La inseminación intrauterina en cerdos: beneficios y riesgos

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1 La inseminación intrauterina en cerdos: beneficios y riesgos Dra. Carmen de Alba Romero Minitub Ibérica S.L. Polígono Industrial la Drecera. Calle Metallúrgia La Selva del Camp. Tarragona. España calba@minitub-iberica.com Resumen A finales de los años 90, se despertó un gran interés por desarrollar nuevas técnicas que permitieran la deposición del semen más cerca del lugar de fertilización para disminuir el número de espermios/dosis de inseminación con el objetivo de optimizar los verracos de mayor valor genético. Las primeras experiencias de campo utilizando la técnica de Inseminación intrauterina se iniciaron hace más de 10 años, siendo España pionera en esta técnica con el desarrollo y patente de dos de las cánulas utilizadas, una para la inseminación intrauterina profunda (IA IUP) y otra para la inseminación post cervical (IA PC). La grave crisis que atraviesa el sector porcino desde hace unos años ha sido un factor predisponerte para que en algunos países se haya intentado implementar la técnica de forma rutinaria. En este trabajo se revisa la técnica de inseminación intrauterina con el objetivo de ayudar al productor porcino a valorar su posible implantación como herramienta para la producción de lechones. Palabras clave: Inseminación intrauterina; Cerda; Calidad seminal; Concentración espermática; Cánula intrauterina 1. Introducción La eficiencia reproductiva, estimada por el número de lechones destetados por cerda y año, es el indicador de la productividad en la granja porcina. La inseminación artificial (IA) lleva contribuyendo desde hace más de 30 años a que éste parámetro alcance los valores máximos. Desde sus inicios, la técnica de IA contempla la deposición del semen mediante un catéter o pipeta que permite depositar el semen en el cervix. A partir de aquí, el semen tiene que atravesar el cervix y llegar al cuerpo uterino. Este paso se realiza a través de las contracciones uterinas [1]. Algunos estudios afirman que 1 billón de espermatozoides por dosis puede dar tasas de fertilidad alta en condiciones óptimas. Sin embargo, la mayoría de las granjas aumentan este número hasta casi los 6 billones de espermios por dosis para minimizar condiciones subóptimas de manejo que podrían afectar a los resultados si se utilizara un número bajo de espermatozoides [2]. En la actualidad se insemina con dosis de 2-5 billones, siendo evidente que si se consigue disminuir el número de espermios por dosis se optimizaría el uso de verracos y los centros de inseminación serian más eficientes. Pero hay tres limitaciones principales en cuanto al uso de dosis con baja concentración de espermios: (1) en el ganado porcino el transporte espermático no es muy eficiente, (2) las condiciones de inseminación deben ser óptimas y consistentes, y (3) hasta ahora la valoración del semen no ha sido muy precisa y segura para garantizar un número mínimo de espermios fértiles en cada inseminación. A finales de los 90, se despertó un gran interés por desarrollar nuevas técnicas de deposición del semen en el cuerno uterino o en el cuerpo, bien vía quirúrgica o no quirúrgica, que permitieran el uso de una concentración baja de espermios y un volumen menor de semen, sin que se afectara la productividad [3]. El objetivo principal de los investigadores era poder optimizar los verracos de mayor valor genético. La IA quirúrgica garantizaba la posibilidad de reducir el número de espermios a depositar cerca de la unión útero-tubárica [4,5]. Pero estas técnicas no se podían aplicar de forma rutinaria en las granjas porcinas, por lo que se buscaron alternativas a la cirugía, que permitieran depositar el semen lo más cerca posible del sitio de fertilización, siempre con el objetivo de disminuir el número de espermios por inseminación. Así se llegó a la denominada Inseminación intrauterina (IA IU), la cual se define como la deposición del semen directamente en el cuerpo del útero mediante un catéter especial de inseminación artificial. Las primeras experiencias de campo utilizando la técnica de IU comenzaron hace unos 10 años por Kruger y col. [4] utilizando 10 x 106 espermios. Más tarde Martínez y col. [6] con una concentración por dosis de 150 x 106 espermios. Watson y Behan, [7] y J. Gil [8] inseminaron con 1500 x 106 espermios. El objetivo de este trabajo es revisar en profundidad la técnica de inseminación intrauterina, sus ventajas y resultados con el objetivo de ayudar al productor porcino a valorar su posible implantación como herramienta para la producción de lechones. 2. La técnica de inseminación intrauterina (IA IU La inseminación intrauterina se define como la deposición del semen directamente en el cuerpo del útero (Tabla 1). Pero dentro de la IA IU se distingue dos tipos diferentes de técnica dependiendo del lugar donde se deposita el semen (Figura 1): 1. La Inseminación Intrauterina Profunda (IA IUP), que deposita el semen en la profundidad de un cuerno uterino [6]. 2. La Inseminación post cervical (IA PC) en la que el semen se deposita en el cuerpo del útero [7,8]. Para poder valorar la técnica y dar respuesta a algunas preguntas que se plantean, primero vamos a revisar cada uno de los métodos por separado, analizando la técnica y los resultados, para poder discutir sus ventajas/ desventajas y finalmente sugerir algunas pautas que pueden ayudar al productor porcino a la posible implementación de esta técnica en la granja La Inseminación Intrauterina Profunda (IA IUP) La técnica La IA IUP permite depositar los espermatozoides, por vía quirúrgica o no quirúrgica, en la profundidad de un cuerno uterino. Aquí sólo nos vamos a referir a la vía no quirúrgica ya que es la que se puede aplicar a nivel de campo en la granja. Con la IA IUP, la dosis espermática puede ser depositada en la profundidad de un cuerno uterino de forma rápida y sencilla, aunque el coste del sistema es elevado.

