Estrategias de control del Virus del Síndrome de la Mancha Blanca. Dr. Arturo Sánchez Paz
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- José María Torregrosa Castro
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1 Estrategias de control del Virus del Síndrome de la Mancha Blanca Dr. Arturo Sánchez Paz
2 WSSV: un patógeno letal para camarones Datos:
3 WSSV: un patógeno letal para camarones Extremadamente virulento y letal (mortalidades masivas % en 5 días) Relación filogenética distante con otros DNA virus (Whispovirus, Nimaviridae) Genoma muy grande ( kpb) Infecta un amplio rango de hospederos (~100 especies de crustáceos, y rotíferos y poliquetos) (Sánchez-Paz et al., 2010) Más virulento conforme su genoma disminuye su tamaño (Zwart et al., 2010) No hay tratamientos terapéuticos o profilácticos.
4 Productos derivados de plantas Extractos de plantas de origen marino o terrestre con actividad antiviral contra el WSSV. Detalles importantes a considerar. Uso correcto de controles. Extracto acuoso de Cynodon dactylon y extracto metanolico de Momordica charantia con potente actividad anti-wssv: 100% sobrevivencia de Penaeus monodon (10-15 g) (Balasubramanian et al., 2007)
5 Productos derivados de plantas Los extractos de ambas plantas se mezclaron con el inoculo viral, se incubó 3 h a 29 C, y posteriormente se administró vía intramuscular. Que efecto tuvieron los compuestos del extracto sobre el inóculo viral? Se ha reportado que viriones de WSSV pierden su capacidad infectiva al mantenerlos 4 h en agua de mar (He et al., 1999).
6 Productos derivados de plantas Fucoidan de algas pardas (Sargassum polycystum y Cladosiphon okamuranus): reducción significativa de mortalidad (sobrevivencias máximas de 93 y 77% 10 dpi, respectivamente) de camarones infectados con WSSV (Takahashi et al., 1998; Chotigeat et al., 2004).
7 Productos derivados de plantas Se sugiere que el fucoidan inhibe el acceso de WSSV a las células blanco del camarón. Administración oral. Inóculo con carga viral desconocida. Y el inóculo diluido en agua de mar (1:8000) por 2.5 h. En todo caso es necesario dilucidar el mecanismo de acción.
8 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
9 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral Bustillo-Ruíz et al., 2009
10 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
11 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral VP31, VP36A, VP36B o VP281, VP110, VP136A, VP187 y VP664 motivo RGD. RGD: ligando con integrinas en la superficie celular. Uso de péptidos sintéticos para bloquear receptores de integrina. Sin efecto inhibitorio (Jiravanichpaisal et al., 2006).
12 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral Uso de péptido sintéticos RGDT para bloquear receptores de integrina. Efecto inhibitorio (Li et al., 2006) RGDT? T brinda mayor especificidad y afinidad a la interacción virus-célula hospedero (Plow et al., 2000).
13 Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral Uso de anticuerpos contra proteínas de WSSV. Resultados muy alentadores (van Hulten et al., 2001b; Yi et al., 2004; Musthaq et al., 2006, Chen et al., 2010; Patil et al., 2011). 1 Ab 2 Abs 3 o 4 Abs
14 Atacando el proceso de replicación viral Replicación viral: punto crítico para su supervivencia. Comprensión de los mecanismos de replicación del WSSV: desarrollo de agentes terapéuticos efectivos anti-wssv. Poca información al respecto. Difícil encontrar compuestos que limiten la replicación viral sin interferir con procesos celulares del hospedero.
15 Atacando el proceso de replicación viral WSSV no depende del genoma del hospedero para replicarse. Genoma de WSSV: ribonucleotido reductasa (RR), timidilato sintasa (TS), desoxiuridin-trifosfato nucleotidohidrolasa (DTNH) y DNA polimerasa (DNApol).
16 Atacando el proceso de replicación viral La timidilato sintasa (TS) de WSSV un blanco muy interesante!!! Homodímero obligatorio Dos sitios activos. Entre ambos monomeros existe una interface que permite su unión
17 Atacando el proceso de replicación viral La secuencia de la a-helice N-terminal de la interface de la TS de WSSV muy diferente a la de camarón. WSSV MEG-EHQYLNLVREIL 15 Shrimp MRHDEYQYLDLIRQIM 16 *. *:***:*:*:*: Desarrollo de un inhibidor que se ligue específicamente a la interface del monomero viral, con baja afinidad por la enzima del camarón (Arvizu-Flores et al., 2009).
18 Atacando el proceso de replicación viral RNAi: su uso contra WSSV ha sido ampliamente divulgado (Robalino et al., 2004; Westenberg et al., 2005; Robalino et al., 2005; Robalino et al., 2007; Kim et al., 2007; Xu et al., 2007; Wu et al., 2007; Ongvarrasapone et al., 2008; Sarathi et al., 2008a; Sudhakaran et al., 2011; Mejía-Ruíz et al., 2011)
19 Atacando el proceso de replicación viral
20 Atacando el proceso de replicación viral
21 La realidad Gran esfuerzo para desarrollar un agente terapéutico contra el WSSV. Los resultados obtenidos son promisorios y exigen mayor investigación. Áreas de oportunidad claras en las que se debe profundizar. La mayoría de los tratamientos mencionados se administran vía intramuscular u oralmente.
22 La realidad La inyección de millones de organismos en una granja: tarea físicamente demandante Esta vía de administración no es factible para animales tan pequeños (Johnson et al., 2008).
23 La realidad Vía de administración oral No se asegura la administración de dosis mínimas requeridas, ni la misma dosis para toda la población. Se desconoce si el tratamiento es totalmente asimilable por las células blanco, o si sufre algún efecto durante la digestión. Efectos secundarios? Impacto ecológico? Lixiviación encapsulación: incremento en costos.
24 Perspectivas Avances recientes permiten visulaizar el desarrollo de un tratamiento antiwssv en el mediano plazo (quizás unos años). Aún se requiere una gran cantidad de estudios. Autorización de los órganos sanitarios reguladores. Producción a gran escala. Precios accesibles.
25 Estrategias de control del Virus del Síndrome de la Mancha Blanca Dr. Arturo Sánchez Paz Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste S. C. (CIBNOR) Hermosillo, Sonora.
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