ACCU TELL Prueba Rápida en Cassette NT-proBNP Sólo para uso diagnóstico in vitro Para muestras de sangre completa/suero/plasma

Transcripción

1 ACCU TELL Prueba Rápida en Cassette NT-proBNP Sólo para uso diagnóstico in vitro Para muestras de sangre completa/suero/plasma Número de Catálogo ABT-CT-B111 completa Nombre del producto Prueba Rápida en cassette NT-proBNP en sangre Una prueba rápida para detectar NT-proBNP cualitativamente en sangre completa, suero o plasma. Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro. USO PREVISTO es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de NT-proBNP humana en sangre completa, suero o plasma para ayudar en el diagnóstico de insuficiencia cardíaca congestiva (ICC) RESUMEN La Insuficiencia Cardíaca Congestiva (ICC) se describe como una afección en la que el corazón no puede mantener una circulación sanguínea adecuada en los tejidos del cuerpo o bombea la sangre venosa que devuelve la circulación venosa. ICC afecta a casi 17 millones de personas en todo el mundo. NT-proBNP, fragmento N-terminal de probnp, está adherido al péptido precursor probnp. Muestra una estrecha correlación con la gravedad de la insuficiencia cardíaca. NT-proBNP es ampliamente reconocido como un marcador definitivo para el diagnóstico de ICC. Una cierta cantidad de NT-proBNP está disponible en

2 el suero. Sin embargo, los niveles elevados de NT-proBNP indican la presencia de ICC. La alta sensibilidad de NT-proBNP también permite la detección de formas leves de disfunción cardíaca en pacientes asintomáticos con cardiopatía estructural.¹ ² ³El Grupo de Trabajo de la Sociedad Europea de Cardiología para el Diagnóstico y Tratamiento de la Insuficiencia Cardíaca Crónica recomienda en sus guías que los péptidos natriuréticos incluído el NTproBNP pueden ser más útiles clínicamente como una prueba de descarte debido a valores predictivos negativos muy altos.⁴ es una prueba simple que utiliza una combinación de partículas recubiertas de anticuerpos anti-nt-probnp y reactivos de captura para detectar cualitativamente NT-proBNP en sangre completa, suero o plasma. El nivel mínimo de detección es de 450 pg/ml. PRINCIPIO es un inmunoensayo cualitativo basado en una membrana para la detección de NT-proBNP en sangre completa, suero o plasma. La membrana está recubierta previamente con reactivos de captura en la región de prueba del test. Durante la prueba, las muestras de sangre completa, suero o plasma reaccionan con las partículas recubiertas con anticuerpos anti-nt-probnp. La mezcla migra hacia la superficie de la membrana cromatograficamente por acción de capilaridad reaccionando con los reactivos de captura en la membrana generando una línea coloreada. La presencia de esta línea coloreada en la región de la línea de prueba indica un resultado positivo, mientras que su ausencia indica un resultado negativo. Para servir como un control de procedimiento, siempre aparecerá una línea coloreada en la región de la línea de control, indicando que se ha agregado el volumen adecuado de la muestra y que se ha producido la absorción de la membrana. REACTIVOS El cassette de prueba contiene partículas conjugadas con anticuerpos anti-nt-probnp reactivos de captura recubiertos en la membrana. PRECAUCIONES Sólo para uso diagnóstico profesional in vitro. No usar después de la fecha de vencimiento. La prueba debe permanecer en el envoltorio sellado hasta su uso. No comer, beber ni fumar en el área donde se manipulan las muestras o los kits. No usar la prueba si el envoltorio está dañado. Manejar todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. Observar las precauciones establecidas contra los riesgos microbiológicos en todos los procedimientos y seguir los protocolos estándar para la eliminación adecuada de las muestras. Usar ropa protectora, como batas de laboratorio, guantes desechables y protección ocular cuando se tomen las muestras de las pruebas. Todas las pruebas utilizadas, las muestras y el material potencialmente contaminado debe desecharse de acuerdo con las regulaciones locales. La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente los resultados.

