Aportaciones y soluciones Agilent para GC-MS de triple cuadrupolo en el laboratorio medioambiental
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- Nieves Arroyo Blázquez
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1 Aportaciones y soluciones Agilent para GC-MS de triple cuadrupolo en el laboratorio medioambiental Agilent 7000B Triple Cuadrupolo: Un sistema MS/MS especialmente diseñado para acoplamientos GC. Jaume Santamaria AGILENT TECHNOLOGIES Page 1
2 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 2
3 Introducción al nuevo Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 1. Sistema introducido en Primer sistema del mercado especialmente diseñado para análisis GC 3. Basado en la plataforma de cuadrupolo simple de Agilent Technologies 4. Desarrollo focalizado en la resolución de problemas en el laboratorio de rutina 5. Robustez 6. Incorpora la plataforma de software MassHunter que unifica toda la oferta Agilent en MS y mejora el rendimiento de Chemstation Page 3
4 GC-MS: Single Quad o Triple Quad? Comparación de GC/Q SIM congc/qqq MRM en diversas matrices Analysis of p,p -DDE at 10 ppb (All injections = 1 µl) EIC (246) MRM Apple S/N = 448 Cabbage S/N = 241 Ginseng S/N = 446 Orange S/N = 456 Spinach S/N = 260 Page 4
5 7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases Q1 Celda de Colisión Q3 Espectro de impacto electrónico con todos los iones de los compuestos y del fondo químico Page 5
6 7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases Q1 Celda de Colisión Q3 Q1 filtra todas las masas permitiendo únicamente el paso del ion precursor m/z 210 Page 6
7 7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases Q1 Celda de Colisión Q3 En la celda de colisión se produce la disociación del ión seleccionado en iones producto Page 7
8 7000 Series Cuadrupolo MS/MS Optimizado para cromatografía de gases Q1 Celda de Colisión Q3 En Q3 se monitorizan sólo dos de los iones característicos generados correspondientes al compuesto de interés. Uno con finalidad cuantitativa y el otro con finalidad cualitativa Page 8
9 Diseño basado en el rendimiento y la robustez de la aplicación Niveles de sensibilidad de femtogramos en columna y MRM de alta velocidad accesibles para un amplio rango de usuarios Sensibilidad: 100 fg OFN a 500:1 RMS S/N Alto rendimiento SRM (MRM) con hasta 500 transiciones/s Celda de colisión hexapolar patentada Cuadrupolos de cuarzo recubiertos de oro para una segura operación en rutina Agilent 7890 GC con Tecnología de Flujo Capilar MassHunter Software Gold Plated Hyperbolic Quartz Quadrupole Agilent 7000B Triple Quadrupole GC/MS Page 9
10 Por qué un sistema específico para GC? 1. Selección de materiales La selección de materiales en el caso de un sistema MS que va a acoplarse a un GC debe ser específica 2. Tamaño del sistema La modificación de un SQ origina un sistema mucho menor que en LCMS 3. El sistema de vacío necesario es menor 4. El acceso a TODOS los componentes de la fuente es bastante más sencillo a través de una simple puerta 5. Permite el uso de un cuadrupolo A ALTA TEMPERATURA, lo que es esencial para asegurar una operación robusta en matriz compleja Page 10
