GEBRAX DIVISION DIAGNÓSTICA

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1 GEBRAX T h e r a p e u t i c s & D i a g n o s t i c s DIVISION DIAGNÓSTICA Se recomienda que el prospecto deba ser leído antes de comenzar el procedimiento de prueba. Aunque el ensayo está diseñado para ser d e fácil uso, es necesario ajustarse al instructivo del test para asegurar resultados precisos. La exposición directa del producto al sol, debe ser evitada. USO. No para selección de donantes. El Test INSTI VIH-1/VIH-2 es de solo un uso (desechable), rápido, flujo a través de una membrana como inmunoensayo cualitativo in vitro para la detección de anticuerpos contra el virus de inmunodeficiencia humana tipo 1 y tipo 2 en sangre -EDTA, sangre capilar (dedo), suero o plasma-edta. La prueba está diseñada para su uso por personal capacitado en centros médicos, laboratorios clínicos, situaciones de emergencia médica, consultorios médicos y estudios de campo, como una prueba de diagnóstico capaz de ofrecer resultados en menos de un minuto. No es recomendado utilizarlo en el hogar. Todos las directrices requeridas para las pruebas pre y post consejería debe ser realizada en cada escenario en el que se utiliza el Test INSTI VIH-1/VIH-2. El test viene como un kit que contiene la unidad de membrana INSTI, diluyente de la muestra (Solución 1), revelador de color (Solución 2), solución para aclarar (Solución 3), con o sin material de apoyo (lanceta, pipeta y gasa con alcohol).

2 RESUMEN. El Síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) es causado por al menos dos retrovirus, el VIH-1 y VIH-2. Estos son similares en estructura genómica, morfología y la habilidad de causar el Sida. El VIH se transmite principalmente por contacto sexual, exposición a sangre o productos sanguíneos, o de una madre infectada, al feto. Las personas que presentan alto riesgo de infección por el VIH son hemofílicos, usuarios de drogas intravenosas y hombres que tienen sexo con hombres. VIH ha sido aislado de pacientes con SIDA, complejo relacionado al SIDA, y de las personas de alto riesgo de contraer el SIDA. Los anticuerpos específicos para proteínas de la envoltura VIH son frecuentes en el suero de personas con alto riesgo de contraer el SIDA, así como en personas con SIDA. La presencia de anticuerpos al VIH indica exposición previa al virus, pero no constituye necesariamente un diagnóstico de SIDA. La ausencia de anticuerpos contra el VIH no indica que un individuo este absolutamente libre de VIH-1 o VIH-2, el VIH ha sido aislado de los individuos seronegativos antes de la seroconversión. La especificidad y la sensibilidad del test dependerá, entre otros factores, de: a) la selección de los antígenos del VIH para la detección de anticuerpos, b) las clases de anticuerpos reconocido por el conjugado de detección, y c) la complejidad del protocolo utilizado para realizar la prueba. Reacciones no específicas se pueden observar en algunas muestras. Un test INSTI reactivo (positivo) debe considerarse como un resultado preliminar. Después de una prueba rápida reactiva, una muestra de sangre venosa debe ser recogida en un tubo de colección con EDTA (de sangre o plasma) o un tubo sin anticoagulante (para suero), y enviarlo a un laboratorio para pruebas de VIH de confirmación. PRINCIPIOS DEL TEST El test de anticuerpos INSTI HIV-1/HIV-2 es manual, de lectura visual, flujo a través de una membrana como inmunoensayo cualitativo in vitro para la detección de anticuerpos VIH- 1/VIH-2 en sangre humana, suero o plasma. La prueba consiste en una membrana de filtración sintética colocada encima de un material absorbente dentro de un cartucho de plástico, conocida como la unidad de membrana INSTI. La membrana ha sido específicamente tratada con proteínas VIH-1 y VIH- 2 recombinantes, que reaccionan con anticuerpos HIV-1/HIV-2 en la muestra para producir una señal visual diferente en la membrana. La membrana también incluye un procedimiento de control. El procedimiento de control consiste en un punto tratado con proteína-a capaz de capturar los anticuerpos IgG presentes normalmente en la sangre y componentes sanguíneos. Los anticuerpos IgG reaccionan con un agente de propiedad cromática para producir una señal visual en la membrana. Desde que los anticuerpos IgG presentes en las muestras de sangre VIH positiva o normal reaccionan, el punto de control proporciona una señal visual cuando se ejecuta el test, lo que indica que el test fue realizado correctamente. Si el punto de control no aparece, el test es considerado no válido. En el caso de ser positivo, en el control del test, proteínas recombinantes VIH-1 y VIH-2, incrustadas en la membrana, capturan anticuerpos específicos para VIH, que están presentes en la muestra. Anticuerpos capturados en el control del test reaccionan con un agente de propiedad cromática para producir una señal visible de la membrana. La unidad de membrana

3 está diseñada para filtrar, absorber y retener la muestra y todos los reactivos del test, de tal manera que se eviten las fugas y la exposición del personal a materiales potencialmente infecciosos. Los reactivos necesarios para llevar a cabo el test incluyen diluyente de la muestra (Solución1), revelador de color (Solución 2) y la solución de aclaramiento (Solución 3). El test se realiza mediante la adición de la muestra de sangre, suero, plasma, al vial que diluye la muestra y que rompe los glóbulos rojos. Esta solución muestra /diluyente es vertido en el contenedor de la unidad de membrana. Anticuerpos HIV-1/HIV-2, si están presentes en la muestra, son capturados por las proteínas en la membrana de filtración. El revelador de color se añade a la unidad de membrana. El revelador de color reacciona con los anticuerpos capturados para generar un punto distinto color azul en la localización del punto de control y, en caso de que anticuerpos HIV-1/HIV-2 están presentes en la muestra, un punto azul también aparece en el lugar del punto del test de la membrana. En el paso final, la solución de aclaramiento es agregado a la membrana para disminuir el color de fondo con el fin de hacer que el control y los puntos de prueba sean más claros. Selección de antígenos: El ensayo INSTI HIV-1/HIV-2 utiliza una combinación de proteínas transmembrana recombinante del VIH-1 (gp41) y VIH-2 (gp36). El uso de estas proteínas supera los problemas de sensibilidad y especificidad asociados con la prueba sobre la base de lisados virales o una combinación de antígeno del core y otras proteínas virales. Detección anticuerpo: El ensayo INSTI HIV-1/HIV-2 utiliza un reactivo único para detectar anticuerpos contra el VIH-1 y / o VIH-2. Aunque inicialmente diseñado para detectar la clase IgG de anticuerpos específicos, el ensayo INSTI HIV-1/HIV-2 ha sido presentado para detectar anticuerpos en muestras obtenidas en la infección temprana, durante la seroconversión y baja titulación anti-vih-1 de muestras obtenidas en la infección tardía. (Tablas 1, 2 y 3) La complejidad de la prueba: El test INSTI HIV-1/HIV-2 fue diseñado para reducir la complejidad del protocolo. El test INSTI HIV-1/HIV-2 no requiere preparación de la muestra, el momento exacto, o varios pasos, que incluyen múltiples lavados y reactivos. Estos requisitos aumentan la complejidad de un test y dan lugar a errores de procedimiento que puede afectar negativamente la sensibilidad y la especificidad. El tiempo total de prueba puede variar ligeramente en función del tipo de muestra, pero los resultados validos del test siempre están claramente legibles dentro de 1 o 2 minutos. COLECCIÓN DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO. 1.- Para sangre entera-edta, plasma-edta o muestras de suero, siga los procedimientos normales de punción venosa utilizando un tubo de tapa lila con anticoagulante EDTA (sangre y plasma) o tubos con tapa roja (sin anticoagulante) para el suero. 2.- Si se va a utilizar el plasma o suero, separar de las células sanguíneas por centrifugación. 3.- El suero o plasma con EDTA, se puede almacenar a 2-8 C durante un máximo de 5 días, congelar a -20 ºC durante 3 meses, o congelarse a -70C durante un año. 4.- Las muestras de sangre recogidas en EDTA puede conservarse a 4 º C y deben ser analizadas dentro de 48 horas. No calentar o congelar las muestras de sangre entera.

