Club de Inmunohistoquímica y Biología Molecular. Mª Dolores Lozano Escario Clínica Universidad de Navarra. Pamplona.

Transcripción

1 Club de Inmunohistoquímica y Biología Molecular Mª Dolores Lozano Escario Clínica Universidad de Navarra. Pamplona.

2 Cuando me invitan a dar charlas un poco filosóficas pienso que mi vida profesional está acabada Dr. JR Valentí. Especialista en Traumatología y Cirugía Ortopédica. Clínica Universidad de Navarra.

3

4

5 Marzo Abril 1995

6

7

8 Abril-Mayo 1995

9 Junio Departamento de Anatomía Patológica Clínica universidad de Navarra. Pamplona.

10

11

12

13 HPV en citología ginecológica.

14 Desarrollo de la PAAF Técnicas de punción con TAC, ecoendoscopia, broncoscopia, EBUS Bloques celulares, biopsias pequeñas.

15

16 Rudolf Virchow ( ) Teoría celular:la célula es la unidad elemental de la estructura y formación de todos los seres vivos. Toda célula procede de otra célula Teoría general de la enfermedad basada en tres principios: Principio de la localización: no hay "enfermedades generales", todo proceso morboso se halla anatómicamente localizado. Principio de la lesión celular: si se quiere conocer lo que en la enfermedad es verdaderamente fundamental hay que recurrir al estudio de la célula. Principio del peligro: La vida de la célula enferma lleva en sí una cierta idea de "peligro", y esto es lo que básicamente distingue a la enfermedad de la salud en cuanto modos de vida.

17 Completo, de calidad y reproducible La Anatomía Patológica Humana (AP) es la rama de la Medicina que se ocupa del estudio, por medio de técnicas morfológicas, de las causas, desarrollo y consecuencias de las enfermedades. El fin último es el diagnóstico correcto de biopsias, piezas quirúrgicas, citologías y autopsias. La Anatomía Patológica es una especialidad médica que posee un cuerpo doctrinal de carácter básico que hace que sea, por una parte, una disciplina académica autónoma y, por otra, una unidad funcional en la asistencia médica.

18 Patología: Estudio (logos) del sufrimiento (pathos) Ciencia Básica Práctica Clínica Dimensión Asistencial Investigación Aplicada Estudio de cambios estructurales y funcionales en células, tejidos y órganos que subyacen la enfermedad Técnicas: morfológicas inmunológicas microbiológicas moleculares

19

20

21

22 Técnicas complementarias en patología 11 mm Desarrollo de lineas celulares FISH Inmunocitoquímica Estudios moleculares

23

24

25

26 INTRODUCCIÓN

27 Tumores morfológicamente iguales Alteraciones moleculares diana diferentes Necesidad de información molecular Calidad de las muestras diagnósticas Desarrollo de técnicas reproducibles para estandarizar las guías terapeúticas Diagnóstico AP completo

28 65-yr-old male smoker, squamous KRAS Mt 54-yr-old male never-smoker, adenoca Interpatient Heterogeneity in the Molecular Characteristics of NSCLC ALK fusion In 2012: Patients With the Same Diagnosis and Clinical Features (Stage IV NSCLC) Most oncologists would agree that these patients have very different malignancies Most oncologists would agree that these patients should receive different therapy 39-yr-old female never-smoker, adenoca EGFR Mt

29 Demanda de diagnósticos precoces, certeros, rápidos y mediante métodos mínimamente invasivos Desarrollo de las técnicas de imagen Pacientes metastásicos Biopsias PAAF

30 Enero Enero CUN-Departamento de Anatomía Patológica 590 CPNM 441 citología (PAAF); 36 con Bx 149 biopsia / resección; 32 con PAAF previa provide accurate diagnosis manage the tissue in a way that immunohistochemical and/or molecular studies can be performed use and integration of immunohistochemical (i.e. TTF- 1/p63), histochemical (i.e. mucin stain), and molecular studies

31 Técnicas complementarias en muestras citológicas y biopsias pequeñas Líneas celulares FISH Immunocitoquímica Estudio mutacional

32 Immunocitoquímica CD20 BCL-2 Citometría de flujo Estudio Molecular

33 S-100 Melan A FINAL REPORT SAMPLE PROCUREMENT IN PATIENTS WITH SUSPECTED METASTATIC MELANOMA FINE NEEDLE ASPIRATION Direct FNA EUS guided FNA Bronchoscopy guided FNA SURGICAL SPECIMEN IMPRINTS EYE IMPRINTS CYTOLOGICAL DIAGNOSIS BY PATHOLOGIST ACCURATE DIAGNOSIS IHQ (Melan A, S100, HMB45) Select smear for molecular testing containing more than 40% tumour cells. DNA EXTRACTION PCR AMPLIFICATION DIRECT SEQUENCING Exon 15 of BRAF gene Exons 9,11,13 and 17 of c-kit gene V600E mutation in BRAF gene L576P mutation in c-kit gene

34 Varon 76 años, fumador 80 paq/año Citologia esputo positiva para ca. Escamoso Masas pulmonares bilaterales, adenopatías mediastínicas Mts. Hepáticas, óseas, pleurales y cerebrales PAAF con broncoscopio de adenopatías hiliares

35 2011C1865

36 TTF C1865 p63

37 Del E746-S752 Exón 19

38 Del E746-S752 Exón 19 Respuesta parcial a los 6 meses del incio de TKIs

39 Mujer 72 años, no fumadora Enfermedad diseminada (origen desconocido) Metástasis cerebrales Se le había ofrecido únicamente tratamiento paliativo

40 PAAF directa de un nódulo supraclavicular TTF-1 Ac metastásico de probable origen pulmonar CK-7 del L747-E749, A750P Exon 19

41 Tratamiento con TKI (Tarceva)

42

43

44

45

46

47

48

49 ...los nuevos test moleculares no son una amenaza para los patólogos, sino una oportunidad para incorporar las nuevas tecnologías y desarrollarlas. Los citopatólogos juegan un papel primordial puesto que se les pide hacer más con menos muestra... Naylor and Ramzy, 2003

50 Muchas gracias a todos!

51