Cribado de cromosomopatías mediante el estudio de ADN fetal en sangre materna

Transcripción

1 Cribado de cromosomopatías mediante el estudio de ADN fetal en sangre materna Javier Suela

2 DE DONDE VENIMOS

3 Semana 4 Semana 8 Semana 12 Semana 20 Semana 32 Parto ECOGRAFIA TEST EMBARAZO Eco confirmación Eco del triple cribado: Estado general Transucencia nucal Mediciones sec. de Down: nariz, ductus, tricúspide TRIPLE CRIBADO: PAPP-A, bhcg Semana 14: fin ILE libre Eco alta resolución: Revisión estado general. Evaluación cardíaca Evaluación todos los órganos (puede haber eco semana 16 en caso de sospecha previa de cardiopatía u otros) Eco tardía de malformaciones Revisión estado general. Evaluación cardíaca Evaluación todos los órganos Estudio RHD Vacuna RHD Semana 22: fin ILE malformación no letal BIOQUÍMICA

4 Transferencia materno/fetal Microquimerismo

5 Céls. fetales en sangre materna Separación por MACS (eritroblastos) (técnica alternativa) Trofoblasto trisómico sangre materna Determinación por sexo (XY) También se propuso citometría Rendimiento MUY pobre (<1 cel / )

6 Qué es el ADN libre en plasma? El ADN libre circulante (cfdna) son restos celulares apoptóticos que se degradan y excretan por nuestro cuerpo Varios usos de interés: - Biopsia líquida (tumor) - Presencia fetal en sangre materna

7 ADN libre en plasma (cfdna) Estudios oncológicos: Un 30% de los pacientes con cáncer presentaban cfdna con la tecnología de detección del momento

8 cfdna fetal en sangre materna Dennis Lo El contenido de ADN fetal libre en plasma materno es 970 veces mayor que el nivel de ADN contenido en células fetales en sangre materna. La cantidad de ADN fetal libre en plasma materno crece durante el embarazo, y puede detectarse en plasma materno a partir de la 5ª semana de gestación. El ADN fetal libre en plasma desaparece extremadamente rápido tras el nacimiento. La vida media de este ADN es de 16.3 minutos, siendo prácticamente indetectable en 2 horas. El cfdna fetal es PLACENTARIO

9 Aplicación del cfdna fetal BMJ 2011;342:c7401 Kypros Nicolaides Jun Wang Análisis Trisomía 21: 753 embarazadas Sensibilidad: 100% Especificidad: 97.9% Dennis Lo

10 DÓNDE ESTAMOS

11 Metaanálisis para NIPT

12 Nuestra experiencia ( ) - En sintonía con la mayoría de estudios publicados - T18 y T13 podrían tener menor VPP por causa de CPM

13 Cómo trabajar con NIPT? El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA En embarazos con patología fetal la técnica de primer orden es la INVASIVA La embarazada debe conocer los pros y contras de la técnica antes de elegir, así como los datos de contingencia (sensibilidad, especificidad, VPP, VPN ) Se debe ofrecer la confirmación de un ALTO RIESGO Se debe recomendar un estudio con medición de fracción fetal (rec >4%) Se debe hacer consentimiento, consejo pre y post test No es un análisis de TODO el genoma (no es infalible)

14 Qué limitaciones tiene el NIPT? El NIPT es un CRIBADO. EL NIPT DETECTA cfdna, Y POR TANTO ES SENSIBLE A SU MODIFICACIÓN: - Mosaicismos de confinamiento placentario o exclusivamente fetal - Madre portadora de patología a testar - Gemelo evanescente - Cualquier contaminación de cfdna (exógena o endógena) UN RESULTADO NO INFORMATIVO (FF<4%) PUEDE SER RELEVANTE

15 Mosaicismo feto/placenta (CFM, CPM) NIPT ALTO RIESGO ALTO RIESGO BAJO RIESGO Biopsia coriónica POSITIVO POSITIVO NEGATIVO L.Amniót ico POSITIVO NEGATIVO POSITIVO Concordancia

