RESUMEN TRABAJO DE GRADO SERGIO ANDRÉS PÉREZ RUEDA CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE

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1 UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER OCAÑA Documento FORMATO HOJA DE RESUMEN PARA TRABAJO DE GRADO DIVISIÓN DE BIBLIOTECA Dependencia Código F-AC-DBL-007 Fecha Aprobado SUBDIRECTOR ACADÉMICO Revisión A Pág. 1(39) RESUMEN TRABAJO DE GRADO AUTORES FACULTAD PLAN DE ESTUDIOS DIRECTOR TÍTULO DE LA TESIS SERGIO ANDRÉS PÉREZ RUEDA CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE ZOOTECNIA ASDRÚBAL BAYONA URIBE UTILIZACIÓN DE LAS TÉCNICAS EMPLEADAS EN EL LABORATORIO BIOTECNOLÓGICO DEL SENA AGUACHICA, PARA MEJORAR LA REPRODUCCIÓN DEL GANADO BOVINO DE LAS DIFERENTES FINCAS VINCULADAS A LA INSTITUCIÓN RESUMEN (70 palabras aproximadamente) El presente trabajo bajo la modalidad de pasantías se realizó en las diferentes fincas vinculadas al laboratorio tecnológico del SENA, en el municipio de Aguachica, la cua fue dirigida y supervisada por un médico veterinario zootecnista, con el fin de que cada unos de los objetivos se cumplieran a toda cabalidad teniendo en cuenta el bienestar animal como el bienestar del personal de trabajo. CARACTERÍSTICAS PÁGINAS: 39 PLANOS: ILUSTRACIONES: CD-ROM: 1

2 UTILIZACIÓN DE LAS TÉCNICAS EMPLEADAS EN EL LABORATORIO BIOTECNOLÓGICO DEL SENA AGUACHICA, PARA MEJORAR LA REPRODUCCIÓN DEL GANADO BOVINO DE LAS DIFERENTES FINCAS VINCULADAS A LA INSTITUCIÓN SERGIO ANDRÉS PÉREZ RUEDA UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER OCAÑA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE ZOOTECNIA OCAÑA 2013

3 UTILIZACIÓN DE LAS TÉCNICAS EMPLEADAS EN EL LABORATORIO BIOTECNOLÓGICO DEL SENA AGUACHICA, PARA MEJORAR LA REPRODUCCIÓN DEL GANADO BOVINO DE LAS DIFERENTES FINCAS VINCULADAS A LA INSTITUCIÓN SERGIO ANDRÉS PÉREZ RUEDA Trabajo bajo la modalidad de pasantías para optar el titulo de zootecnista Director JORGE ANTONIO DUARTE NORIEGA Médico veterinario zootecnista UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER OCAÑA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE ZOOTECNIA OCAÑA 2013

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5 CONTENIDO pág. INTRODUCCIÓN 1. UTILIZACIÓN DE LAS TÉCNICAS EMPLEADAS EN EL LABORATORIO BIOTECNOLÓGICO DEL SENA SECCIONAL AGUACHICA, PARA MEJORAR LA REPRODUCCIÓN DEL GANADO BOVINO DE LAS DIFERENTES FINCAS VINCULADAS A LA INSTITUCIÓN 1.1 DESCRIPCIÓN DE LA EMPRESA Misión Visión Objetivos de la empresa Descripción de la estructura organizacional Descripción de la dependencia 2. DIAGNOSTICO INICIAL DE LA DEPENDENCIA 3. INFORME DE CUMPLIMIENTO DE TRABAJO 3.1 DESCRIPCIÓN DE LAS ACCIONES REALIZADAS Examen andrológico a reproductores Selección y evaluación de donadora Visitas técnicas Apoyo en la formación y evaluación de aprendices Inseminación artificial Superovulación y técnica de lavado convencional para la obtención de embriones en bovinos 3.2 ENFOQUE CONCEPTUAL O MARCO CONCEPTUAL Examen andrológico Inseminación artificial Transferencia de embriones Superovulación Criopreservación de embriones 4. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS 4.1 DIAGNOSTICO FINAL 5. CONCLUSIONES 6. RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFÍA REFERENCIAS DOCUMENTALES ELECTRÓNICAS

6 ANEXOS 35

7 LISTA DE FIGURAS pág. Figura 1. Estructura organizacional. Figura 2. Descripción de la dependencia. Figura 3. Protocolo de superestimulación

8 LISTA DE CUADROS pág. Cuadro 1. Diagnostico de la dependencia. Cuadro 2. Toro simental primera colecta. Cuadro 3. Toro brahmán blanco primera colecta. Cuadro 4. Toro simental segunda colecta Cuadro 5. Toro brahmán blanco segunda colecta. Cuadro 6. Toro brangus N 1 primera colecta. Cuadro 7. Toro brangus N 2 primera colecta. Cuadro 8. Toro brangus N 1 segunda colecta Cuadro 9. Toro brangus N 2 segunda colecta Cuadro 10. Protocolo superovulación. Cuadro 11. Resultado inseminación

9 LISTA DE ANEXOS Anexo A. Registro fotográfico 36 pág.

10 RESUMEN El presente trabajo se encuentra toda la información sobre las pasantías realizadas en el laboratorio biotecnológico animal del Sena Aguachica, el cual se desarrollaron todos los objetivos los cuales estaban encaminados a la reproducción y producción animal de las diferentes fincas. Este trabajo fue realizado en el Sena de Aguachica en donde se puso en práctica y se pudo ejercer todos los conocimientos adquiridos para el beneficio propio y de las fincas vinculadas a la institución. Estas pasantías fueron dirigidas y supervisadas por el médico veterinario zootecnista, con el fin de que cada unos de los objetivos se cumplieran a toda cabalidad teniendo en cuenta el bienestar animal como el bienestar del personal de trabajo. Por último se puede concluir que las pasantías fueron muy satisfactorias y enriquecedoras ya que se hicieron actividades que a lo largo de la carrera no se adquirieron y nos sirve para la formación profesional como zootecnistas.

