Atlas of Clinical Cytology in Dogs and Cats

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1 THE VETERINARY PUBLISHING COMPANY SMALL ANIMALS Atlas of Clinical Cytology in Dogs and Cats Aimed at veterinary surgeons, students, professors and professionals in this field. TECHNICAL SPECIFICATIONS Author: Elena M. Martínez de Merlo. Format: 22 x 22 cm. Number of pages: 424. Number of images: 500. Binding: Hardcover. ISBN: Year: This veterinary cytology atlas will be of great help for the clinician as it may be used as an essential diagnostic tool in daily practice. This book displays in a simple manner the complex world of cytologic interpretation since it contains a great variety of images and pictures that facilitate the search of information and help to reach a precise diagnosis. The book is divided in thirteen chapters in which the details of the main pathological processes of each organ are carefully explained. Centro Empresarial El Trovador, planta 8, ofi cina I - Plaza Antonio Beltrán Martínez, Zaragoza - España Tel.: Fax: pedidos@grupoasis.com Grupo Asís Biomedia, S.L.

2 THE VETERINARY PUBLISHING COMPANY Atlas of Clinical Cytology in Dogs and Cats TABLE OF CONTENTS 1. Introduction 2. General concepts about cytologic interpretation Introduction Sample preparation protocol Sending of cytologic samples to specialised laboratories 3. Cytologic diagnosis of cutaneous and subcutaneous masses Sample collection and handling 4. Lymphatic node cytology of lymphatic nodes Sample collection, spreading and staining 5. Cytology of the digestive tract: hepatic, pancreatic and gastrointestinal Hepatic cytology Cytology of the pancreas Cytology of the gastrointestinal tract 6. Cytology of the spleen Sample collection and handling 7. Cytology of the reproductive tract Cytology of the male reproductive tract Cytology of the female reproductive tract 8. Cytology of the respiratory system Nasal cavity cytology Respiratory tract cytology (tracheal wash and bronchoalveolar lavage) Cytology of the pulmonary parenchyma Cytology of mediastinal masses 9. Cytology of the urinary tract Renal cytology Cytology of the bladder and the urethra 10. Cytology of the ocular surface Indications of the corneal or conjunctival cytologic study Sample collection and processing Centro Empresarial El Trovador, planta 8, ofi cina I - Plaza Antonio Beltrán Martínez, Zaragoza - España Tel.: Fax: pedidos@grupoasis.com Grupo Asís Biomedia, S.L.

3 THE VETERINARY PUBLISHING COMPANY 11. Cytology of the external ear canal Introduction Sample collection and handling 12. Cytologic study of the organic fluids Peritoneal, pleural and pericardial fluids Synovial fluid Cerebrospinal fluid 13. Blood smear cytology Introduction The perfect blood smear Microscopic examination of a blood smear Erythrocytes Leukocytes Thrombocytes 14. Bone marrow cytology Sample collection and processing Centro Empresarial El Trovador, planta 8, ofi cina I - Plaza Antonio Beltrán Martínez, Zaragoza - España Tel.: Fax: pedidos@grupoasis.com Grupo Asís Biomedia, S.L.

4 atlas de citología clínica citología de gánglios linfáticos Ganglio metastásico Figura 37. Metástasis ganglionar de un seminoma. Las células tumorales tienen un tamaño muy superior a los linfoblastos y presentan una morfología más irregular. La población linfoide es escasa (célula linfoide señalado con flecha). El diagnóstico de metástasis ganglionar es sencillo, ya que se basa en la observación de células que no forman parte del tejido ganglionar normal o en un incremento en el número de células presentes habitualmente. Los tumores que metastatizan con mayor frecuencia a ganglio linfático son los carcinomas, mastocitomas y melanomas. Las metástasis de otros tipos tumorales son más raras (fig. 37).También puede producirse afectación ganglionar secundaria en procesos leucémicos mieloides, linfoides o en el curso del mieloma múltiple. Figura 34. Linfosarcoma canino de bajo grado (linfocítico): La imagen citológica carece de otros estadios linfoides, sólo se observan linfocitos pequeños (muchos de ellos deformados en el momento de la extensión). Esta forma de linfosarcoma es difícil de diagnosticar mediante citología. Existen algunos tipos de linfosarcoma canino cuya imagen citológica difiere de la habitual. En algunos casos, entre los que se incluye la diseminación de linfosarcomas cutáneos epiteliotrópicos (micosis fungoides) a ganglio linfático (fig. 35), la citología muestra un predominio de linfoblastos con morfología histiocítica, de citoplasma más abundante y más claro y núcleos que pueden presentar indentaciones o lobulaciones. De forma excepcional, pueden diagnosticarse linfosarcomas pleomórficos (fig. 36), cuyas células son muy inmaduras, de gran tamaño con numerosas irregularidades en su forma y en su volumen nuclear, observándose abundantes células multinucleadas. Figura 35. Diseminación a ganglio de un linfosarcoma epiteliotrópico en el que se observan linfoblastos de tipo histiocítico. Figura 36. Linfosarcoma pleomórfico de células grandes atípicas. Según el tipo celular neoplásico, el proceso puede clasificarse según alguno de los esquemas propuestos para el perro (Kiel,Working Formulation), aunque esta diferenciación no es básica para establecer un diagnóstico.además, esta clasificación de linfosarcomas es más fiable en muestras procesadas por histopatología. La determinación del fenotipo celular (linfocitos T ó B) puede establecerse con técnicas inmunohistoquímicas que se realizan en laboratorios especializados.