2 Los estudios llevados a cabo comparando la IA IUP con la IA tradicional indican que con esta técnica se pude reducir 20 veces el número de espermatozoides/dosis (0,15 x 109) y el volumen de la dosis (5 ml) sin que la fertilidad a parto y el tamaño de camada se vea afectado [10]. El primer procedimiento que permitió realizar una IA IUP en la cerda fue descrito y patentado por la Universidad de Murcia [6]. Para poder realizar una IA IUP, estos investigadores tuvieron que salvar los principales obstáculos anatómicos del aparato genital de la cerda: la rigidez de los pliegues cervicales y, la longitud y particular disposición en curva de los cuernos uterinos (Figura 2) Para poder realizar la IA IUP, y depositar los espermatozoides al final del cuerno uterino se diseñó un catéter de 1 80 metros de longitud y 4 milímetros de diámetro que permite alcanzar el extremo profundo del cuerno uterino. Dicho catéter combina las propiedades de rigidez (para su introducción a través del cervix y cuello uterino) y flexibilidad (para adaptarse al cuerno uterino), garantizando que el tracto genital no sufra daño alguno durante el proceso. El diseño del catéter está basado en la sonda flexible de fibra óptica con la que realizaron las primeras inseminaciones en la profundidad del cuerno uterino mediante un endoscopio. Para que la IA IUP se pueda aplicar en granja, es requisito indispensable el entrenamiento del personal. El uso incorrecto puede dañar el tracto reproductivo en la cerda y además se requiere un nivel de higiene alto para garantizar que el catéter este limpio durante la introducción del mismo hacia la parte profunda del cuerno uterino. La introducción de un catéter sucio puede dar lugar a infecciones graves del tracto reproductivo. Una de las incógnitas que plantea la técnica es que la deposición del semen se realiza en un cuerno, por lo que podría ser causa de un descenso de la fertilidad. Pero este mismo grupo de investigadores decidieron profundizar en este tema y demostraron que los espermatozoides pueden alcanzar el cuerno contra lateral mediante una vía intrauterina, en la gran mayoría de los casos, aunque en un porcentaje pequeño y probablemente debido a las condiciones anatómicas y fisiológicas en el momento de la ovulación, los espermatozoides son capaces de alcanzar el oviducto contra lateral por migración transoviductal a través de la cavidad peritoneal [12] Los resultados Los resultados obtenidos mediante la técnica de IA IUP se han repetido en diferentes países del mundo además de España, Chile, Australia, Alemania y EEUU. Las pequeñas variaciones en los resultados se observan en el número de lechones nacidos por camada. Entre los diferentes factores que podrían relacionarse con este hecho se encuentran, por un lado, el incremento en las fecundaciones unilaterales [13], así como un menor número de espermatozoides unidos a la zona pelúcida de los cigotos obtenidos tras la fecundación, lo cual sugiere que el número de espermatozoides que alcanzan el oviducto en algunas cerdas puede ser insuficiente existiendo, además, una gran variabilidad entre cuernos uterinos. Entre las causas que pueden influir en esta variabilidad se encuentran diferencias entre hembras con relación a la contractibilidad del miometrio o el grado de fagocitosis, lo cual podría repercutir sobre la incidencia de las inseminaciones unilaterales. Afortunadamente, este hecho no ocurre cuando el número de espermatozoides inseminados es de 600 millones dosis todavía 5 veces inferior a una dosis convencional de inseminación [13] (Tabla 2). La poca variabilidad que se observa en los diferentes trabajos, así como la implementación de esta técnica como herramienta de algunos investigadores en las pruebas de campo tiene su explicación en que hasta ahora sólo hay un catéter para la IA IUP (Catéter DeepBlue, Minitube, desarrollado por la Universidad de Murcia, España), y además el protocolo de la técnica está estandarizado Discusión del uso de la IA IUP La IA IUP presenta ventajas indiscutibles y claras con respecto a las IA tradicional. Para valorar las ventajas/desventajas de la técnica, debemos tener en cuenta como influye no sólo a nivel de granja, sino también en los centros de verracos. Según Martínez y col. [6] en el Stud de machos la IA IUP,permite 1. Aumentar entre 8 y 20 veces los rendimientos de inseminación ya que posibilita una importante reducción en el número de espermatozoides por dosis de inseminación. 