SEIMC 2016 EL PAPEL CRÍTICO DEL LABORATORIO DE REFERENCIA DE MICROBIOLOGÍA EN EL PROGRAMA PIRASOA

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1 EL PAPEL CRÍTICO DEL LABORATORIO DE REFERENCIA DE MICROBIOLOGÍA EN EL PROGRAMA PIRASOA Servicio de Microbiología Hospital Universitario Virgen Macarena Unidad Intercentros de Enfermedades Infecciosas, Microbiología Clínica y Medicina Preventiva Universidad de Sevilla

2 Programa PIRASOA Programa integral de prevención y control de las infecciones Relacionadas con la asistencia sanitaria y uso apropiado de los antimicrobianos Secretaría General de Salud Pública, Inclusión Social y Calidad de Vida Dirección General de Asistencia Sanitaria y Resultados en Salud Dirección General de Calidad, Investigación, Desarrollo e Innovación 22 de febrero de 2013

3 Definición Es un programa de calidad asistencial, para mejorar el pronóstico de los pacientes, reduciendo la mortalidad y las secuelas que producen las infecciones, en particular las relacionadas con la asistencia sanitaria (IRAS) y las causadas por las bacterias multirresistentes (BMR). Beneficio económico, por la reducción de los gastos directos que genera el diagnóstico y el tratamiento de los pacientes con IRAS y por BMR.

4 Objetivos generales 1. Reducir la incidencia de IRAS hasta alcanzar el nivel de los países europeos con mejores indicadores. 2. Optimizar el uso de antimicrobianos hasta alcanzar el nivel de los países europeos con mejores indicadores.

5 Estructura y organización Hospitales - Equipo de IRAS - Equipo de PROA UGCs - Referentes Comité científico Plataforma digital Distritos - Equipo de PROA Laboratorio de referencia UGCs - Referentes

6 Apoyo institucional Objetivos del programa PIRASOA: CONTRATO PROGRAMA del SAS con los Distritos y Hospitales ACUERDOS DE GESTIÓN de los Distritos y Hospitales con las UGC

7 Laboratorio PIRASOA Antecedentes 1. Reconocimiento como laboratorio de referencia (UPRA) en noviembre de Finalidad: tipado molecular de bacterias MR y ofrecer información relevante en tiempo real para el control de brotes producidos por bacterias MR.

8 Objetivos (I) Servir de apoyo al Programa PIRASOA en la detección, investigación y control de brotes por bacterias MR. Determinar la relación clonal de los aislamientos de patógenos nosocomiales MR mediante la combinación de pruebas fenotípicas y genotípicas en tiempo suficiente para poder tomar medidas de control adecuadas. Estudio fenotípico y genotípico de los mecanismos de resistencia de patógenos nosocomiales de interés y que puedan favorecer el desarrollo de medidas terapéuticas y/o preventivas.

9 Objetivos (II) Identificación y seguimiento de clones de microorganismos MR que circulen en centros hospitalarios de la Comunidad. Creación de una base de datos con los genotipos de interés. Servir de centro centinela para la detección de nuevos mecanismos de resistencia en patógenos nosocomiales o de la comunidad.

10 Metodología Detección de mecanismos de resistencia: Marcadores fenotípicos Marcadores genotípicos: PCR +/- secuenciación Identificación molecular: REP-PCR, PFGE, MLST, Secuenciación Base de datos históricas

11 Primer paso RESISTENCIA TIPADO INFORME Solicitud de estudios. Recepció n de aislados Flujo de trabajo Pruebas de sensibilidad Test rápidos PCR de genes diana PFGE MLST Comparació n con bases de datos Preliminar Definitivo

12 PFGE Normalización Comparación con perfiles previos MLST Nuevos aislados Perfiles de la base de datos de Andalucía Comparación con previos

13 Tiempos de respuesta Informe preliminar: Informe final: < 10 dias < 21 dias Estos tiempos pueden variar de acuerdo a la complejidad del brote

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15

16 Actividad Octubre 2013-Diciembre 2015 Año Aislados Episodios Aislados/ episodio Centros

17 Enterobacteriaceae K. pneumoniae K. oxytoca 2 4 Others No fermentadores A. baumannii P. aeruginosa 7 15 Others 6 0 Gram positivos Staphylococcus spp 6 2 E. faecium 0 3 Microorganismos Incremento 60%

18 Determinantes de resistencia Epecies/determinante K. pneumoniae BLEE Carbapenemasa Carbapenemasa+BLEE Carbapenemasa+BLEE+pAmpc 0 1 pampc 11 4 Carbapenemasa y BLEE negativo 1 3

