INDICE LISTA DE PARTICIPANTES 3 2. OBJETIVO DEL INFORME 4 3. ALCANCE DEL ENSAYO DE APTITUD 4 4. DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD 4
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2 INDICE LISTA DE PARTICIPANTES 3 1. INTRODUCCIÓN 4 2. OBJETIVO DEL INFORME 4 3. ALCANCE DEL ENSAYO DE APTITUD 4 4. DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD 4 5. REFERENCIAS 5 6. RESPONSABILIDADES 5 7. MUESTRAS ENVIADAS Preparación de las muestras Homogeneidad y estabilidad 6 8. RESULTADOS ENVIADOS POR LOS PARTICIPANTES 6 9. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO DE LOS LABORATORIOS COMENTARIOS 8 ANEXO 1 TABLAS 10 ANEXO 2 - GRÁFICOS 16 Página 2 de 20
3 LISTA DE PARTICIPANTES CIATI AC Av. Mitre y 20 de junio s/n Villa Regina, Río Negro Argentina Gestión de Calidad y Laboratorio Avda. Parque Antonio Rabat Sur 6165 Vitacura, Santiago Chile INAL-ANMAT Estados Unidos 25 Ciudad Autónoma de Buenos Aires Argentina INTI Agroalimentos Av. General Paz 5445 San Martín, Buenos Aires Argentina INTI Mendoza Araoz 1511 Mayor Drummond, Luján de Cuyo, Mendoza Argentina Laboratorio de Control S.A. Tte. Gral. Tomás Guido 1095 Morón, Buenos Aires Argentina Página 3 de 20
4 1. INTRODUCCIÓN Debido a las exigencias de diferentes organismos, entidades regulatorias y la sociedad, se requiere que los laboratorios puedan mostrar la calidad de sus servicios, a través de resultados confiables. Algunos de los requerimientos de los sistemas de gestión de la calidad son el aseguramiento de las mediciones, ensayos y calibraciones, y la demostración de la competencia técnica de los laboratorios mediante la participación en ensayos de aptitud. Los ensayos de aptitud son una herramienta útil para identificar problemas que pudieran estar relacionados con procedimientos inadecuados, la eficacia de la formación o supervisión del personal, las calibraciones o verificaciones de los equipos e instrumentos y la validación de técnicas. Los ensayos de aptitud brindan al laboratorio la posibilidad de iniciar acciones de mejora y fomentar la eficacia de sus procesos. 2. OBJETIVO DEL INFORME El objetivo del presente informe es mostrar el desempeño individual de los participantes en el ensayo de aptitud Conservantes en Bebidas Analcohólicas detallando el desarrollo del proceso de organización, aplicación de metodologías estadísticas, evaluación de los datos y conclusiones obtenidas. 3. ALCANCE DEL ENSAYO DE APTITUD El alcance del presente ensayo de aptitud es la determinación de sorbato de potasio y benzoato de sodio en bebidas analcohólicas. 4. DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD El INTI preserva la confidencialidad de los participantes mediante la asignación de un código único elegido en forma aleatoria, el cual es sólo conocido por el propio participante. El tratamiento de los resultados y el informe de los mismos se realizan utilizando ese mismo número. Se informa a cada participante el número que le fue asignado para el presente ensayo de aptitud. El personal de INTI firma un compromiso de confidencialidad. Página 4 de 20
5 5. REFERENCIAS 5.1 ISO/IEC Conformity assessment General requirements for proficiency testing. 5.2 ISO (2005). Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons. 5.3 The international harmonized protocol for the proficiency testing of analytical chemistry laboratories. Pure & Appl. Chem, Vol. 78, 1, (2006). 5.4 ISO Parts 1-6 (1994). Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results. 5.5 Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement. Eurachem, Second edition (2000). 5.6 Procedimiento específico Diseño del ensayo de aptitud - PS Procedimiento específico Diseño estadístico del ensayo de aptitud - PG Instrucción Evaluación de la homogeneidad y estabilidad de las muestras - IS PS Procedimiento específico Elaboración del informe - PS RESPONSABILIDADES El grupo técnico está integrado de la siguiente manera: Coordinador: Lic. Jennifer Kawior INTI SAI Experto técnico: Lic. Alicia Gutiérrez INTI Agroalimentos Experto estadístico: Prof. Silvina Forastieri INTI SAI Página 5 de 20