2. Se optimizan los machos de alto valor genético para diseminar de forma más rápida dicha genética, pero para ello es necesario garantizar que la calidad de la dosis, calidad seminal, sea excelente. En la granja es posible [6] : 1. Incrementa el número de cerdas inseminadas a partir de un solo eyaculado, sin afectar el porcentaje de partos aunque con una ligera afectación del número de lechones nacidos por camada. 2. Es la herramienta de elección para la aplicación de nuevas tecnologías a nivel de campo, esto es semen congelado o sexado. Pero hay que tener en cuenta que la IA IUP: 1. No se debe utilizar con cerdas nulíparas. Esto es matizable ya que si es posible de utilizar en cerdas a partir del 3er celo siempre que sean cerdas con buen desarrollo y previamente seleccionadas. 2. No es una técnica sencilla. Se necesita un personal bien entrenado y motivado. Esta premisa es aplicable a cualquier nueva tecnología o protocolo a introducir en una explotación. 3. El precio alto del catéter. Si el valor de la genética es alto, semen de verracos TOP (ya sea fresco o congelado) y semen sexado, el coste del catéter queda totalmente justificado y amortizado [14] La Inseminación Post-cervical (IA PC) La técnica Durante la IA PC el semen se introduce directamente en el cuerpo del útero utilizando una cánula, más larga (de 74 a 75 cm según el modelo y fabricante), semirígida y fina que un catéter tradicional. Esta cánula pasa a través de los anillos del cervix hasta llegar al cuerpo del útero, y al igual que en la IA IUP es necesario un catéter de IA tradicional que se utiliza de guía para la introducción de la cánula (Figura 3). Es muy variable el volumen (de 30 a 80 ml) y la concentración (500, 750, 1000, 1500 x 106 espermios/dosis) dependiendo del fabricante y el protocolo que describe cada uno de ellos.

3 Los resultados Este es un capítulo complejo por el número de trabajos publicados, la variedad de diseños experimentales y lo resultados, en muchas ocasiones controvertidos, que podemos encontrar. La tabla 3 adaptada de Echegaray [15], resume los diferentes resultados obtenidos con la IA PC por distintos autores y en diferentes partes del mundo. Es interesante como los mismos autores aparecen en el mismo año en los dos extremos de la tabla, es decir primero obtienen buenos resultados y después malos o viceversa [15,16,17,18]. Los primeros trabajos de campo publicados fueron realizados por Watson y Behan [7]. Hasta ahora se consideran de los resultados más consistentes por el número de hembras utilizado (3.240 cerdas repartidas en 5 granjas) y por el diseño del estudio (comparación de las mismas concentraciones en las dos técnicas). Estos autores demostraron que esta técnica permite una tasa de partos y tamaño de camada equivalente a los resultados de la inseminación cervical, pero utilizando un número reducido de espermios por dosis: 1-2 mil millones vs. 3 mil millones (Tabla 4). Los estudios realizados por Gil y col. [8] en España, Francia, Italia, Hungría, EEUU y México aparecen resumidos en la tabla 5. Importante observar la variabilidad entre las granjas en cuanto a número de cerdas por prueba y los resultados productivos iniciales. Además, para la IA tradicional los autores utilizan como grupo control la concentración estándar de 3000 x 106 espermatozoides por dosis Discusión del uso de la IA PC Al igual que en la IA IUP, la valoración de la inseminación post-cervical es importante hacerla teniendo en cuenta el punto de vista de los centros de semen y el de la granja. Según Gil y col. [8] en el Stud de machos la IA PC permite: 1. Reducción del número total de espermatozoides por dosis: entre 500 y 1000 millones vs millones usados en la técnica convencional. 2. Reducción del volumen de la dosis: entre 15 y 30 ml vs. 80 y 100 ml usados en la técnica convencional. 3. Mayor rendimiento de los verracos con alto valor genético. Los verracos de mayor mérito genético pueden cubrir un mayor número de cerdas, por lo que su aprovechamiento y el progreso genético es significativamente mayor. En la granja, la IA PC permite [8] : 1. Reducción del tiempo necesario para la inseminación. Cuanto mayor es el tamaño de la explotación, mayor reducción en el tiempo de trabajo. 