición del paciente mejoró con los antibióticos. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

9 Beneficios automatización del urianálisis XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

10 Beneficios La automatización cambia el urianálisis aportando: Mayor rapidez en la obtención de resultados: Ofrece un mejor servicio a los facultativos Diagnóstico prematuro tratamiento o no desde el inicio Menor carga de trabajo manual Disminución errores de manipulación Ahorro de costes Mejora en la calidad y la estandarización Mayor facilidad de conseguir los requisitos de acreditación Resultados de alta calidad XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

11 Aplicaciones XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

12 Aplicaciones de la CFF (I) Sistemático y Sedimento URINOGRAMA urinario (sedimento) Discriminar muestras negativas Ahorro de tiempo de FEA en muestras negativas Augmento de disponibilidad de tiempo para muestras positivas Mejor indicación de las muestras patológicas o Infecciones de tracto urinario o Hematuria XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

13 Aplicaciones de la CFF (II) LÍQUIDOS BIOLÓGICOS Posibilidad de análisis de los siguientes líquidos: Líquido cefaloraquídeo Líquido pleural Líquido ascítico CAPD (diálisis peritoneal) Líquido sinovial No requiere ningún pretratamiento se evitan errores de preparación Capacidad de detección en rangos bajos relevancia clínica Rápido procesamiento y fácil recuento celular. Preparación de citospin directamente después del análisis. No requiere recuento manual. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

14 Aplicaciones de la CFF (III) CRIBADO UROCULTIVOS Tecnología reconocida por la guías clínicas de la SEIMC Punto de corte para bacteriuria y leucocituria Otros parámetros de interés: EC, SRC, Levaduras Ventajas: Informar el paciente negativo en minutos Ayudar a la lucha contra la resistencia a antibioticos Disminución de siembra Posible asociación a MALDI-TOF - Ahorro tiempo XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

15 Estudios XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

16 Evaluación del UF-500i (I) Hospital Santa Bárbara (Puertollano) Objetivos: Se pretende validar las características del contador de partículas en orina, UF-500i, en comparación con el método de referencia recomendado. Repetitividad (precisión) para hematíes y leucocitos Linealidad: diluciones en serie de muestras de orina con una alta concentración de hematíes y leucocitos. Comparación del recuento de partículas en la orina con el método de rutina usado en el laboratorio, así como con el método de referencia según ISLH (cámara Fuchs Rosenthal). Se estudia la correlación entre el UF-500i y el método de referencia de contaje de partículas en el microscopio. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

17 Evaluación del UF-500i (II) Objetivos (II): Puede el UF-500i ser usado como un sistema de cribado previo al urocultivo, descartando aquellas muestras que no tengan indicaciones de infección de tracto urinario como indican las guidelines internacionales? Comparación con el método de rutina usado en microbiología. Correlación entre el UF-500i y el urocultivo. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

18 Evaluación del UF-500i (III) Total analizados = 97 Cultivos negativos = 60 Cultivos positivos = 37 Punto de corte UF-500i: LEUCOS > 15/µl y BACT > 100/µl Cultivos positivos UF: 45 Cultivos negativos UF: 52 FP= 8 TP=37 FN= 0 TN=52 Sensibilidad = 100% Valor predictivo negativo = 100% Especificidad = 86,67 % Valor predictivo positivo = 82,22% Reducción de siembra (cultivos) = 53,60% XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

19 Evaluación del UF-500i (IV) Conclusiones La precisión del contaje de Hematíes y Leucocitos es muy buena (cv% RBC=1,55 y cv% WBC = 0,99) La linealidad del contaje de Hematíes y Leucocitos es muy buena (RBC R2=0,997 y WBC R2= 0,999) La correlación del contaje de Hematíes y Leucocitos en el UF-500i y en la cámara de Fuchs Rosenthal es muy buena. (RBC r= 0,999 y WBC r=0,950) La reducción de siembra de orinas es de 53,60% XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

20 Estudio URISCAM (I) Estudio multicéntrico en 6 hospitales del SESCAM Servicios de Microbiología participantes: Hospital La Mancha Centro Hospital Santa Bárbara Hospital General de Guadalajara Hospital Universitario de Ciudad Real Hospital Nuestra Señora del Prado Hospital Universitario Virgen de la Salud Objetivo Determinar la validez y precisión de la citometría en la detección de las infecciones del tracto urinario y/o bacteriurias asintomáticas para ser usado como método de cribado previo al urocultivo. XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

21 Estudio URISCAM (II) Conclusiones (I) Incidencia ITU/BA 15,6%, 156 Variables predictivas significativas ITU/BA: Bacterias, Morfoflogia, Leucocitos y Edad Tamaño muestral pequeño para bolsas colectoras y orinas de sondaje Mala concordancia morfología UF vs cultivo Sin influencia del conservante XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

22 Estudio URISCAM (III) Conclusiones (II) El 69% de los FN eran orinas contaminadas Errores diagnósticos: 1,17% (0,36%) Algoritmo predictivo (reglas de decisión): S=94,9%, E= 47,4%, VPP=35%, VPN=97%, Kappa=0,289 VÁLIDO PARA CRIBADO El método seleccionado permite un ahorro de siembras del 38% de las muestras Punto de corte 21 bacterias BUEN MÉTODO DIAGNÓSTICO XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

23 Innovación UN-series XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

24 UN-series UD-10 UF-5000 UC-3500 XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

25 UN-series UD UF UF UF UF UF UC UF UC UC UF UC UD UF XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

26 UN-series UD SISTEMA MODULAR DE AUTOMATIZACIÓN COMPLETA DEL URINÁLISIS UF UF UF UF UC UC XV Reunión Científica LABCAM Anna Corominas, Sysmex España Puertollano

27 Gracias por su atención Anna Corominas Sysmex España, S. L. La innovación constante es la única forma de mantenerse competitivo, porqué ninguna ventaja es sostenible en el largo plazo. Jorge González Moore