Monitoreo de los serotipos de Rotavirus en la Región

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Yolanda Chávez Ruiz
hace 6 años
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1 Immunization Unit / FCH Monitoreo de los serotipos de Rotavirus en la Región Simposio Subregional de Nuevas Vacunas: Neumococo y Rotavirus San José, Costa Rica agosto, 2007

2 Monitoreo de los Serotipos de RV Objetivos: Conocer la epidemiología de los rotavirus para la toma de decisión sobre la implementación de una vacuna Medir el impacto de la vacuna Ajustar la formulación de las vacunas existentes para que reflejen la prevalencia de las cepas en diferentes áreas geográficas, caso las vacunas existentes no confieran inmunidad hetorotípica a serotipos de importancia regional

ROTAVIRUS Características generales: Estructura: En forma de rueda (rota) Transmisión: fecal oral Alta resistencia a condiciones ambientales (10 10 10 12 partículas/g de heces) 7 serogrupos - A-G

3 ROTAVIRUS Características generales: Estructura: En forma de rueda (rota) Transmisión: fecal oral Alta resistencia a condiciones ambientales ( partículas/g de heces) 7 serogrupos - A-G Grupo A-C asociados a infecciones en los seres humanos Grupo A - más importante agente etiológico por causar gastroentererite severa aguda en niños y jóvenes VP4 y VP7- Son las proteínas más importantes do vírus desde el punto de vista inmunológico, son los antígenos virales responsables por la inducción de Ac neutralizantes y por lo tanto utilizadas en la clasificación de los serotipos y desarrollo de vacunas

4 Clasificación RV en serotipos y genotipos Serotipos y Genotipos- diferencias entre las ptns. de la capa externa del vírus formada por las ptns. VP7 y VP4 VP7 o tipo G (glicoproteína)- G serotipos y G genotipos determinados por las diferencias existentes en la ptn. VP7 de los RV VP4 o tipo P (sensible a la protease) P serotipos y P genotipos determinados por las diferencias existentes en la ptn. VP4 de los RV (P) (G)

5 Classificacion de los RV A: P sorotipos ou [P] genotipos P serotipo VP4 [P] genotipo 4 P sorotipo [P] genotipo P1A [8] P1B [4] P2A [6] P3 [9] P4 [10] P5A [3] P6 [1] P8 [11] P11 [14] P12 [19] P [25] Rahman et al., 2005

6 Classificacion de los Rotavirus A: G sorotipo ou G genotipo G serotipo VP7 G genotipo G sorotipo G1 G2 G15 G genotipo G1 G2 G15

Serotipos Rotavirus A 10 serotipos G y 10 genotipos G G1-G6; G8-G10 y G12 9 serotipos P / 10 genotipos P P1, P2A, P3, P4, P5A, P7, P8, P11 y P12 P[3]-P[6], P[8]-P[11], P[14] y P[19] > 45 posibles P-G

7 Serotipos Rotavirus A 10 serotipos G y 10 genotipos G G1-G6; G8-G10 y G12 9 serotipos P / 10 genotipos P P1, P2A, P3, P4, P5A, P7, P8, P11 y P12 P[3]-P[6], P[8]-P[11], P[14] y P[19] > 45 posibles P-G combinaciones 5 globalmente comunes: serotipos G 1, 2, 3,4, 9 y los genotipos P [8] y P[4] en las combinaciones: P[8]G1; P[8]G3; P[8]G4; P[8]G9; P[4]G2 Cepas regionales importantes: G5 en Brasil (20%); G8 en Malawi (80%); G9 en Australia (20%) (P) (G)

8 REGISTRO Y RECOLECCION DE DATOS EN FICHA CLINICA - EPIDEMIOLOGICA TOMA DE MUESTRA MANTENIMIENTO DE MUESTRA EN CADENA DE FRIO (2 8ºC) TRASLADO A LABORATORIO DIAGNOSTICO (2-8ºC) REGISTRO ALICUOTADO Y ALMACENAMIENTO (-20ºC) ANALISIS POR ELISA ROTAVIRUS (+ y -) INFORME RESULTADO ROTAVIRUS (+) ENVIO AL LABORATORIO DE REFERENCIA BAJO CADENA DE FRIO PARA SEROTIPAGE Y GENOTIPIPAGE (G y P) INFORME RESULTADO

9 Diagnóstico de Laboratorio Muestras: 5-10 ml de heces de todos los casos sospechosos al primer contacto con el paciente o dentro de las 48 hs posteriores al ingreso hospitalario Transporte: +2 0 C y +8 0 C Obs: a) Las heces pueden ser almacenadas por no máximo 7 días en refrigeradora; C por varios meses; C infinitamente; temperatura ambiente hasta 4 horas (* con pérdida potencial de la infectividad) b) Evitar ciclos de congelación y descongelación

