Dra. Alicia Luque Centro de Referencia de Micología Fac. de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas UNR

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Estefania Cárdenas Segura
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1 MICOLOGÍA Dra. Alicia Luque Centro de Referencia de Micología Fac. de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas UNR

2 Micosis sistémica producida por hongos dimórficos pertenecientes al género Coccidioides. Fue descripto por primera vez por Posadas y Wernicke en Argentina en Lesiones granulomatosas de piel, de aspecto verrucoso Cortes de tejidos con esférulas

Fue descripto por primera vez por Posadas y Wernicke en

3 Taxonomía de Coccidioides. División Ascomycota Clase Euascomycetes Orden Onygenales Familia Onygenaceae Género Coccidioides Los organismos pertenecientes a este género no han sido asociados a ningún estado teleomorfo. Especies: C. immitis y C. posadasii.

Familia Onygenaceae Género Coccidioides Los organismos

4 Taxonomía Hasta hace poco tiempo sólo se reconocía una especie C. immitis. En el año 2002 Fisher et al. proponen una nueva especie. C. immitis California C. posadasii Arizona, Texas, Méjico, Venezuela, Argentina y Brasil Usando características morfológicas sólo es posible distinguir una especie en el género Coccidioides. La creación de la nueva especie se basa en: polimorfismo de cinco proteínas conservadas en Coccidioides, polimorfismo nucleotídico simple y marcadores moleculares de microsatélites.

posadasii Arizona, Texas, Méjico, Venezuela, Argentina y Brasil Usando características morfológicas sólo es posible

6 Taxonomía Migración del Homo sapiens a América del Sur.

7 La distribución de Coccidioides posadasii podría reflejar la codispersión del hospedero y su patógeno

9 1-artroconidios liberados. 2-germinación de artroconidios o endosporas. 3-hifas. 4-septación de la hifa. 5-formación de artroconidios. 6- artroconidios hinchados. 7-esférula joven. 8- esférula multinucleada. 9- esférula con pared gruesa. 10 y 11- esférulas con múltiples planos de clivaje que dividen el protoplasma. 12- esférula madura con endosporas. 13-ruptura de esférula con liberación de endosporas. 14-endosporas libres.

10 Ecología Suelo de regiones como altas temperaturas (26-32 C) y precipitaciones anuales de 25 cm. El suelo típicamente alcalino y altos contenidos de sal. Coccidioides sobrevive en profundidades de 20 cm y se ausenta de la superficie durante los períodos de tiempo cálido y seco. El micelio crece después de llover. Después de períodos prolongados de sequía, Coccidioides persiste mientras los organismos competidores mueren.

Coccidioides sobrevive en profundidades de 20 cm y se ausenta de la superficie durante los períodos de

11 Ecología Transmisión: se disemina por el polvo suspendido en el aire.

12 Epidemiología Distribución geográfica: Regiones desérticas de California, Arizona, Nevada, Nuevo Méjico y el oeste de Texas en Estados Unidos. Norte de Méjico y América Central. En América del Sur: Venezuela, Colombia, Paraguay, Bolivia. Argentina (áreas centrales áridas y se extiende desde el norte de la patagonia hasta los ríos Salta-Hondo y Dulce incluye parte de las provincias de Córdoba, Catamarca, La Rioja, San Juan, Mendoza, San Luis, Santiago del Estero y La Pampa.

Argentina (áreas centrales áridas y se extiende desde el norte de la patagonia hasta los ríos Salta-Hondo y Dulce

13 Epidemiología Raza: Algunos grupos raciales son más propensos a la infección diseminada, en los caucásicos la diseminación es de alrededor del 2, 3 %, con el 23, 5 % entre los afro-americanos y 21 % en los filipinos. Sexo: el sexo masculino es más propenso a sufrir diseminación que las mujeres no embarazadas blancas. Inmunosupresión: es el factor principal que contribuye a la diseminación de la enfermedad.

14 Formas clínicas I. Coccidioidomicosis primaria A. Pulmonar 1.Asintomática 2.Sintomática B. Cutánea (rara) II. Coccidioidomicosis secundaria A. Pulmonar 1.Benigna crónica 2.Progresiva B. Diseminación simple o en multisistema 1.Meníngea 2.Cutánea crónica 3.Generalizada

Coccidioidomicosis secundaria A. Pulmonar 1.Benigna crónica 2.

