FICHA TECNICA DE PRODUCTOS Y EQUIPOS

Transcripción

1 1 de 7 NOMBRE DEL PRODUCTO: VITROS FOLATO REACTIVO - CALIBRADOR REFERENCIA: MARCA: JOHNSON & JOHNSON GENERALIDADES 1. Aplicación Para uso diagnóstico in vitro. Para la determinación cuantitativa de folato en el suero y el plasma humanos (heparina) y en sangre completa (folato en hematíes), utilizando el sistema de inmunodiagnóstico VITROS ECi/ECiQ, el sistema de inmunodiagnóstico VITROS 3600 y el sistema integrado VITROS 5600 para ayudar en el diagnóstico diferencial de la anemia. 2. Resumen y explicación Suero/plasma Los folatos son un subgrupo de vitaminas relacionadas con el ácido pteroilglutámico (APG) que funcionan como coenzimas en reacciones metabólicas en las que está implicada la transferencia de unidades de carbono individuales. El folato y la vitamina B12 son necesarios para la síntesis del ADN y, por consiguiente, la maduración normal de los hematíes. La deficiencia de folato puede causar anemia macrocítica (megaloblástica). El folato se obtiene de fuentes alimentarias como la fruta, las verduras verdes y de hoja, la levadura y la carne de órganos. El folato se absorbe en el intestino delgado y se almacena en el hígado. Las causas de la deficiencia de folato son la ingesta insuficiente del mismo, la mala absorción debida a enfermedades gastrointestinales, el embarazo y el uso de fármacos como la fenitoína, anticonceptivos orales y concentraciones excesivas de alcohol. Las concentraciones bajas de folato en suero son una indicación temprana de depleción de folato que precede la depleción en los tejidos. Las concentraciones adecuadas de folato durante el embarazo también son importantes en la prevención de defectos del tubo neural (DTN) en los niños. El suplemento de folato antes de la concepción y en las primeras semanas del embarazo reduce la incidencia de nacimientos afectados por DTN. Sangre total Los niveles de folato en suero ofrecen una indicación temprana de equilibrio de folato negativo. La depleción prolongada de folato (generalmente de 3 a 4 meses) da como resultado la depleción en tejidos, para los que el folato en hematíes es un marcador. El folato se almacena en los glóbulos rojos, donde sus niveles son considerablemente mayores que los niveles de folato en suero. Un nivel bajo de folato en hematíes es un indicador inequívoco de la deficiencia de folato y es, por tanto, un marcador útil, ya que las concentraciones de folato en suero dependen de factores como la inanición, la ingesta reciente en dieta, el embarazo y ciertas terapias con fármacos. Si bien la rotación relativamente lenta de glóbulos rojos en el cuerpo hace que el folato en hematíes refleje un estado histórico, más que reciente, del folato, los niveles se aproximan bastante a la depleción de folato en el hígado. Esta información es útil, puesto que la mitad de los almacenes de folato del cuerpo están situados en el hígado.