6 7. MUESTRAS ENVIADAS 7.1 Preparación de las muestras Los participantes recibieron dos muestras compuestas por tres frascos cada una para analizar con diferentes concentraciones de benzoato de sodio y sorbato de potasio: a) una bebida analcohólica sabor manzana y b) una muestra preparada por gravimetría por el laboratorio de Productos Azucarados, Miel y Bebidas de INTI Agroalimentos. Cada envase contenía aproximadamente 30 ml de las muestras respectivamente. Las muestras fueron rotuladas por el orden de llenado y posteriormente asignadas al azar a cada participante. 7.2 Homogeneidad y estabilidad Para la determinación de la homogeneidad de las muestras se tomaron al azar tres muestras de la bebida y tres de la muestra preparada por gravimetría. Se analizaron los contenidos de sorbato de potasio y benzoato de sodio. Para evaluar la homogeneidad se siguieron los lineamientos sugeridos en las normativas internacionales obteniéndose resultados satisfactorios. En relación a la estabilidad de las muestras, se sabe que las dos sustancias a medir no pueden considerarse suficientemente estables durante todo el período de ejecución del ensayo de aptitud. En consecuencia en el protocolo de medición enviado a los participantes, se estableció la fecha de análisis de las muestras para que la inestabilidad ya mencionada tenga el mismo efecto para todos los participantes 8. RESULTADOS ENVIADOS POR LOS PARTICIPANTES Los datos enviados por los participantes pueden verse en las tablas 1 a 3 del ANEXO 1. Las metodologías empleadas por los participantes pueden observarse en la tabla 4 a 6 del ANEXO 1. En los gráficos 1 al 4 del anexo 2 se puede observar la desviación de los resultados individuales respecto del valor medio interlaboratorio para cada parámetro. Página 6 de 20
7 9. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LOS RESULTADOS Como valor asignado a las muestras se utilizó el valor de consenso, calculado como el promedio robusto de los resultados informados por los participantes del ensayo, utilizando el Algoritmo A que se describe en la norma ISO 5725 (1994) Parte 5 (ref. 1). Para la estimación de la desviación estándar interlaboratorio robusta (s*) se utiliza el Algoritmo A también descripto en la mencionada norma. La incertidumbre del valor asignado es u x = 1,25 x s*/ p, donde p es el número de participantes. Los resultados del análisis estadístico pueden observarse en la siguiente tabla: Muestra Bebida Valor medio interlab. Desviación estándar interlab. (s L ) Desviación estándar interlab. relativa porcentual (s L relativa % ) Incertidumbre del valor medio (u) Sorbato de potasio (mg/l) 219,2 22,2 10,1 11,3 Benzoato de sodio (mg/l) 636,8 97,3 15,3 49,7 Muestra por gravimetría Valor medio interlab. Desviación estándar interlab. (s L ) Desviación estándar interlab. relativa porcentual (s L relativa % ) Incertidumbre del valor medio (u) Sorbato de potasio (mg/l) 239,9 14,0 5,8 7,1 Benzoato de sodio (mg/l) 233,4 26,5 11,4 13,5 En las Tablas 7 del ANEXO 1 se resumen los valores numéricos correspondientes a las desviaciones de todos los resultados enviados con respecto al valor medio interlaboratorio. 10. EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO DE LOS LABORATORIOS La evaluación del desempeño de los laboratorios participantes se realizó de acuerdo con los procedimientos aceptados internacionalmente y que se citan en la Bibliografía. Se utilizó como criterio el cálculo del parámetro z, definido de la siguiente manera: Donde: z = ( x 1/2 - x ref ) / s L Página 7 de 20
