NADAL RSV Test (test cassette)
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- Felisa Venegas Figueroa
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1 NADAL RSV Test (test cassette) REF EN FR ES PL Instruction for use 2 Instructions d utilisation 4 Instrucciones de uso 7 Sposób użycia 10 Symbols 16 Our Teams 16 nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse Moers Germany Moers Tel: +49 (2841) Fax: +49 (2841) Regensburg Tel: Fax: info@nal-vonminden.com Directors: Sandra von Minden Roland Meißner Thomas Zander Commercial reg. Kleve HRB 5679 Steuer-Nr. 244/133/00130 UST-ID-Nr. DE Version 1.1,
2 ESPAÑOL Test NADAL VRS (Ref ) 1. Uso previsto El test NADAL VRS es una prueba immunocromatográfica invitro para la detección rápida y cualitativa del antígeno del virus respiratorio sincitial (VRS) en aspiraciones nasofaríngeas (NPS), muestras nasofaríngeas o muestras de la garganta. 2. Introducción El virus respiratorio sincitial (VRS) es la principal causa de neumonía y bronquiolitis en lactantes y bebés (1, 2). Como otros virus respiratorios, el VRS provoca una serie de enfermedades respiratorias, siendo la más común el resfriado con rinorrea profusa. Entre el 1% y 2% de los niños infectados requieren hospitalización, padeciendo la enfermedad de manera más intensa aquellos que se encuentran en el primer año de vida y en aquellos niños con enfermedad cardiopulmonar subyacente. En el resto de lactantes y niños, el virus desaparece después de 2 a 3 semanas generalmente o 1 ó 2 semanas después de que los niños sean tratados en el hospital (3). Debido a su alto nivel de infección y a que tanto el personal del hospital como los pacientes son susceptibles de contagio, el VRS se ha convertido en la causa más frecuente de las infecciones nosocomiales en las salas de pediatría. Los estudios de Hall y Taber y sus compañeros, establecieron que la bronquiolitis por VRS y la neumonía pueden ser tratadas con éxito mediante la administración de la ribavirina en aerosol (4, 5). Este hallazgo ha supuesto que se logre una identificación precisa y rápida de los casos a través de métodos de laboratorio, lo que es muy importante para el cuidado de los niños en el hospital. 3. Principio del test A diferencia de como sucede con los métodos clásicos (Inmunofluorescencia y ELISA), que son laboriosos y lentos, el test NADAL RSV es una prueba rápida, sencilla y altamente sensible para la detección rápida y fiable del VRS en el tracto respiratorio. El método emplea una combinación única de conjugado colorante monoclonal y anticuerpos policlonales en fase sólida para identificar selectivamente VRS con un alto grado de sensibilidad y especificidad. Después de la recogida y tratamiento, la muestra se añade al pocillo de muestra ( ) del dispositivo de reacción. Como la muestra fluye a través del dispositivo absorbente, el conjugado anticuerpo tintado se une al antígeno de VRS (cuando está presente en la muestra) formando un complejo antígeno anticuerpo. Este complejo se une al anticuerpo policlonal en la ventana de reacción positiva produciendo una banda de color rosa. En caso de ausencia de VRS, no aparecerá ninguna línea en la zona de reacción positiva. La mezcla de reacción continúa fluyendo a través del dispositivo absorbente, más allá de la zona de reacción positiva y zona de control. El conjugado no unido se une al reactivo en la ventana de control produciendo una banda de color rosa, mostrando que los reactivos están funcionando correctamente. 4. Reactivos y materiales suministrados Cada kit contiene todo lo necesario para utilizar 20 test: 20 test NADAL VRS 20 cuentagotas de plástico 20 bastoncillos 2 frascos cuentagotas de 11 ml de solución de extracción 1 manual de instrucciones 5. Otros materiales necesarios Tubos de plástico Cronómetro Solución salina estéril, licuadora (si se usa el aspirado) Control positivo (opcional): hay opcionalmente disponible una preparación liofilizada derivada de cultivo in vitro como control positivo.(1x 0,5 ml). Esta solución se compone de 0,5 ml de solución de extracción y produce un resultado del ensayo equivalente al producido por dudosas muestras positivas (es decir, el color rosa claro) y debería almacenarse a temperaturas entre 2 C y 8 C después de la reconstitución. 6. Almacenamiento y conservación Todos los componentes del test NADAL VRS deben almacenarse a temperatura ambiente (entre 2 C y 30 C). No congelar el test. El test NADAL VRS es válido hasta la fecha de caducidad establecida en la etiqueta del envase. 