Resistencia Bacteriana en el Ecuador

Transcripción

1 Resistencia Bacteriana en el Ecuador Simposio interdisciplinar de investigación, Postgrados y vinculación con la comunidad Iliana Alcocer Negrete, Dra. Pontificia Universidad Católica del Ecuador Escuela de Ciencias Biológicas Laboratorio de Microbiología

2 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas Año 2004

3 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas

4 Interdisciplinaridad ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS FACULTAD DE MEDICINA Iliana Alcocer Jeannete Zurita Año 2009 Confianza Apoyo mutuo Grupos de trabajo Apoyo de la PUCE

5 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas Biología Bioanálisis Biología Medicina Biología Biología

6 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas Chef DRIII System Para análisis de clonalidad bacteriana por electroforesis de campo pulsado 1. PUCE 2. San Francisco 3. INH

7 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas Sistema de fotodocumentación Molecular Imager Gel Doc XR+ BioRad

8 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas

9 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas

10 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas

11 Laboratorio de Microbiología Escuela de Ciencias Biológicas

12 Antimicrobianos Los antimicrobianos son compuestos relativamente sencillos, producidos por bacterias u hongos que atacan específicamente a las bacterias. Tienen capacidad, en baja concentración, de inhibir el crecimiento bacteriano Pueden ser naturales, sintéticos o semisintéticos.

13 Antimicrobianos

14 1940 Alexander Fleming, 1928 Desde el descubrimiento de la penicilina, se han descubierto una docena de nuevos tipos de antimicrobianos y optimizado o sintetizado cerca de una centena.

15 Resistencia bacteriana Cepas resistentes raras Exposición a antimicrobianos Cepas resistentes predominantes

16 Resistencia Introducción en la terapia Aislamiento de cepas resistentes Capacidad adaptativa de las células bacterianas Alta tasa de diseminación por transferencia horizontal de genes de resistencia

17 Resistencia bacteriana Patógeno Patógeno Resistente Prevención de la transmisión Resistencia a los antimicrobianos Uso acertado Prevención de la infección Infección Diagnóstico y tratamiento eficaces Uso de antimicrobianos

18 Preocupación mundial Resistencia a betalactámicos: BLEEs AMP-C Carbapenemes Resistencia a quinolonas Resistencia a aminoglucósidos

19 BLEE Diseminación de la Resistencia bacteriana Beta lactamasas de espectro extendido Enzimas capaces de conferir a la bacteria resistencia a penicilinas, cefalosporinas de primera, segunda, tercera e inclusive cuarta generación y a los monobactámicos como el aztreonam, pero no a cefamicinas ni carbapenémicos

20 Diseminación de la Resistencia bacteriana Enzimas modificadoras de aminoglucósidos EMAs 1. acetiltransferasa (AAC), 2. fosfatidil transferasa (APH) y 3. adenil transferasa (ANT o AAD).

21 Resistencia Adquirida Klebsiella pneumoniae Serratia marcenses Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa AMIKACINA GENTAMICINA ESTREPTOMICINA TOBRAMICINA IMIPENEM MEROPENEM Pseudomonas aeruginosa Klebsiella pneumoniae IMIPENEM MEROPENEM

22 Carbapenemasas Tipo Serin-β-lactamasas (Residuo de Serina en el sitio activo) Metalo-b-lactamasas (Cationes divalentes tipo Zinc) Clase A Clase A Clase D Clase B SME NMC SFC E. cloacae S. marcenscens KPC GES IMI K. pneumoniae P. aeruginosa OXA Acinetobacter baumannii IMP VIM SPM GIM SIM NDH Acinetobacter baumannii S. marcescens P. aeruginosa

23 Especies patógenas: Klebsiella pneumoniae - Infecciones de tracto respiratiorio - Infección de vías urinarias - Sistema nevioso osteoraticular - Sepsis

24 Especies patógenas: Escherichia coli - Infección de vías urinarias - Sepsis - Meningitis - Enfermedad diarreica

25 Especies patógenas: Serratia marcescens - Infecciones de tejidos - Sepsis

26 Especies patógenas: Pseudomonas aeruginosa - patógeno oportunista principalmente en ambientes hospitalarios

27 Materiales y métodos

28 Hospitales participantes de la REDNARBEC y laboratorios interesados 15. Rodríguez Zambrano 16. Icaza Bustamente 17. Guayaquil 18. Roberto Gilbert 19. Luis Vernaza 20. De infectología 21. Alcívar 12. Vicente de Paúl 13. IESS Ibarra 14. Centro Médico Ibarra 1. Carlos Andrade Marín 2. De las Fuerzas Armadas 3. De la Policía 4. Baca Ortiz 5. Enrique Garcés 6. Solca Quito 7. Vozandes Quito 22. Patronato San José 23. Clínica la Merced 24. Clínica Guadalupe 8. Vozandes Shell 9. Homero Castañer 10. Solca Cuenca 11. Clínica Santa Ana 25. Clínica del Río Cuenca

29 Población bacteriana 2792 bacterias de origen clínico Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Serratia marcescens Enterobacter cloacae Enterobacter aerogenes Proteus mirabilis Citrobacter freundii Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Shigella spp.