4 5.- No diluir antes de la prueba. COMPONENTES DEL KIT Y ALMACENAMIENTO. Reactivos INSTI deben mantenerse entre º C para su almacenamiento prolongado. -Catálogos de Nos, todos los componentes del kit son empaquetados individualmente para un solo uso. -Catálogos de Nos y , se proporcionan los componentes para 24 pruebas. Cada kits contiene el mismo número de cada tipo de componentes. Cada prueba requiere de los siguientes materiales. 1.- Unidad de membrana, individualmente embalados, preparados con control (captura de IgG) y test (antígeno gp41 y gp36) puntos de reacción. Para un solo uso en el procedimiento de INSTI. 2.- Diluyente de la muestra - Xn R22, Vial Solución 1, que contiene 1,5 ml de tris-glicina solución tampón que contiene reactivos de lisis celular, con un espacio adecuado para adición de sangre, muestras de suero o plasma que serán probados con INSTI. Listo para usar, sin mezcla o preparación necesaria. Contiene 0,1% de azida de sodio como conservante. Para un solo uso en el procedimiento de INSTI. Estable hasta la fecha y las condiciones de almacenamiento indicado en la etiqueta. 3.-Botella que desarrolla el Color - Xn R22, Vial Solución 2, que contiene 1,5 ml de borato de color azul indicador de solución tampón, diseñada para detectar IgG en el punto de control y anticuerpos específicos contra el VIH en el lugar de prueba. Listo para usar, sin mezcla o preparación necesaria, invertir 2 o 3 veces inmediatamente antes de usar. Contiene 0,1% de azida de sodio como conservante. Estable hasta la fecha y las condiciones de almacenamiento, como se indica en la etiqueta. 4.- Botella de solución de aclaramiento - Xn R22, Vial Solución 3, que contiene 1,5 ml de buffer tris-glicina, la solución de aclaramiento de proteína está diseñado para eliminar la tinción de fondo de la unidad de la membrana antes de leer los resultados de la prueba INSTI. Listo para usar, sin mezcla o preparación necesaria. Contiene 0,1% de azida de sodio como conservante. Estable hasta la fecha y las condiciones de almacenamiento indicadas en la etiqueta. MATERIALES DE APOYO El siguiente material es para la prueba de sangre capilar (dedo) (incluido en los kits y especificado para su uso): 1.-Toallas con alcohol desechable.

5 2.- Lancetas desechables (que se suministra estéril) 3.-Pipeta desechables, capaz de dispensar 50 ul. MATERIALES REQUERIDOS PERO NO ENTREGADOS. -Equipo de protección personal como guantes, bata de laboratorio o una bata. -Apropiados contenedores de residuos biológicos peligrosos. -Bolas de algodón absorbente para la punción en el dedo o el cierre de la herida de punción venosa. Para la recolección de punción venosa: -Dispositivo para punción venosa, si la muestra de sangre es recogida. -Apropiado tubo de colección de sangre. -Recipientes adecuados de envío. -Equipo de protección personal. -Apropiados contenedores de residuos biológicos peligrosos y desinfectantes. MATERIALES DISPONIBLES COMO ACCESORIOS AL KIT Controles para el INSTI test HIV-1/HIV-2: Muestra de control de suero humano HIV-negativo y HIV-1/HIV-2 positivo de plasma humano desfibrinada por separado (no ) están disponible en BioLytical Laboratories en cantidades definidas por el usuario, para uso en procedimientos de control de calidad. Por favor referirse a la sección de control de calidad, siguiendo los procedimientos y las instrucciones de los test de control de INSTI test HIV-1/HIV- 2. ADVERTENCIA Para uso diagnóstico in vitro solamente. Se recomienda leer el prospecto completo antes de comenzar el procedimiento de prueba. Aunque el test está diseñado para ser fácil de usar, de conformidad con el procedimiento de prueba, es necesaria su lectura para asegurar resultados precisos. 1.- No mezcle los reactivos de lotes diferentes. 2.- No usar los reactivos o kits más allá de la caducidad.