11 INTRODUCCIÓN El laboratorio reproductivo bovino es un campo muy innovador el cual comprende a las técnicas como la inseminación artificial, colecta y congelación de semen, sincronización, superovulación, transferencia, extracción y congelación de embriones, manipulación de embriones, producción in vitro de embriones, lo cual con esto permite aumentar la eficiencia reproductiva de los animales. Es uno de las técnicas más emblemáticas de la investigación del control y dominio de las ciencias y la zootecnia porque logra incrementar con éxito los progresos genéticos, reproductivos y productivos de los hatos. 11

12 1. UTILIZACIÓN DEL LABORATORIO BIOTECNOLÓGICO DEL SENA SECCIONAL AGUACHICA, PARA MEJORAR LA REPRODUCCIÓN DEL GANADO BOVINO DE LAS DIFERENTES FINCAS VINCULADAS A LA INSTITUCIÓN 1.1 DESCRIPCIÓN DE LA EMPRESA Servicio nacional de aprendizaje (Sena).Creado en 1957 como resultado de la iniciativa conjunta de los trabajadores organizados, los empresarios, la iglesia católica y la Organización Internacional del Trabajo, es un establecimiento público del orden nacional, con personería jurídica, patrimonio propio e independiente y autonomía administrativa, adscrito al Ministerio de la Protección Social de la república de Colombia. El Sena cumple la función que le corresponde al Estado de invertir en el desarrollo social y técnico de los trabajadores colombianos, ofreciendo y ejecutando la formación profesional integral para la incorporación de las personas en actividades productivas que contribuyan al crecimiento social, económico y tecnológico del país. Además de la formación profesional integral, impartida a través de Centros de Formación, brinda servicios de formación continua del recurso humano vinculado a las empresas; información; orientación y capacitación para el empleo; apoyo al desarrollo empresarial; servicios tecnológicos para el sector productivo, y apoyo a proyectos de innovación, desarrollo tecnológico y competitividad Misión El Sena, está encargado de cumplir la función que le corresponde al estado de invertir en el desarrollo social y técnico de los trabajadores colombianos; ofreciendo y ejecutando la formación profesional integral, para la incorporación y el desarrollo de las personas en actividades productivas que contribuyan al desarrollo social, económico y tecnológico del país Visión En el 2020, el Sena será una Entidad de clase mundial en formación profesional integral y en el uso y apropiación de tecnología e innovación al servicio de personas y empresas; habrá contribuido decisivamente a incrementar la competitividad de Colombia a través de: Los relevantes aportes a la productividad de las empresas. La contribución a la efectiva generación de empleo y la superación de la pobreza. El aporte de fuerza laboral innovadora a las empresas y regiones. 1 (citado el 2 de noviembre 2012). 12

13 La integralidad de sus egresados y su vocación de servicio. La calidad y los estándares internacionales de su formación profesional integral. La incorporación de las últimas tecnologías en las empresas y en la formación profesional integral. Su estrecha relación con el sector educativo (media y superior) La excelencia en la gestión de sus recursos (humanos, físicos, tecnológicos, financieros) Objetivos de la empresa El Sena, tiene los siguientes objetivos: Dar formación profesional integral a los trabajadores de todas las actividades económicas, y a quienes sin serlo, requieran dicha formación, para aumentar por ese medio la productividad nacional y promover la expansión y el desarrollo económico y social armónico del país, bajo el concepto de equidad social redistributiva. Fortalecer los procesos de formación profesional integral que contribuyan al desarrollo comunitario a nivel urbano y rural, para su vinculación o promoción en actividades productivas de interés social y económico. Apropiar métodos, medios y estrategias dirigidos a la maximización de la cobertura y la calidad de la formación profesional integral. Participar en actividades de investigación y desarrollo tecnológico, ocupacional y social, que contribuyan a la actualización y mejoramiento de la formación profesional integral. Propiciar las relaciones internacionales tendientes a la conformación y operación de un sistema regional de formación profesional integral dentro de las iniciativas de integración de los países de América latina y el Caribe. Actualizar, en forma permanente, los procesos y la infraestructura pedagógica, tecnológica y administrativa para responder con eficiencia y calidad a los cambios y exigencias de la demanda de formación profesional integral. 2 2 Ibíd., 13

14 1.1.4 Descripción de la estructura organizacional Figura 1. Estructura organizacional. Fuente: Servicio Nacional de Aprendizaje (Sena) Descripción de la dependencia Figura 2. Descripción de la dependencia. LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA ANIMAL RESPONSABLE Fuente: Pasante Sergio Pérez. PASANTE UFPSO 3 Ibíd., 14

15 Responsable: Es el encargado de administrar gerencia y coordinar las actividades del laboratorio que respectan a la formación de los aprendices y las salidas a campo. Pasante UFPSO: Brinda apoyo a procesos de formación de los aprendices, actividades de laboratorio y salidas a campo. El Sena integra la innovación, el recurso humano especializado y los ambientes de formación con infraestructura tecnológica avanzada. Estos aspectos conforman los servicios tecnológicos y biotecnológicos para que las empresas encuentren apoyo en su propósito de ser más productivas y competitivas. Los empresarios pueden acceder a estos servicios a través de los centros de formación del Sena en el país con tarifas adecuadas a sus necesidades. Lo anterior apunta, una vez más, al cumplimiento de la misión institucional de contribuir con el desarrollo social, económico y tecnológico de Colombia. 4 4 Ibíd., 15