13 Diagnóstico de Laboratorio cont. Métodos para la detección y caracterización de los RV Detección: ELISA; PAGE; ME; RT-PCR antígeno viral / acido nucleico de RV Caracterización (identificación/genotipage): RT-PCR; PAGE; Secuenciaón P & G serotipos/genotipos Subgrupo y perfil electroforético del RNA (PAGE) Homologia genética con RV animal (genogrupagen)

14 Capacidad de diagnóstico de la Red de Laboratorios, Americas Detección por ELISA: Labs de hospitales centinelas y algunos Labs Nacionales Tipagen por RT-PCR; Secuenciación; PAGE: CDC/Atlanta, FIOCRUZ y IEC/Brasil, InDRE/Mexico, INS/Venezuela, Malbran/Argentina, UMSA/Bolivia, INS/Paraguay, LNS/Guatemala

15 Flujo del procesamiento de las muestras de heces y tipagen de las cepas Especimen (heces) - (03 alícuotas anadir 3 gotas de glicerol) Detección del antigeno de RV (ELISA) RV positivos (escoger 20-30% de los positivos con alta DO) Serotipage/genotipage G tipos (todas las muestras) P-genotipage RT-PCR (25-30% muestras) Monoclonal Ac (ELISA) o RT-PCR: serotipos G (G1 - G4, G9) G- no tipables P no tipables (5-10%) G-genototipage RT-PCR G-no tipables (5-10% total) Todas las G y P no tipables son secuenciadas

16 Métodos para la detección y caracterización de los RV ELISA RT-PCR P types G types A T G A T C G C C A T G G C A A T C A C G Secuenciaón del genoma

474 muestras analizadas en 5 continentes entre 1973-2003 Distribución

17 Distribuición geográfica RV A de acuerdo con la frecuencia de las combinaciones P/G Distribución global RV A, muestras analizadas en 5 continentes entre Distribución América Latina RV A,1.989 muestras colectadas entre (Brasil, Mexico, Chile, Argentina, Paraguay)

18 Cepas de RV Serotipadas (~ 110 muestras/país) America Latina, Serotipos/Países G1 G2 G3 G4 G9 Indet. Argentina 96% 0% 0% 0% 0% 4% Brasil 57% 1% 0% 2% 8% 31% Chile 21% 1% 0% 66% 0% 12% Colômbia 88% 0% 0% 0% 0% 13% Costa Rica 30% 0% 68% 2% 0% 0% R. Dominicana 46% 2% 21% 0% 0% 31% Honduras 100% 0% 0% 0% 0% 0% México 48% 3% 5% 11% 9% 23% Nicarágua 28% 3% 33% 20% 0% 16% Panamá 89% 4% 7% 0% 0% 0% Venezuela 42% 0% 13% 19% 0% 26% % Total 51% 1% 10% 18% 3% 17% N= 1240 Fuente: Linhares, AC

19 Distribución (%) de los serotipos de RV detectados América Central y Caribe, País G1 G2 G3 G4 G9 NT Mix G8 G12 Costa Rica 35% 0% 0% 25% 30% 10% 0% 0% 0% Honduras 0% 55% 5% 2% 9% 26% 3% 0% 0% Nicaragua 0% 0% 4% 70% 11% 11% 4% 0% 0% El Salvador 0% 47% 0% 0% 44% 6% 3% 0% 0% Guatemala 5% 37% 0% 0% 46% 4% 8% 0% 0% Guyana 74% 0% 26% 0% 0% 0% 0% 0% 0% Suriname 3% 0% 0% 0% 0% 3% 3% 84% 7% Jamaica 87% 0% 0% 0% 0% 13% 0% 0% 0% St. Lucia 0% 0% 40% 0% 53% 7% 0% 0% 0% St. Vincent 41% 0% 4% 0% 55% 0% 0% 0% 0% Trinidad 83% 0% 0% 4% 0% 4% 9% 0% 0% %Total: 19% 19,8% 5% 7,2% 26% 9% 3% 10,2% 0,8% Muestras tipadas CDC N= 366 muestras ( muestras; muestras)

20 Distribución de las cepas de Rotavirus circulantes Central America y Caribe, P[8]G2 1% P[8]G8 10% other 12% P[8]G1 19% P[6]G12 1% P[8]G9 26% P[8]G4 7% P[8]G3 5% P[4]4G2 19% N=366 Fuente: Jon Gentsch / CDC

21 Conclusiones La vigilancia intensificada de laboratorio en la Región ha mostrado: Patrones muy distintos de serotipos entre los países durante el mismo periodo Variabilidad regional de cepas circulantes Presencia de alta diversidad de cepas circulantes con sustitución temporal de cepas predominantes Redistribución entre los tipos comunes P y G Discreta predominancia del serotipo G9

22 Importancia del Monitoreo de las cepas de RV antes y después de la introducción de la vacuna conocimiento de las cepas circulantes origen de nuevas cepas circulantes impacto de la vacuna en las cepas circulantes recombinación in vivo con las cepas vacunales comprobar la protección heterotípica contra los serotipos no presentes en las vacunas desarrollo de vacunas específicas a los serotipos regionales

23 GRACIAS!!

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