Estudio de la generación de desórdenes fisiológicos en palta "Hass" en etapas tardías de cosecha en tres temporadas de evaluación

Transcripción

1 -7- Plts Hss en Chile: producción y exportción mercdos distntes Estudio de l generción de fisiológicos en plt "Hss" en etps trdís de cosech en tres tempords de evlución. hectáres (7% Hss ) 9. tons (9-) Miguel Grcí-Rojs, Orinne Gudenschwger, Amy Busto, Bruno Defilippi, Muricio González-Agüero Europe 7% Europe 9% 6 CONGRESO AGRONÓMICO Iquique Chile, Octure USA 69% Tempord 9- Jpn % Argentin Others % % USA 7% Jpn % Others Argentin % % Tempord - Desórdenes fisiológicos en postcosech Cosech de plts Hss en Chile En el árol, se encuentrn coexistiendo un mplio rngo de estdos de desrrollo... Prdemiento externo Prdemiento de Pulp Prdemiento vsculr Fuente: L. Postcosech (INIA) Fuente: L. Postcosech (INIA) Cosechs trdís de plts Hss Menor vid de postcosech Pregunt???... Metodologí Septiemre - Octure (primver) (inicio del verno) Diciemre - Enero Cmios en: cosech cosech - Metolismo de lípidos? - Metolismo de zúcres? - Tiempo del fruto en el árol? Almcenmiento C dís Estudios en: Almcenmiento C - Genes + Mdurción C + Mdurción C - Lípidos, zucres y otros metolitos. - Efecto de l tempertur - Efecto del etileno Por qué? Estudios en tempords de evlución - Plts Hss cosechds en tempords desde Quillot (Centro Experimentl l Plm, PUCV). - Almcenmiento C y C por,,,, y dís. - Trtmiento con -MCP ( pp). - Se evlún frutos por cd trtmiento: - - Firmez - Desrrollo de D.F. - Se seleccionn 6 frutos y se lmcenn -8 C. - Extrcción de RNA síntesis de cdna PCR en tiempo Rel - Otrs metodologís.

2 Firmez (Kgf) Firmez (Kgf) -7- ª Cosech V/S ª Cosech 6 Octure 8 9 Diciemre 8 Dís Almcenmiento + Mdurción C C ª Tempord (8-9) - Desrrollo diferencil de - / Firmez Identificción de genes diferencilmente expresdos en plts que presentn dño - Análisis moleculres Genotec SSH d C d C + d C d C d C + d C ª Tempord (8-9) r Cosech d Cosech r Cosech d Cosech Firmez + 7 egd d C d C + d C d C d C + d C ª Tempord (8-9) Prdemiento Vsculr r Cosech d Cosech SF SF 7 SF 6 SF 6 SF 7 SF 6 SF Dís C ± C SF 7 SF 6 SF SF SF SF SF Dís C ± C ª Tempord (8-9) Prdemiento de Pulp r Cosech d Cosech SF SF 7 SF 6 SF 6 SF 7 SF 6 SF Dís C ± C SF 7 SF 6 SF SF SF SF SF Dís C ± C ª Tempord (8-9) Prdemiento Externo r Cosech d Cosech 7 + SF SF 7 SF 6 SF 6 SF 7 SF 6 SF Dís C ± C SF 7 SF 6 SF SF SF SF SF + 7 Dís C ± C Construcción de Genotec de Sustrcción (SSH) r Cosech d Cosech Sin dño Genotec SSH 7 Con dño SSH ª Tempord (8-9) Identificción de genes específicos pr l condición con dño

3 Firmez (Kgf) Firmez (Kgf) Firmez (Kgf) -7- Construcción de Genotec de Sustrcción (SSH) ª Tempord (8-9) Construcción de Genotec de Sustrcción (SSH) ª Tempord (8-9) Resumen Genotec SSH: - 6 clones - Tmño promedio 98 p ( p. p) - Redundnci 6% - 7 genes únicos (unigenes),7 %, %,9 % Metolismo de Pred Celulr Metolismo de Lípidos 8, % Metolismo de Azúcres Metolismo Metolismo Primrio de Pred Celulr Otros Metolismos de Lípidos Respuest Estrés Síntesis y Metolismo Modificción de Proteíns de Azúcres Trnsducción Metolismo de Señles Primrio Trnsporte Unión DNA/RNA Otros Metolismos Función Desconocid Respuest Estrés,7 % Síntesis y Modificción de Proteíns Trnsducción de Señles Trnsporte Unión DNA/RNA Función Desconocid ª Tempord (8-9) Genes diferencilmente expresdos ª Cosech V/S ª Cosech V/S ª Cosech ª Tempord (9-) L : Hoj F : Flor B : otón UF : fruto inmduro Noviemre 9 Enero Mrzo RF : fruto mduro Poliglcturons (PG) Esteroil ACP desturs () Posile NAD soritol dehidrogens (SDH) Posile cil-coa sintets (ACoAS) Posile cil-coa sintets (ACoAS) 6 Posile cil-coa sintets (ACoAS) 7 Riulos,-isfosfto croxils/oxigens (RUBISCO) Dís Almcenmiento + Mdurción C C Almcenmiento + Mdurción C C - Desrrollo diferencil de - / Firmez - Análisis moleculres Análisis de genes diferencilmente expresdos Grcí-Rojs et l., Envid Posthrvest Biology nd Technology ª Tempord (9-) r Cosech d Cosech r Cosech C C C C C C 7 Firmez C C C C C C 7 ª Tempord (9-) Prdemiento de Pulp r Cosech Cosech r Cosech C C C C C C Sin dño Con dño