16 2. DIAGNOSTICO INICIAL DE LA DEPENDENCIA Cuadro 1. Diagnostico de la dependencia. Fortalezas - Existencia de tecnología moderna y experiencia para ponerlos en práctica en las actividades. - Estrechas y cordiales relaciones con las entidades públicas y privadas que de forma directa o indirecta benefician a los aprendices. - Alto conocimiento de los médicos veterinarios para la orientación del estudiantado. Debilidades - Mal estado y falta de algunos equipos. - Área del laboratorio pequeña para el desarrollo de las diferentes actividades. Fuente: Pasante Sergio Pérez Oportunidades - Disponibilidad de programas de capacitación y actualización de los diferente cursos. - Políticas de rendición de cuentas comprometidas con la mejora de la institución para una buena formación. - Desarrollo de las nuevas tecnologías para el cumplimiento y desarrollo de los objetivos. Amenazas - Funcionarios se anteponen a algunas funciones y atrasan la realización de actividades. - Acciones de funcionarios atrasan o desmejoran la dependencia. 16

17 3. INFORME DE CUMPLIMIENTO DE TRABAJO 3.1 DESCRIPCIÓN DE LAS ACCIONES REALIZADAS Examen andrológico a reproductores. Para desarrollar esta actividad se realizaron dos trabajos uno en la finca Santa Marta ubicada en el municipio de Gamarra, en donde se evaluaron dos toros de diferentes razas Angus, brahmán blanco, en esa evaluación se tuvo en cuenta su condición física, edad y luego se procedió a realizar la colecta de semen para su estudio en el laboratorio, y el otro fue realizado en la finca Villa Juliana ubicada en el corregimiento de Aguas claras Norte de Santander donde se trabajaron dos toros donde también se tuvo en cuenta los parámetros anteriores Selección y evaluación de donadora. Esta actividad se realizo en la finca Villa Juliana ubicada en el corregimiento de Aguas claras Norte de Santander, en el cual se hizo una revisión de una vaca simental y allí se procedió a la revisión de la condición física y reproductiva, una palpación rectal de los ovarios, sanidad y vacunación del animal para el proceso de superovulación Visitas técnicas. Esta actividad se realizo en tres fincas, las cuales fueron la Margarita ubicada en la vereda Jawil, la finca Villa Juliana ubicada en el corregimiento de Aguas claras Norte de Santander, la finca Santa Marta ubicada en el municipio de Gamarra, en ellas se revisó el estado físico del ganado, instalaciones de la finca, potreros, tipos de pastos, el registro de los semovientes, estado sanitario de las vacas, con el fin de hacer unas recomendaciones para el mejoramiento de las diferentes fincas Apoyo en la formación y evaluación de aprendices. Se brindó apoyo en la formación y evaluación de los aprendices tanto en campo como en el laboratorio, a cargo del médico veterinario Jorge Duarte, aquí se dio orientación en diferentes temas a los aprendices para complementar sus conocimientos Inseminación artificial. Esta actividad se desarrollo en la finca Margarita ubicada en la vereda el Jawil el cual ya se habían seleccionado los animales con mejor condición corporal y mejor condición reproductiva, que fueran buenas madres, buenas productoras de leche, se trabajaron diez semovientes con las mejores características y las mejores condiciones corporales Superovulación y técnica de lavado convencional para la obtención de embriones en bovinos. esta técnica fue realizada en la finca Villa Juliana ubicada en el pueblo de Aguas claras Norte de Santander, este trabajo de realizo con una novilla simental pura de tres años. 3.2 ENFOQUE CONCEPTUAL O MARCO CONCEPTUAL Examen andrológico. Es la ciencia que estudia las funciones reproductivas del macho. 17

18 Presentación de series de argumentos que amerita la evaluación rutinaria anual de los toros. Muchos trabajos científicos han demostrado que en sistemas de producción de carne, la fertilidad, en términos económicos es 10 veces más importante que características como la calidad de res, y cinco veces más importante que la ganancia de peso. 5 Recolección del semen bovino.el electroeyaculador hace parte de los métodos utilizados para la recolección de semen, este método es utilizado cuando el toro es renuente al contacto sexual y/o para aprovechar al máximo el potencial reproductivo del macho. 6 La presente técnica, está basado en la estimulación de las glándulas accesorias sexuales por medio de descargas eléctricas posteriores a la introducción del electroeyaculador en el recto del toro, con las cuales se puede obtener una erección y posteriormente un eyaculado. La estimulación no se extenderá a más de cinco minutos, ya que puede causar ciertos traumatismos en el toro. Se debe tener preparado con anticipación el material a utilizar para la recolecta del semen (un embudo recolector que conducirá el semen a un tubo de ensayo). El semen recolectado debe ser manipulado teniendo en cuenta ciertas técnicas para su conservación y posterior uso. En este método se hace uso de un electroeyaculador que consta un electrodo conectado a una batería que genera estimulaciones rítmicas provocadas por corriente no mayores a 20 voltios, las descargas pueden ser automáticas o manuales. Procedimiento. Alistamiento del toro: para esta técnica utilizaremos un toro. Se procede a traer el toro del corral de residencia (CR) y ubicarlo en los corrales de manejo en el cual se deja descansar por un periodo de 10 a 15 minutos. Si por algún motivo el toro fue maltratado en el camino o si se hizo correr éste se debe dejar descansar durante un periodo más prolongado. Alistamiento del baño maria: previo a la colecta del semen se debe alistar el baño maría. Se realiza el llenado con agua del baño maría hasta el nivel indicado. Se ubica la gradilla dentro del baño maría. Se procede a encender el baño maría. Con los botones de regulación de temperatura se lleva el agua a una temperatura de 36 a 37 C, con lo cual se busca evitar un choque térmico a los espermatozoides. 5 Viedma José Luis, sector productivo, (citado el 12 octubre) disponible internet 6 Poveda PeñaEdwin Hernán, colecta de semen bovino (citado el 11 de noviembre) disponible en internet colecta-semen-bovino.html 18