2. Minimizar el reflujo durante y después de la inseminación. 3. Mejores resultados con semen congelado. Estudios recientes [33,14] afirman que la IA PC puede mejorar sustancialmente la fertilidad del semen descongelado. Los resultados de fertilidad se pueden duplicar si se utiliza semen descongelado previamente seleccionado (con motilidad progresiva >50% y viabilidad >45%). Kaeoketu [34], fija el volumen y concentración de la dosis de semen descongelado para IA PC en 60 ml y 2x109 espermatozoides respectivamente. Pero estas ventajas teóricas necesitan matizarse: 1. Si el número de espermatozoides se reduce, es necesario que la calidad del semen sea óptima. Inseminar con una concentración más baja de espermios/dosis (1 billón/dosis) obliga a ser más exigentes en cuanto a la vitalidad (motilidad progresiva) y el % de formas anormales en los espermios de dosis seminal. A pesar de que los espermatozoides se depositan más cerca del útero (20 cm), si se compara con la IA tradicional, las células espermáticas todavía tienen que recorrer los cuernos uterinos (entre 80 y 130 cm de longitud) hasta llegar al lugar de la fecundación. El número de espermatozoides disminuye considerablemente durante la fase de transporte hasta el oviducto. Esto es debido a la adherencia de los espermatozoides al epitelio uterino y el ataque inmunológico por los PMNs que sufren los espermios. 2. Reducir el volumen de una dosis seminal no es una ventaja propiamente dicha. El uso de un volumen de 30 ml para la IA PC realmente se desarrolló en base a la costumbre de dividir dosis destinadas a la IA tradicional. El volumen de la dosis seminal es clave en el transporte de los espermatozoides a través del cerviz, cuerpo uterino y cuernos uterinos para llegar finalmente al oviducto. El cuerpo uterino proporciona espermatozoides a los dos cuernos uterinos, por lo que necesita un determinado volumen de semen para garantizar un número mínimo de espermatozoides que entren en cada cuerno uterino. 3. La IA PC también puede ser utilizada como parte de un plan de emergencia en sistemas cerrados cuando la producción de semen falla en un centro de IA y todas las cerdas deben cubrirse con semen de los centros restantes. 4. La introducción del catéter es un procedimiento más lento que en la IA tradicional. El catéter post-cervical es similar al catéter tradicional, pero contiene una sonda en su interior más fina y larga. El uso de estos catéteres para IA PC, así como la técnica es un poco diferente a la tradicional, lo que hace necesario e imprescindible la formación del operario antes de su uso en la explotación. El riesgo de lesiones a nivel de cuello uterino y el posible daño tisular es alto si el personal no está debidamente entrenado. El mal uso de este tipo de catéter aumenta el riesgo de infección para las hembras. La IA tradicional con el sistema manos libres es un proceso más rápido y seguro que la IA PC. En las granjas bien organizadas 40 hembras inseminadas /hora es un parámetro normal. 5. El reflujo de semen en la IA es un hecho común, que no depende del sitio donde se deposita el semen ni está relacionado con problemas reproductivos [2,35]. El reflujo de semen durante o poco después de la inseminación ha sido considerado por muchos técnicos como un punto crítico en la técnica de IA. Según estos autores, el reflujo de líquido se produce en todas las inseminaciones como un mecanismo normal de defensa del útero. El tracto genital de la cerda es muy eficaz para hacer llegar los espermatozoides al oviducto durante los 30 minutos posteriores a la IA. Esto ocurre en el 98% de las IA, por lo que cada ml de líquido perdido contiene menos espermatozoides a medida que pasa el tiempo. En la IA tradicional, por lo general, el reflujo se minimiza mejorando la técnica de IA (detección de celo, fijación del catéter, estimulación de la cerda antes y después de la aplicación seminal) 6. En la IA PC una inseminación mal hecha significa que no hay reserva espermática para dejar la cerda cubierta o producir una camada buena. Esto explicaría en parte los resultados variables de esta técnica [36].