11 Un sistema específico para GC. Limitaciones para convertir un sistema LC/MS/MS en un sistema GC/MS/MS ESI, APCI y APPI Fuentes a presión Atmosférica Diseñadas para separar moléculas ionizadas ANTES de entrar en el sistema de vacío Los cilindros (rods) metálicos del cuadrupolo de mayor rango de m/z estan compensados térmicamente para una operación entre º C. Esto no es un problema en LCMS ya que sólo entran iones en el sistema de vacío EI, PCI y NCI Fuentes a Vacío Todas las moléculas neutras (portador, matriz y analitos) ENTRAN EN EL SISTEMA DE VACÍO antes de la ionización La MAYOR PARTE de moléculas NO SE IONIZAN y deben ser eliminadas Las moléculas de altos punto de ebullición, comunes en GC, contaminaran las superficies frías La contaminación origina pérdidas de sensibilidad Los cuadrupolos metálicos (< 100ºC) se contaminan más fácilmente en GC Nebulizer tip aimed at 90 degree angle to inlet of capillary Solvent spray Dielectric capillary entrance Atmospheric Pressure Ions -5,000 V Interface draws ions into vacuum and designed to exclude neutrals Heated nitrogen drying gas Vacuum If neutrals do enter into the first stage of vacuum, most are small, volatile solvents like H 2 O and CH 4 OH Page 11
12 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 12
13 Normativa de análisis de aguas: Reales Decretos Page 13
14 Parámetros químicos. Sensibilidad Nota 4: Por «plaguicidas» se entiende: Insecticidas orgánicos, herbicidas orgánicos, fungicidas orgánicos, nematocidas orgánicos, acaricidas orgánicos, algicidas orgánicos, rodenticidas orgánicos, molusquicidas orgánicos, productos relacionados (entre otros, reguladores de crecimiento) y sus pertinentes metabolitos y productos de degradación y reacción. Sólo es preciso controlar aquellos plaguicidas que sea probable que estén presentes en un suministro dado. Nota 5: El valor paramétrico se aplica a cada uno de los plaguicidas. En el caso de aldrin, dieldrin, heptacloro y heptacloroepóxido, el valor paramétrico es de 0,030 µg/l. Nota 6: Por «total plaguicida» se entiende la suma de todos los plaguicidas detectados y cuantificados en el procedimiento de control. Nota 7: Los compuestos especificados son: Benzo(b)fluoranteno, benzo(k)fluoranteno, benzo(ghi)perileno e indeno (1,2,3-cd)pireno. Page 14
15 Parámetros químicos. Sensibilidad Page 15
16 Sensibilidad. Fuente iónica a alta temperatura Diseño óptimo para el rendimiento de la fuente. El rendimiento de la lente de entrada elimina la necesidad del pre-filtro 350 C 325 C 300 C 275 C Respuestas mejoradas para un amplio rango de compuestos Operación más robusta para matrices sucias Mejor respuesta para compuestos con tailing Picos más estrechos para compuestos de alto punto de ebullición Tech Overview EN 230 C Page 16
17 Sensibilidad. Ramped Detector Iris Formas de pico mejoradas a alta masa Sensibilidad mejorada a masas medias/altas MS2 502 Peak Shape Mass Iris (V) Signal Increase X X X X X X Page 17
18 Sensibilidad. Celda de colisión con gas de quenching Celda de Colisión 1 ml/min N 2 Gas Colisión Cuadrupolo Cuadrupolo Fuente He* + Entrada Precursor Disociación por colisión Salida Producto + He* Detector He Buffer Gas He* + He 2 He + Q La transmisión de helio metastable hacia el detector se reduce de modo notable. Además el TAD reduce aún más el ruido de neutros Page 18
19 Sensibilidad. Detector de Triple Eje de alto rendimiento Máxima reducción de ruido de neutros La combinación del gas de quenching (helio) y el diseño del triple eje en el sistema de detección proporcionan grandes reducciones en el ruido Larga vida y linealidad extendida Electromultiplicador de triple canal Sintonizado de ganancia normalizada corrige los problemas causados por el deterioro del detector Sensibilidad consistente a largo plazo Diseño probado en el 5975C MSD hyperbolic quartz transmission quadrupole analyzer Y ion beam steering rod Electromultiplicador de Triple Canal shield for secondary particles X Offset Z high energy dynode triple channel electron multiplier Page 19