15 Formas clínicas

16 Diagnóstico diferencial Síntomas respiratorios con: tuberculosis, neumonías bacterianas, bronquitis, resfriado común, paracoccidioidomicosis, histoplasmosis. En piel y huesos con: tuberculosis o micobacteriosis, esporotricosis, leishmaniasis, osteomielitis, etc.

17 Diagnóstico micológico Muestras: Esputos, LBA, material purulento, líquidos corporales (LCR), exudados de lesiones en mucosas y piel, biopsias. Examen microscópico: Examen en fresco entre porta y cubre; examen con azul de lactofenol e KOH al 20 % y coloraciones de histología (Gomori, HE, PAS). Las esférulas maduras miden de 10 a 80, su pared es refringente y gruesa (hasta 2 ). Las endosporas miden de 2 a 5. Esférula madura con endosporas. Tinción con hematoxilina y eosina (500x)

Examen microscópico: Examen en fresco entre porta y cubre; examen con azul de lactofenol e KOH al 20 % y coloraciones de

18 Diagnóstico micológico Forma infectiva

19 Diagnóstico micológico Cultivos: crecen en medios de cultivo usuales, con o sin antibióticos a 28 C. Al comienzo las colonias en Agar Sabouraud glucosa son húmedas y grisáceas, rápidamente se recubren de vello, con micelio aéreo que ocupa toda la superficie del tubo. Al principio el micelio es blanco pero con la edad se torna de color canela a pardo. Artroconidios que alternan con células vacías en la forma micelial de Coccidioides (450X)

con micelio aéreo que ocupa toda la superficie del tubo.

20 Diagnóstico micológico Forma infectante C. posadasii crece significativamente más rápido a 37ºC in vitro que C. immitis

21 Diagnóstico micológico Identificación: Hallazgo de los artroconidios característicos de la fase saprofítica de Coccidioides. Muchos hongos queratinofílicos del suelo que pueden ser aislados en esputo, en forma incidental, se parecen a Coccidioides. Para confirmar la identificación se requiere la producción de esférulas en animales infectados en forma experimental o en cultivo líquido a 40 C. La demostración del dimorfismo es el único criterio absoluto. Con el fin de evitar los peligros en el manejo de cultivos vivos de Coccidioides, se desarrolló una prueba de exoantígeno. En la misma los exoantígenos del hongo aislado se enfrentan con sueros de pacientes reactivos al Coccidioides y a través de las bandas de precipitación de identidad se puede hacer una identificación muy específica del aislamiento.

22 Diagnóstico inmunológico Prueba cutánea: Valor diagnóstico: Valor pronóstico viraje de la reacción de neg. a positiva pacientes con diagnóstico previo su negatividad indica enfermedad diseminada avanzada Fijación del complemento: Es útil en el diagnóstico. Estudios en serie del título de fijación de complemento se emplean para la evaluación del pronóstico. En la infección diseminada los anticuerpos fijadores de complemento se elevan a títulos muy altos y persisten durante toda la fase terminal. Inmunodifusión: Tiene valor diagnóstico, se hace positiva casi al mismo tiempo que la prueba de fijación de complemento.

23 Diagnóstico molecular Uso de PCR para la detección directa de Coccidioides spp. en materiales clínicos, son métodos sensibles y específicos. Se han empleado regiones ITS para diseñar cebadores específicos: ITS C1A e ITS C2, se obtiene un producto de 239pb, en suero humano y de ratón antes de la detección de anticuerpos específicos. Johnson et al. 2004

24 Agente etiológico: Coccidioides spp. Dimorfismo termal Formas clínicas Materiales clínicos: Biopsias Esputo Lavado bronquioalveolar Sangre entera Líquido cefalorraquídeo Exudados de lesiones cutáneas o mucocutáneas Pulmonar Diseminación simple o en multisistema Diagnóstico micológico: Cultivos KOH al 20 % y coloraciones (Gomori, HE, PAS) 28ºC: Sb, My. Identificación Demostración del dimorfismo

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