Modelo centinela en colonia de ratones de laboratorio. (Sentinel model in a colony of laboratory mice)

Transcripción

1 REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN (Sentinel model in a colony of laboratory mice) García, Itamis C: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Burón, M: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Pérez, M: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Soroa, J.C: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Figueroa T: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Rodríguez, Y: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Donatién, M: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Beovides, P.P: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Entrena, A: Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba. Lugo, S. Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio. Cuba Resumen En colonias de ratones de laboratorio es vital preservar la salud de los mismos y el estado microbiológico por el riesgo de infecciones, que pueden ser inaparentes e influyen en los resultados de la experimentación o contaminan los productos biológicos derivados de ellos. En 1983 Melvin Bosma publica un reporte científico que ofrece nuevas perspectivas al describir un ratón inmunodeprimido: CB-17.El objetivo del trabajo es evaluar este modelo como centinela en una colonia de ratones de laboratorio para el control de los microorganismos circulantes y el actuar contraepizoótico adecuado.se usaron ratones CB- 17 de un banco de producción, distribuidos en números de 10 por cuartos de cría, de forma aleatoria, se monitorearon al unísono diferentes líneas: BALB/c,DBA/2,C57BL/6 y NMRI.Se examinaron las entidades virales, bacterianas y parasitarias correspondientes a esta especie según las Recomendaciones de la Federation of European Laboratory Animal Science Association. Los microorganismos más incidentes tanto en centinelas como controles fueron: Pasteurella pneumotrópica, Corynebacterium kutscheri, Entamoeba spp y Syphacia spp.del total de microorganismos detectados el 48.2% se detectó en mayor número en los centinelas que en los controles, el 34.4% fue igualmente detectable en ambos y solo el 10.3% fue más detectable en controles que en centinelas. Los signos clínicos observados en centinelas respondieron a síndromes respiratorios, compatibles con la confirmación del laboratorio de bacteriología y anatomía patológica. El uso del modelo resultó efectivo, se recomienda su uso en colonias de producción 1

2 mantenidas en salas protegidas y en sistemas de aisladores y en bancos genéticos, con la adecuada seguridad e identificación; esto evitaría el uso de parejas de los bancos con fines de monitoreo de salud. Palabras clave: CB-17 centinela modelo colonias Abstract In laboratory mice colonies is vital to preserve the health of the latter and the microbiological state by infection risk, which can be unapparent and influence in the results of experimentation or contaminate the biological products derived from them. In 1983 Melvin Bosma published a scientific report which offers new perspectives describing an immunodepressed mouse: CB-17. The goal of this paper is to evaluate this model as sentinel in laboratory mice colony to control circulating microorganisms and the adequate contraepizootic actions. Were used CB-17 mice from a production bank, distributed in numbers of 10 by breed rooms randomly, were monitored in unison different lines: BALB/c,DBA/2,C57BL/6 and NMRI. Were examined the viral, bacterial and parasitic entities corresponding to this species according to the Recommendations of the Federation of European Laboratory Animal Science Association. The microorganisms more incident both in sentinels and controls were: Pasteurella pneumotrópica, Corynebacterium kutscheri, Entamoeba spp and Syphacia spp From the total of the detected microorganisms 48.2 was detected in greater number in sentinels than in controls, 34.4 % was detected equally in both and 10.3 % was more detected in controls than in sentinels. The clinical signs observed in sentinels answered to respiratory syndromes, compatible with the confirmation by the laboratories of bacteriology and pathological anatomy. The use of the model turned out to be effective; its use is recommended in production colonies maintained in protected halls and isolating systems and genetic banks, with the proper security and identification; this will avoid the use of pairs from the banks with purposes of health monitoring. Keywords: CB-17, sentinel, model, colonies Introducción En 1983 Melvin Bosma publica un reporte científico que ofrece nuevas perspectivas al descubrir un ratón severamente inmunodeprimido capaz de aceptar neotransplantes con un mínimo de rechazo, el cual se conoce 2