4 Pautas para el uso de la IA PC Cuando queremos realizar una prueba, la prudencia debe marcar nuestra forma de operar. A la hora de valorar una técnica nueva debemos ser sensatos y lo suficientemente juiciosos para valorar tanto lo positivo como lo negativo y de esta forma ponerla en práctica o descartarla. 1. Para mantener los parámetros de fertilidad y prolificidad de la granja, es recomendable que la concentración de espermios/dosis de en al IA PC sea mayor de 1 billón. El mínimo número de espermatozoides por dosis para que la fertilidad/prolificidad sea alta, depende de la calidad del eyaculado, el procesado del semen, la conservación de la dosis seminal, la calidad de la dosis en el momento de su uso, el tipo de diluyente y la aplicación del semen. Los sistemas CASA para el análisis de la calidad seminal son una herramienta de gran valor en la producción de dosis con calidad y seguridad. 2. Para que la IA-IU sea una técnica segura y con resultados constantes, el volumen de la dosis seminal debe ser mayor de 50 ml. El volumen de la dosis seminal es clave para el transporte de los espermatozoides a través del cervix, cuerpo uterino, cuernos uterinos y oviducto. Es necesario un volumen mínimo de semen para asegurar las contracciones del tejido muscular uterino y que los espermatozoides puedan avanzar a través del cervix (15-25 cm de largo), cuerpo del útero (entre 6 y 15 cm de longitud), cuernos uterinos (80 y 130 cm de longitud) y finalmente llegar al oviducto (15-30 cm de longitud). 3. La calidad del catéter de IA-IU y maximizar la higiene durante su uso son puntos críticos a tener en cuenta. Es recomendable el uso de catéteres de IA-IU envasados de forma individual que aseguren la higiene de la sonda intrauterina durante el proceso. 4. El entrenamiento del personal es clave para obtener buenos resultados. Es necesario un periodo de formación adecuado y realizado bajo la supervisión de especialistas en la materia. Además el personal debe ser receptivo a la utilización de nuevas tecnologías. Trabajar con la IA-IU supone exigir más a los trabajadores, tanto a los que inseminan como a los que están involucrados en la cadena de producción y transporte de las dosis de IA-IU. 5. La selección y el manejo cuidadoso de las cerdas a inseminar. Sólo cerdas de más de 2 partos, con buenos resultados productivos y cerdas nulíparas previamente seleccionadas y con más de 3 celos se pueden inseminar con esta técnica. La presencia del verraco sigue siendo clave para determinar el celo de las hembras y realizar una buena introducción del catéter. 3. La realidad de la técnica en España y Europa. España es pionera en la técnica de Inseminación Intrauterina ya sea IA IUP o PC. El único modelo disponible de cánula para IA IUP es de patente Española. Esta técnica se utiliza a nivel de campo para la optimización de semen de alto valor genético y para el semen sexado, por lo que el porcentaje de hembras que se insemina con este método no supera el 5% y principalmente el usuario final son empresas de genética y granjas que introducen genética líquida de alto valor. En cuanto a la IA PC, también España fue pionera con una sonda diseñada por Gil en el año 2002 [8] (SoftQuick, Imporvet, España). Pero a pesar de que la técnica no es nueva, más de 10 años, no se ha implementado en las explotaciones hasta hace relativamente poco. El aumento del uso del la IA PC en España en los últimos años, con un incremento desde un 10% a casi el 60% (el 40% restante corresponde a las cerda de reposición que se inseminan con la técnica tradicional), ha sido forzado por la grave crisis que afecta a la industria porcina desde hace casi 4 años. Por qué la crisis ha forzado la implantación de la IA PC y no la técnica por sí sola es algo simple y difícil de explicar a la vez. A través de la revisión que hemos hecho de la técnica, hemos podido ver como ciertos puntos críticos como el volumen y la concentración de la dosis, el número de cerdas de cada prueba, el diseño experimental entre otros, han generado un número grande de trabajos y resultados que exponen problemas de la técnica en sí y su amplia implementación, de tal forma que el productor no la implantaba de forma rutinaria. En cuanto al resto de Europa, la técnica de IA IUP se utiliza en niveles similares a los de España y en ciertos casos se ha utilizado como solución a problemas de índole sanitaria. En el caso de la IA PC la situación es totalmente distinta, siendo sólo entre el 5 y el 10% de cerdas inseminadas con esta técnica. Entre las razones posibles estaría el coste del catéter más del doble del catéter tradicional, la necesidad de formar a los operarios y los resultados variables. Además muchos ganaderos admiten que aunque en un principio los resultados eran buenos, los problemas aparecen cuando la técnica se convierte en rutina o es necesaria la formación continua de personal por el flujo constante de nuevos trabajadores. La producción moderna de semen se está profesionalizando y el sistema CASA está comenzando a ser una herramienta clave para la optimización de los verracos de tal forma que actualmente en los principales centros de Alemania, Dinamarca y Holanda se trabajan con dosis que garantizan un número determinado de espermios mótiles, y que oscila entre los 1,5 y 2,0 billones por dosis de inseminación. Además, la mejora del control de celos permite la reducción de las dosis seminales a 2 por ciclo, con el consiguiente ahorro de costes sin que se afecte a los resultados productivos. 