6 3.- No usar la unidad de membrana si la bolsa de aluminio se ha abierto previamente o si la integridad de los envases ha sido comprometida. Una vez que la unidad de membrana se ha abierto, debe ser utilizado inmediatamente. 4.- Evite la contaminación microbiana de los reactivos. 5.- La azida de sodio está presente en el 0,1% en todos los reactivos de ensayo. La azida sódica puede reaccionar con el plomo o tuberías de cobre para formar azidas metálicas muy explosivas. Si los productos que contienen azida de sodio se descartan en el desagüe, utilice gran cantidad de agua para evitar la acumulación de azida. Compruebe con las agencias reguladoras locales para determinar en qué concentración de azida de sodio puede causar que un producto sea regulado como residuo peligroso 6.- Las características de la prueba INSTI HIV-1/HIV-2 no se han establecido para otros fluidos corporales. Solo de sangre con EDTA, la sangre del dedo, suero y plasma EDTA. El uso de la sangre recogida en otros anticoagulantes EDTA no ha sido validado. No existen datos suficientes para interpretar las pruebas obtenidas con otros fluidos corporales, sangre acumulada o combinadas de suero y plasma EDTA, o productos a base de tales agrupaciones. 7.- No utilizar el reactivo y el volumen de muestra más allá de lo recomendado, puede resultar en fugas y / o desbordamiento de líquidos de la unidad de membrana. 8.- Los pacientes que han estado en terapia a largo plazo de medicamentos antirretrovirales pueden resultar en falsos negativos en el test INSTI HIV-1/HIV Las muestras de pacientes con condiciones graves de hipogammaglobulinemia como el mieloma múltiple puede resultar en falsos resultados negativos o no válido con INSTI. PRECAUCIONES. 1.- Todas las muestras deben manipularse como si fueran capaces de transmitir enfermedades infecciosas. Se recomienda nivel 2 de bioseguridad o normas equivalentes. 2.- Lávese bien las manos después de manejar o de realizar esta prueba. 3.- No fumar, comer o beber en las zonas donde las muestras o los reactivos del equipo se están manejando. 4.- Use una bata de laboratorio y guantes desechables durante la manipulación de los reactivos del kit o muestras. No pipetear con la boca. 5.- Evite el contacto con la piel y los ojos. Si esto ocurre, lave el área afectada con agua. 6.-Evite los aerosoles. 7.- Deseche todas las muestras y los materiales utilizados para realizar los test como si contuvieran agentes infecciosos. El método preferido de eliminación es la esterilización en autoclave durante un mínimo de una hora a 121 º C, seguido de incineración. Residuos líquidos, no contiene ácido, y los residuos neutralizados se pueden mezclar con hipoclorito de sodio en

7 volúmenes de tal manera que la mezcla final contenga 0,5% de hipoclorito de sodio (una solución que contenga 10% de cloro es de uso doméstico). Deje completar por lo menos 30 minutos para descontaminación. No use en autoclave soluciones que contienen cloro. 8.- Los derrames deben ser limpiados y descontaminados de acuerdo a los procedimientos establecidos para el manejo de derrames biopeligrosos. PROCEDIMIENTO DEL TEST. Nota: Todas las unidades de prueba deben ser usadas de inmediato una vez abiertas. Todos los reactivos deben verterse de manera uniforme en el centro del test. TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE CAPILAR (Punta del Dedo). 1.- Reunir los materiales de apoyo (toallas, lancetas, pipetas), una bolsa sellada que contenga la unidad de membrana INSTI, y un vial de diluyente de la muestra, desarrollador de color y solución de aclaramiento para cada test a realizar. PRECAUCIÓN: La cantidad de muestra (sangre del dedo) es crítica. Para asegurarse de que la cantidad de sangre adecuada se logre, siga estas instrucciones cuidadosamente. 2.- Masajee la punta del dedo para permitir que la sangre se mueva en la superficie (los dedos se tornan de color rosa). Use almohadillas de calefacción si están disponibles para calentar la mano. La mano debe ser colocada a nivel de la cintura o más bajo. 3.- Limpie la punta del dedo con alcohol. 4.- Tan pronto como el dedo está seco, desenroscar la tapa verde de protección de la lanceta, y luego tire hacia fuera (ver figura A). Pulse el dedo firme en el punto justo debajo de donde la lanceta se aplicará. Con la otra mano, sostenga la lanceta por el cuerpo y el cuerpo de la lanceta firmemente contra el sitio de punción para activar el dispositivo (vea la Figura B abajo). Inmediatamente desechar la lanceta usada en un contenedor de objetos punzantes. 5.- A medida que la sangre brota, mantenga la pipeta horizontal tocando con la punta de la pipeta la muestra de sangre (vea la Figura C abajo). La acción capilar automáticamente extrae la muestra completando la línea de llenado y se detiene. Si la sangre escurre muy poco, aplique una suave presión intermitente cerca del sitio de la punción para obtener el volumen de sangre necesario. Si el flujo sanguíneo es inadecuado, realizar una segunda punción en la piel con una lanceta.