19 Direccionamiento del toro al brete: Se procede a llevar el toro del corral de manejo (CM)a la manga. Luego se realiza una sujeción parcial para facilitar la práctica de colecta. Alistamiento de materiales y equipos: Electroeyaculador, se debe verificar que éste cuente con la carga de batería necesaria para la realización del proceso, para esto el equipo cuenta con una luz testigo la cual nos indica el momento en el cual el equipo está completamente cargado (la luz parpadea cuando está cargando y en el momento en que completa su carga total la luz se queda estable), adicional se debe verificar que todo el equipo este en buen funcionamiento. Microscopios, se procede a ubicar, encender y verificar el buen funcionamiento de cada uno de estos. Placa térmica, se instala y luego se enciende, sobre ella se ubican las láminas, laminillas y mezcladores con el fin de llevarlas a una temperatura de 37 C y evitar choque térmico en las muestras tomadas. Alistamiento de manga colectora, se debe verificar que cada una de las partes que componen el mango de colecta esté en perfectas condiciones. Tinciones, se lleva a cabo el alistamiento de la eosina, nicrosina y tinta china. Alistamiento del toro en el brete: Se hace corte de pelos largos presentes en el área prepusial. Se realiza desinfección y lavado del prepucio con agua fría para estimular la orina del toro y evitar así la contaminación del esperma colectado. Se debe realizar un excelente secado ya que el agua es espermicida, utilizando toallas absorbentes desechables. 7 Armado del mango de colecta: Previo análisis de las partes del mango de colecta se procede a su armado. Se toman todas las medidas preventivas para evitar contaminación del mango de colecta. 8 Desplazamiento de equipos y materiales: Se lleva el electroeyaculador con todas sus partes al sitio donde se realizara la colecta (brete). Para el desplazamiento del mango de colecta se utiliza un guante de cirugía para cubrirlo y evitar contaminación. Montaje del equipo para la colecta: Lubricar la bala antes de introducirla en el recto del toro. 7 Ibíd., 8 Ibíd., 19

20 Introducir la bala el recto del toro. Conexión de cables del electroeyaculador a la bala Encendido del electroeyaculador Colecta de esperma: Se da inicio a los estímulos por medio de descargas eléctricas controladas, con lo cual se busca estimular las glándulas sexuales accesorias. Por medio de las descargas se logra la erección y desenfunde del pene. Cuando se inicie la salida de líquido seminal se deben dejar caer las primeras muestras de líquido seminal. Luego de esto se ubica el mango de colecta en el pene para lograr así que el eyaculado quede dentro del tubo colector, el líquido seminal colectado debe ser opaco. Traslado del semen al laboratorio: Inmediatamente se colecta el semen se procede a retirar el tubo de colecta del embudo y se tapa, rápidamente debe ser llevado al laboratorio. Se debe empuñar el tubo de colecta con el fin de mantener la temperatura y evitar que los rayos ultra violeta disminuyan la calidad del semen. Retiro de electroeyaculador: Se apaga el equipo. Se retiran los cables de conexión. Retirar el electroeyaculador Se realiza el lavado y limpieza del electroeyaculador. Desamarrar el toro Se procede a retirar todo el material de sujeción utilizado para inmovilizar parcialmente el toro. Al igual que en el momento de la llegada del toro este debe ser tratado de la misma forma, lo que quiere decir que no se debe maltratar el animal se debe brindar un adecuado bienestar animal. 9 Se ubica en el corral de manejo con el fin de dejarlo descansar Inseminación artificial, Es una técnica muy empleada para lograr el mejoramiento genético de los rebaños bovinos. Se persigue principalmente el nacimiento de animales de alta productividad en un corto período de tiempo. Básicamente la inseminación artificial consiste en la introducción de semen de toros genéticamente calificados a los cuales se les ha recolectado el semen por distintos métodos. Este semen permanece conservado hasta el momento de su utilización. 9 Ibíd., 20

21 La creciente implementación de la inseminación artificial ha sido posible mediante el desarrollo de un sistema de pruebas de progenie y la utilización de los subsiguientes registros de producción de leche como medida objetiva del rendimiento para la selección de toros mejorados, así como también de las técnicas de recolección y manejo de semen. Ventajas de la inseminación artificial Mejor aprovechamiento del macho: por ejemplo un toro en monta natural deposita en la hembra todo el semen producido en una eyaculación, en cambio con inseminación artificial ese semen puede ser diluido y alcanzar para pajillas y también congelarse y preservarse en el tiempo. Mejoramiento genético más rápido. Es más económico que tener un macho de monta libre. Evita la transmisión de enfermedades venéreas. Aumenta la fertilidad del rebaño por ser más controlada que la monta natural. Permite usar machos con excelentes características pero con algún problema físico no hereditario (quiebre o daños en extremidades, ciegos, etc.). Uso de machos a grandes distancias mediante semen congelado. Procedimiento para la inseminación artificial Para la deposición del semen en el tracto reproductivo de la hembra se utiliza con frecuencia el método recto - vaginal: Limpiar cuidadosamente los genitales externos. Introducir una de las manos por el recto con la finalidad de sujetar el cuello del útero. Introducir la pipeta de inseminación a través de la vulva y vagina hasta llegar al cervical externo. Mediante la manipulación del cérvix y el uso de una ligera presión se trata de pasar la pipeta por el cuello del útero hasta llegar al cuerpo uterino. Se expulsa el semen de la pipeta lentamente para evitar la pérdida de esperma GELVEZ, Liliam Damaris, disponible internet pecuario.com/tema252/reproducción _bovinos/inseminación _artificial_vacas-1503.html, citado (15 de diciembre2012). Pag 1. 21

