Propagación in vitro de Paeonia var SeSu en Sistemas de Inmersión Temporal.

Transcripción

1 Propgión in vitro de Peoni vr SeSu en Sistems de Inmersión Temporl. Yrinne Lezno Más, Mritz Eslon Morgdo, Mros Dquint Grdille. Centro de Bioplnts, ÚNICA, Crreter Moron, km 9 Ciego de Ávil. ylezno@ioplnts.u RESUMEN. Ls Peonis son ornmentles perennes que se ultivn en los píses templdos y fríos del hemisferio orel. Por el interés omeril de ests plnts se desrrollron diferentes estrtegis on vists umentr el oefiiente de multipliión. Entre ells, se evluron diferentes métodos de ultivo (semi-sólido, líquido e inmersión temporl), tipos (BA y mt) y onentriones de itoquinins (,.,., y. µmol/l), sí omo el número de suultivos en l proliferión de l Peoni vriedd SeSu en los Biorretores de Inmersión Temporl. Se estleió un proedimiento pr l proliferión en iorretores de inmersión temporl de l Peoni vriedd SeSu el ul inluye el uso de l BA. µmol/l y l relizión de un mio de medio los dís de iniido el ultivo. INTRODUCCION Ls espeies del orden Rnunulles son importntes desde el punto de vist ornmentl. Ar hst espeies de porte muy diverso unque en su myorí se trt de plnts heres. Dentro de ells se enuentrn ls Peonis muy preids por l ellez y exquisito rom de sus flores (Gol et l., 99). Se propgn de mner vegettiv trvés de l división del rizom o de l oron de l plnt. Por est ví sólo es posile otener de lones por ño (Hosoki et l., 99) y l ts de multipliión es muy lent pr stisfer ls demnds de produión de ultivres populres sí omo l introduión de nuevs espeies e híridos. Ls Peonis no produen ríes dventiis fáilmente. El injerto es uno de los métodos que se plin omerilmente pr su propgión sexul y ls ests pueden formr su propio sistem rdil sólo después de uno o dos ños de ser injertds sore rizom de peonis heráes (Bouz et l., 99) Se h informdo sore l propgión in vitro de diferentes ultivres de Peoni suffrutios Andr. L myor difiultd está en que el porentje de superviveni h sido muy jo produto de l dormni de ls vitroplnts durnte el estleimiento ex Vitro. El empleo de los Biorretores de Inmersión Temporl es un ví efiiente pr l otenión de plnts de form elerd on l ul se logr un myor número de plnts en menor tiempo (Etienne y Berthouly, ). El ojetivo de nuestro trjo fue evlur l efetividd de l téni de inmersión temporl sí omo diferentes ondiiones de ultivo en l proliferión in vitro de l vriedd de Peoni SeSu. Mteriles y Métodos. Proliferión in vitro de Peonis en Biorretores de Inmersión temporl. Determinión de l influeni del método de ultivo y l onentrión de l Benil denin (BA) en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de l vriedd SeSu.

2 Este experimento se desrrolló on el ojetivo de evlur l efiieni del ultivo en inmersión temporl diferentes onentriones de itoquinins en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes. Se ompró l form de ultivo en medio semi-sólido, líquido y l inmersión temporl El experimento ontó on trtmientos d uno on tres repetiiones. A ls ino semns de l proliferión se evluó el oefiiente de multipliión. Est vrile se determinó por el oiente del número finl de rotes entre el número iniil de explntes (un rote de - m de longitud y un diámetro myor de. m) inouldos. De igul form se determinron los indidores morfológios de lidd (longitud y número de hojs por rote) del rotes prinipl (Hosoki et l., 99), sí omo l hiperhidriidd de los rotes. Determinión del efeto del tipo y onentrión de itoquinins en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de Peoni vriedd SeSu en el ultivo en inmersión temporl. Después de determindo que el ultivo en BIT es más efiiente que el ultivo en medio líquido y semi-sólido, se evluó el efeto de dos itoquinins diferentes onentriones en l proliferión de est vriedd. Se ensyron dos tipos de itoquinins romátis, l Benil denin (BA): N - enil denin y l mettopolin (mt): N - (-hidroxyenzyl) denin. Ls ondiiones experimentles fueron ls misms que se desriieron en el experimento nterior. A ls ino semns de l proliferión se luló el oefiiente de multipliión y se evluó l lidd del rote prinipl omo se desriió nteriormente. El experimento ontó on oho trtmientos d uno on tres repetiiones. Determinión del número de suultivo en el BIT y su efeto en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de l Peoni vriedd SeSu. El ojetivo del mismo fue evlur el efeto del número de suultivo en el BIT en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de est vriedd (en d suultivo se renuev l omposiión hormonl y de nutrientes del medio de ultivo). Los suultivos se relizron d dís. Ls ondiiones experimentles fueron ls misms que se desriieron en el experimento nterior. A ls ino semns de l proliferión se luló el oefiiente de multipliión y se evluó l lidd del rote prinipl. Resultdos y Disusión. Proliferión in vitro de Peonis en Biorretores de Inmersión temporl. Efeto del método de ultivo y l onentrión de l Benil denin (BA) en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de l vriedd SeSu. L efetividd de l téni de inmersión temporl en el umento de l proliferión y lidd de los rotes h sido demostrd en diferentes espeies de plnts (Etienne y Berthouly, ). Dentro de ls ventjs que ofree est téni, el ontto direto on el medio de ultivo renovdo durnte d inmersión grntiz un form más efiiente de suministro de los nutrientes en omprión on l form estáti en que se tomn los mismos en el ultivo onvenionl (semi-sólido y líquido) Coefiiente de Multipliión SeSu Longitud del rote prinipl (m) SeSu,,, BA onentrión (µmol/l),,, BA onentrión (µmol/l)