8 PRECAUCIÓN: El llenado es automático: Nunca se debe apretar el tubo durante la toma de la muestra. 6.- Transfiera la sangre, tomada con la pipeta, al vial con el diluyente (Solución 1). Alinear la punta de la pipeta con el frasco de diluyente de la muestra y apriete la perilla para dispensar la muestra (ver Figura D). NOTA: Si la muestra no es expulsada, mantenga la pipeta verticalmente y deslizar un dedo sobre (sin presionar) el orificio de ventilación, a continuación, presione la perilla (ver figura E). Vuelva a tapar el vial y mezclar por inversión. Siga el procedimiento general, previa toma de muestras, a continuación. De sangre entera con EDTA, suero y plasma-edta y Test de Control: 1.- Llevar las muestras a temperatura ambiente y mezclar cada muestra antes de su uso. No caliente o repetidamente congele / descongele las muestras. 2.- Reunir una bolsa sellada que contenga la unidad de membrana INSTI y un vial de diluyente de la muestra, Desarrollador de Color y Solución de aclaramiento para cada prueba que se realizará. NOTA: En el ajuste "Point of Care", para los controles INSTI Test kits, es importante utilizar un dispositivo de pipeta de 50 ul para añadir el material de control al vial de diluyente de la muestra. No utilice la pipeta desechable provista para la recogida de sangre desde el dedo. PROCEDIMIENTOS GENERALES DESPUES DEL MUESTREO 1.- Abra la bolsa y retire con cuidado la unidad de membrana, sin tocar el centro del contenedor. Coloque la unidad sobre una superficie plana. Para fines de identificación de la

9 muestra la unidad de la membrana puede ser etiquetada con el nombre del paciente o el número. NOTA: En este punto, es importante que los pasos siguientes se realicen de inmediato y de forma secuencial. 2.- Mezcle la solución muestra/diluyente y vierte todo el contenido en el centro de la Unidad de la membrana (NOTA: Se debe realizar esto dentro de los cinco minutos después que la muestra haya sido agregada al vial con el diluyente). La muestra debe ser absorbida a través de la membrana en menos de 30 segundos, sin embargo, los tiempos de absorción varían ligeramente dependiendo del tipo de muestra. 3.- Homogeneizar el Desarrollador Color lentamente invirtiendo para mezclar bien la solución. Continúe este proceso hasta que observe que el reactivo se suspende de manera uniforme. Abra el revelador de color y añadir todo el contenido al centro de la unidad de membrana. La solución de color debe fluir a través de por completo en aproximadamente 20 segundos. 4.- Abrir la solución de la aclaramiento y vierta todo su contenido en el centro de la unidad de membrana. Se aclarará el color de fondo y facilitara la lectura. Lea inmediatamente el resultado, mientras que la membrana está todavía húmeda. No lea los resultados si son más de 5 minutos los transcurridos después de la adición de la solución de aclaramiento. CONTROL DE CALIDAD. Kit Controles: La prueba de anticuerpos HIV-1/HIV-2 INSTI tiene incorporado un IgG control del procedimiento que demuestra la validez del ensayo y la adecuada adición de la muestra. Un color azul en el punto de control indica que la muestra fue apropiadamente agregada y que el procedimiento de ensayo se realizó correctamente. El punto de control aparecerá en todas las pruebas INSTI válidos. (Refiérase a la interpretación de los resultados, más abajo).