7. Precauciones y medidas de seguridad Este test está diseñado únicamente para diagnostico invitro y para uso profesional. Leer detenidamente las instrucciones antes de usar el test. No utilizar después de la fecha de caducidad establecida en la etiqueta del envase. Todos los reactivos y materiales que estén en contacto con muestras posiblemente infectadas deben ser tratadas con desinfectantes apropiados o autoclavadas a 121 C durante al menos una hora. No utilizar el test si el envase está dañado. 8. Colección de muestras y preparación a) Notas preliminares El VRS se encuentra casi exclusivamente en las vías respiratorias. Las secreciones se obtienen idealmente ya sea por aspiración a través de un catéter o por succión en un bulbo de goma blanda. También pueden utilizarse bastoncillos, nasofaríngeos o de la garganta, pero son algo menos precisas que las secreciones aspiradas (6). Si el análisis de la muestra no se realiza inmediatamente, deben almacenarse los bastoncillos en un recipiente limpio y seco (no incluido en el kit) a 2 C y 8 C y continuar con el análisis en las próximas 24 horas. No utilice ningún medio de sujeción. b) Muestra de aspiración nasofaríngea 1. Después de la colección con un método adecuado, diluir el aspirado nasofaríngeo con un medio apropiado (salina estéril por ejemplo) hasta un volumen máximo de 3 ml. 2. Verter 1 ml de muestra diluída en un tubo de plástico y centrifugar durante 10 min a RPM. 3. Desechar el sobrenadante y verter el precipitado en 0,5 ml de solución de extracción. Utilizar una pipeta automática y mezclar bien pipeteando varias veces. nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse Moers Germany info@nal-vonminden.com 7
3 ESPAÑOL Test NADAL VRS (Ref ) 4. Permitir que la extracción se produzca durante 15 minutos antes de ejecutar la prueba. c) Recogida de muestras Utilice bastoncillos con extremos de dracon. No use bastoncillos con extremos de algodón o de alginato de calcio, o con ejes de madera o impregnados con carbón y no utilizarlo en recipientes de transporte con gelatina. 1. Colectar la muestra, ya sea nasofaríngea o de garganta, usando un bastoncillo apropiado. 2. Inmmediatamente después de la colección, sumergir el bastoncillo en un tubo de plástico con 1 ml de solución de extracción (=30 gotas) y remover la muestra contundentemente. 3. Permitir que la extracción se produzca durante 15 minutos. 4. Al final del período de extracción, eliminar completamente el líquido del bastoncillo presionándolo contra la pared del tubo de extracción. Deseche el bastoncillo de acuerdo con las directrices para el manejo de agentes infecciosos (ver Precauciones y medidas de seguridad). 9. Realización del test 1. Mantener todos los reactivos a temperatura ambiente (15 C - 30 C). 2. Sacar del envase el dispositivo del test. 3. Utilizando la pipeta de plástico, añadir 6 gotas (200 µl) de la solución extraída en el pocillo de la muestra ( ) 4. Leer los resultados del test 10 minutos después de añadir la muestra al dispositivo. 10. Interpretación de los resultados Resultado positivo Aparecerá una línea de color en la zona de control. Además de la línea de color, aparecerá una línea fácil de distinguir en la zona del test. La muestra contendrá VRS. Resultado negativo Únicamente aparecerá una línea de color en la zona de control. No aparecerá ninguna línea en la zona del test. La muestra no contiene VRS. Resultado no válido Si no aparece ninguna línea de color en la zona del test ni en la zona de control, el test no es concluyente. Deberá repetirse el test. 11. Control de calidad De acuerdo con las Buenas Prácticas de Laboratorio, se recomienda el uso de materiales de control para asegurar una utilización adecuada del kit. Cuando se utilizan los controles positivos y negativos de acuerdo con los procedimientos del test, deben mostrar resultados positivos y negativos respectivamente. 12. Limitaciones El test NADAL VRS está diseñado específicamente para detectar el virus respiratorio sincital en aspirados nasofaríngeos o en muestras nasofaríngeas. Como sucede con todos los procedimientos de diagnosis, el médico deberá confirmar los resultados obtenidos con otros métodos clínicos. 