22 3.2.3 Transferencia de embriones. El crecimiento de la producción y transferencia de embriones in-vitro ha sido acompañado por el desarrollo de laboratorios en Universidades y centros privados. Los embriones son producidos de ovocitos colectados de ovarios provenientes de animales in-vivo. La colección de ovocitos de animales in-vivo (OPU) no tiene desventajas. La identidad de las donantes es conocida y con esta técnica se puede colectar ovocitos de la misma donante hasta dos veces a la semana. Sin embargo, la técnica es cara y requiere personal capacitado. El numero de ovocitos colectados varia de 0 a 5, por lo tanto de 1 a 2 embriones podrían ser producidos por colección. 11 Esta producción podría ser aumentada a 3 embriones por colección si las donantes son previamente estimuladas con hormona folículo estimulante (FSH). Probablemente la superestimulación con FSH y la colección de embriones in-vivo es superior a la técnica de OPU en cuanto a el costo/beneficio. Sin embargo, con OPU se podría maximizar la producción de embriones con colecciones de ovocitos dos veces por semana y además, permitiría la producción de embriones en donantes preñadas o en aquellas que no responden a la superestimulación. Uno de los problemas de los embriones producidos in-vitro es que la supervivencia después del congelamiento es menor que el de los embriones producidos in-vivo. Por lo tanto, la mayoría de esos embriones son transferidos en fresco y esto requiere la sincronización de receptoras con la producción de embriones Superovulación. El objetivo de los tratamientos superovulatorios en el bovino, es obtener el máximo número de embriones transferibles que resultaran en la mayor cantidad de terneros posibles. Desafortunadamente, la producción de embriones en animales superestimulados es muy variable. A pesar de toda la investigación llevada a cabo en los últimos años, no ha habido un mejoramiento en la cantidad promedio de embriones producidos por tratamiento superestimulatorio. Lo que si se ha mejorado notablemente es la producción de embriones producidos por donantes por año. Hoy en día, podemos superestimular los animales cada 30 días, sin necesidad de detectar celos y sin comprometer los resultados. Esto ha sido, en parte, por un mejor entendimiento de la función ovárica queha resultado en protocolos que permiten sincronizar la onda folicular e iniciar los tratamientos superestimulatorios sin la necesidad de conocer el día del ciclo estral. El protocolo tradicional de superestimulación se basó originalmente en información anecdótica y experimental, en la cual se logró una mayor respuesta superovulatoriacuando los tratamientos fueron iniciados 8-12 días después del celo. Hoy en día, gracias a la ecografía, se sabe que entre los días 8 y 12 es aproximadamente cuando comienza la segunda onda folicular. 11 Colazo M.G, R.J. Mapletoft, Estado actual y aplicaciones de la transferencia de embriones en bovinos, disponible internet /pubpdf/revet/n09a03colazo.pdf, citado el 8 de febrero de 2013.Pag

23 Figura 3. Protocolo de superestimulación Fuente: ciencia veterinaria la pampa Argentina Criopreservación de embriones: La congelación exitosa de embriones fue un gran avance para la industria de la transferencia de embriones. Más adelante, el uso de crioprotectores más permeables, como el etilen glicol que permite la llamada transferencia directa (la transferencia de un embrión sin tener que remover el crioprotector) fue un importante adelanto. De esta manera, la pajuela con el embrión es descongelada como el semen y luego el embrión es depositado en el útero de la receptora muy similar a una IA. No es necesario A pesar del adelanto en materia de criopreservación, los procedimientos dependen del uso de congeladores y microscopios que encarecen la técnica. Esto puede ser evitado con el uso de la vitrificación, un procedimiento relativamente simple. Se utilizan altas concentraciones de crioprotectores y la pajuela con el embrión es colocada directamente en nitrógeno líquido. 12 La vitrificación tiene mucho que ofrecer en los procesos de criopreservación de ovocitos y embriones producidos in-vitro, ya que su mayor ventaja es la simplicidad. Los procedimientos de vitrificación están siendo usados experimentalmente, y solo es cuestión de tiempo que se encuentre su aplicación comercial. Claramente, la vitrificación de embriones bovinos abre un nuevo horizonte en la transferencia comercial de embriones. 12 Ibíd., pag

24 4. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS Finca Santa Marta, consta de con una extensión de 396 hectáreas, con un inventario animal de 650 animales, está dividida con grandes extensiones de potreros por escasa disponibilidad de agua los cuales están sembradas con pasto brachiaria decumbens, brachiaria humidicola y solana, cuenta con un terreno semiplano con unas praderas un poco regulares por el clima de la región, un corral con su respectiva manga y bascula en buenas condiciones, el estado físico de los animales es bueno con una condición corporal de 3.5 y 3.75 promedio, muy bueno ya que esta región ha sido muy azotada por las inclemencias del clima y en ese estado de los animales se puede tener una buena reproducción, ya que se tenía una visión de la finca se hicieron unas recomendaciones como la de dividir los potreros en extensiones pequeñas, también la de hacer y llevar un registro de los animales, hacer unas desparasitaciones y un buen manejo en cuanto a las praderas ya que por el clima estas se deterioran mucho. Otra actividad que se hizo fue hacerle unos exámenes andrológicos a dos toros de la raza angus y brahmán blanco, para saber cómo estaban en su parte reproductiva, estos fueron llevados al brete o manga donde fueron inmovilizados para el trabajo, se adecuaron los equipos y se procedió a hacer el examen físico que consistía en mirar los cascos, buena condición corporal, buena raza, que no tenga ningún problema de salud y que este sanitariamente bien esto a cada toro, lo primero que se le hizo fue un corte de los pelos del prepucio y un lavado prepusial, un masaje rectal y se introdujo el electroeyaculador el cual por los impulsos eléctricos hizo que el toro eyaculara, se colecto el semen y se almaceno en un tubo de ensayo y fue llevado con cuidado al laboratorio para ser estudiado, en el laboratorio se hizo un examen al semen en donde se evaluó la concentración espermática, motilidad de los espermatozoides, volumen del eyaculado. Según lo observado en el laboratorio presentaron las siguientes características: Cuadro 2. Toro angus primera colecta. TORO No.1 RAZA Angus EDAD 5 AÑOS PESO 700 kg EXAMEN FISICO LOCOMOTOR MB AUDITIVO MB OLFATIVO MB VISUAL MB C.C 3.25 C.E 38 Cm ESPERMOGRAMA VOLUMEN 11mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal M. GRUPAL ++++ M. 90% CONCENTRACION 700 Millones/mg INDIVIDUAL 24