3 SS Líquido BIT No. de hojs por rotes SeSu,,, BA onentrión (µmol/l) Figur : Efeto de l onentrión de BA y l forms de ultivo en el oefiiente de multipliión y lidd morfológi de los rotes de Peoni vr. SeSu. L medi represent los dtos de tres repetiiones. Kruskll-Wllis p.. Letrs diferentes indin signifiión por el test Student-Newmn Keuls. Figur. Brotes de Peoni vr SeSu después de ino semns de proliferión en el sistem de inmersión temporl. Efeto del tipo y onentrión de itoquinins en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de Peoni vriedd SeSu en el ultivo en inmersión temporl Coefiiente de Multipliión d d d BA mt Número de hojs del rote prinipl e e d d BA mt... Conentrión (µmol/l)... Conentrión (µmol/l) rote prinipl (m) BA mt

4 Figur : Efeto del tipo y onentrión de itoquinins en el oefiiente de multipliión y lidd morfológi de los rotes después de ino semns de proliferión en el BIT. Ls medis son el resultdo de tres repetiiones. Kruskll-Wllis p.. Letrs diferentes indin signifiión por Student-Newmn Keuls. A B Figur : Brotes de Peoni vr. SeSu después de ino semns de proliferión en el sistem de inmersión temporl: A: gregdos de rotes utilizndo BA; B: Brotes de Peoni SeSu utilizndo mt nótese l preseni de llo en l se del gregdo. Efeto del número de suultivo en el BIT en el oefiiente de multipliión y lidd de los rotes de l Peoni vriedd SeSu. En el trtmiento que permneió ls ino semns on el mismo medio de ultivo (sin renovión) el.% de los rotes presentron longitud myor de m y un diámetro myor.m, es deir que umplen on los indidores óptimos de lidd que estlee el lortorio omeril. En generl medid que ument el número de suultivos el porentje de rotes on lidd óptim disminuye. Figur : Efeto del número de suultivos en el oefiiente de multipliión de l Peoni SeSu después de oho semns en l fse de proliferión en el sistem de inmersión temporl. CM I: En el álulo del oefiiente de multipliión se inluyeron todos los rotes independientemente de su longitud y diámetro. CM II: En el oefiiente de multipliión se inluyeron sólo los rotes on longitud >. m y diámetro >. m (requerimientos óptimos pr psr enrizr). Los dtos representn l medi de tres sistems de inmersión temporl d uno on seis rotes (n= ). Kruskll-Wllis p.. Letrs diferentes dentro de d líne indin signifiión por Student-Newmn Keuls. promedio de los /luster (m ),,,,, prom edio de los /luster (m )

5 Figur : Efeto del número de mio de medio en l longitud y diámetro promedio de los rotes por gregdo de l Peoni vr SeSu después de oho semns de proliferión en el sistem de inmersión temporl. Los dtos representn l medi de tres sistems y tres gregdos por sistem (n=9). Kruskll-Wllis p.. Letrs diferentes indin signifiión por Student-Newmn Keuls. CONCLUSIONES. Se estleió un proedimiento pr l proliferión in vitro de l Peoni vr SeSu on el empleo del ultivo en inmersión temporl que logró inrementos signifitivos del oefiiente de multipliión y l lidd de los rotes en omprión on los métodos onvenionles (semi-sólido).. Se estleió el uso de l BA l onentrión de. µmol/l y l relizión de un mio de medio los quine dís de iniido el ultivo, omo ls mejores ondiiones pr l proliferión de l Peoni vr SeSu en los SIT. BIBLIOGRAFIA BOUZA L., JACQUES M., SOTTA B., MIGINIAC E. (99). The retivtion of tree Peony (Peoni suffrutios Andr) vitroplnts y hilling is orrelted with modifitions of sisi id, uxin nd ytokinin. Plnt Siene 9: -. ETIENNE H., BERTHOULY M. (). Temporry immersion systems in plnt miropropgtion. Plnt Cell, Tissue nd Orgn ulture. 9: -. GOLA G., CAPPELLETTI C. (99). Trtdo de Botáni. ed Revoluionri. pp 9. HOSOKI T., ANDO M., KUBARA T., HAMADA M., ITAMI M. (99). In vitro propgtion of hereous peony (Peoni ltiflor Pll.) y longitudinl shoot-split method. Plnt Cell Reports., : -.

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