10 Los controles del INTI Test están disponibles separadamente para ser usado solo con la prueba de anticuerpos HIV-1/HIV-2 INSTI. Los controles son utilizados para verificar el rendimiento del test y la interpretación de los resultados. El kit de control deben ser realizados bajo las siguientes circunstancias: - para la verificación del un nueva operador del INSTI antes de realizar el test a muestras de pacientes. -cuando se cambia a un nuevo número de lote del INSTI test. -siempre que un nuevo envío del test haya sido recibido. -cuando la temperatura durante el almacenamiento de los kits esta fuera del rango de C. -cuando la temperatura del área del test cae fuera del rango de C. - a intervalos regulares que determine el usuario. Consulte las instrucciones de uso de los controles de la prueba HIV-1/HIV-2 INSTI para obtener más información sobre el uso de estos reactivos. Es responsabilidad de cada usuario del test de anticuerpos HIV-1/HIV-2 INSTI para establecer un programa de garantía de calidad adecuado para garantizar un rendimiento adecuado de acuerdo a sus condiciones y lugares específicos. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. - No lea los resultados después de 5 minutos de haber agregado la solución de aclaramiento. - Si usa las muestras de control provistas por BioLytical, todos los controles positivos deben ser reactivos con el INSTI test y todos los controles negativos deben ser no reactivos con INSTI test. Controles que producen resultados incorrectos e inválidos deben ser re- testeado con INSTI test. Si los resultados son aun incorrectos o inválidos, informar inmediatamente a BioLytical Laboratories o Gebrax-Chile. NO REACTIVO: Un punto azul que es claramente perceptible por encima de cualquier color de fondo que aparecen en la membrana. Este es el punto de control de procedimiento y muestra que la prueba se ha realizado correctamente. El control se encuentra en la parte superior del marco de lectura más alejada de la pestaña de plástico en la unidad de membrana. No hay reacción debe ser visible en el lugar de prueba, que se encuentra debajo del control. Un resultado no reactivo indica que los anticuerpos HIV-1/HIV-2 no se detectaron en la muestra.

11 REACTIVOS (POSITIVOS): Los dos puntos azules que se pueden distinguir por encima de cualquier matiz de fondo indican que la muestra contiene anticuerpos contra VIH-1 y / o VIH- 2. Un punto puede ser más oscuro que el otro. Una muestra que da este patrón es considerado como un reactivo preliminar. Después de un resultado de rápida reacción del test, una muestra de sangre venosa debe ser depositada en un tubo de tapa color lila de recogida EDTA (de sangre o plasma) o un tubo de tapa roja (para suero), y enviarlo a un laboratorio para la prueba del VIH de confirmación. NO VÁLIDO: La prueba no es válida si se da cualquiera de las siguientes situaciones: A. - No hay ningún punto en la membrana. B. - El punto de prueba apareció sin el punto de control. C. - Color uniforme a través de la membrana. D. - Sólo manchas azules aparecen en la membrana.

12 NOTA: la prueba no válida, con muestras de sangre capilar (dedo) en este test debe repetirse con una nueva muestra con una unidad de membrana nueva, los componentes del equipo y materiales de apoyo. Prueba no válidos con EDTA, plasma EDTA o muestras de suero en el laboratorio se debe repetir con una unidad nueva membrana y los componentes del kit. INDETERMINADO: La prueba es indeterminada si un anillo apenas visible aparece en el área del test. Después de un resultado indeterminado INSTI, una muestra de sangre venosa debe ser almacenada en un tubo de recogida tapa color lila de EDTA (de sangre o plasma) o un tubo de tapa roja (para suero), y enviarlo a un laboratorio para la prueba del VIH de confirmación. Tenga en cuenta lo siguiente: 1.- Después de un resultado reactivo (positivo) o indeterminado INSTI, una muestra de sangre venosa debe ser almacenada en un tubo de recogida tapa color lila de EDTA (de sangre o plasma) o un tubo de tapa roja (para suero), y enviarlo a un laboratorio para la prueba del VIH de confirmación. 2.- En función de la titulación de anticuerpos, la muestra de reacción (positiva) puede ser menos intensa en color que el procedimiento de control, o viceversa. 3.- Sólo una mancha de color azul de color visiblemente más oscuro que el color de fondo debe ser interpretada como reactiva. En raras ocasiones, un anillo de fondo tenue puede