13. Características de utilización Precisión, sensibilidad y especificidad Se realizó un estudio con 49 muestras positivas de aspirado nasofaríngeo obtenidas de niños que padecían el VRS del tipo bronquiolítico (VRS.A, VRS.B o VRS no identificado) y con otros 47 aspirados nasofaríngeos que no contenían el virus. Se compararon los resultados del Test NADAL VRS con los resultados Immunofluorescentes (IF) obtenidos usando el kit IMAGEN VRS (DAKO). Los datos están reflejados en el Cuadro 1 : IF Test NADAL VRS + - Total Total Cuadro 1 : Resultados de evaluación entre el test NADAL VRS y el test por IF De este estudio se deduce que el Test NADAL VRS tiene las siguientes características de calidad en comparación con el método immunofluorescente: sensibilidad de 86% (42/49) especificidad de 94% (44/47) fiabilidad (concordancia) total de 90% (86/96) Una de las muestras, no incluida en el Cuadro 1, obtuvo un resultado negativo mediante el método immunofluorescente y un resultado positivo con el test NADAL VRS. Finalmente, se confirmó un resultado positivo por el método PCR. Reacciones cruzadas Se ha utilizado el test NADAL VRS en aspirados nasofaríngeos que contenían el virus parainfluenza (4 muestras), Rhinovirus (7 muestras) o Adenovirus (2 muestras) y se obtuvieron repetidamente resultados negativos. Sin embargo, se confirmó la presencia de los virus mencionados anteriormente tanto mediante cultivo celular como a través de métodos immunofluorescentes. 14. Bibliografía 1. Chanock, R.M., and L. Findberg Recovery from infants with respiratory illness of a virus related to chimpanzee coryza agent (CCA). II. Epidemiologic aspects of infection in infants and young children. Am. J. Hyg.66 : Chanock, R.M., H.W. Kim, A.J. Vargosko, A. Deleva, K.M. Johnson, C.Cumming, and R.H. Parrott nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse Moers Germany info@nal-vonminden.com 8
4 ESPAÑOL Test NADAL VRS (Ref ) 3. Respiratory syncytial virus. I. Virus recovery and other observations during 1960 outbreak of bronchiolitis, pneumonia, and minor respiratory diseases in children. J. Am. Med. Assoc. 176 : Hall, C,B, R.G. Douglas, and J.M. Geiman Respiratory syncytial virus infections in infants : quantitation and duration of shedding. J. Pediatr. 89 : Hall, C,B,J.T. McBride, E.E. Walsh, D.M. Bell, C.L. Gala, S.Hildreth, L.G. Teneyck, and WW.J. Hall Aerosolized ribavirin treatment of infants with respiratory syncytial virus infection. N.Engl. J. Med. 308 : Taber, L.H.V, Knight, B.E. Gilbert, H.W. McClung, S.Z. Wilson, H.J. Norton, J.M. Thurson, W.H. Gordon, R.L. Atmar and W.R. Schlaudt Ribavirin aerosol treatment of bronchiolitis associated with respiratory syncytial virus infection in infants. Pediatrics 72 : Ahluwalia, G.J. Embree, P. McNicol, B.Law, and G.W. Hammond Comparison of nasopharyngeal aspirate and nasopharyngeal swab specimens for respiratory syncytial virus diagnosis by cell culture, indirect immunofluorescence assay, and enzyme-linked immunoabsorbent assay. J.Clin. Microbiol. 257 : Rev. 1: LGR nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse Moers Germany info@nal-vonminden.com 9
5 Symbol Deutsch English Français Español Italiano Polski CE Konformitätszeichen CE marking of conformity Conformité aux normes européennes Conformidad europea Conformità europea Znak zgodności CE Gebrauchsanweisung beachten Consult instructions for use Consulter la notice d utilisation Consúltense las instrucciones de uso Consultare le istruzioni per l uso Przestrzegać instrukcji obsługi In-vitro-Diagnostika In-vitro diagnostic medical device Dispositif médical de diagnosticc in vitro Producto sanitario para diagnóstico in vitro Dispoitivo medicodiagnostico in vitro Tylko do diagnostyki in vitro Temperaturbegrenzung Temperature limitation Limites de température Limitación de tempperatura Limiti di temperatura Temperatura przechowywania Chargenbezeichnung Batch code Code du lot Código de lote Codice lotto Numer serii Nicht zur Wiederverwendung Do not reuse Ne pas réutiliser No reutilizar Non riutilizzare Tylko do jednorazowego użytku Verwendbar bis Use by Utiliser jusqu au Fecha de caducidad Utilizzare entro Data ważności Bestellnummer Catalogue Number Référence du catalogue Número de catálogo Riferimento di Catalogo Numer katalogowy Hersteller Manufacturer Fabricant Fabricante Fabbricante Producent Ausreichend für <n> Ansätze Sufficient for <n> tests Suffisant pour pour n tests Válido para para <n> ensayos Sufficiente per n saggi Wystarczający na <n> Powtórzeń Our Teams Germany: Regensburg Tel: Moers Tel: Fax: Austria: Tel: Free Tel: Fax: Free Fax: UK & Ireland: Tel: Free Tel UK: Free Tel IRE: Fax: France: France Tel: France Fax: Switzerland Swiss Tel: Swiss Fax: Belgium Belgium Tel: Belgium Fax: Luxembourg Lux. Tel: Lux. Fax: Spain: Tel: Free Tel: Free Fax: Italy: Tel: Poland: Tel: Free Tel: Free Fax: Portugal: Tel: Tel. Verde: Fax Verde: Netherlands: Tel: Free Tel: Fax: Free Fax Denmark: Tel: Free Tel: Tax: Laboratory Diagnostics Team: Tel: nal von minden GmbH Carl-Zeiss-Strasse Moers Germany info@nal-vonminden.com Fon: Fax:
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