3 como CB 17 scid mouse, estos modelos sufren una mutación severa combinada de inmunodeficiencia, careciendo tanto de linfocitos T como B. Han perdido el patrón IgH del BALB/c y del C57BLK, sus progenitores. La inmunodeficiencia los provee de una gran tolerancia a la implantación de tumores y tejidos extraños convirtiéndose en un conveniente modelo para la investigación. Excepto la inmunodeficiencia, este ratón es normal en otros aspectos. Tienen un número normal y funcional de células sanguíneas no linfocíticas. La inmunodeficiencia en este ratón se manifiesta como linfopenia,agammaglobulinemia y una gran susceptibilidad a infecciones con virus, bacterias y otros microorganismos. En colonia de ratones de laboratorio es de vital importancia preservar la salud y el estado microbiológico de las mismas por el riesgo de las infecciones inaparentes que influyen en los resultados de la experimentación. Las infecciones en animales pueden causar contaminación de materiales biológicos, s de tejidos, líneas celulares, tumores transplantables y otros productos biológicos derivados de los mismos. Para ser consecuentes con una política de calidad en la cría y mantenimiento de ratones de laboratorio, encaminada a la satisfacción de los investigadores sobre la base de Buenas prácticas, cumpliendo con regulaciones al efecto, es necesario llevar a cabo un programa de monitoreo de salud en las colonias de ratones para disminuir el riesgo de infecciones zoonóticas y permitir la repetibilidad reproducibilidad de las investigaciones. El uso de un modelo inmunodeficiente como centinela en el control de los microorganismos que circulan en las colonias de ratones de laboratorio nos permite actuar inmediatamente y tomar decisiones contraepizooticas adecuadas. La vigilancia contraepizootica en esta especie es vital, debido a las grandes masas poblacionales en producción, a que la mayoría de las infecciones cursan inaparentes y a que muchas líneas de ratones se comportan resistentes a determinadas infecciones. Objetivo Evaluar el modelo CB-17 como animal centinela en una colonia de producción de ratones de laboratorio. Material y Métodos Animales Centinelas: Ratones CB-17. Procedentes del banco de producción de CB-17, tansportados en cajas con filtro a la sala de experimentación con cuatro cuartos de cría donde se mantuvieron otras líneas: BALB/c,DBA/2,C57BL/6 y NMRI. Los centinelas fueron ubicados en números de 10 por cuarto de forma aleatoria. Se mantuvieron en igualdad de condiciones centinelas y monitoreados: sala controlada con o C, 10mmCH de presión, 50-60% de humedad relativa, 12 cambios 3

4 por hora, agua de bebida ozonizada y alimento concentrado a voluntad. El sistema de alojamiento consistió en cajas de cría tipo T2. Monitoreo microbiológico: Los animales se observaron clínicamente clasificando las observaciones en: enfermedades de la piel(alopecia, formación de costras o lesiones necrosantes), gastrointestinales (diarreas,deshidratación,pelaje erizado, retraso del crecimiento,caquécticos),respiratorias (disnea,secresiones oculares,secresiones nasales,estornudos), nerviosas (tumefacción de la cabeza,parálisis de extremidades,convulsiones, marcha en círculo) y otras (aumento de volumen, mutilaciones,abcesos, etc). Se examinaron serológicamente según las Recomendaciones de la FELASA: Infecciones virales monitoreadas Antígenos Método MVM MHV PVM Reovirus tipo3 TMEV Ectromelia LCM MAD Edim Polyoma MCMV Sendai Infecciones bacteriológicas monitoreadas Antígenos Método Salmonella spp Streptobacilus moniliformis Streptococcus beta hemolítico Bordetella bronchiséptica Corynebacterium kutscheri Citrobacter freundii Streptococcus pneumoniae Shigella spp Pasteurella spp Bacillus piliformis Leptospira spp patología microaglutinación 4

5 Resultados Infecciones parasitarias monitoreadas Parásitos Método ectoparásitos estereoscópico Eimeria spp Giardia muris Spironucleus muris Klossiella spp Histopatología Hymenolepis nana Syphacia spp Entamoeba muris Tricomonas muris Los microorganismos más incidentes en los monitoreo microbiológicos de las unidades de cría, tanto en los animales controles como en los centinelas fueron: Pasteurella pneumotrópica, Corynebacterium kutscheri, Entamoeba spp y Syphacia spp. Los siguientes gráficos muestran la incidencia en las unidades de cría en cada uno de los muestreos: 5

6 Del total de microorganismos más incidentes en los muestreos, el 48.2% se detectó en mayor número en los centinelas que en los controles. Los signos clínicos observados en los animales centinelas respondieron a síndromes respiratorios, compatible con la confirmación del laboratorio de bacteriología y anatomía patológica. En todos los muestreos realizados se detectaron microorganismos en los animales centinelas, no siendo así en todos los casos de animales controles, lo que demostró la elevada susceptibilidad de este modelo para determinar infecciones que normalmente cursan inaparente. Conclusiones El uso del modelo CB-17 como animal centinela en colonias de ratones de laboratorio resulta efectivo para la detección de microorganismos circulantes que puedan afectar la calidad microbiológica de los mismos y las investigaciones. Se recomienda evaluar el modelo en salas protegidas y sistemas aisladores donde se conserven bancos genéticos y colonias de producción, manteniendo la adecuada identificación. Esto evitaría el uso de parejas del núcleo genético con fines de monitoreo de salud. Bibliografía 1. Bosma, M.J. & Carroll, A.M. Annu. Rev. Immunol. 9:323-50, Bosma, M.J. Immunodeficiency Reviews. 3: , Mosier, D.E. Nature. 335:256-59, Mosier, D.E. J Clin. Immunol. 10(4): , Orcutt, R.P. & Gielstfeld, J.G. Abstract #12, 44th Annual Meeting, Asso. for Gnotobiotics Orcutt, R.P., Gielstfeld, J.G. & Poole, T.W. Unpublished data, REDVET: 2012, Vol. 13 Nº 06B Ref. 011ATM01_REDVET / Publicado: Este trabajo fue presentado en las Jornadas Científicas por el 120 Aniversario del Sabio de la Medicina Veterinaria Cubana Dr. Ildefonso Pérez Vigueras, celebrado en Pinar del Río, Cuba, del 9 al 11 de Febrero del 2012 y está disponible en concretamente en REDVET Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización. Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org y con REDVET - 6