13 aparecer alrededor del punto de prueba, lo que no debe interpretarse como un resultado reactivo (positivo). Sólo test que exhiben distintos puntos de prueba totalmente formado de color azul combinado con un claro punto de control completamente formado azul debe ser interpretada como reactiva (positivo). 4.- Un resultado inválido indica que el test fue realizado incorrectamente o hay un problema con la muestra o el dispositivo. La ausencia de un punto de control diferente por lo general indica que el volumen de la muestra era insuficiente. Una prueba inválida debe repetirse. 5.-Un ensayo en un tono uniforme azul a través de toda la membrana, lo que oculta al control y puntos de prueba, se produce cuando más de 60 ul de sangre entera se utiliza y el flujo a través de la membrana de ensayo está obstruido. 6.- Un individuo que tiene un resultado no reactivo (negativo), pero tiene conducta o actividades de alto riesgo para VIH es recomendable obtener pruebas adicionales en los próximos meses. 7.- A fin de reducir significativamente el riesgo de transmisión del VIH, es aconsejable abstenerse de realizar actividades de alto riesgo como relaciones sexuales sin protección o compartir agujas en todo momento. LIMITACIONES DE LA PRUEBA Tiempos de flujo. En algunos casos, las muestras pueden presentar tiempos de flujo más largo que lo normal. (Desde el momento en que la mezcla, muestra /diluyente, se vierte en la membrana y al tiempo de la solución de aclaramiento a fluido plenamente a través de la membrana). Esto se debe a distintos factores, como los componentes celulares, en especial con la sangre entera. En los casos de flujo largos de tiempo, una leve sombra en forma de un anillo pueden aparecer en el lugar del punto del test, pero esto no debe interpretarse como un resultado reactivo (positivo). Esto debe ser considerado como un resultado indeterminado. En estos casos, una muestra de sangre venosa debe ser elaborado en un tubo de recogida de tapa lila con EDTA, y procesados en el laboratorio para la prueba del confirmación de VIH. El procedimiento INSTI HIV-1/HIV-2 y la interpretación de los resultados debe ser seguido muy de cerca cuando las pruebas de la presencia de anticuerpos de VIH en suero, plasma o sangre total. No existen datos suficientes para interpretar los test realizados en otros fluidos corporales, sangre o combinadas de suero, plasma, o productos a base de tales agrupaciones, por lo tanto, las pruebas de estos ejemplares no es recomendable. El ensayo INSTI HIV-1/HIV-2 no ha sido validada para la detección de anticuerpos contra el VIH- 1 subtipos grupo O o N. El test INSTI HIV-1/HIV-2 detecta anticuerpos contra HIV-1/HIV-2 y es útil en el establecimiento de la infección con el VIH. Debido a una variedad de factores que pueden causar reacciones no específicas, pacientes encontrados reactivos (positivos) utilizando el ensayo de INSTI HIV-

14 1/HIV-2 debe tener una muestra de sangre con EDTA procesadas por laboratorio basada en pruebas de confirmación. Una persona que tiene anticuerpos contra el VIH se sospecha que están infectadas con el virus, una adecuada consejería y evaluación médica debe ser ofrecida. La presencia de anticuerpos de VIH indica exposición previa al virus, pero no es un diagnóstico de SIDA, que sólo puede ser hecha por un médico. Sin embargo, un test no reactivo (negativo) no descarta la exposición en el pasado con el VIH. El riesgo de que una persona asintomática con repetidas test de suero reactiva desarrolle SIDA no se conoce. La prevalencia de infección por HIV en varios grupos, así como clínicas y guías de salud publica están disponibles en el reporte de morbilidad y mortalidad de CDC. CARACTERÍSTICAS DE LA PRUEBA. Sensibilidad y especificidad. La sensibilidad de un test es la capacidad de una prueba para detectar a las personas verdaderamente infectadas, mientras que la especificidad de un test es la capacidad de una prueba para identificar a todas las personas no infectadas. Por lo tanto, una prueba sensible no debe producir falsos negativos, y una prueba específica no debe producir falsos positivos. No existe un estándar único para la detección de la sensibilidad o especificidad de una prueba de anticuerpos para el VIH en suero humano, plasma o sangre entera. Sin embargo, el método generalmente aceptado para expresar la sensibilidad y la especificidad de una prueba dada en términos de tasa de detección es comparar los resultados con los resultados del ensayo aprobado suplementarios, tales como ELISA y Westernblot. Basándose en estos criterios, la sensibilidad y especificidad de la prueba INSTI HIV-1/HIV-2 se determinó mediante la comparación de sangre capilar (punta del dedo), sangre entera con EDTA, muestras de suero y plasma EDTA, que también se analizaron para anti-vih-anticuerpos por ELISA y Western Blot. Muestras analizadas usando el test INSTI HIV-1/HIV-2 están en 4 categorías: 1.- Veinticinco paneles de seroconversión comerciales (cuadro 1) y un anticuerpo HIV-1 bajo título del panel de rendimiento (tabla 3), que representan una amplia gama de títulos de anticuerpos o clases. 2.- Muestras de pacientes de Canadá seroconversión de VIH. (Tabla 2) 3.- Muestras prospectivas de los pacientes con VIH reclutados en el ensayo clínico canadiense (tabla 4). 4.- Muestras prospectiva negativas de pacientes reclutados en el ensayo clínico canadiense. (Tabla 5) Datos clínicos canadienses BioLytical laboratorios muestran : 1.- La sensibilidad relativa del test INSTI HIV-1/HIV-2 para la detección temprana de anticuerpos se evaluó mediante paneles estandarizados seroconversión de Boston Biomédica Inc. Tabla 1 resume los datos del ensayo INSTI HIV-1/HIV-2 en comparación con un número