25 Cuadro 3. Toro brahmán blanco primera colecta. TORO No.2 RAZA Brahmán blanco EDAD 4.5 AÑOS PESO 715 kg EXAMEN FISICO LOCOMOTOR MB AUDITIVO MB OLFATIVO MB VISUAL MB C.C 3.25 C.E 40 Cm ESPERMOGRAMA VOLUMEN 12mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal M. GRUPAL +++ M. 86% CONCENTRACION 590 Millones/mg INDIVIDUAL Según los análisis andrológicos podemos concluir que los dos toros están en excelentes condiciones ya que dio un buen volumen de eyaculado y una motilidad muy buena lo que hace que este sea un toro apto para la reproducción, se le dieron algunas recomendaciones como suplementar tanto los toros como los demás animales y seguir dándole ese manejo al toro ya que es excelente para congelar su semen. Viendo que estos toros estabanen excelente estado reproductivo se decidió volver hacer otro examen andrológico dos meses después para ver si seguían en las mismas condiciones para poder congelar su semen y obtener unas ganancias con la venta de las pajillas,y sus resultados fueron los siguientes. Cuadro 4. Toro angus segunda colecta TORO N 1 RAZA Angus ESPERMOGRAMA VOLUMEN 10 mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal CONCENTRACION 650 millones/mg. Cuadro 5. Toro brahmán blanco segunda colecta. TORO N 2 RAZA Brahmán blanco ESPERMOGRAMA VOLUMEN 9 mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal CONCENTRACION 500millones/mg. 25

26 En este examen andrológico se puede observar que los dos toros bajaron un poco en cuanto a volumen y concentración, esto puede ser por las mismas inclemencias del clima, por el trabajo que estaban realizando que era monta natural, y porque su alimentación no era la mejor ya que las praderas estaban en regulares condiciones por la falta de agua, pero así estos exámenes son toros muy excelentes reproductivamente, aunque se les recomendó dejar descansar los toros y que el numero de vacas por toro no fuera muy alto ya que estaban en una época de sequia y esto ocasionaba que los animales bajaran reproductivamente. En cuanto a las recomendaciones generales de la finca se vio que no habían cambiado mucho pero no se debía tanto a los trabajadores sino que la época climática no ayudaba mucho. Finca Villa Juliana, tiene una extensión de tierra de 84 hectáreas las cuales están un poco deterioradas por el alto número de animales, consta con una carga animal de 200 animales, en cuanto al alimento de los animales la finca consta de pasto de pastoreo como estrella roja cynodon nlemfluensis, pasto de corte como la caña forrajera saccharum officinarum, King grass pennisetum y suplementado con pollinaza, posee un establo, una manga en buenas condiciones, en cuanto a los animales muy buenos con una condición corporal promedio de con unos buenos toros de excelente genética, viendo como estaba la finca se dieron unas recomendaciones la primordial era el descanso de las praderas ya que estaban en mal estado y la fertilización de las mismas, hacer la división de potreros, cifrado de los animales, desparasitaciones; En la finca se hicieron dos trabajos el primero fue el examen reproductivo de dos toros brangus y el otro fue la superovulación y técnica de lavado convencional para la obtención de embriones de una vaca simental. El primer trabajo que se hizo fue hacerle el examen andrológico a los dos toros de la raza brangus, para conocer como estaban reproductivamente, lo primero fue llevar a los toros a la manga donde fueron inmovilizados para el trabajo, se adecuaron los equipos y se procedió a hacer el examen físico a cada uno, lo primero que se le hizo fue un corte de los pelos del prepucio y un lavado prepusial, un masaje rectal y se introdujo el electroeyaculador el cual por los impulsos eléctricos hizo que el toro eyaculara, se colecto el semen y se almaceno en un tubo de ensayo el cual fue analizado en la misma finca ya que esta estaba alejada del laboratorio, allá se hizo el examen al semen en donde se evaluó la concentración espermática, motilidad de los espermatozoides, volumen del eyaculado. Cuadro 6. Toro brangus N 1 primera colecta. TORO No.1 RAZA Brangus EDAD 4 AÑOS PESO 800 kg EXAMEN FISICO LOCOMOTOR MB AUDITIVO MB 26

27 Continuación del cuadro 6. OLFATIVO MB VISUAL MB C.C 4 C.E 44 Cm ESPERMOGRAMA VOLUMEN 3mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal M. GRUPAL ++++ M. INDIVIDUAL 90% CONCENTRACION 600 Millones/mg Fuente: Pasante Sergio Pérez. Cuadro 7. Toro brangus N 2 primera colecta. TORO No.2 RAZA Brangus EDAD 4 AÑOS PESO 750 kg EXAMEN FISICO LOCOMOTOR MB AUDITIVO MB OLFATIVO MB VISUAL MB C.C 3.5 C.E 37 Cm ESPERMOGRAMA VOLUMEN 3mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal M. GRUPAL +++ M. 90% CONCENTRACION 550 Millones/mg INDIVIDUAL Fuente: Pasante Sergio Pérez. Lo primordial de este examen andrológico era con la intención de evaluar los toros reproductivamente ya que estos están trabajando y se utilizan como monta natural, ya que hay problemas en el hato y se querían revisar los animales para ir descartando el problema, en cuanto al resultado del examen andrológico de los dos toros fue muy similar ya que los dos están en trabajo y todo el día permanecen con las vacas, por eso su bajo volumen espermático; aunque los toros tienen la misma edad el primer toro esta un poco mejor puede ser por su condición corporal y su tamaño, aunque fue muy bajo el volumen espermático son toros supremamente buenos por su concentración lo que se puede concluir que son animales que pueden preñar perfectamente, por eso se tomaron algunas decisiones con el dueño de la finca que era dejar descansar los toros ya que tienen un desgaste reproductivo para ver si aumentaban su volumen de eyaculado, otra fue hacer varios lotes de animales para que el número de vacas por toro fuera bajo. La misma evaluación y examen se les repitió a los toros treinta días después aproximadamente para ver qué cambio habían tenido, los resultados obtenidos dieron resultados positivos ya que se hicieron bien las recomendaciones dadas a los dueños y trabajadores. 27