19 Determinantes de Resistencia Especies A. baumannii OXA OXA OXA-24/ Especies Otras Enterobacteriaceae BLEE 1 7 Hiper OXY 1 0 Carbapenemasa 2 11 Carbapenemasa+BLEE 0 1 Negativo 4 23

20 Center H. San Cecilio 27 0 H. Reina Sofia H. Virgen de la Victoria H. Alto Guadalquivir Andujar H. San Juan de Dios 3 30 H. Jerez 7 31 H. Costa del Sol 7 25 H. Regional de Málaga 9 6 H. Virgen Macarena 6 22 H. Valme 3 49 H. Virgen del Rocio 0 13 H. Virgen de las Nieves 5 13 H. de la Línea 5 4 H. la Inmaculada Nuercal-Overa 2 3 H. Serrania Malaga 2 4 HARE Puente Genil 5 2 H. Infanta Margarita Cabra 0 9 H. Montilla 2 0 H. Pozoblanco 1 0 H. Riotinto 1 0 HARE Guadiato 3 1 H. Alcala la Real 1 0 H Utrera 0 3 H. Linares 0 2 H. Torrecárdenas 0 6 Aislados /Hospital

21 K. pneumoniae Clones relevantes Productores de Carbapenemasas KPC-3 ST512 (n = 45) ST258 (n = 5) OXA-48 +CTX-M-15 ST15 (n = 7) ST11 (n = 5) ST405 (n = 1)* producer of OXA-245+CTX-M-15 Productores de BLEEs CTX-M-15 ST307 (n = 23)* ST405 (n = 7) CTX-M-15+SHV-2a ST25 (n = 8)* SHV-2 ST870 (n = 10)* *circunscritos a un solo centro

22 Diseminación de K. pneumoniae productora de KPC en la cuenca mediterránea KPC-2/ST258 KPC-3/ST258 Woodford, J Antimicrob Chemother 2008; Kitchel, Antimicrob Agents Chemother 2009; Samuelsen, J Antimicrob Agents Chemother 2009; Baraniak, Antimicrob Agents Chemother 2009; Pounaras J Antimicrob 2009; Warburg, J Antimicrob Chemother 2012; López-Cerero, Int J Antimicrob Agents 2015 KPC-3 ST512 Israel

23 K. pneumoniae ST512 productor de KPC August 2012 Córdoba Transfer from Italy Abril, 2013 Cabra Febrero, 2014 Montilla Abril, 2014 Pozoblanco Mayo, 2014 Sevilla Mayo, 2014 Jerez Agosto, 2014 Alcala la Real Agosto, 2014, Peñarroya-Pueblonuevo Diciembre, 2014 Puente Genil Febrero, 2015 Andujar

24 K. pneumoniae ST512 KPC-3 en 2015 Centro Periodo de los aislados H alto Guadalquivir Andujar Febrero 2015 Mayo 2015 Agosto 2015 H Infanta Margarita (Cabra) Septiembre 2015 H SAS Jérez Enero-abril 2015 HARE del Guadiato Julio 2015

25 Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] PFGE EC Aparición de K. pneumoniae ST258 productor de KPC-3 ST258 una variante alélica de ST PFGE EC ST gapa infb mdh pgi phoe rpob tonb Nº Ref Muestra Fecha Origen Centro clon exudate. Orina. Orina. F rectal. F rectal. Orina. F rectal. F rectal. Orina. F rectal. Sangre. F rectal. F rectal. 26/06/12. 27/02/15. 05/03/15. 05/03/15. 25/02/15. 20/11/15. 14/12/15. 16/09/15. 25/10/15. 17/09/15. Cama BOX-5. 22/09/15. 05/12/15. 11/12/15. 09/12/15 caso H U Reina Sofia H de Jerez H de Jerez H de Jerez H U Reina Sofia H Virgen de las Nieves H Virgen de las Nieves H Infanta Margarita H de Jerez H Infanta Margarita H Infanta Margarita H Virgen de las Nieves Aparición de un pulsotipo idéntico a aislados del clon ST512, pero pertenecientes al clon ST258 en H. Virgen de las Nieves noviembrediciembre de 2015 H Virgen de las Nieves H Virgen de las Nieves ST512 ST512 ST512 ST512 ST512 ST258 ST258 ST512 ST512 ST512 ST512 ST258 ST258 ST258

26 K. pneumoniae ST405 productor de CTX-M-15 Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] PFGE EC PFGE EC CO-10 CO-13 CO-8 CO-1 CO-11 CO-14 CO-15 CO-16 CO-17 CO-18 CO-2 CO-3 CO-4 CO-5 CO-6 CO-7 CO CO-12-Felipe OXA-245+CTX-M-15 OXA-48+CTX-M-15 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1 +TEM-1. 16/09/14. 08/06/15.? /11/15. 10/11/15. 26/12/15. 11/01/16. 04/11/15. 10/11/15. 12/11/15. 25/07/15. H Reina Sofia. H Costa del Sol. H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H Reina Sofia H La Paz H Reina Sofia. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H Torrecardenas. H La Línea 1er brote Neonatología H Virgen de las Nieves 2013 Brote en la comunidad de Madrid 2º brote Neonatología H Torrecárdenas 2015 J. Machuca et al. JAC 2016