15 de licencia EE.UU u europeas aprobaron los inmunoensayos enzimáticos (EIA) mediante paneles comerciales. 2.- La sensibilidad relativa del test INSTI HIV-1/HIV-2 para la detección temprana de anticuerpos también se evaluó utilizando los pacientes canadienses con seroconversión. La Tabla 2 resume los datos de los pacientes con seroconversión canadiense. 3.- La sensibilidad de la prueba INSTI HIV-1/HIV-2 fue 99% de sangre del dedo, EDTA sangre, plasma y suero (rango 99,0-99,6%) (Tabla 4). Resultados indeterminados y no válidos fueron eliminados de la evaluación. 4.- La especificidad de la prueba INSTI HIV-1/HIV-2 fue 99,3% (rango de 99,3 a 100%) de sangre capilar (punta del dedo), EDTA de sangre, plasma y suero (Tabla 5). Resultados indeterminados y no válidos fueron eliminados de la evaluación. 5.- Resultados de los test anticuerpo INSTI HIV-1/HIV-2 no se vieron afectados por la mayoría de las condiciones que puedan interferir o sustancias, como se ilustra en el cuadro 6. Muestras de pacientes con condiciones graves con hypogammaglobulinemia como el mieloma múltiple en los resultados pueden obtener resultados falsos negativos o no válido con INSTI. 6.- La sensibilidad del test de anticuerpos INSTI HIV-1/HIV-2 en el VIH-2 muestras positivas es del 98,3% (cuadro 7).

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19 REPRODUCTIBILIDAD. Se realizaron dos estudios para evaluar la reproducibilidad de la prueba de anticuerpos INSTI HIV-1/HIV-2. Para cada estudio, un grupo de nueve muestras de plasma con código oculto que consta de 4 anticuerpos positivos, 1 muestra el nivel de anticuerpos muy bajo, y 4 muestras de anticuerpos negativos, se analizó por triplicado en tres sitios en 3 días separados con 3 lotes de INSTI. La reproducibilidad global del INSTI para el VIH-1 fue del 99,7% (646/648, dos muestras de anticuerpos negativos fueron leídos como débil positivo en un sitio). Para la muestra un nivel muy bajo de anticuerpos, el 59% (48/81) de los resultados fue positivo mientras que el 41% (33/81) fueron negativos. La reproducibilidad global del INSTI para el VIH-2 fue del 99,8% (566/567, una muestra de anticuerpos negativos fue leído como indeterminado en un sitio: En el más bajo nivel de anticuerpos dos muestras, el 85,2% de los resultados fueron positivos, con miembros de Grupo 3 (69 / 81), mientras que el 63% de los resultados fueron negativos con los Miembros del Panel 4 (51/81). VIH-1 subtipo de pruebas Cuarenta y ocho muestras de 48 pacientes infectados con cepas VIH-1 no B fueron probados. Todas las muestras fueron genotipo por secuenciación de didesoxinucleótidos del gen de la proteasa todo el VIH-1 y los primeros 450 codones de la transcriptasa inversa, para la determinación del subtipo. La distribución del subtipo fue el siguiente: A: 7 C: 8 D: 8 F: 6 G: 8 J: 1 CRF AG: 5 CRF AE: 5 La sensibilidad de la prueba de anticuerpos al INSTI HIV-1/HIV-2 en los 48 no-b muestras de VIH resultaron positivos fue del 100%.

20 Importado y Distribuido por Gebrax Cia Ltda. Alcántara 200. Piso 6 Las Condes. Santiago.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA: USO PREVISTO:

PRINCIPIO DE LA PRUEBA: USO PREVISTO: ESPECIFICACIONES DEL KIT: Cat. No Cantidad Reactivo Almacenamiento ADRT0011 1 x 20 PRUEBAS 1 x 3 ml Diluente USO PREVISTO: HIV 2-30 C El HIV-1/2 Plus Combo Rapid Test es un inmunoensayo de flujo lateral

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