28 Cuadro 8. Toro brangus N 1 segunda colecta TORO N 1 RAZA Brangus ESPERMOGRAMA VOLUMEN 9 mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal CONCENTRACION 600millones/mg Cuadro 9. Toro brangus N 2 segunda colecta TORO N 2 RAZA Brangus ESPERMOGRAMA VOLUMEN 8 mg COLOR Blanco cremoso OLOR Normal CONCENTRACION 550 millones/mg Con este segundo espermograma se pudo observar que las recomendaciones dadas se cumplieron ya que el toro había estado descansando y se vio en el resultado del volumen del eyaculado aunque la concentración se mantuvo lo que se puede concluir que estos son unos buenos reproductores, lo que les estaba faltando era un mejor manejo por parte de los dueños, se le volvió a recalcar a el dueño que siguiera con ese manejo ya que los toros son de muy buena genética. El segundo trabajo que se realizo en la finca Villa Juliana fue la superovulación y técnica de lavado convencional para la obtención de embriones en bovinos en una novilla simental, lo primero que se hizo fue revisar su condición física y reproductiva, sanidad, luego se procedió hacer una palpación retal para saber si el aparato reproductivo estaba en condiciones excelentes, se utilizo un protocolo de superovulación con una dosis de 10mg de FSH. Cuadro 10. Protocolo superovulación. Días Labores 1 Colocar implante y aplicar 2 mg benzoato de estradiol 5 Aplicar 2mg de FSH en la mañana y la tarde 6 Aplicar 1.5mg de FSH en la mañana y la tarde 7 Aplicar 1mg de FSH en la mañana y la tarde 8 Aplicar o.5mg de FSH en la mañana y la tarde, se retira el implante, se aplica 2mg de prostaglandina y 2mg de gonadotropina 9 Inseminación artificial en la tarde. 10 Inseminación artificial en la mañana y tarde y se aplica 2mg de acetato de buserelina 15 Lavado y extracción de embriones Fuente: Pasante Sergio Pérez. 28

29 Para el lavado de los embriones de la vaca el procedimiento que se desarrollo fue el siguiente: Sujeción de la donante. Palpación rectal de los ovarios. Anestesia epidural, lavado y atado de la cola. Desinfección de la vulva. Introducción del catéter tipo Foley con catéter de goma con dos vías. Se produce hacer el lavado, por una vía se introduce la solución de lavado en el útero y por la otra vía se recupera el líquido de lavado con embriones. Se decantan los embriones y se procede a la búsqueda en placas de petri con un microscopio estereoscopio. Se procede a la congelación de los embriones. Los resultados de la técnica de lavado convencional de embriones fue la extracción de 6 embriones muy excelentes los cuales fueron examinados por el médico veterinario para darles la viabilidad; los cuales se empajillaron y congelaron para ser utilizados en la misma finca con el fin de animales puros en este caso de la raza simental. Finca Margarita, posee una extensión de tierra de 200 hectáreas, las cuales estas establecidas con pasto solana Botriochloa pertusa, angleton Dishanthium aristatum, y guinea mombaza Panicum máximum, consta con un inventario animal de 210 animales entre ganado de carne y leche, está en una finca que posee unos animales con baja condición corporal de 2.75 promedio por las inclemencias del clima ya que por escases de agua las praderas no son las mejores para la alimentación bovina lo cual se ve el resultado en la ganancia de peso y la reproducción y el mismo estado fisiológico de los animales, en cuanto a la sanidad es muy excelente ya que se vio el ganado y ninguno presentaba problemas, en cuanto a las instalaciones estaban un poco deterioradas por su antigüedad y por su trabajo diario, pero a su vez son aptas para el trabajo. Se empezó en esta finca con unas actividades que fue el mejoramiento de las instalaciones, cifrado de los animales ya que no se tenían registros, y otra muy importante fue la sincronización e inseminación artificial. En esta inseminación se trabajaron animales siete colores el cual se hizo la respectiva selección, con una edad promedio de los animales de cuatro años, una condición corporal baja por la época del clima. Se aplico el protocolo: el día cero se aplico el dispositivo intravaginal bovino y se inyecta 2mg de benzoato de estradiol, el día ocho se retira el dispositivo intravaginal y se aplica 2 mg de prostaglandina y 2mg de gonadotrofina coriónica, el día nueve aplicamos 1mg de benzoato de estradiol, y el día diez se procedió hacer la inseminación también aplicándole 1mg de acetato de buserelina conceptal, el toro que se utilizo fue un toro Guzerat llamado el vergel, se palparon las vacas a los dos meses después de la inseminación, el cual arrojo los siguientes resultados: 29