20 Nuevo Inyector Multimodo - Capacidad de programación de temperatura Hot/cold S/SL (pulsed mode), temperature programmed vaporization (PTV), solvent vent. - Flexibilidad en los volúmenes de inyección Análisis de muestras termolábiles y mínima discriminación en la inyección para compuestos con alto peso molecular - Mayor sensibilidad en inyecciones de gran volumen - Compatibilidad con Tecnología de flujo Capilar Venteo de disolventes y uso de Backflush - Totalmente integrado con Chemstation, EZChrom y MassHunter Ambient In-vial Small-Volume Derivatization Dilution Internal Standard Heating/Mixing Headspace Extraction Sampling Addition Bar Code Page 20
21 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 21
22 Problemas de la fuente de ionización en GC-MS: Contaminación en las zonas frías Moléculas neutras a alta temperatura provenientes del GC se pegan a las partes frías de la fuente. La presencia de iones Helio ayudan a que estos iones se peguen a esas partes frías Rods del cuadrupolo < 100ºC Contaminacion de partes frías de la fuente (frío 200ºC) Contaminacion de un analizador frío Page 22
23 Ventajas del trabajo en MS/MS Mejor selectividad que en SIM EI-SIM La selectividad es proporcional a la resolución espectral. Por tanto no hay selectividad frente a iones de igual m/z interferencia EI-MS/MS La selectividad para el precursor es igual que en SIM. Hay una alta probablidad de que al menos un ion producto sea diferencial entre el compuesto de interés y la interferencia analito Producto 2 resolución unidad Producto 3 Producto 1 interferencia Ion Precursor El precursor no debe ser usado para la medida de ion ratios ya que las interferencias serán idénticas a las que pueden surgir en SIM Page 23
24 Backflush Tecnología de Flujo Capilar Durante GC Run Split Vent S/SL Inlet Aux EPC 4 psi Detector/es 25 psi Capillary Flow Device Después GC Run Split Vent S/SL Inlet Aux EPC 60 psi Detector/es 2 psi Capillary Flow Device Page 24
25 Backflush al final de cada inyección Fin del run Flujo Inlet Columna Backflush 20 sec Flujo Backflush 30 sec Flujo Backflush 40 sec Flujo Backflush 60 sec Flujo La finalidad es eliminar componentes pesados al final de cada inyección Page 25
26 Sin opción de backflush Un problema serio Abundance 4.6e e e+07 4e e e e e+07 3e e e e e+07 2e e e e e+07 1e Time Tras solo 3 muestras, el fondo es claramente mayor debido al aumento de ruido quimico a nivel espectral A: TIC: lettuce_blank.d\data.ms B: TIC: lettuce_blank3.d\data.ms Data provided by MSD user in Almeria, Spain B A Superposición de dos cromatogramas correspondientes a un blanco inyectado antes y después de una secuencia de tres inyecciones de lechuga sin BACKFLUSH Page 26
27 Con opción de backflush Sin incrementos de fondo y RTs repetitivos Abundance 4.6e e e+07 4e e e e e+07 3e e e e e+07 2e e e e e+07 1e Time TIC: lettuce_10_ppb.d\data.ms TIC: lettuce_100_ppb.d\data.ms TIC: lettuce_5_ppb.d\data.ms Data provided by user in Almeria, Spain Tiempos de retención totalmente estables y línea de base casi libre de ruido químico Superposición de dos cromatogramas correspondientes a un blanco inyectado antes y después de una secuencia de tres inyecciones de lechuga sin BACKFLUSH Page 27
28 Nueva Purged Ultimate Union. Modo Analítico 7890A GC Venteo Split/Splitless Puerto de Inyección Presión / Control de Flujo Z ml/min Dispositivo de Flujo Capilar Purged Ultimate Union Y+Z ml/min 5975C MSD EI mode Y ml/min 15-m HP-5ms (0.25mm id x0.25um) 15-m HP-5ms (0.25mm id x0.25um) Pueden usarse columnas de fases y dimensiones diferentes Page 28