4. Conclusiones En la última década, se han desarrollado nuevas técnicas englobadas en las denominadas Técnicas de Reproducción Asistida (TRA), que están contribuyendo a que el sector porcino sea cada vez más profesional y eficiente. Algunas de estas nuevas técnicas son ya una realidad y se aplican en producción porcina. Muchos son los nuevos dispositivos para aplicación de semen que se están introduciendo constantemente en el mercado. Algunos de ellos pueden ser muy útiles en algunas explotaciones, pero otros no. La validación y transferencia de la biotecnología a nivel de granja abre la posibilidad de compartir y salvaguardar la genética así como mejorar el trabajo al mismo tiempo que se aseguran los resultados productivos. Las técnicas de IA IU podrían tener un elevado impacto económico en la industria de la IA porcina con semen fresco ya que permitirían reducir el número de verracos destinados a IA. Además, la disminución del espacio, alimentación, manejo y alojamiento de los verracos, así como el tiempo para la obtención, evaluación y preparación de las dosis seminales serían otros aspectos a tener en consideración. Como inconvenientes de estas técnicas de inseminación cabría destacar la necesidad de un periodo

5 mínimo de entrenamiento del personal, de un manejo cuidadoso de los animales y de utilizar exclusivamente verracos de alto valor genético y excelente calidad seminal. Las tecnologías y biotecnologías asociadas con la reproducción animal son, sin lugar a dudas, procedimientos que desde el conocimiento, han cambiado, están cambiando y cambiarán sustancialmente los modelos productivos en las granjas. Nuestro objetivo debe ser profesionalizar el sector porcino, implementando procedimientos y/o tecnologías que permitan establecer sistemas productivos más seguros y eficientes. 5. Bibliografía [1] Roca J, Vázquez JM, Gil MA, Martínez E. Challenges in pig artificial insemination. Reproduction in Domestic Animal 2006;42: [2] Steverink DB, Soede N, Bouwman NG, Kemp B. Semen backflow after insemination and its effect on fertilization results in sows. Animal Reproduction Science 1998;54: [3] Vázquez JM, Martínez EA, Parrilla I. Birth of piglets after deep intrauterine insemination with flow cytometrically sorted boar spermatozoa. Theriogenology 2003;59: [4] Krueger C, Rath D, Johnson LA. Low dose insemination in synchronized gilts. Theriogenology 1999;52: [5] Krueger C, Rath D. Intrauterine insemination in sows with reduced sperm number. Reproduction Fertility and Development 2000;12: [6] Martínez EA, Vazquez JM, Roca J, Lucas X, Gil MA, Parrilla I, Vazquez JL, Day BN. Successful non-surgical deep intrauterine insemination with small numbers of spermatozoa in sows. Reproduction 2001; 122: [7] Watson PF, Behan JR. Intrauterine insemination of sows with reduced sperm numbers: results of a commercially based field trial.theriogenology 2002;57: [8] Gil J, Tortades JM, Alevia A. Post cervical insemination use of different volumes and sperm number. Proceedings 17th IPVS Congress. June 2-5; Ames, Iowa. 2002: 229. [9] Martinez E., Vazquez JM, Roca J. Nuevas técnicas de inseminación artificial con semen fresco en la especie porcina. [10] Martínez EA, Vazquez JM, Roca J, Lucas X, Gil MA, Parrilla I, Vazquez JL, Day BN. Minimal number of spermatozoa required for normal fertility after deep intrauterine insemination in non-sedated sows. Reproduction 2002; 123: [11] Senger PL. Pathways to Pregnancy and Parturition. Current Conceptions Inc; 2nd edition [12] Vazquez JM, Martínez EA, Roca J, Gil MA, Parrilla I, Cuello C, Carvajal G, Lucas X, Vazquez JL. Improving the efficiency of sperm technologies in pigs: The value of deep intrauterine insemination. Theriogenology 2005;63: [13] Martínez EA, Vazquez JM, Parrilla I. Incidence of unilateral fertilizations after low dose deep intrauterine insemination in spontaneously ovulating sows under field conditions. Reproduction in Domestic Animals. 