5 estudio citológico de líquidos orgánicos estudio citológico de líquidos orgánicos Interpretación citológica El estudio citológico del LCR debe realizarse incluso cuando el recuento celular es normal, porque pueden existir alteraciones en la morfología celular y/o en el recuento diferencial sin que se modifique el número total de células nucleadas. Las células del LCR degeneran rápidamente. En muchas ocasiones, el proceso degenerativo es tan intenso que impide la realización del estudio citológico, ya que puede ser imposible reconocer los diferentes tipos celulares (fig. 55). A esta limitación hay que añadir las dificultades que entraña realizar un recuento diferencial significativo debido a la escasa celularidad y a la extrema dispersión de las células presentes, sobre todo si no se emplean técnicas de concentración eficaces. Es muy poco frecuente que los hallazgos citológicos sean específicos de una única enfermedad. En la mayoría de los casos, el objetivo del estudio citológico del LCR es determinar el tipo celular predominante, lo que permite definir un patrón citológico, común a una serie de procesos. De esta forma, al menos, se limita la lista de diagnósticos diferenciales (tabla 3). En primer lugar debe valorarse la presencia de hematíes, cuya presencia puede indicar la presencia de una hemorragia o, más frecuentemente, contaminación sanguínea durante la toma de muestras.a continuación se valorará la integridad de las células nucleadas; si es adecuada, se realizará un recuento diferencial clasificando los tipos celulares observados. En muchas ocasiones, es preferible realizar este recuento diferencial a aumentos intermedios (40x) ya que permiten la observación de campos más amplios. El empleo de objetivos de grandes aumentos (100x con aceite de inmersión) es esencial para la búsqueda de microorganismos o cuerpos de inclusión. Figura 55. Citología de LCR en la que las células están tan degeneradas que son imposibles de identificar. No inflamatorias Inflamaciones infecciosas Inflamaciones no infecciosas Traumática/ compresiva Apariencia RGR RCN Pr Citología Claro N N/+ N/+ 90% mononucleares; 30% PMN en procesos agudos. Degenerativa Claro N N N/++ Monocítica, macrófagos. Neoplásica Claro N/+ N/++ N/++ Bacteriana Turbio N/++ ++/+++ ++/+++ Raramente células tumorales; PMN y eosinófilos ocasionalmente; PMN en meningioma. > 80% PMN degenerados ± bacterias; imagen mixta en procesos crónicos. Vírica (menos PIF) Claro N N/+ N/+ Mononuclear: 60-80% linfocitos. PIF Turbio N/+++ ++/+++ ++/+++ Fúngico Claro- turbio N/++ +/+++ +/+++ Protozoos Claro N/+ +/++ N/+ Parásitos Claro amarillento N/++ N/++ ++/+++ Rickettsias Claro N/+ N/++ N/++ Responde a corticoides Tabla 3. Interpretación citológica del LCR 75-95% PMN; En 20-50% de los casos: imagen mixta con predominio de PMN. PMN inicialmente; Mixta (con eosinófilos); Organismos ocasionales. Mixta: predominan linfocitos, 10-20% PMN, 5-10% eosinófilos. Mixta con bajo porcentaje de eosinófilos. Linfocitos (ehrlichia); 80% PMN (fiebre de las Montañas Rocosas). Turbio N/+ ++/+++ +/++ >80% PMN no degenerados. Necrotizante Turbio N/+ ++/+++ +/++ 80% linfocitos. Vasculitis Turbio N/+ ++/+++ +/ % PMN no degenerados. Eosinofílica Claro- turbio N/+ +/+++ +/++ > 50% de eosinófilos. Granulomatosa Claro- turbio N/++ +/+++ +/+++ Mixta. RGR Recuento de hematíes;rcn Recuento de células nucleadas;pr Proteínas;NValor normal;+valor ligeramente aumentado;++valor aumentado de forma moderada; +++Valor aumentado de forma severa;pmn Neutrófilos;PIF Peritonitis infecciosa felina.