4 Reltive expression Expresión reltiv Expresión Reltive expression reltvi Reltive expression Expresión reltiv Reltive expression Expresión reltiv -7- Contenido de ceite de plts cv. Hss correspondiente l llegd de tres cosechs. Cosech Fech Promedio, SD //9 9,7,87 //,6,7 8//,, Vlores corresponden los promedios de ls muestrs en porcentje (%), (n = 6). Letrs diferentes en l column represent diferenci significtiv utilizndo un nálisis Anov con LSD, p <,. Vlores corresponden l desvición estándr. Metolismo de lípidos Cerc del 6% - 8% de l mteri sec de l plt est compuest por lípidos Fuente: L Postcosech (INIA) Ácido Plmitico Ácido Linoleico Ácido Plmitoleico Ácido Linolenico ª Tempord (9-) El perfil de ác. grsos se podrí ver fectdo por l tempertur durnte l mdurción Metolismo de lípidos ª Tempord (9-) En plnts l síntesis de ác. grsos ocurre en los plstidios. ª Tempord (9-) Expresión de PmACCseBC y PmACCseBCCP durnte el desrrollo de prdemiento de pulp r Cosech d Cosech ACCse ACCse 7 7 Acetyl-CoA croxylse (EC 6...) L form heteromeric est compuest por: - Biotin croxylse (BC) - Biotin croxyl crrier protein (BCCP) - nd the lph (α) nd et (β) suunits. 6 C C Sin dño C C ACCseBC Con dño ACCseBC Steroyl-ACP desturse ºC ºC ºC + + ºC ºC + + SL ºC ºC + + ºC ºC + + SL Fuente: Kchroo nd Prdeep Kchroo, 9 * Diferencis significtivs P <. con test LSD. ª Tempord (9-) Expresión de PmACCseBC y PmACCseBCCP durnte el desrrollo de prdemiento de pulp r Cosech d Cosech PmACCse BC Cosechs trdís y umento de prdemiento 7 7 ACCse PmACCse BCCP C C Sin dño C C Con dño ACCseBCCP ACCseBCCP ºC + ºC + ºC + ºC + SL ºC + ºC ºC + ºC + SL * Diferencis significtivs P <. con test LSD. Se oserv un lt incidenci de prdemiento en fruts cosechds trdimente y lmcends C. Esto se correlcionrí con un disminución en l expresión de ls suuniddes de ACCse (PmACCseBC nd BCCP).

5 Firmez (Kgf) Firmez (Kgf) Firmez (Kgf) -7- ª Cosech V/S ª Cosech Octure Diciemre Dís Almcenmiento + Mdurción C C Almcenmiento + Mdurción C C V/S ª Cosech ª Tempord (-) Ferero - Desrrollo diferencil de - / Firmez - Análisis moleculres Análisis de genes diferencilmente expresdos ª Tempord (-) r Cosech d Cosech r Cosech C C C C C C 7 Firmez - Cuntificción de metolitos C C C C C C ª Tempord (-) Prdemiento de Pulp r Cosech Cosech r Cosech C C C C C C En progreso Sucrose Acidos Alcoholes Esteres Cronilos Lctons Inverts OAA MDH CAC ADH AAT HPL Fructose Glucose Mlte OAA Citrte Hidroxi peroxido FK GK PEPC NADP-ME LOX Oleic cid Pyruvte ª Tempord (-) ALF F6P PFK F,6BP TP G6P Análisis de metolitos y principles enzims de ruts metólics relcionds con el sor (clidd) en plt. PEP PK PDH 8: ACP Acetyl CoA Mlonyl CoA 6: ACP 8: ACP ACCse Conclusiones - Plts Hss cosechds trdímente resultron ser ms susceptiles desrrollr fisiológicos (DF; prdemiento de pulp y vsculr), cundo ests lcnzn l mdurez de consumo y luego de estr lmcends dís C y ºC. - L expresión de poliglcturons (PG), soritol dehidrogens (SDH) y cil- CoA sintets (ACoAS), genes clves pr los metolismos de pred celulr, zúcres y lípidos, est correlciond con el desrrollo de DF en plts de cosechs trdís y podrín estr socidos con l perdid de clidd. - Bjo condiciones de lmcenmiento C se oserv un disminución en l expresión de ls suuniddes del gen ACCse (PmBC nd PmBCCP) cundo l frut lcnz l mdurez de consumo. - Hemos identificdo y crcterizdo nuevos genes posilemente relciondos con l pérdid de clidd en plt. Estos pueden ser utilizdos como mrcdores (predictores) o pr su vlidción como mrcdores moleculres pr el mejormiento genético. Postcosech: Miguel Grcí, UNAB Amy Busto, UNAB Orinne Gudenschwger Plo Muñoz Pul Roledo Ros Molin Bruno Defilippi Muricio González Agüero Finncimiento: Equipo de trjo Octure