8 x 1/2 = promedio para cada laboratorio = x i / r x ref = valor asignado a los parámetro de la muestra enviada. En este caso se utilizó el valor de consenso obtenido con el procedimiento descripto en el ítem 9. r = número de replicados informados s L = desviación estándar (estimador de la reproducibilidad o variancia entre laboratorios) En este caso es la desviación estándar robusta obtenida (s*) como se describió en el ítem 9. Los valores del parámetro z así obtenidos pueden verse en los gráficos 5 al 8 del ANEXO 2 y en la tabla 8 del ANEXO 1. Es posible clasificar los resultados obtenidos por los laboratorios de la siguiente forma: z 2 satisfactorio, 2 < z < 3 cuestionable, z 3 no satisfactorio 11. COMENTARIOS Se puede observar que la mayoría de los participantes obtuvieron resultados satisfactorios para ambas determinaciones. Se recomienda al participante n 1 revisar su estimación de incertidumbre y su metodología. En la tabla siguiente se resume el número de determinaciones satisfactorias, cuestionables y no satisfactorias, evaluadas mediante el parámetro z. Muestra bebida Parámetro Z 2 2 < Z < 3 Z 3 Benzoato de sodio Sorbato de potasio Muestra por gravimetría Parámetro Z 2 2 < Z < 3 Z 3 Benzoato de sodio Sorbato de potasio Aquellos participantes que hayan obtenido valores de z mayores que 2 deberían revisar la metodología empleada. A fin de lograr un mecanismo de mejora continua, solicitamos a los laboratorios que nos envíen cualquier sugerencia o comentario que consideren oportunos. Página 8 de 20
9 Por otro lado, en caso de tener alguna duda sobre la ejecución de los métodos de ensayo o de las causas de diferencias en los resultados, rogamos nos consulten. Página 9 de 20
10 ANEXO 1 Tablas Página 10 de 20
11 Tabla 1 Datos enviados por los participantes Muestra bebida Muestra bebida Benzoato de sodio (mg/l) Frasco 1 Frasco 2 Frasco 3 n part. Incert. Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 exp.(k=2) % 2 489,1 521,8 520,5 525,2 520,1 541,9 541,5 519,9 529,4 20, ,4 668,6 648,4 680,8 686,2 686,4 680,7 681,7 681,2 10,1 Muestra bebida Sorbato de potasio (mg/l) Frasco 1 Frasco 2 Frasco 3 Incert. n part. Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 exp.(k=2) % 2 218,1 225,1 223,9 222,7 220,0 225,8 222,8 220,3 220,3 5, ,9 223,5 224,9 230,6 229,6 231,4 225,7 224,2 224,9 8,1 Página 11 de 20
12 Tabla 2 Datos enviados por los participantes Muestra preparada por gravimetría Muestra preparada por gravimetría Benzoato de sodio (mg/l) Frasco 1 Frasco 2 Frasco 3 Incert. n part. Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 exp.(k=2) % 2 193,5 196,5 194,4 196,7 186,6 189,6 190,9 189,4 185,7 7, ,9 246, ,6 250,2 244,5 250,7 247, ,6 Muestra preparada por gravimetría Sorbato de potasio (mg/l) Frasco 1 Frasco 2 Frasco 3 Incert. n part. Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 Dato 1 Dato 2 Dato 3 exp.(k=2) % 2 221,6 224,0 221,4 222,3 215,6 218,0 219,4 216,5 216,4 5, ,0 251,1 254,4 252,5 250,7 244,4 252,8 250,0 244,9 8,7 Tabla 3 Número de muestra enviada n Muestra bebida Muestra prep. por gravimetría part. Frasco 1 Frasco 2 Frasco 3 Frasco 1 Frasco 2 Frasco Página 12 de 20