29 Reproducibilidad* en RT para Trifluralin en extracto de lechuga. 100 Inyecciones, 3 minutos backflush. Secuencia de 21 horas 6,150 6,130 RT (mins) 6,110 6,090 6,070 6,050 6,030 Min Max Mean Std Devn % RSD ,010 5,990 5,970 5, Injection Number * Agilent 2x RTL Pesticide Method Page 29
30 Tune de Ganancia Normalizada Cuadrupolo i Dínodo de alta energía (10kV) Fuente de iones Multiplicador de electrones (EM) EMV EMV: 1kV to 3kV 15 X 10 5 HiSense.U I I i GANANCIA 10 X X 10 5 ATUNE.U+400V ATUNE.U EL USUARIO PUEDE SELECCIONAR EL NIVEL DE AMPLIFICACIÓN DE LA SEÑAL Page 30
31 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 31
32 Bloqueo de tiempos de retención Qué es el Retention Time Locking (RTL)? Es la posibilidad de traspasar los tiempos de retención cromatográficos de un sistema cromatográfico a otro con el mismo método y la misma columna. GC 1 SSL/FPD Column 1 GC 1 SSL/NPD GC 2 PTV/µECD Column 2 Column 1 GC/MS Column 3 Cómo se consigue? Ajustando la presión en cabeza de columna de la columna vía EPC usando ChemStation. Page 32
33 500 Transiciones/segundo Por qué es importante? 1. Picos GC especialmente estrechos (anchuras <1-2 s) 2. Suficientes puntos a lo largo del pico (15) para conseguir una cuantificación aceptable/exacta 3. Muchos compuestos a monitorizar en un único run (multiresiduos) con coeluciones muy frecuentes 4. Ambientes regulados en los que se exigen controles de calidad rigurosos para asegurar la validez de los datos (p.e. transiciones de confirmación de acuerdo con la directiva europea (96/23/CE directive) Page 33
34 Extracto vegetal enriquecido 200 ppb plaguicidas - TIC/MRM Extracción automatizada de todas las transiciones programadas en un cromatograma complejo Page 34
35 Herramientas para optimización automatizada con MassHunter Proporcionar una serie de herramientas que asisten al usuario en la CREACION y OPTIMIZACION del método de adquisición MS/MS Dynamic MRM para GC/MS es una parte del flujo de trabajo que incluye la generacion del método (basado en RTs/transiciones conocidas y LA OPTIMIZACION DE LOS PARÁMETROS DE ADQUISICIÓN MRM Design Experiments Assistant - MassHunter Quant - MassHunter Qual - Microsoft Excel Page 35 Analyze Experiments Assistant DynamicMRM Assistant
36 Herramientas de optimización. Generación manual de segmentos? Zonas de baja densidad de picos permiten una division manual sencilla En zonas de gran densidad de compuestos es casi imposible. Problema clásico del campo de residuos Page 36
37 Como funciona Dynamic MRM para GC/MS a la hora de optimizar métodos MS/MS? Dynamic MRM optimiza scan cycle time, dwell times, y el orden de adquisición (generación automatizada de segmentos) para conseguir: 1. Maxima señal 2. Mínimo ruido 3. %RSD bajas 4. La mayor velocidad de análisis 5. La mayor robustez en el método La aproximación tiene en cuenta la integración de picos y el ruido de línea de base en el proceso de optimización del valor de dwell time. Page 37
38 Visualizacion de la optimizacion del dwell time Single-Transition RSD Model* El algoritmo de trabajo de dmrm tiene en cuenta el hecho de que: a) Incrementar el valor de dwell time disminuye el RSD debido a la disminución del ruido RSD (%) RSD_Noise RSD_Int TotalRSD b) Disminuye el número de puntos que definen el pico cromatográfico y, por tanto, aumenta el error debido a la integración Dwell Time (ms) Dwell Time Optimo Page 38