30 IIdentificación genotípica Identificación de genes de resistencia y determinantes genéticos relacionados en aislados entéricos de la Colección Bacteriana Quito Católica CB-QCA Identificación de genes por PCR Secuenciamiento

31 DETECCIÓN DE GENES POR PCR Y SECUENCIAMIENTO BLEE: bla SHV, bla TEM, bla PER, bla CTX-M y AmpC CARBAPENEMASAS: bla KPC, bla GES, bla VIM, bla IMP bla SPM EMAs: aac(3)-iia, aac(6 )-Ib, ant(2 )-Ia,, Resistencia a quinolonas: qnr IntI y RV de integrones clase I

32 Diseño de primer y padronización para detección de genes María Fernanda Yauri David Ortega Pedro Barba

33 David Ortega Paredes Genotipaje de la resistencia a antibióticos en aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae productores de β- lactamasas de espectro extendido (BLEE)

34 Confirmación fenotípica de producción de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) Prueba confirmatoria de producción de BLEE: Positivo aumento < 5 mm en el halo de inhibición de cefalosporina de tercera generación / clavulanato

35 Detección de genes en Klebsiella pneumoniae bla SHV cromosómico Componente de ADN cromosómico en ADN plasmidial 0.0

36 Detección de genes en Klebsiella pneumoniae Primer lugar en la categoría pregrado universidades el área Ciencias de la Salud y el Segundo lugar dentro de todas las áreas en la categoría Pregrado Universidades en la IX Feria Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación (FENACYT 2008)

37 Búsqueda de BLEE y carbapenemasas en enterobacterias Diana Muñoz Gabriela Yépez Ana María Gómez

38 Carlos Andrade Marín General De Las Fuerzas Armadas No.1 Solón Espinosa, Solca Quito De Niños Baca Ortiz Vozandes Gineco-Obstétrico Isidro Ayora De La Policía Nacional Pablo Arturo Suárez Enrique Garcés Castañier en Azogues Número de aislados Bacterias entéricas de origen clínico

39 Comunitarias Hospitalarias ,1 / 2693/325

40 Carlos Andrade Marín General De Las Fuerzas Armadas No.1 Solón Espinosa, Solca Quito De Niños Baca Ortiz Vozandes Gineco-Obstétrico Isidro Ayora De La Policía Nacional Pablo Arturo Suárez Enrique Garcés Porcentaje Porcentaje de BLEE en bacterias entéricas 25,0 23,2 20,0 18,9 19,4 18,9 17,3 15,0 13,1 15,1 10,0 6,3 5,0 3,0 0,0

41 Control positivo Primer caso Azogues Segundo caso Guayaquil Tercer caso Cuenca Control negativo Identificación molecular de KPC 738 pb

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43 Pseudomonas aeruginosa RESISTENCIA A CARBAPENEMES RESISTENCIA A AMINOGLUCÓSIDOS 37% 48/ % 78/129 Aislados Resistentes a Carbapenemes Aislados Resistentes a Aminoglucósidos

44 Identificación de bla GES en aislados de Pseudomonas aeruginosa 31% (44/129)

45 Identificación de bla KPC en aislados de Pseudomonas aeruginosa 5,4% (7/129)

46 Identificación de bla VIM y bla IMP en aislados de Pseudomonas aeruginosa INTEGRONES 3,1% 22,5% (29/129) bla VIM 7,8%(10/129) bla IMP

47 Amplificación de genes EMAs en Pseudomonas aeruginosa 27/129 (20,9%) 21/129 (16,3%) 13/129 (10,1%) 6/129 (4,7%)

48 Integrones Clase I Total Aislados Presentan Integrón Clase I Porcentaje ,2% % genes productores de carbapenemasas presentes Integrones Clase I 21,7%

49 Búsqueda de carbapenemasas en enterobacterias Camila Cilveti Andrea León Nathaly Espinel

50 Identificación molecular de BLEE TEM SHV CTX-M 862pb 858pb 585pb

51 Identificación molecular de carbapenemasas: serin-beta-lactamasas bla KPC bla GES 864 pb 38 pb A

52 Identificación molecular de carbapenemasas: metalo-beta-lactamasas bla VIM bla IMP A

53 Número de aislamientos Número de aislamientos entéricos positivos para los genes de análisis Total Hospitalarios Total Comunitarios Total blactx blatem blashv blaper bla KPC bla GES bla IMP bla VIM Total bla CTX bla TEM bla SHV bla PER bla KPC bla GES bla IMP bla VIM

54 Casos con bla KPC n 6 Quito Guayaquil Azogues Cuenca 13 Klebsiella pneumoniae Serratia marcescens Klebsiella oxytoca Enterobacter aerogens Enterobacter cloacae

55 Genotipificación de KPC por campo pulsado

56 Casos con 8 Quito bla GES n Cuenca Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca

57 Casos con Quito bla IMP n Cuenca Serratia marcescens

58 Casos con Quito bla VIM n Cuenca Klebsiella pneumoniae Morganella morganii Serratia marcescens

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60 Conclusiones

61 CONCLUSIONES Dentro de la población de estudio se encontró alta resistencia a betalactámicos, aminoglucósidos y carbapenemes y no registraron resistencia a polimixina B, colistina, tigeciclina ni fosfomicina. Los resultados confirman que en nuestro medio hay una evidente asociación entre producción de BLEE y resistencia a otras familias de antibióticos, en especial quinolonas, aminoglicósidos y carbapenemes. Existe una relación entre la presencia de plásmidos y de integrones con la alta resistencia antimicrobiana.