13 Part n * Equipo modelo 8 HPLC c/dad- Shimadzu, mod 20A SHIMADZU 10AVp HPLC Merck Hitachi Hewlett Packard series 1100 Lachrom Hitachi modelo DAD L7450A, Bomba L7100 Calefactor L7350 HPLC UV, Shumadzu software Class LC10 Tabla 4 Condiciones cromatográficas enviadas por los participantes Sistema de inyección BIl 20 AHT Automático Columna/ precolumna cromatográfica Pursuit XRS 5c18-250x4,6mm-Agiten Supelcosil LC 18DB,25cmx4,6mm, 5μm Autosampler RP (5μm) Manual 20μl (manual) Automático *El participante n 6 no informa la unidad Waters C18 5µm; 4,6x250mm Fenil hexil Luna 250x4,6 mm dp=5u Pinnacle II C18 5um- 250x4,6mm/Security Guard Cartridge C18, 4,0*3,0mm Temperatura de trabajo/ fase móvil 36 C 40 C/MeOH 40% - Buffer HacO/NaAcO (ph=4,3) 60% 25 C/Buffer Acetato de Sodio ph C columna/acetato de amonio 0,005 ph 4.2 Acetonitrilo (80-20) 35±1 C FM: (25 Acetonitrilo:75 Buffer fosfato 0,01 M ph 3,0±0,1) 30 C/Ácido acético 10% regulada a ph3 Flujo o gradiente 800 mg acetato de Amonio/l a ph 4,4 y 10% de Acetonitrilo Tiempo de corrida 1 ml/min 12 min Detección (λ) nm Benzoato: 227 nm - Sorbato: 258 nm 1.0 ml/min 15 min 240 nm 1,5 ml/min 10 min 1,3 ml/min 1,5 ml/min 9 minutos 35 minutos 260 y 230 nm 244 nm 254* Página 13 de 20
14 Tabla 5 Materiales de referencia o estándares utilizados por los participantes Part Benzoato de sodio Sorbato de potasio n 1 Art 127. Merck. 40 mg/100ml Art Fluka. 40 mg/100 ml 2 SIGMA. Solución madre 1000 mg/l SIGMA-ALDRICH. Solución madre 1000 mg/l 3 Fluka 99,6% Sigma 100,3% 4 Acido Benzoico. Sigma Aldrich Lote Acido Sórbico. Accustandard lote 28H0823. a 300 mg/l a 300 mg/l 5 Testio secundario. Elbahiense Testigo secundario. Sigma LN ,989 g/g de sustancia tal L:BCBB ,99 g/g de droga cual tal cual. 6 J.T.BAKER. Conc:100,3%. Título:99,07% FLUKA. Conc:>99%. Título: 99,79% Tabla 6 Método de cuantificación utilizado por los participantes N part. Método de cuantificación 1 Curva de calibración 2 Curva de calibración 3 Curva de calibración 4 Curva de calibración 5 Calibración en un punto 6 Calibración en un punto Tabla 7 Desvíos respecto del valor medio interlaboratorio nº part V. medio Muestra bebida Benzoato de sodio Sorbato de potasio (mg/l) (mg/l) % desv.v. % desv.v. V. medio medio medio interlab interlab 1 712,7 11,9 246,0 12, ,3-17,8 222,1 1, ,3-16,4 173,4-20, ,0 6,0 217,6-0, ,9 10,4 216,1-1, ,5 5,9 227,5 3,8 Página 14 de 20
15 nº part V. medio Muestra por gravimetría Benzoato de sodio Sorbato de potasio (mg/l) (mg/l) % desv.v. % desv.v. V. medio medio medio interlab interlab 1 253,6 8,6 247,2 3, ,5-18,0 219,5-8, ,2-6,5 231,3-3, ,9 1,5 240,7 0, ,6 7,8 250,2 4, ,6 5,7 250,4 4,4 N part Tabla 8 Parámetro z Muestra bebida Benzoato de Sodio Sorbato de potasio 1 0,8 1,2 2-1,2 0,1 3-1,1-2,1 4 0,4-0,1 5 0,7-0,1 6 0,4 0,4 N part Muestra por gravimetría Benzoato de Sodio Sorbato de potasio 1 0,8 0,5 2-1,6-1,5 3-0,6-0,6 4 0,1 0,1 5 0,7 0,7 6 0,5 0,8 Página 15 de 20
16 ANEXO 2 - Gráficos Página 16 de 20
17 Gráfico 1 Datos enviados por los participantes - Muestra bebida- Benzoato de Sodio Valor medio v ref interlab +/- sl Valor medio interlaboratorio Valor medio informado n participante Gráfico 2 Datos enviados por los participantes - Muestra Bebida- Sorbato de Potasio 290 Valor medio v ref interlab +/- sl Valor medio interlaboratorio 270 Valor medio informado n participante Página 17 de 20
18 Gráfico 3 Datos enviados por los participantes - Muestra por gravimetría- Benzoato de Sodio 290 Valor medio v ref interlab +/- sl Valor medio interlaboratorio 270 Valor medio informado n participante Gráfico 4 Datos enviados por los participantes - Muestra por gravimetría- Sorbato de Potasio 280 Valor medio v ref interlab +/- sl Valor medio interlaboratorio 270 Valor medio informado n participante Página 18 de 20
19 Gráfico 5 Parámetro z - Muestra bebida- Benzoato de Sodio Parámetro z n participante Gráfico 6 Parámetro z - Muestra bebida- Sorbato de Potasio 3 2 Parámetro z n participante Página 19 de 20
20 Gráfico 7 Parámetro z - Muestra por gravimetría- Benzoato de Sodio Parámetro z n participante Gráfico 8 Parámetro z - Muestra por gravimetría- Sorbato de Potasio 3 2 Parámetro z n participante Página 20 de 20
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