39 Comparación DynamicMRM vs. Tradicional 250 ppb, 123 compuestos, 298 transiciones Original 17 segmentos Dynamic MRM 60 segmentos Page 39
40 Resultados: %RSD Comparación CompoundName Expert-optimized Dynamic MRM RSD RSD Improved? Acetochlor Y Aclonifen Y Alachlor Y Allethrin Y Ancymidol Y Azaconazole Y Azinphos-methyl Y Benfuracarb Y Benodanil Y Benzoylprop ethyl Biphenyl Y Bromacil Y Bromocyclen Y Bromopropylate Bromuconazole I Y Bromuconazole II Y Buprofezin Y Butachlor Y Butralin Y Captafol Carbofuran Y. Average %RSD RSD Std Dev La ventaja más importante de todas es el TIEMPO INVERTIDO POR EL USUARIO. Notablemente menos en el caso de dmrm 1. dmrm proporciona un RSD medio 15% menor que el método tradicional 2. La distribución de %RSD es notablemente menor Page 40
41 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Preparación de muestra Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 41
42 Dificultades al afrontar los requisitos de las entidades de acreditación Plaguicidas ENAC/SANCO Validación, incertidumbre, sensibilidad, control de calidad, exactitud, recuperación, robustez, precisión, repetibilidad MS Technique IP / ion Low resolution mass spectrometry (LR-MS) 1.0 LR-MS n precursor ion 1.0 LR-MS n transition products 1.5 High resolution mass spectrometry (HR-MS) 2.0 HR-MS n precursor ion 2.0 HR-MS n transition products 2.5 Page 42
43 7000B: Precision, Precision, Precision Dwell Time (msec) # Transitions Cycle Time MRM/sec n= Average Area SD Area % RSD 2.5% 5.1% 3.8% 4.2% 4.1% Para 10ppb de Propizamida Mejor precisión, Mejor precisión, supone mejoras en la información cualitativa Page 43
44 Detección de anómalos 1. Más de 20 criterios posibles 2. Tolerancias establecidas en el método de análisis 3. Avisos & Herramientas de filtrado 4. Report de Anómalos Page 44
45 Batch-at-a-Glance Comprobación de tolerancias para transiciones cualificadoras Tolerancias de legislación Page 45
46 Batch-at-a-Glance Navegación + Informacion Page 46
47 Integrador libre de parámetros Validación de picos Valida la calidad de pico basándose en: Altura de pico Area de pico Anchura de pico Simetría de pico Picos unidos a la derecha/izquierda Merge Valley Height 15 % Nivel de spikes en un pico Clasifica la calidad de los picos como: Aceptados Revisar Peak Accepted Merge Valley Height Rechazar Permite centrarse en los picos de interés! 54% Merge Valley Height 39 % Peak Rejected Inspect Peak Page 47
48 Reporting basado en Excel Excel XML Selección de la plantilla correcta Cola con reports múltiples Selección Impresora/Pdf Excel Carga la plantilla Importa los resultados Formatea el report Report es: Report Resultados (XML) & Gráficos generados a) Guardado como XLS b) OPT: Printer c) OPT: PDF Page 48
49 GC/MS/MS - Pesticide Analyzer Dos configuraciones posibles Nuevo!!! Basado en un sistema 7890A/7000B GC/MS/MS, configurado con backflush usando la Tecnología de Flujo Capilar. Bases de datos MRM incluídas en el método puesto en marcha y chequeado químicamente en fábrica. Dos posibles configuraciones: : Método basado en el método clásico de plaguicidas de Agilent (RTL) GC/MS/MS MRM con una base de datos (500+ pesticidas) puesto en marcha a Presión Constante con Post-column backflush. Proporciona flexibilidad para añadir detectores GC y escalarlo a menores tiempos : Método basado en la USA targeted pesticide list RTL GC/MS/MS MRM con base de datos de (200+ pesticidas) puesta en marcha a Flujo constante con backflush a mitad de columna. El método proporciona el mejor rendimiento y los menores tiempos de ciclo para un consumo reducido de carrier. Page 49
50 Analyzer Building Blocks: EPC Column(s) Deactivated tubing CFTs Purged Ultimate Union Splitter 15 x 0.25 x x 0.25 x 0.25 Detector flow restrictor (Siltek) Two configurations EPC Constant Flow Mid-column Backflush Inlet MS Configurations are interchangeable!! Inlet EPC or a splitter Constant Pressure Post-column Backflush MS Page GC/MS/MS April 2010
51 GC/MS/MS Analyzer Configurations setup post-column BF mid-column BF GC MS Inlet BF pressure 7890A - fast oven 7000B - EI bundle MMI (N2 or air coolant) AuxEPC CFT Purged Ultimate Union CFT bleed line yes, in-id x 100 cm, on top of oven column (1x) 30 x 0.25 x 0.25 (2x) 15 x 0.25 x 0.25 restrictor 0.7 m x 0.15 mm (to MS) none guard column none none Page GC/MS/MS April 2010
52 SP1 Analyzer MRM Methods setup post-column BF mid-column BF flow control constant pressure constant flow # of Analytes in DB # of Analytes in method RTL yes, to Agilent method no Method/DB origin Agilent FDA and Agilent inj mode(s) hot SL and cold pulsed SL cold pulsed splitless Backflush post run post run runtime 42 min 20 min coolant N2 or Air (preferred) N2 or Air (preferred) Page GC/MS/MS April 2010
53 MRM 595 compounds Database LIST Page 53
54 Qué está incluído en un analizador? SP1: Factory Pre-setup Analyzer App. optimized Consumables System w. Application setup Familiarization & consulting Application report Std. HW, SW Factory Setup CE specialist I&F Optional Consulting Aftermarket Individual Components produced Individual Components Tested (OFN) System assembled App. method developed on cust. system System checkout on App. mix Run 1 st customer sample customization or optimization method On-going maintains/service Factory CE Setup; I&F Optional Consulting Aftermarket Without Ordering Analyzer Page GC/MS/MS April 2010
55 Ready to use Analyzers no on-site break-in needed, ready for injections At Factory At User s Lab Plug and Play Retention Time Locking (RTL) Capillary Flow Device for Backflushing Dynamic MRM App. specific consumables Sample Prep. QuEChERS MRM method for 500+ Pesticides Multi-Mode Inlet, Cold Splitless Ready for the 1 st run Page GC/MS/MS April 2010
56 Agilent Packaged Workflow Solutions Fast track to greater productivity GC, GC/MS, GC/MS/MS Analyzers: Factory pre-configured and chemically tested On site application checkout >60 Analyzers for all industries LC/MS Application Kits User-friendly accessory kits for LCMS TOF, QTOF and QQQ Includes Accurate Mass or Dynamic MRM Database Easy setup of screening methods Customized GC instrument configurations >200 customized configurations Customized with inert tubing, valves, special columns etc.. Page 56 Agilent Restricted Page 56
57 GO beyond instrumentation more than 200 proven, reliable solutions Factory chemically-tested GC Analyzers: More than 60 Factory tested (SP1) Analyzers are preconfigured and pretested in the factory to run a specific application. Impurities in Bulk Gases Transformer Oil Gas Analyzers SIMDIS Analyzers ASTM Methods GPA Methods UOP Methods EN Methods Based on Agilent Application Notes Refinery Gas Analyzers Natural Gas Analyzers Green House Gases Analyzers Sulfur Analyzers Biodiesel Analyzers CO/CO2 Analyzers Nitrogen Analyzers Gasoline Analyzers Page 57 Agilent Restricted Page 57
58 Agilent Fast Track Pesticide Screening Solutions Sample GC/MSD Analyzer for known/unknown SIM/Scan Deconvolution 401 Final Report S 83 C 256 (+backflush) Library Search Q Extraction GC/QQQ Analyzer for known targets S (+backflush) C LC/QQQ MRM App. kit for known targets S C Q Q Clean-up LC/QTOF or TOF App. Kits for unknown compounds Screen, Confirm Quantify S Mass Hunter MFE C Accurate Mass Database Search Q LC-QQQ app. kit MS MS C16 H19 N3 P Cl C15 H25 O P S Cl C18 H21 O P Cl S Molecular Formula Generation Q Fragmentation MS/MS C Page 58 Agilent Restricted AFO NPT
59 Analyzers and Application Kits Work better and faster, With more reliable results New EN Page 59
60 Agenda 1. Agilent 7000B GC Triple Cuadrupolo 2. Analizador de pesticidas: Una solución global a los principales problemas del laboratorio de medioambiente Legislación Preparación de muestra Sensibilidad Efecto matriz Desarrollo de métodos/traslado de métodos desde GC/MS Acreditación Software Mass Hunter-Reporting GC/MS/MS - Pesticide Analyzer 3. Otras aplicaciones: a. Determinación de compuestos organoestánnicos Page 60
61 Análisis de tributilestaño (TBT) y compuestos relacionados por GC-QQQ Usos: -Agentes anti incrustantes (protección de algas, moluscos, etc.) -Fungicidas en conservantes de madera -Conservantes en tejidos, papel, piel y vidrio. -Insecticidas, biocidas, repelentes de roedores, antioxidantes, inhibidores de corrosión, retardantes de llama del poliéster, etc. -El metacrilato de tributil estaño se usa como estabilizador del PVC Legistalación de control y acuerdos internacionales: Environmental Quality Standards Directive (2008/105/EC) designa al TBT como Substancia peligrosa prioritaria (Priority Hazardous Substance) Page 61
62 Análisis de tributilestaño (TBT) y compuestos relacionados por GC-QQQ Técnicas analíticas disponibles GC-AAS GC-FPD GC-MS HPLC-ICP-AES HPLC-ICP-MS GC-QQQ Page 62
63 Análisis de tributilestaño (TBT) y compuestos relacionados por GC-QQQ 250ml sample Spike samples with 50ul of internal standard Add 2ml 0.05% tropolone in hexane/ethyl acetate Shake for 1 minute Adjust to ph 5 with acetic acid/ acetate buffer Add 2ml 0.3% sodium tetraethyl borate in methanol Shake for 1 minute Allow 30 minute reaction time with occasional shaking Transfer organic layer into 2ml vial Analyze by GC-QQQ Page 63
64 TBT Chromatogram / Mass spectrum Part of the suite of organotins detectable by this method TBT elutes at minutes Mass spectrum of TBT derivative MBT DBT TBT TtBT Page 64
65 TBT Calibration/MRM transitions Quantification 291m/z 179m/z Qualification 207m/z 151m/z, 205m/z 149m/z Page 65
66 TBT Validation Page 66
67 Conclusiones 1. Un sistema basado en la tradición GC/MS Agilent, con más de 30 años de experiencia en el manejo de sistemas cuadrupolares 2. Un sistema especialmente dedicado para un robusto acoplamiento GC destinado a obtener las mejores prestaciones sin riesgos ni falsas expectativas 3. Una novedosa celda de colisión basada en el desarrollo realizado para la serie 6400 LC/MS Triple Cuadrupolo 4. Un sistema destinado a aplicaciones en matriz compleja en busca de la más alta robustez y sensibilidad 5. Facilitando la puesta en marcha de la aplicación a través del uso del MassHunter Software o del uso de los Agilent Analyzers 6. Colaborando con el laboratorio en muchas de las tareas propias del trabajo en entorno acreditado 7. MassHunter Software. Una nueva plataforma que recoge las demandas del usuario más exigente en cuestiones relevantes como el tratamiento de datos, el autosintonizado o la generación de reports Page 67
68 Gracias por su atención Preguntas Jaume Santamaria Especialista GC/MS AGILENT TECHNOLOGIES Page 68
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