3 ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD Almacenar sellado a temperatura ambiente o refrigerado (2 30 C). La prueba es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en el envoltorio sellado. La prueba debe permanecer en el envoltorio sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar después de la fecha de vencimiento. RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA La prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) puede utilizarse usando sangre completa (venopunción o punción capilar), suero o plasma. Para la recolección de muestra de sangre completa por punción capilar: o Lave la mano del paciente con agua tibia y jabón o limpie con algodón con alcohol. Dejar secar. o Masajear la mano sin tocar el sitio de punción frotando la mano hacia la punta del dedo medio o anular. o Puncionar en la piel con una lanceta estéril. Limpiar el primer signo de sangre. o Frotar suavemente la mano desde la muñeca a la palma y el dedo para formar una gota redonda de sangre sobre el sitio de la punción. o Agregue la muestra de sangre completa por punción capilar a la prueba mediante el uso de un tubo capilar: Toque el extremo del tubo capilar con la sangre hasta que se llene aproximadamente 75 µl. Evitar las burbujas de aire. Colocar la pipeta en el extremo superior del tubo capilar, luego apretar la pipeta para dispensar la sangre completa al área de muestra del cassette de prueba. Separar suero o plasma de la sangre lo antes posible para evitar la hemólisis. Usar solo muestras claras no hemolizadas. Las pruebas se deben realizar inmediatamente después de que se hayan recolectado las muestras. No dejar las muestras a temperatura ambiente durante períodos prolongados. Las muestras de suero y plasma pueden ser almacenadas a 2 8 C hasta 3 días. Para almacenar a largo plazo, las muestras deben mantenerse por debajo los -20 C. La sangre completa recolectada mediante venopunción deben almacenarse a 2 8 C si la prueba se realizará dentro de 2 días de la recolección. No congelar las muestras de sangre completa. La sangre completa recolectada por punción capilar debe ser analizada inmediatamente. Poner las muestras a temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes de realizar la prueba. Las muestras no deben congelarse y descongelarse repetidamente. Si se deben enviar muestras, deben embalarse de acuerdo con las regulaciones locales que cubren el transporte de agentes etiológicos. Separar suero o plasma de la sangre lo antes posible para evitar la hemólisis. Usar solo muestras claras no hemolizadas.

4 Las pruebas se deben realizar inmediatamente después de que se hayan recolectado las muestras. No dejar las muestras a temperatura ambiente durante períodos prolongados. Las muestras de suero y plasma pueden ser almacenadas a 2 8 C hasta 3 días. Para almacenar a largo plazo, las muestras deben mantenerse por debajo los -20 C. La sangre completa recolectada mediante venopunción deben almacenarse a 2 8 C si la prueba se realizará dentro de 2 días de la recolección. No congelar las muestras de sangre completa. La sangre completa recolectada por punción capilar debe ser analizada inmediatamente. Poner las muestras a temperatura ambiente antes de realizar la prueba. Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes de realizar la prueba. Las muestras no deben congelarse y descongelarse repetidamente. Si se deben enviar muestras, deben embalarse de acuerdo con las regulaciones locales que cubren el transporte de agentes etiológicos. MATERIALES Materiales proporcionados Cassette de prueba Pipeta Buffer Inserto Materiales requeridos pero no proporcionados Contenedor de recolección de muestra Centrífuga Temporizador Para punción capilar de sangre completa Lancetas Tubos capilares heparinizados y pipeta desechable PROCEDIMIENTO DE PRUEBA Permitir que la prueba, la muestra, el buffer y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15 30 C) antes de realizar la prueba. 1. Poner el envoltorio a temperatura ambiente antes de abrir. Retirar el cassette de prueba del envoltorio sellado y usar lo antes posible. Se obtendrán mejores resultados si la prueba se realiza inmediatamente después de abrir el envoltorio de aluminio. 2. Colocar el cassette en una superficie limpia y nivelada. Para muestras de Suero o Plasma:

5 Sostener la pipeta verticalmente y transferir 2 gotas de suero o plasma (aproximadamente 50 µl) al área de muestra, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. Para muestras de Sangre Completa por Venopunción: Sostener la pipeta verticalmente y transferir 3 gotas de sangre completa (aproximadamente 75 µl) al área de muestra, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. Para muestras de Sangre Completa por Punción Capilar: Para usar un tubo capilar: llenar el tubo capilar y transferir aproximadamente 75 µl de muestra de sangre completa por punción capilar al área de muestra del cassette de prueba, después agregar 1 gota de buffer (aproximadamente 40 µl) y encender el temporizador. Ver la ilustración a continuación. 3. Esperar a que aparezcan la línea(s). Leer los resultados a los 10 minutos. No interpretar los resultados después de 20 minutos. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

6 (Por favor consultar la ilustración de arriba) POSITIVO:* Aparecen dos líneas coloreadas. Una línea coloreada debe estar en la región de la línea de control (C) y otra línea aparentemente coloreada debe estar en la región de línea de prueba (T) *NOTA: la intensidad de color en la región de línea de prueba (T) variará dependiendo de la concentración de NT-proBNP presente en la muestra. Por lo tanto, cualquier tono de color en la región de línea de prueba (T) debe considerarse positivo. NEGATIVO: Aparece 1 línea coloreada en la región de control (C). No aparece una línea coloreada en la región de prueba (T). INVALIDO: La línea de control no aparece. El volumen de muestra es insuficiente o las técnicas de procedimiento son incorrectas son las razones más probables para la falla en la línea de control. Revisar el procedimiento y repetir la prueba con un cassette de prueba nuevo. Si el problema persiste, suspender el uso del kit de prueba inmediatamente y contactar a su distribuidor local. CONTROL DE CALIDAD Se incluye un control de procedimiento en la prueba. Una línea coloreada que aparece en la región de control (C) se considera un control de procedimiento interno. Confirma un volumen de muestra suficiente, una membrana que absorbe adecuadamente. No se proporciona control estándar con este kit; sin embargo, se recomienda que los controles positivos y negativos se prueben como una buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento y verificar el rendimiento adecuado de la prueba. LIMITACIONES 1. La prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) es solo para uso diagnóstico in vitro. La prueba solo debe usarse para la detección de NT-proBNP en muestras de sangre completa, suero o plasma. Ni el valor cuantitativo ni la tasa de incremento de NT-proBNP se pueden determinar mediante esta prueba cualitativa. 2. La prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) solo indica el nivel cualitativo de NT-proBNP en la muestra y no debe utilizarse como único criterio para el diagnóstico de infarto al miocardio. 3. La prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU-TELL (Sangre completa/suero/plasma) no puede detectar menos de 450 pg/ml de NT-proBNP en muestras. Si en cualquier momento se obtiene un resultado negativo, no se excluye la posibilidad de ICC. 4. Al igual que con todas las pruebas de diagnóstico, todos los resultados deben ser interpretados junto con otra información clínica disponible para el médico.