2006;41(1): [14] Roca J, Parrilla I, Rodriguez-Martínez H, Gil MA, Cuello C, Vazquez JM, Martínez E. Approaches Towards Efficient Use of Boar Semen in the Pig Industry. Reprod. Dom. Anim. 2011;46(2): [15] Echegaray A. Inseminación Postcervical porcina. VI Congreso AVPA 5-6 nov Zaragoza. España [16] Williams S. Inseminación artificial postcervical. Agrupación de Consultores en Tecnología del Cerdo. Facultad de Ciencias Veterinarias. UNLP. La Plata, Argentina [17] Williams, S. Comunicación personal 2005 [18] Leyún Izco M. ITG Experimentación: Estudio comparativo de diferentes sistemas de aplicación de semen porcino. Navarra agraria 2004;144: [19] Leyún Izco M. ITG Experimentación: Comparación de la Inseminación clásica con la Inseminación post-cervical. Navarra agraria 2008;168: [20] Rozeboom KJ, Reicks DL, Wilson ME. The reproductive performance and factors affecting on-farm application of low-dose intrauterine deposit of semen in sows. J. Anim. Sci. 2004; 82: [21] Roberts PK, Bilkei G. Field experiences on post-cervical artificial insemination in the sow. Reprod. Dom. Anim. 2005;40: [22] Panzardi A, Corcini D, Mirapalheta Madeira E, Piassi L, Mattos R, da Silva Pinto L, Deschamps J, Lucia T. Genetic paternity test for piglets generated by Heterospermic cervical and post-cervical artificial Insemination. Acta Veterinaria Brasilica, 2010;4(3): [23] Valladares Morazán R.. Efecto de la disminución en la concentración espermática en las dosis de inseminación artificial en cerdas utilizando inseminación pos cervical. Trabajo de licenciatura. Zamorano, Honduras. Diciembre, [24] Dallanora D, Mezalira A, Katzer LH. Desempenho reprodutivo de fêmeas suínas inseminadas com deposição intra-uterina de sêmen e reduzido número de espermatozóides. In: Congresso da associação brasileira de veterinários especialistas em suínos,ufg 2003; [25] Padilla-Mota N, Meza-Cueto L, Lemus-Flores C. Efecto y costo de la inseminación artificial convencional y postcervical en la fertilidad y prolificidad de la cerda. Memorias XXXIX Congreso Nacional AMVEC: Julio 28- Agosto 1 de Mazatlán, Sinaloa: Asociación Mexicana de Veterinarios Especialistas en Cerdos. [26] Cuevas P, Pedroza C, Jiménez C. Evaluación de la técnica de inseminación artificial postcervical y su relación con los parámetros reproductivos. Revista de Medicina Veterinaria y Zootecnia (Universidad Nacional de Colombia) 2005;52: [27] Llanes J E, Alzina A, Segura J C, Alvarez M J, Góngora G. Porcentaje de gestación y prolificidad de cerdas en el trópico utilizando las técnicas de inseminación artificial convencional e intrauterina. Livestock Research for Rural Development 2007;19(10) [28] Fitzgerald RF, Jones GF, Stalder KJ. Effects of intrauterine and cervical artificial-insemination catheters on farrowing rate and litter size. J Swine Health Prod 2008;16(1): [29] Dimitrov, S, Gª Ruvalcaba, José A., Hernandez-Gil, R. Inseminación Post-Cervical en hembras multíparas con concentración reducida de espermatozoides por dosis: resultados de campo en Bulgaria. Avances en tecnología porcina 2007;IV: [30] Stancic, B.; Grafenau, P.; Hrenek, P.; Radovic, I.; Gagrcin, M. The

6 influence of catheter types and postinsemination cervix stimulation on the sows fertility. Biotechnology in animal husbandry 2006; 22: [31] Gil J, Nieto M. Post cervical artificial insemination, effect of cervical stimulation alter infusión of semen dose. Proceedings 19th IPVS Congress. July 16-19; Copenhagen, Denamark [32] Hernández-Caravaca I, Izquierdo-Rico M, Matás Parra C, García- Vázquez F. Rentabilidad en la granja de la inseminación post cervical. SUIS 2009;60: [33] Casas I, Sancho S, Briz M, Pinart E, Bonet S. Fertility alter post-cervical artificial insemination with cryopreserved sperm from boar ejaculates of good and poor freezability. Anim Reprod Sci 2010;118(1): [34] Kaeoketu K, Chanapiwat P, Wongtawan T, Kunavongkrit A. Successful Intrauterine Insemination (IUI) with Frozen Boar Semen: Effect of Dose, Volume and Fixed-Time AI on Fertility.Thai Journal of Agricultural Science 2010;43(1): [35] Rath D. Low dose insemination in the sow: a review. Reproduction in Domestic Animals 2002; 37: [36] Levis DG, Burroughs S, Williams S. Use of intra-uterine insemination of pigs: Pros, cons & economics. Ohio Pork Center. The Ohio State University Extension Figura 1. Representación de los diferentes sistemas de inseminación en un aparato genital obtenido en el matadero; a) Inseminación artificial estándar: deposición del semen en el conducto cervical; b) Inseminación intrauterina profunda: deposición del semen en la profundidad de un cuerno uterin (nótese la tensión en el cuerno izquierdo de la imagen); c) Inseminación post-cervical: deposición del semen en el cuerpo del útero [9].o Figura 2. Detalle del aparato genital de la cerda y la tres principales barreras a salvar durante la introducción del catéter de IA IU: la rigidez de los pliegues cervicales (1), y la longitud (2) y particular disposición en curva de los cuernos uterinos (3) [9,11] Figura 3. Representación de la Inseminación post-cervical en un aparato genital obtenido en el matadero y detalle del paso de la cánula a través de los anillos del cervix.

7 Tabla 1. Comparación de las características principales de los métodos de IA Tradicional (IA T), Intrauterina Post cervical (IA PC) e Intrauterina Profunda (IA IUP) Características IA T IA PC IA IUP Longitud aproximada del catéter/cánula (cm) Volumen de la dosis recomendado (ml) Nº de espermios por dosis (x106) Apto para todo tipo de cerdas SI NO NO Tabla 2. Resultados de la IA IUP con distintas concentraciones de espermios/dosis[13] Técnica de IA No spz/dosis (milliones) No cerdas Fertilidad parto (%) Nacidos totales Tradicional IUP IUP IUP IUP Tabla 3. Resumen de trabajos realizados comparando la IA PC vs. IA Tradicional (diferentes autores y resultados) [15] Peor Igual Mejor Williams, 2002 [16] Leyún Izco 2004 [18] Rozeboom y col 2004 [20] Roberts y col 2005 [21] Panzardi y col [22] Gil 2002 [8] Watson y Behan, 2002 [7] Valladares, 2003 [23] Dallanora y col [24] Padilla-Mota y col [25] Cuevas y col [26] Llanes-Chalé y col 2007 [27] Fitzgerald y col [28] Dimitrov y col 2009 [29] Williams, 2005 [17] Stancic y col, 2006 [30] Gil y col 2006 [31] Leyún Izco 2008 [19] Hernández Caravaca y col 2009 [32] Tabla 4. Resultados de la IA Tradicional (IAT) vs. IA Post Cervical (IA PC) con distintas concentraciones de espermios/dosis [7] Fertilidad a parto (%) Nacidos totales Concentración/dosis IAT IA PC IAT IA PC 1 billón 65.8a a billones 91.8b b billones 91.1b b 12.3

8 Tabla 5. Resultados de la IA Tradicional (IAT) vs. IA Post Cervical (IA PC) con distintas concentraciones de espermios/dosis [8] Inseminación Postcervical Inseminación Tradicional Granja X106spz N Partos NT NV X106 spz N Partos NT NV (%) (%) Tailandia ,25 10,36 9, ,00 10,19 9,69 Tailandia ,00 11,30 9, ,00 10,71 9,85 Tailandia ,88 9,04 8, ,75 9,91 9,20 EEUU 1 * ,78 11,05 10, ,69 11,14 9,89 Mexico ,32 11,02 10, ,89 10,48 10,24 Francia ,88 13,49 12, ,78 13,74 12,57 Hungría ,45 9,96 9, ,72 10,18 9,77 Italia ,33 11,98 10, ,86 12,01 10,48 España ,15 10,34 9, ,18 10,79 9,84 España ,00 13,02 11, ,04 13,32 12,34 España ,33 12,82 11, ,10 12,81 11,48 España ,87 12,14 10, ,50 12,74 10,98 España ,15 13,29 11, ,12 12,60 11,35 España ,26 12,50 11, ,33 12,47 11,27 España ,59 11,29 10, ,26 11,76 10,56 España ,25 12,84 11, ,94 13,12 11,62 España ,06 11,33 10, ,79 11,60 10,92 España ,00 10,98 10, ,16 11,33 10,51 España ,83 10,57 9, ,19 10,30 9,66 España ,44 11,82 10, ,70 11,05 9,44 España ,35 13,50 11, ,17 12,70 11,30 España ,00 12,64 11, ,64 12,91 11,46 España ,37 12,32 11, ,00 12,56 12,04 España ,00 11,47 10, ,08 11,11 10,22 España ,35 13,17 9, ,20 12,33 9,43 España ,86 11,85 10, ,57 13,55 11,64 España ,96 14,05 12, ,82 14,39 12,94 España ,65 11,04 9, ,87 12,85 11,92