16 Presencia de DNA materno tumoral El ADN plasmático tumoral materno podría ser detectable por NIPT (retrospectivo) 7 casos de cáncer / Nuestra experiencia: 1 caso con cariograma complejo (CCR tipo IVa posteriori) Isocromosoma 8p Monosomía 9 Duplicación 11q24qter Deleción 17p Monosomía 19 Duplicación 20q Deleción Xq intersticial

17 Seguimiento no informativos Otros estudios informan, además, de posibles aneuploidías

18 Guías clínicas y consensos Guía de recomendaciones de la ACMG acerca de: - Qué tecnología usar - Qué informar - Qué parámetros epidemiológicos son relevantes (S, ESP, VPP, VPN ) - Qué consejo dar a las pacientes

19 Guías clínicas y consensos NIPT como test contingente

20 Guías clínicas y consensos NIPT como test contingente

21 Uso contigente de NIPT en el SNS HOY Implantación del NIPT en el SNS (globalizado) En proceso / en proyecto Sin datos (uso esporádico)

22 HACIA DONDE VAMOS

23 Dos preguntas de futuro - DEBE DEMOCRATIZARSE EL USO DEL NIPT? DEBE SER UN CRIBADO DE POBLACIÓN GENERAL? DEBE SUSTITUIR AL CRIBADO COMBINADO ACTUAL? QUÉ SITUACIONES HAY QUE ANALIZAR? - DEBE AMPLIARSE LA CAPACIDAD DE DETECCIÓN DE LA TÉCNICA? DEBEN ANALIZARSE OTRAS ANEUPLOIDÍAS? MICRODELECIONES? HASTA DÓNDE PODEMOS LLEGAR?

24 Debe democratizarse su uso? CRIBADO GENERAL DE ANEUPLOIDÍAS DE INTERÉS? Utilización de las técnicas actuales de manera más generalizada PROS: Reducción técnicas invasivas Simplificación protocolos Detección de falsos negativos CONTRAS: Evaluación real de las aneuploidías a cribar Podría aparecer otra cohorte de falsos negativos NO DEJA DE HABER RESULTADOS DISCREPANTES

25 Debe democratizarse su uso? CRIBADO GENERAL DE ANEUPLOIDÍAS DE INTERÉS? Utilización de las técnicas actuales de manera más generalizada PROS: Reducción técnicas invasivas Simplificación protocolos Detección de falsos negativos CONTRAS: Evaluación real de las aneuploidías a cribar Podría aparecer otra cohorte de falsos negativos NO DEJA DE HABER RESULTADOS DISCREPANTES

26 Análisis de otras regiones - actual Nuestro conocimiento es residual: Pallister Killian (tetra12p) Caso trisomía 14 placentario (UPD materna por rescate cromosómico) del10q11q22 de novo Es posible ver otras regiones del genoma No hay Del16q11q22 base de datos de estadística novo Profundidad baja (>10Mb) Trisomía 22 en mosaico fetal Debe tratarse como sospecha (no hay series Pero también suficientes algún de caso VPP y VPN) exclusivamente placentario Importante conocer indicación caso

27 Análisis de otras regiones - futuro Las técnicas de NGS cada vez son más potentes y precisas: WGS Y si incrementamos el número de lecturas?

28 Análisis de otras regiones - futuro ARRAY-CGH EN SANGRE MATERNA? En casos con patología fetal (o de manera general?). Sería una CVS no invasiva PROS: Reducción técnicas invasivas NIPT para todos los estudios, con o sin malformación CONTRAS: Generalizar este estudio incrementaría test invasivos (variantes sólo placentarias rescatadas) La madre podría seguir generando problemas (cromosoma X, etc.)

29 Conclusiones El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA Hoy por hoy es una técnica muy útil para descartar el FP del cribado bioquímico Cada vez más utilizado en clínica diaria La tecnología permite analizar cada vez más información, pero todo debe estudiarse desde un correcto consejo genético, pre y post test A nivel futuro, se plantea como: 1. Un cribado para población general 2. Un array-cgh en sangre materna (limitaciones como biopsia coriónica)

30 LABORATORIO TRISONIM GRACIAS A: AL RESTO DEL EQUIPO NIMGENETICS, COLABORADORES, PACIENTES Y A VOSOTROS POR ESCUCHARME