2 2 de 7 ESPECIFICACIONES TÉCNICAS

3 3 de 7 Principios del procedimiento Suero/plasma La prueba VITROS Folate, incluido el pretratamiento de las muestras, se realiza con los VITROS Folate Reagent Packs 1 y 2, el VITROS Vitamin B12/Folate Reagent Pack 3 y los VITROS Immunodiagnostic Products Folate Calibrators en los sistemas de inmunodiagnóstico VITROS ECi/ECiQ, el sistema de inmunodiagnóstico VITROS 3600 y el sistema integrado VITROS 5600 utilizando la tecnología Intellicheck. Esta prueba utiliza una prueba de fijación competitiva. Esto depende de la competición entre el folato que está presente en la muestra con un folato de peroxidasa de rábano marcado con HRP para un número limitado de sitios de fijación en un conjugado de proteína de fijación de folato biotinilada (FBP). El folato presente en muestras de pacientes se libera desde proteínas de fijación endógenas mediante la desnaturalización alcalina y se estabiliza para impedir la oxidación. Una alícuota de la muestra tratada se transfiere a un pocillo recubierto con estreptavidina y se añaden folato-hrp y conjugados biotinilados FBP. Después de una reacción de fijación competitiva, los complejos FBP son capturados por la estreptovidina en los pocillos. El conjugado no fijado se elimina mediante lavados. El conjugado de HRP unido se mide mediante una reacción luminiscente. Se añade a los pocillos un reactivo que contiene sustratos luminógenos (un derivado de luminol y una sal perácida) y un agente de transferencia de electrones. La HRP en el conjugado unido cataliza la oxidación del derivado de luminol y produce luz. El agente de transferencia de electrones (una acetanilida sustituida), incrementa el nivel de luz producido y prolonga su emisión. Las señales luminosas son leídas por el sistema. La cantidad de conjugado marcado con HRP fijado es indirectamente proporcional a la concentración de folato presente. Sangre total El VITROS Immunodiagnostic Products Red Cell Folate Pack proporciona reactivos para la preparación de sangre completa antes de la determinación del folato en hematíes utilizando los sistemas de inmunodiagnóstico VITROS ECi/ ECiQ, el sistema de inmunodiagnóstico VITROS 3600 y el sistema integrado VITROS En el procedimiento de preparación de muestras, los glóbulos rojos presentes en la muestra de sangre son lisados para permitir la liberación de folato intracelular. Esto se consigue diluyendo la muestra de sangre total en una solución que contiene ácido ascórbico. La incubación de la muestra diluida es necesaria para la conversión de los poliglutamatos de folato en monoglutamatos. Esta muestra preparada puede probarse con la prueba VITROS Folate

4 4 de 7 REACTIVOS Contenido del kit de reactivos VITROS Folate Reagent Pack ½ El kit de reactivos VITROS Folate Reagent Pack 1 contiene: 100 pocillos recubiertos (estreptavidina, bacteriana; se fija a 3 ng de biotina/pocillo). 7,3 ml de reactivo de proteína fijadora de folatos biotiniliada (biotina-fbp, se fija a >19,6 ng folato/ml) en tampón con albúmina sérica humana y un agente antimicrobiano 7,3 ml de reactivo de conjugado (folato marcado con HRP, 320 ng HRP/mL) en tampón con albúmina sérica humana y un agente antimicrobiano. El kit de reactivos VITROS Folate Reagent Pack 2 contiene: 100 pocillos no recubiertos 6,2 ml de reactivo para el tratamiento (estabilización) de muestras con agente antimicrobiano VITROS Vitamin B12/Folate Reagent Pack 3 El kit de reactivos VITROS Vitamin B12/Folate Reagent Pack 3 contiene: 11,7 ml de reactivo de tratamiento (desnaturalización) de muestras 15,6 ml de reactivo de tratamiento (neutralización) de muestras Tarjeta de lote auxiliar (para utilizar con el kit de reactivos Reagent Pack 3, color amarillo) VITROS Red Cell Folate Pack El kit VITROS Red Cell Folate Pack contiene: 2 botellas de reactivo de folato en hematíes con agente antimicrobiano (27 ml) 2 comprimidos de ascorbato de folato en hematíes (54 mg ácido ascórbico/comprimido) envueltos individualmente con papel de aluminio Tarjeta de protocolo para folato en hematíes (de color azul pálido) Manipulación del kit de reactivo VITROS Folate Reagent Pack 1/2 VITROS Vitamin B12/Folate Reagent Pack 3 Los kits de reactivos se suministran listos para usar. Los kits de reactivos contienen reactivos líquidos homogéneos que no requieren agitación ni mezclado antes de cargarlos en el sistema. Manipule los kits de reactivos con cuidado. Evite que: se forme condensación en los kits los reactivos formen espuma se agiten los kits