7 5. Incluso si los resultados de la prueba son positivos, se debe considerar una evaluación clínica adicional con información clínica disponible para el médico. 6. Existe una ligera posibilidad de que algunas muestras de sangre completa con alta viscosidad o que se hayan almacenado durante más de 2 días, no funcionen correctamente en el cassette de prueba. Repetir la prueba con una muestra de suero o plasma del mismo paciente usando un nuevo cassette de prueba. VALORES ESPERADOS ha sido comparada con una prueba líder comercial de CLIA NT-proBNP que demuestra una precisión global de >99.0%. CARACTERÍSTICAS DE PRESENTACIÓN Sensibilidad y Especificidad ha sido evaluado con una prueba líder comercial CLIA NT-proBNP utilizando muestras clínicas. Los resultados muestran que la prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU- TELL (Sangre completa/suero/plasma) posee una sensibilidad >99.9% y especificidad es de 98.9% en relación con la prueba líder comercial CLIA. Prueba Rápida de NT-proBNP vs. CLIA Método CLIA Resultados ACCU-TELL Prueba Resultados Positivo Negativo Totales Rápida en NT-proBNP Positivo (Sangre Total / Suero / Negativo Plasma) Resultados Totales Sensibilidad Relativa: 21/21 x 100% = 99.9% (95% IC*: 86.7% - 100%) Especificidad Relativa: 310/(1+310) x 100% = 99.5% (95% IC*: 97.4% - 100%) Precisión: (21+310)/( ) x 100% = 99.6% (95% IC*: 97.6% - 100%) *Intervalo de Confianza PRECISIÓN Intra Ensayo La precisión interna se ha determinado mediante el uso de 15 repeticiones para cada uno de los tres lotes con niveles de muestras de NT-proBNP de 0 pg/ml, 450 pg/ml, 1000 pg (ml, 3000 pg/ml. Las muestras se identificaron correctamente >99% de las veces. Inter Ensayo

8 La precisión entre corridas se ha determinado mediante 15 ensayos independientes en las mismas cuatro muestras: 0 pg/ml, 450 pg/ml, 1000 pg (ml, 3000 pg/ml de NT-proBNP. Se analizaron tres lotes diferentes de la prueba rápida en cassette NT-proBNP ACCU- TELL (Sangre completa/suero/plasma) usando estas muestras. Las muestras fueron identificadas correctamente >99% de las veces. Reactividad cruzada ha sido probada con muestras positivas HAMA, Factor Reumatoide, VEB IgM, HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb, HBcAb, anti-vhc, anti-vih, anti-sífilis, anti-h.pylori, MONO, anti- CMV, anti-rubéola y anti-toxoplasmosis. Los resultados no mostraron reactividad cruzada. Sustancias Interferentes Las siguientes sustancias potencialmente interferentes se agregaron a NT-proBNP muestras negativas y positivas, respectivamente Acetaminofeno: 20 mg/dl Cafeína: 20 mg/dl Ácido Acetilsalicílico: 20 mg/dl Ácido Gentílico: 20 mg/dl Ácido Ascórbico: 20 mg/dl Albúmina: 10,500 mg/dl Creatinina: 200 mg/dl Hemoglobina: 1,000 mg/dl Bilirrubina: 1,000 mg/dl Ácido Oxálico: 600 mg/dl Colesterol: 800 mg/dl Triglicéridos: 1,600 mg/dl Ninguna de las sustancias en las concentraciones probadas interfirió en el ensayo. Bibliografía 1. Muller T, et al. Head-to-head Comparison of the diagnostic utility of BNP and NT-proBNP in symptomatic and asymptomatic structural heart Disease. Clin Chim Acta 2004; 341: Pfister R, et al. Use of NT-proBNP in routine Testing and Comparison to BNP. Eur J Heart Fail 2004; 6(3): Seino Y, et al. Application of NT-proBNP and BNP measurements in cardiac care: a more discerning marker for the detection and evaluation of heart failure. Eur J Heart Fail 2004; 6(3):

9 4. Remme WJ, Swedberg K et al. The European Society of Cardiology Task Force Report: Guidelines for the diagnosis and treatment of chronic heart failure. Eur Heart J 2001; 22: