PRÁCTICAS DE LABORATORIO

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1 1 DIRECCIÓN GENERAL DE EDUCACIÓN TECNOLÓGICA INDUSTRIAL REALIZA ANALISIS INMUNOLOGICOS PRÁCTICAS DE LABORATORIO TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO SEMESTRE IV CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial de servicios 33 Leona Vicario SAN LUIS R.C., SONORA MÈXICO

2 2 INDICE No PRACTICAS PAGINA 1 DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y RH (ABO) 3 2 SEPARACION DEL SUERO Y PLASMA DE LA SANGRE 5 3 PRUEBA DE EMBARAZO (GCH) 6 4 PROTEINA C- REACTIVA (PCR) 7 5 ROSA DE BENGALA 9 6 REACCIONES FEBRILES 11 7 FACTOR REUMATOIDE 13 8 DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE SIFILIS 15 9 ANTIDOPING PRUEBAS CRUZADAS HIV 19 COMPETENCIAS: GENERICAS: 5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos. 1. Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo. 2. Sintetiza evidencias obtenidas mediante la experimentación para producir conclusiones y formular nuevas preguntas. 6. Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información. DISCIPLINARES: Utiliza el lenguaje y la comunicación como una herramienta para interpretar y representar la realidad que estructura nuestras percepciones diarias. Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en la realización de actividades experimentales. PROFESIONALES: Realiza inmunoensayos

3 3 PRACTICA No DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y RH (ABO) INTRODUCCIÓN: Cuando comenzaron a intentarse las transfusiones de sangre frecuentemente se obtenían resultados fatales los que dependían esencialmente de la información incompleta sobre el fenómeno que puede ocurrir cuando se mezcla sangre de dos individuos de diferente especie o grupo sanguíneo. A este fenómeno se le denomina aglutinación que es cuando los glóbulos rojos del donador reúnen cúmulos cuando entran en contacto con el plasma del receptor sufriendo destrucción, en un principio se creyó que dicho problema era de naturaleza patológica y fue en el año de 1901 cuando LANSTEINER descubrió que era de origen inmunológico, estableciéndose que existen 4 grupos principales de sangre que son: A, B, AB, O. Estos grupos son proteínas que se encuentran en la membrana de los glóbulos rojos y se llaman aglutinógenos (hace las veces de antígeno) y los anticuerpos del suero se llaman aglutininas. También reconoció la relación que existe en una muestra de sangre entre los anticuerpos del suero y los antígenos de los glóbulos rojos. GRUPOS O A B AB GLÓBULOS ROJOS AGLUTINÓGENOS (ANTÍGENOS) PLASMA AGLUTININAS (ANTICUERPOS) Por lo tanto una persona del grupo A contiene el aglutinógeno A en los glóbulos rojos y tiene la aglutinina anti-b en el plasma. Y una persona del grupo B contiene el antígeno B en los glóbulos rojos y tiene la aglutinina anti-a en el plasma. El grupo AB no tiene ninguna aglutinina pero tiene los dos aglutinógenos. En cambio el grupo O no tiene aglutinógenos y tiene ambos anticuerpos ( O significa cero). FACTOR R H Este factor fue descubierto por Lansteiner y Wiener en 1940, ya que previas investigaciones descubrieron una aglutinina anormal en el suero de una mujer que padeció un aborto, y se pensó que esta aglutinina era la causa de la reacción que la madre sufrió al recibir una transfusión de su esposo tipo O Rh positivo. Las complicaciones hemolíticas hasta entonces inexplicables en las transfusiones de sangre, así como la causa de la enfermedad hemolítica del recién nacido (eritroblastosis fetal) resultaron ser debidas a una incompatibilidad en el sistema

4 4 Rh expresada por la formación de anticuerpos anti-rh en el suero de personas cuyos eritrocitos carecen de antígeno Rh. METODO: PRUEBA DE AGLUTINACIÓN EN PLACA FUNDAMENTO: Se basa en la ausencia o presencia de los aglutinógenos A ó B MATERIAL: Lancetas Torundas impregnadas de alcohol Antisueros Anti-A, Anti B, Anti-D Portaobjetos ó placas especiales Aplicador de madera MATERIAL BIOLOGICO: sangre capilar TÉCNICA: 1.- Colocar en el portaobjeto o placa especial 3 gotas de sangre por examinar, inmediatamente aplicar los antisueros uno para cada gota perfectamente localizados, se mezclan con un palillo de madera distinto para cada mezcla 2.- Inclinar suavemente el portaobjetos en movimientos circulares y de balanceo, haciendo que la mezcla vaya hacia la periferia para observar más fácil la aglutinación. 3.- Observar si existe aglutinación macroscópica, normalmente los resultados son muy claros, si son dudosos pueden comprobarse examinando la mezcla en el microscopio con objetivo seco débil. 4.- Las lecturas deben hacerse antes de que se seque la muestra, el tiempo máximo habitual es de 3 minutos. NOTA Si tiene sangre coagulada remover el coágulo quedando en el fondo suero y paquete de eritrocitos, poner 2 gotas en un tubo de ensaye + 2 gotas de anti-d mezclar e incubar a 37º C durante media hora. INTERPRETACIÓN: Anti-A Anti-B Anti-D Anti-Rh O Rh+ A Rh + B Rh + AB Rh+ Los eritrocitos del grupo O no son aglutinados por ningún antisuero. Los eritrocitos del grupo A son aglutinados por el suero anti-a, pero no por el anti-b. Los eritrocitos del grupo B son aglutinados por el suero anti-b, pero no por el anti-a Los eritrocitos del grupo AB son aglutinados por ambos antisueros. REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA: Para el factor Rh si aglutina es Rh positivo y si no aglutina es Rh negativo

5 5 PRACTICA No SEPARACION DEL SUERO Y PLASMA DE LA SANGRE FUNDAMENTO: El suero se obtiene cuando se coloca una muestra de sangre en un tubo de vidrio vacio, se deja coagular, se centrifuga y la parte líquida que se separa del coágulo se llama SUERO. El plasma se obtiene cuando se coloca una muestra de sangre en un tubo de vidrio que contenga un anticoagulante (E.D.T.A, heparina), se centrifuga y la parte líquida que se separa de los elementos celulares se llama PLASMA. MATERIAL: 4 tubos de ensaye pequeños 1 tubo con anticoagulante Torunda de algodón 2 pipetas Pasteur con bombillas Jeringa de 5 ml torniquete Gradilla 1 aplicador de madera Centrifuga Baño maría Área blanca Bata blanca MATERIAL BIOLOGICO: Sangre venosa TÉCNICA: PARA OBTENER SUERO: a) Hacer limpieza donde se va a efectuar la punción venosa. b) Utilizando la jeringa con el bisel hacia arriba realizar la punción venosa y obtener los 5 mm. de sangre. c) Verter la mitad de la sangre obtenida inmediatamente en un tubo limpio y vacio, dejando resbalar la sangre por las paredes del mismo. d) Dejar reposar el tubo que contiene la sangre durante unos 20 min. En baño maría a 37º C con el fin de que se forme el coágulo y se separe del suero. e) Remover el coágulo con un aplicador de madera (para no hemolizar los glóbulos rojos) y proceder a centrifugar el tubo durante 5 min. (con contrapeso). f) Con la pipeta Pasteur separar el suero de la sangre coagulada y pasarlo a otro tubo vacio, y anotar el color y aspecto del suero. PARA OBTENER PLASMA: a) Una parte de la sangre tomada anteriormente se vacía a un tubo limpio que contenga anticoagulante y se le pone tapón. b) Se agita el tubo unos minutos con el fin de que se mezcle bien la sangre con el anticoagulante. c) Proceder a centrifugar durante 5 min (con contrapeso). d) Parar la centrifuga, sacar el tubo y con la pipeta Pasteur separar el plasma de la sangre no coagulada. e) Pasar el plasma a otro tubo limpio y seco, observar y anotar su color y aspecto REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: REVISADO: FECHA:

6 6 PRACTICA No PRUEBA DE EMBARAZO (GCH) SIGNIFICADO CLÍNICO: La gonadotropina coriónica humana (GCH) es secretada normalmente por la placenta. En el embarazo la secreción aumenta tiempo después la GCh se excreta por la orina y se alcanzan niveles relativamente altos, lo que permite la utilización de técnicas rápidas y simples para la determinación del embarazo. MATERIAL: Un cartucho de prueba compuesto de colorante unido a anticuerpos policlonales específicos para GCh, anticuerpos inmovilizados contra GCH, anticuerpos monoclonales IgG. MATERIAL BIOLOGICO: orina o suero TÉCNICA La prueba es un inmuno ensayo cualitativo en orina y suero utiliza una combinación de anticuerpos que detectan selectivamente niveles bajos de GCh en la muestra (orina o suero). La prueba se lleva a cabo mediante la adición de muestra en la zona de prueba seguido de la formación de líneas coloridas en las zonas de muestra y de control. La muestra migra por acción capilar a lo largo de la membrana y reacciona con el anticuerpo GCh- colorido conjugado específico y forma una línea colorida en la zona de muestra en la porción de la membrana. Como procedimiento de control, siempre aparecerá una línea colorida en la zona de control sin importar la presencia de la GCh en la muestra. INTERPRETACIÓN: La ausencia de esta línea colorida sugiere un resultado negativo. REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DE LA PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA:

7 7 PRACTICA No PROTEINA C- REACTIVA (PCR) INTRODUCCIÓN En 1930 Tillet y Francis reportaron una reacción que podía ser demostrada en el suero de pacientes que padecían neumonía, el extracto neumocócico era un carbohidrato denominado C. (de ahí se deriva su nombre) Y a la proteína humana capaz de precipitarlo se denomino proteína C- reactiva. La proteína C-reactiva es un examen general para verificar si hay una inflamación en todo el cuerpo. No es un examen específico; es decir, puede revelar que usted tiene una inflamación en alguna parte del cuerpo, pero no puede señalar la localización exacta. FUNDAMENTO: En el laboratorio, la muestra de sangre se mezcla con un líquido llamado antisuero, el cual contiene sustancias que buscan la proteína específica. El médico puede ordenar este examen para: Verificar exacerbaciones de enfermedades inflamatorias como: artritis reumatoide, lupus o vasculitis. Determinar si un antiinflamatorio está funcionando para tratar una enfermedad o afección. Sin embargo, un nivel de PCR bajo no siempre significa que no se presente una inflamación. Los niveles de PCR pueden no estar elevados en personas con artritis reumatoide y lupus, pero la razón de esto no se conoce. Un examen positivo significa que la persona tiene inflamación en el cuerpo, lo cual puede deberse a una variedad de afecciones diferentes, incluyendo: Cáncer, Enfermedad del tejido conectivo, Ataque cardíaco, Infección, Enfermedad intestinal inflamatoria, Lupus, Neumonía neumocócica, Artritis reumatoide, Fiebre reumática, Tuberculosis. MATERIAL: Laminilla 3 Tubos de ensaye Palillo de madera Pipeta Pasteur c/bombilla Jeringa 3ml. Torundas c/alcohol torniquete gradilla Área blanca

8 8 TÉCNICA: 1. Esperar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente 2. Obtener suero de la manera ya conocida 3. Preparar una dilución 1:20 del suero problema, (diluyendo: 1 ml. del suero con 1.9 ml. de la solución de trabajo) 4. Colocar una gota del suero diluido en la primera área marcada de la laminilla y enseguida depositar una gota de los sueros control positivo y negativo respectivamente en la segunda y tercer área de la misma 5. Mezclar el reactivo PCR látex hasta tener una suspensión homogénea y añadir una gota a cada uno de los sueros. 6. Mezclar con un aplicador diferente para cada uno 7. Mover en ángulo de 45º la lamina por dos minutos 8. Observar inmediatamente la aglutinación, utilizando una fuente de luz directa. VALORES NORMALES EN UN EXAMEN Varía según el laboratorio en el cual se realice. El examen que el especialista puede realizar es el Examen de Alta Sensibilidad PCR, para poder diagnosticar el riesgo de una cardiopatía en el paciente. Bajo riesgo: bajo 1.0 mg. /L. Riesgo promedio: niveles entre 1.0 mg. /L. y 3.0 mg. /L. Alto riesgo: niveles sobre 3.0 mg. /L. REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA:

9 9 ROSA DE BENGALA PRACTICA No INTRODUCCIÓN: Antígeno Brucelar Amortiguado para el diagnóstico de Brucelosis. Que es una enfermedad infecciosa causada por el contacto con animales portadores de la bacteria llamada Brucella la cual puede infectar al ganado vacuno, las cabras, los camellos, los perros y los cerdos. La bacteria se puede diseminar a los humanos si se entra en contacto con carne infectada o la placenta de animales infectados o si bebe leche o come queso sin pasteurizar. FUNDAMENTO: Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas específicas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis). MATERIAL Y REACTIVOS: Laminilla 3 Tubos de ensaye Palillo de madera Pipeta Pasteur/ bombilla Jeringa 3ml. Torundas c/alcohol torniquete gradilla Área blanca Antígeno Rosa de Bengala Control Positivo y Negativo de Brucella PROCEDIMIENTO: 1. Obtener el suero de la forma ya conocida 2. Llevar a temperatura ambiente el reactivo y controles. 3. adicione una gota de la muestra del paciente en un círculo de la placa. 4. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después coloque una gota en la placa de prueba, en el mismo círculo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles. 5. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4minutos. 6. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante: Después de este tiempo la lectura ya no es válida. INTERPRETACION: La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar. Este es un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se pueden omitir, además de que se pueden presentar reacciones no específicas. No Aglutinación Suero Negativo Cualquier cantidad de Aglutinación Presencia de anticuerpos específicos. Suero Positivo REPORTE: Nombre del estudiante: Nombre paciente: Revisado: Resultado: Fecha:

10 10 REACCIONES FEBRILES PRACTICA No INTRODUCCIÓN Antígenos Febriles es un término referido a un grupo de suspensiones bacterianas, representativo de un número de bacterias patógenas para la especie humana y responsables de la aparición de infecciones (brucelosis, salmonelosis y ciertas rickettsiosis) que cursan con un cuadro febril en el huésped infectado. La mejor forma para establecer la etiología de una enfermedad infecciosa es el aislamiento e identificación del agente causal de la misma. Sin embargo, estos medios de diagnóstico no son siempre de fácil aplicación y es ahí donde radica la importancia del uso de las suspensiones bacterianas en la detección de los anticuerpos presentes en el suero del paciente (método indirecto de diagnóstico). En el diagnóstico clínico, los resultados obtenidos con el uso de los Antígenos Febriles deben ser considerados siempre en relación a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio. Método: Reacción de Widal, Reacción de Weil Félix, Reacción de Hudlesson Reacción de Widal Reacción de Weil Félix Reacción de Hudlesson Antígeno tífico o Antígeno Proteus 0X19 Brucella abortus Tífico H Rickettsiosis (garrapata) Brucelosis Paratífico A Paratífico B tifoidea, salmonelosis (Alimentos contaminados) FUNDAMENTO: Se basa en encontrar los anticuerpos aglutinantes producidos por la inoculación de microorganismos lo cual trae como consecuencia reacciones febriles intestinales en el individuo. MATERIAL: Torundas c/alcohol 3 Tubos de ensaye 2 Palillos de madera Pipeta Pasteur c/bombilla Placa Masini torniquete Jeringa 3ml. gradilla Área blanca