6 atlas de citología clínica citología de gánglios linfáticos Citología de un ganglio normal Diagnóstico citológico de linfadenitis Los ganglios linfáticos normales se caracterizan por la variabilidad celular. Por lo tanto, en las extensiones citológicas de un ganglio normal se advierte la presencia de diferentes tipos celulares (fig. 5). Figura 5. Citología de un ganglio normal ND CL La célula predominante en un ganglio normal es el linfocito pequeño, que debe constituir un 75-95% de la población total. El 5-25% restante está formado por una mezcla de otros tipos celulares, con mayor número de linfocitos de tamaño medio. El número de linfoblastos y de células plasmáticas es bajo, normalmente inferior al 5% (fig. 6). Ocasionalmente, se observa un pequeño número de células inflamatorias (neutrófilos.- 0.1%, macrófagos %, eosinófilos.- 0.3% o mastocitos %). En los gatos es frecuente encontrar un número superior de mastocitos, incluso en ausencia de eosinófilos. No es raro observar mitosis en ganglios normales, pero en número escaso y sin atipias significativas. Figura 6. Citología de un ganglio normal en la que se observa un predominio de linfocitos pequeños; el número de linfocitos de tamaño medio y linfoblastos es escaso. Figura 7. Linfadenitis purulenta; se observa un incremento del número de neutrófilos no degenerados (inflamación aséptica). En general, la linfadenitis se caracteriza por el incremento en el número de células inflamatorias, que, en casos extremos, pueden llegar a predominar sobre las células linfoides. Aunque pueden aparecer inflamaciones puras, es frecuente que se observe una mezcla de las diferentes células inflamatorias (neutrófilos, macrófagos, eosinófilos y mastocitos). Los linfocitos pequeños se mantienen como el tipo celular linfoide predominante, aunque aumenta ligeramente el número de linfoblastos y células plasmáticas. Los ganglios afectados por linfadenitis purulenta (inflamaciones agudas, de origen séptico o aséptico) presentan un aumento del número de neutrófilos que supera el 5% de la población total (fig. 7). En procesos sépticos, presentan caracteres degenerativos; si existen bacterias, son más fáciles de observar en las áreas periféricas de la extensión. En casos de linfadenitis crónica se observa un aumento del número de macrófagos. En ocasiones, puede observarse fagocitosis del agente etiológico responsable del proceso (amastigotes de leishmanias, hifas y otras estructuras fúngicas). Pueden aparecer células gigantes multinucleadas o células epitelioides. Las infecciones por micobacterias suelen producir una respuesta granulomatosa pura, mientras que las enfermedades fúngicas (aspergilosis (figs. 8a y 8b), histoplasmosis, blastomicosis, coccidiomicosis, criptococosis (figs. 9a y 9b)) o parasitarias suelen cursar con reacciones mixtas piogranulomatosas. La incidencia de procesos fúngicos en España es escasa; por el contrario, la de enfermedades parasitarias, como la leishmaniosis, es muy elevada, por lo que esta enfermedad constituye el principal diagnóstico diferencial de la linfadenitis crónica (figs. 10a y 10b). 3 1 Linfocito pequeño; 2 Linfocito de tamaño medio; 3 Linfoblasto; 8 Eosinófilo; ND Núcleo desnudo; CL Cuerpo linfoglandular. Los ganglios que responden a procesos de hipersensibilidad presentan un aumento significativo de eosinófilos (mayor del 3%) y mastocitos (menor del 3%) (fig. 11). La linfadenitis eosinofílica también forma parte del complejo del granuloma eosinofílico felino y de procesos parasitarios, incluyendo microfilarias.