Neuropatología. PONENTE: Dr. Miguel Ángel Idoate Gastearena. HOSPITAL: Clínica Universidad de Navarra

Transcripción

1 Neuropatología PONENTE: Dr. Miguel Ángel Idoate Gastearena HOSPITAL: Clínica Universidad de Navarra

2 Comunicaciones a la USCAP 2013 en el área de la Neuropatología 27 comunicaciones (procedencia) USA & Canadá, 22* España, 2 Italia, 2 Turquía, 1 Temática: 20 sobre neurooncología 12 gliomas 8 otros (meduloblastoma, meningioma, carcinoma metastásico cerebral...) 7 sobre enfermedades neurodegenerativas y otras (*) Dos en colaboración con Alemania o Brasil

3 Comunicación 1 Objetivo: Identificar la angiopatía amiloidea. Formas anatomopatológicas de presentación.

4 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates.

5 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Angiopatía beta amiloide y angeítis

6 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Angiopatía beta amiloide y angeítis. Scolding et al. Brain 2005.

7 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Angiopatía beta amiloide y angeítis.

8 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Tipos de angiopatía beta amiloide Depósito amiloide vascular en el SNC y leptomeninges según tres patrones lesionales: a. Angeítis amiloidea cerebral angiodestructiva (granulomatosa) ABRA b. Angiopatía amiloidea cerebral (CAA) c. Angeítis amiloidea perivascular cerebral (reacción de células gigantes) CAA-RI

9 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Resultados 62 biopsias cerebrales Edad años Hemorragia cerebral, efecto masa, alteración leptomeníngea. Peor pronóstico Asociación con hemorragia cerebral

10 Cerebrovascular A-beta amyloid in surgical specimens: clinicopathological correlates. Mensaje Pensar en la angeítis amiloidea en las biopsias cerebrales, especialmente en las correspondientes a hemorragias cerebrales, en el despistaje de la angiopatía amiloidea cerebral. La angiopatía amiloidea cerebral es causa de angeítis (angeítis amiloidea) y se manifiesta como un espectro lesional.

11 Comunicación 2 Objetivo: Identificar el GBM tipo proneural

12 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting.

13 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting.

14 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting.

15 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Olig 2 and Glioblastoma

16 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Olig 2 and Glioblastoma

17 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Olig 2 and Glioblastoma

18 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Notch1 and Glioblastoma

19 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting.

20 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Material & Methods and Results 40 GBM IHQ frente a Olig-2 y Notch-1 Valoración semicuantitativa

21 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Mensaje La inmunotinción de Olig-2 y Notch-1 como una procedimiento de fácil utilización para la identificación del glioblastoma proneural, que parece estar asociado a un mejor pronóstico.

22 Comunicación 3 Objetivo: Existe realmente genoma de citomegalovirus en el glioblastoma?

23 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr.

24 Utility of Olig-2 and Notch-1 immunostains in glioblastomas in a routine histopathology setting. Detección del CMV por técnicas de IHQ, ISH y nested-pcr con secuenciación, con los controles Olig 2 and Glioblastoma adecuados.

25 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr.

26 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr.

27 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr.

28 Se utiliza PCR cuantitativa a tiempo real con creditación CE (no utilizada previamente en ningún trabajo publicado) para la cuantificación de citomegalovirus (carga viral tumoral).

29 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr. Resultados 82 gliomas de diferentes grados (II-IV). Kits validados por la CE para el despistaje de CMV en trasplante. Controles positivos (GAPDH) y negativos. Rango de cuantificación copias; rango de detección >1 copia 3 casos < 10 copias; resto negativo. Estudios complementarios en Castellón (PCRnested) y Alicante (IHQ. ISH). Buen rendimiento en las muestras.

30 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr. Comparación metodológica Trabajo de Barberá et al. Gliomas Controles positivos/negativos. Experiencia en CMV. Bloques de parafina. PCR cuantitativa a tiempo real. Por triplicado. DNA se ha estudiado en otras alteraciones génicas. Otros: Posteriormente, de 20 casos PCR-nested, sólo los tres casos con < 10 copias fueron positivos. IHQ e ISH negativo. Trabajo de Cobb et al. Gliomas. Controles: meningiomas, otros tejidos. Bloques de parafina PCR nested-secuenciación DNA (94%). Otros: IHQ, ISH, microscopía electrónica, positivo. Problema metodológico en la extracción de DNA? Marcada variabilidad del número de copias en los gliomas? Problema de lectura de los primers?

31 Lack of human cytomegalovirus in gliomas. A viral load analysis by quantitative real time-pcr. Mensaje Paradójica situación que requiere un replanteamiento metodológico crítico: Necesidad de una estandarización metodológica para el estudio del DNA extraído de bloques de parafina. Frente a lo aceptado hasta ahora, no se detecta citomegalovirus en el glioma, por lo que se suscita una duda razonable sobre el papel de este virus en el glioma.

32 Comunicación 4 Objetivo: La utilidad de la expresión del receptor de somatostatina en el diagnóstico del meningioma.

33 Somatostatin receptor 2A: A novel immunohistochemical marker of meningioma

34 Somatostatin receptor 2A: A novel immunohistochemical marker of meningioma Receptor de somatostatina y meningioma Los receptores de somatostatina se expresan en muchos (70-100%) meningiomas.