27 K. pneumoniae productor de OXA-48+CTX-M-15 ST15 4/2014 H Virgen de la Victoria 6/2014 H S Juan de Dios 10/2014 H Regional Malaga 5/2015 H Virgen de las Nieves 10/2015 H Valme 9/2015 H Infanta Margarita ST431 (ST15 variante) 4/2015 H Costa del Sol

28 K. pneumoniae ST15 productor de OXA-48 + CTX-M-15 Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] PFGE EC PFGE EC /# /# OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48. OXA-48+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1+SHV-1. 13/11/15 OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+BLEE. OXA-48+BLEE OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+BLEE. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+SHV-1. OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1 OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1 OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+TEM-1. OXA-48+CTX-M-15+TEM-1. OXA-48+CTX-M /09/15. 15/09/15. 21/01/14. 10/10/14. 07/05/14. 14/09/13. 16/09/13. 03/04/14. 29/08/14. 01/09/14. 03/12/14. 09/01/15. 19/01/15. 10/02/15. 29/10/14. 14/09/13. 26/10/14. 24/11/14. 03/09/14. 25/12/14. 20/03/13. 25/05/ /3/14. 02/10/15. 22/04/15. 27/10/14. 30/10/14. 22/10/14. 13/10/14. 14/10/14. 12/12/14. 10/05/14. 09/06/14. H Infanta Margarita. H Infanta Margarita. H U Reina Sofia. H Maritimo. H Valme H U Virgen de la Victoria. H U Virgen Macarena. H U Virgen Macarena H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H Carlos Haya. H U Virgen Macarena. H Carlos Haya. H Maritimo. H Pascual. H U Virgen Macarena. H U Virgen Macarena. H Virgen de las Nieves. H U Virgen Macarena. H Valme. H Costa del Sol. H Carlos Haya. H Carlos Haya. H Carlos Haya. H Carlos Haya. H Carlos Haya. H Maritimo. H U Virgen de la Victoria. H San Juan de Dios

29 K. pneumoniae productor de CTX-M-15 +/- OXA-48 grupo ST11 5/2014 H Jerez 9/2014 H Virgen de la Victoria 3/2015 H Costa del sol 9/2015 H Linares

30 K. pneumoniae ST11 productor de CTX-M-15 +/- OXA-48 grupo Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-1.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] PFGE EC PFGE EC OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M-15. CTX-M-1. OXA-48+CTX-M-15 OXA-48+CTX-M-15 OXA-48+CTX-M-15. OXA-245+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M-15. OXA-48+CTX-M /12/14. 13/01/15. 20/07/14. 01/08/14. 02/03/15. 02/ /04/15. 02/05/14. 23/09/15. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H U Virgen de la Victoria. H Pascual. H Costa del Sol H U Virgen de la Victoria. H Costa del Sol. H de Jerez. H Linares

31 A. baumannii productor de OXA-23 ST2 2/2014 H. San Cecilio 6/2014 H S J Dios 10/2014 H V Victoria 12/2014 H V Macarena 3/2015 H A G Andújar 9/2015 H Costa Sol ST85 7/2014 H V Victoria

32 A. baumannii productor de OXA-24/40 ST2 6/2014 H S J Dios 2/2014 H V Macarena

33 A. baumannii productor de OXA-58 ST2 3/2015 H Regional Malaga 3/2015 H A G Andújar 8/2015 H Costa del Sol 2/2015 H Virgen Macarena ST98 2/2014 H A G Andujar

34 CMI. 2013

35

36 Agradecimientos

37 Cartera de Servicios (I) Resistencia a antimicrobianos Detección de resistencia a oxacilina (SARM) en Staphylococcus aureus. Detección de resistencia a vancomicina en Enterococcus spp. Detección e identificación de genes de beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) tipo TEM, SHV y CTX-M, más frecuentes en nuestro entorno, en enterobacterias. Detección e identificación de genes de AmpC plasmídicas y cromosómicas. Detección e identificación de genes de beta-lactamasas que hidrolizan carbapenems (carbapenemasas).

38 Cartera de Servicios (II) Tipado molecular o Genotipado Enterobacterias productoras de BLEE o carbapanemasas. Otras enterobacterias multirresistentes Acinetobacter baumannii Pseudomonas aeruginosa S. aureus resistente a meticilina. Enterococcus resistente a vancomicina

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