30 Cuadro 11: Resultado inseminación. Vaca C.C Raza Diagnostico Toro Preñez Siete colores Normal El vergel No Siete colores Normal El vergel Si Siete colores Vaginitis El vergel No Siete colores Vaginitis El vergel No Siete colores Vaginitis El vergel Si 05 3 Siete colores Normal El vergel No Siete colores Normal El vergel No Siete colores Normal El vergel Si 48 3 Siete colores Vaginitis El vergel No Siete colores Normal El vergel Si Fuente: Pasante Sergio Pérez Los resultados de la inseminación artificial fue de un 40% y esto pudo incidir por la época climática y el estado fisiológico de los animales, aparte de esto se recomendó hacer unas fertilizaciones cuando empezara la época lluviosa, también seguir haciendo los registros y con esto poder llevar un seguimiento de los animales Apoyo en la formación y evaluación de aprendices. Para esta actividad se hizo fue brindar una ayuda a los aprendices en cuanto al proceso de colecta y análisis de semen de los diferente toros, también en el proceso de empajillado y congelamiento de semen, capturar y extraer embriones de ovarios donados por el matadero y el empajillado de los mismos, otra actividad fue de palpación bovina en el cual identificaran el aparato reproductor, después se procedía al paso del cérvix con la pistola de inseminación; todas estas actividades se evaluaron tanto en laboratorio como en el campo por parte de los pasantes y del médico veterinario. 4.1 DIAGNOSTICO FINAL En cuanto a cómo se encontró el laboratorio biotecnológico se mejoro mucho ya que se pudo contar con la llegada de equipos e insumos para las diferentes practicas en campo y laboratorio, se conto también con la ayuda administrativa del SENA para la ejecución de las diferentes actividades; el laboratorio se dejo con su respectivo inventario como de sus equipos e insumos y con el aseo y mantenimiento del laboratorio biotecnológico. 30

31 5. CONCLUSIONES En esta pasantía realizada se lograron muchos resultados positivos en cuanto al correcto manejo de los equipos, reactivos y materiales que se utilizaban en el laboratorio y en campo. Se aprendió la ejecución en cuanto a los protocolos utilizados en los diferentes trabajos como superovulación, inseminación, colecta de semen y extracción de embriones. Con buenos manejos y exámenes a los reproductores de un hato se puede mejorar la reproducción y se pueden expresar todo su potencial genético. Llevando un buen manejo, un buen protocolo de transferencia, y unos buenos animales de genética se pueden obtener el mayor número de embriones transferibles. Con un correcto manejo y unas buenas recomendaciones se puede mejorar una finca ya sea en cuanto a la infraestructura, mejoramiento de praderas,reproducción, alimentación, manejo de los animales y diferentes trabajos realizados zootécnicamente. Teniendo una alimentación y descanso adecuado de los reproductores se puede aprovechar todo su potencial genético. Las pasantías son de gran importancia ya que podemos poder en práctica todo lo visto en la carrera y desarrollarnos como unos excelentes zootecnistas. 31

32 6. RECOMENDACIONES Hacer periódicamente exámenes reproductivos a los animales en producción y tenerles un buen programa alimentación y manejo. Mejorar el área de trabajo en cuanto al laboratorio ya que es muy pequeño y no se puede hacer muy bien el trabajo. Tratar de independizar el laboratorio ya que hay muchas trabas y muchas complicaciones al momento de ejecutar algo ya sea en el laboratorio o en el campo. Cambiar la mentalidad de los dueños de las fincas vinculadas a la institución ya que la ejecución de algunas con unas recomendaciones se puede mejorar la finca. Agilizar por parte de los encargados o funcionarios los transmites de los diferentes trabajos que se realizan en el trayecto del aprendizaje. 32

33 BIBLIOGRAFÍA Colazo M.Gy R.J. Mapletoft, estado actual y aplicaciones de la transferencia de embriones en bovinos. DE ALBA, Jorge, reproducción y genética animal, instituto interamericano de ciencias agrícolas de la O.E.A. PALMA A, Gustavo, biotecnología de la reproducción, instituto nacional de tecnología agropecuaria. POVEDA, Edwin Hernán, biotecnología animal, informe de campo-recolección de semen bovino. REPETTO, Guillermo, DEL PESO, Ana y ZURITA, Jorge Luis, la aplicación de procedimientos in vitro en la evaluación tecnológica alimentaria SERRANO Q, Alfredo, conceptos sobre la reproducción en bovinos. TOCAGNI, Héctor, inseminación artificial en bovinos, anatomía y fisiología del sistema reproductor de la vaca y el toro. TORRICO, Juan Carlos y CARDONA, José Omar, guía para las buenas prácticas ganaderas experiencias en el sumapaz-colombia. 33

34 REFERENCIAS DOCUMENTALES ELECTRÓNICAS Colazo M.G, R.J. Mapletoft, Estado actual y aplicaciones de la transferencia de embriones en bovinos, disponible internet /pubpdf/revet/n09a03colazo.pdf, GELVEZ, Liliam Damaris, disponible internet _bovinos /inseminación _artificial_vacas-1503.html, Poveda Peña Edwin Hernán, colecta de semen bovino, disponible en internet ologia.blogspot.com/2011/06/ colecta-semen-bovino.html Viedma José Luis, sector productivo, (citado el 12 octubre) disponible internet /sectorproductivo.com 34

35 ANEXOS 35

36 Anexo A. Registro fotográfico Foto 1. Conteo espermático Foto 2. Espermatozoides Foto 3. Haciendo morfología seminal Foto 4.Evaluacion seminal Foto 5. Sincronización Foto 6. Marcando ganado 36

37 Foto 7. Desinfección Foto 8. Evaluación seminal Foto 9. Aplicación dispositivo Foto 10. Dispositivo puesto 37

38 Foto 11. Novilla para transferencia Foto 12. Equipo inseminación Foto 13. Inseminando Foto 14. Trabajo de campo Foto 15. Laboratorio en campo Foto 16. Aplicando dispositivo crestar 38

39 Foto 17. Coleta semen Foto 18. Lavado de embriones Foto 19. Extracción de embriones Foto 20. Congelación embriones Foto 21. Evaluación embriones Foto 22. Equipo congelación 39