35 Somatostatin receptor 2A: A novel immunohistochemical marker of meningioma Receptor de somatostatina y meningioma La función biológica de estos receptores es desconocida. Somatostatin receptor immunostaining at 400 magnification. (A) Weak. (B) Moderate. (C) Strong.

36 Somatostatin receptor 2ª: A novel immunohistochemical marker of meningioma Receptor de somatostatina y meningioma Su presencia se puede detectar mediante gammagrafía de I111-octreótido. Su manejo es especialmente útil en la detección de enfermedad residual y de recidiva tumoral temprana. Son necesarios nuevos análogos de somatostatina radiomarcables, citotóxicos, no peptídicos, que proporcionen nuevas estrategias terapéuticas.

37 Somatostatin receptor 2ª: A novel immunohistochemical marker of meningioma Receptor de somatostatina y meningioma Marcador diagnóstico EMA Bcl-2 CD-99 Claudina-1 Receptores de progesterona Receptor 2A de la somatostatina Utilidad terapéutica

38 Somatostatin receptor 2A: A novel immunohistochemical marker of meningioma Resultados Bloques de parafina Anticuerpo monoclonal de conejo Epitomic Burlingame CA y método de amplificación (Quanto polymer) Dos grupos: 27 meningiomas 27 otros (hemangiopericitoma, schwannoma, gliomas) 100% positividad, intensa y difusa en los meningiomas 2% positividad, focal, en los restantes tumores 100% sensibilidad, 90% especificidad

39 Somatostatin receptor 2ª: A novel immunohistochemical marker of meningioma Mensaje Potencial uso en el diagnóstico diferencial con otros tumores afines, como el hemangiopericitoma, gliomas meníngeos o tumor fibroso solitario (herramienta diagnóstica sumada al EMA y receptores de progesterona) Potencial uso terapéutico en el caso de los meningiomas que expresen intesamente este receptor.

40 Comunicación 5 Objetivo: Qué papel juegan los micrornas en los gliomas malignos?

41 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas

42 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas The Sanger Institute mirbase (V16), have been described 2108 human mirna sequences MiRBase. Available online: (accessed on 16 March 2012). MiRBase. Available online: (accessed on 16 March 2012)..

43 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas MICRORNAs The mirnas are small non coding RNA molecules Mature mirna ~22 nt (mirna) Key elements in post-transcriptional gene

44 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas micrornas y cáncer Normal tissue MicroRNA as tumor suppressor MicroRNA as oncogene Si falta el microrna, no bloquea la traducción Si en exceso el micro RNA, bloquea la traducción Aurora Esquela-Kerscher & Frank J., Nature Reviews, 2006.

45 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas micrornas y CRC Slaby O. et al., Molecular Cancer, 2009.

46 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas MicroRNAs y Glioblastoma Texto

47 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas MicroRNAs y Glioblastoma

48 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas MicroRNAs y Glioblastoma

49 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in glioblastomas. M&M 35 glioblastomas congelados MicroRNAs usando myrcurirna (estudio de 3000 micrornas humanos) MGMT mediante MLPA PTEN secuenciación TP53 secuenciación

50 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas 7/22 pacientes (32%) 9/25 pacientes (36%) 3/25 pacientes (12%)

51 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas 35 Pacientes 35 Pacientes mirnas

52 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas MicroRNAs y Glioblastoma Estos 6/7 mirnas cambian su expresión (bajan) en las condiciones celulares adversas: MGMT metilado y PTEN mutado. Los cambios de expresión de estos mirnas afectarían al ciclo celular y a la apoptosis asociada al estatus de MGMT y PTEN.

53 MicroRNA, MGMT methylation and PTEN & P53 mutations in Glioblastomas Programa Ingenuity P53 y Ciclo celular: RB1, CCND1, E2F1 Apoptosis P53, c-myc y BCL2 (ciclo celular y apoptosis)

54 Título diapositiva Mensaje La expresión de micrornas permiten diferenciar subgrupos de glioblastomas, que tienen cierta relación con alteraciones moleculares conocidas. Estos subgrupos de glioblastomas de acuerdo a la expresión de micrornas pueden tener significado pronóstico y predictivo?

55 Interactive Molecular Pathology Companion Meeting at the USCAP 2013 Annual Meeting

56 Qué me ha aportado la USCAP Interactive Molecular Pathology Companion Meeting at the USCAP 2013 Annual Meeting

57 Qué me ha aportado la USCAP Interactive Molecular Pathology Companion Meeting at the USCAP 2013 Annual Meeting

58 Qué me ha aportado la USCAP Conclusiones Progresiva caracterización molecular en la neuropatología Los datos moleculares van creando progresivamente un cuerpo de doctrina que el patólogo debe aplicar con criterio al diagnóstico, pronóstico y tratamiento. Dispersión de esfuerzos. Hay que ir entresacando de un gran volumen de datos, lo que es realmente relevante. No ha habido aportaciones notables para la práctica hospitalaria de la Neuropatología.

59 Qué me ha aportado la USCAP Muchas gracias por su atención