VPH: Aspectos Relacionados a Laboratorio

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1 Family Community Health/Immunization Unit VPH: Aspectos Relacionados a Laboratorio Simposio Subregional de Nuevas Vacunas: Neumococo, Rotavirusy HPV Caracas, Venezuela, 29 y 30 de Enero de 2008

2 Epidemiología del Virus del Papiloma Humano Familia: Papillomaviridae > 100 tipos (40 transm. sexual) Vírus: DNA Alvo principal las células epiteliales y la mucosa: tracto anogenital, el oral (boca, garganta) y respiratorio Características generales: VPHs están relacionados con varios tipos de cáncer : cáncer del cuello del útero (cervicouterino) y cáncer de varios órganos ( amígdala, faringe, esófago, mama, próstata, ovario, uretra y de piel) El tiempo transcurrido entre la infección por el VPH la aparición de cáncer de cervix o pene es de aproximadamente unos 10 a 15 años. En conjunto se considera que un 80-90% de las infecciones se resuelven espontáneamente y de un 10-20% persisten y evolucionan a cáncer.

3 Caracteristicas: Las infecciones por VPH se pueden expresar en forma clínica, subclínica o latente. La manifestación clínica habitual de la infección son los condilomas acuminados, verrugas genitales, papilomas venéreos o verrugas venéreas Las infecciones por VPH pueden ser por múltiplos tipos ocurriendo al mismo tiempo o al longo de la vida Modo de Transmisión: Contacto sexual hasta 75% de las personas sexualmente activas ya se infectaran en algún momento de sus vidas, generalmente en los primeros años de actividad sexual La mayoría de las infecciones genitales por VPH tienen resolución espontánea sin síntomas en 2-18 meses, las que persisten pueden causar cáncer cervical

4 Clasificación del Virus del Papiloma Humano Los virus de papiloma humano se dividen en dos grandes grupos: Alto y Bajo riesgo (de provocar cancer). VPH de Bajo Riesgo: VPH 6, 11, 40, 42, 53, 54 y 57 ( provocan verrugas genitales, también llamado condiloma acuminado y cresta de gallo, están en este grupo) VPH de Alto Riesgo: VPH 16, 18, 31, 35, 39, 45, 51, 52, 56 y 58 (mayor frecuencia asociados en los casos de cáncer de cuello uterino) VPH 16 y el 18 los más importantes dado que se encuentran con más frecuencia vinculados al cáncer cervicouterino

5 Distribución continental del cáncer cervical asociado con los tipos HPV-16 y HPV-18 Fuente: Agosti et all, 2007 NEJM Globocan 2002 Annual Estimate in THE AMERICAS 86,532 NEW CASES 38,435 DEATHS Source: Ferlay,, 2002

6 Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con cáncer cervical, Américas Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

7 Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con citología normal, Américas Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

8 HPV type Diez más frecuentes tipos de VPH en mujeres con citología normal por sub-región, Américas Datos no disponibles para Región del Caribe Fuente: WHO/ICO Information Centre on HPV and Cervical Cancer

9 Función del laboratorio en la vigilancia del VPH 1. Definir la carga de la enfermedad causado por diferentes genotipos de VPH para la toma de decisión de introducción de la vacuna - determinar el predominio das diferentes fases da enfermedad (cáncer cervical invasivo, displasia cervical, etc) y los tipos de VPH asociados y en diferentes áreas geográficas 2. Obtener datos epidemiológicos de la incidencia (edad-específica) y predominio del VPH para el diseño de programa eficaces de vacunación - establecer seroprevalencia de VPH en la populación para la introducción de la vacuna 3. Monitorear la eficacia de la vacuna a través de la reducción del predominio y incidencia de la infección y la enfermedad por los VPH contenidos en la vacuna 4. Determinar la protección inmune de la populación pos vacunación

10 Papel do laboratorio en apoyo a la vigilancia del VPH Acciones: armonización y la estandardización internacionales de los procedimientos del laboratorio para apoyar la introducción y medir el impacto de la de las vacunas en poblaciones En andamiento: Desarrollo de los reactivos estándard internacionales para el uso en análisis de la detección de DNA y de anticuerpo anti-hpv para facilitar la evaluación de los datos virológicos y de la inmunogeneticidad. Desarrollo de los SOPs para uso de los reactivos estándardizados internacionales en análisis de la detección de DNA y de anticuerpo anti-hpv. Crear una red internacional de laboratorios de HPV para mejora y armonización de los métodos de detección de HPV en los estudios de investigación y de vacunación por todo el mundo - laboratorios globales, regionales y nacionales

11 Establecer Red global de laboratorios de HPV Laboratórios Globales Laboratórios Regionales & Sub-regionales Laboratórios Nacionales/Sub-nacionales

12 Red de Laboratorios de VPH, Americas CDC * * 1 * Global Specialized Lab 2 Regional Reference Lab 6-8 National Laboratories

13 Métodos de Laboratorio para el diagnostico del VPH Métodos principales: in situ hybridization signal amplification (Hibrid capture second generation [HC2] assay target amplification (PCR variants) serología In situ hybridization sondas de DNA aplicadas directamente al tejido (similar inmunoistoquímica ) Obs. Método tipo específico pero trabajoso, permite la visualización del vírus en un contexto morfológico Signal amplification [HC2]- sondas de RNA específicas para algunos VPH de alto riesgo (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59 y 68) y algunos VPH de bajo riesgo (6,11,42,43 y 44) Obs. excelente comparación inter-laboratorio, resultados no tipo específico pero confirma la presencia de los VPHs de alto y bajo riesgo, el único método aprobado por el FDA para teste de VPH cervical.

14 Métodos de Laboratorio para el diagnostico del VPH cont Target amplification PCR método más utilizado pero con más variables que en el método de HC2, la sensibilidad y especificidad pueden variar dependiendo de varios factores Real time PCR cuantifica el numero de partículas de VPH, importante marcador para medir el factor riesgo de desarrollar cáncer cervical (alta viremia) Serología- IgM y IgG ELISA utilizando L1 virus like particle VLPs). Tipo específico y indica infección pasada o actual Prueba de Neutralización

15 Retos para el diagnostico de VPH Falta de algoritmo estandardizado Falta de conocimiento de la asociación entre VPH x cáncer cervical Alto costo de las pruebas de DNA de VPH Falta de una prueba comercial de bajo costo Falta de pruebas estandardizadas validadas y de bajo costo para VPH Falta de recursos para apoyar la implementación de la vigilancia del VPH

16 GRACIAS!!

17 Cumulative cervical cancer cases due to the most frequent HPV types in Latin America % % % % 80.0% 82.7% 85.4% 87.6% MUÑOZ et al: 2004

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