5 5 de 7 VITROS Red Cell Folate Pack Los comprimidos de ascorbato de folato en hematíes se suministran individualmente en forma de comprimidos envueltos en papel de aluminio. Antes de usar, abra la bolsa de aluminio (rasgándola por la ranura indicada) y extraiga un comprimido de ascorbato de folato en hematíes. Agregue el comprimido de ascorbato de folato en hematíes a una botella de Red Cell Folate Reagent y mezcle durante 30 minutos como mínimo a C. No utilice el producto si está visiblemente dañado. Nota: El Red Cell Folate Reagent reconstituido contendrá partículas insolubles. La presencia o ausencia de estas partículas no afecta a la prueba. Una botella reconstituida de Red Cell Folate Reagent basta para procesar 25 muestras. CALIBRADOR Contenido del calibrador 1 juego de calibradores VITROS Folate Calibrators 1, 2 y 3 (ácido fólico en tampón con albúmina sérica humana y agente antimicrobiano, 2,1 ml); valores nominales de 0, 2,00 y 15,0 ng/ml (0; 4,53 y 34,0 nmol/l) Tarjeta de calibración del lote (para utilizar con el kit de reactivos Reagent Pack 1, color verde) Tarjeta de lote auxiliar (para utilizar con el kit de reactivos Reagent Pack 2, color amarillo) Tarjeta de protocolo (color azul) 24 etiquetas de código de barras del calibrador (8 por cada calibrador) Manipulación del calibrador Utilícese solamente con kits de reactivos (VITROS Folate Reagent Pack 1) del mismo número de lote. VITROS Folate Reagent Pack 2 no está relacionado por número de lote con el VITROS Folate Reagent Pack 1 o los calibradores VITROS Folate Calibrators y puede usarse independientemente. Deje que los calibradores se descongelen a C antes de usarlos. A modo indicativo, este proceso no debería durar más de 60 minutos. No deje los calibradores a C durante más de 2 horas. Cada kit contiene cantidad suficiente para un mínimo de seis determinaciones de cada calibrador. Manipule los calibradores en recipientes taponados para evitar la contaminación y la evaporación. Para evitar la evaporación, limite el tiempo de los calibradores en el sistema. Consulte las instrucciones de funcionamiento de su analizador. Tan pronto como sea posible después de su uso, vuelva a poner los calibradores a una temperatura de 2 8 C o cargue solamente la cantidad suficiente para una única determinación.

6 6 de 7 Los calibradores VITROS Folate Calibrators se suministran congelados. Los calibradores VITROS Folate Calibrators se mantienen estables hasta la fecha de caducidad que figura en el envase cuando se conservan y manipulan como se indica en el envase. No los utilice después de la fecha de caducidad. Los calibradores abiertos se pueden conservar congelados (utilizando un único ciclo de congelación-descongelación). Antes de cargarlos en el sistema, voltee con cuidado 3 veces para asegurar que la mezcla se realiza correctamente. La prueba VITROS Folate utiliza 53 μl de calibrador para cada determinación. Los calibradores VITROS Folate Calibrators pueden dividirse en alícuotas de 1,5 ml y ponerse en recipientes de polipropileno que se pueden identificar mediante las etiquetas de códigos de barras que se incluyen en el kit. Se deberán validar otros contenedores antes de utilizarse. Para obtener información detallada sobre los requisitos de volumen de llenado mínimo de las copas y los recipientes de muestras, consulte las instrucciones de funcionamiento del sistema. Protéjalos de la luz. La luz acelera la degradación del folato Cuándo calibrar Cuando cambien los lotes de VITROS Folate Reagent Pack 1 y VITROS Folate Calibrators. La calibración no es necesaria para cambios de número de lote entre VITROS Folate Reagent Pack 2 y VITROS B12/ Folate Reagent Pack 3. Cada 28 días. Tras llevar a cabo determinados procedimientos de reparación. Si los resultados de control de calidad están repetitivamente fuera del rango aceptable. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO

7 7 de 7 Elaborado por Aprobado Por CLAUDIA MILENA CRUZ MOTTA Bacterióloga Soporte Técnico : Jun/12 EDISON MARIN RIVERA Gerente Comercial y Técnico : Jun/12