11 11 PRUEBA CUALITATIVA: Técnica: Reacción de mezcla simple 1. Con una pipeta serológica se coloca en cada una de las secciones o concavidades (placa de vidrio con 6 concavidades) una gota del suero del paciente. 2. Cada gota del suero se le agrega una gota de cada uno de los antígenos febriles (un antígeno distinto para cada gota de suero) 3. Cada palillo de madera se corta en 3 o 6 piezas (o las que se puedan y así ahorrar) para mezclar bien, ya que cada mezcla debe de hacerse con palillo diferente. 4. Hacer oscilar cuidadosamente la placa durante 4 min. Y observar la aglutinación macroscópica. INTERPRETACIÓN: Positiva: Si existiera aglutinación y se hace la prueba cuantitativa en placa de la que haya presentado la aglutinación Negativa: No hay aglutinación gota de suero más gota de suero más gota de suero más Tífico o Tífico H Paratífico A gota de suero más gota de suero más gota de suero más Paratífico B Proteus 0X19 Brucella abortus REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA:

12 12 FACTOR REUMATOIDE PRACTICA No MÉTODO: Prueba Cualitativa en placa utilizando partículas de Látex. Fundamento: Consiste en utilizar partículas de Látex de poliestireno de tamaño uniforme cubiertas de gama globulinas humana que floculan en contacto con el suero de los pacientes con artritis reumatoide y ocasionalmente con otras enfermedades. MATERIAL: Jeringa de 3 ml. 2 tubos de ensaye Torundas Placa Pasteur/bombilla TÉCNICA: La prueba es cualitativa 1. El suero problema se separa por centrifugación de sangre venosa coagulada. 2. Depositar una gota de suero del paciente en una de las secciones de la placa 3. Colocar una gota de suero control positivo y una gota de suero control negativo en secciones separadas de la misma placa de vidrio donde se coloca el suero problema 4. Añadir a cada suero una gota de reactivo globulina látex y mezclar bien con un aplicador distinto para cada suero 5. Hacer oscilar la placa manualmente dándole movimiento de rotación durante un minuto. Observar si se presenta aglutinación macroscópica en el suero problema y control positivo INTERPRETACIÓN: Negativa: Cuando hay una suspensión uniforme sin aglutinación visible (como en el control negativo) Positivo débil: Aglutinación visible con formación de pequeños agregados o aglutinación parcial Positiva: Aglutinación visible con formación de agregados grandes y fondo claro, aglutinación total (como en control positivo) REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA:

13 13 PRACTICA No DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE SIFILIS INTRODUCCIÓN La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ETS) provocada por la bacteria Treponema pallidum. A menudo se le ha llamado la gran imitadora porque muchos de sus signos y síntomas no pueden ser diferenciados de los de otras enfermedades. Las úlceras genitales (chancros) producidos por la sífilis hacen que sea más fácil trasmitir y contraer la infección por VIH por vía sexual. Se calcula que el riesgo de contraer la infección por VIH es de 2 a 5 veces más alto cuando está presente la sífilis. La sífilis se puede diagnosticar mediante el examen del material de un chancro (úlcera infecciosa) en un microscopio especial llamado microscopio de campo oscuro. Si las bacterias de la sífilis están presentes en el chancro, se notarán al microscopio. El examen de sangre es otra manera de determinar si una persona tiene sífilis. Poco tiempo después de que una persona se infecta, el organismo produce anticuerpos que pueden ser detectados mediante un examen de sangre seguro, preciso y económico. El nivel de anticuerpos en la sangre será bajo durante meses o incluso años después de que la enfermedad se ha curado. Dado que una sífilis no tratada en una mujer embarazada puede infectar y posiblemente provocar la muerte de su bebé, toda mujer embarazada debería hacerse un examen de sangre para la detección de la sífilis. MÉTODO: Prueba cualitativa en placa VDRL (venereal disease reagina laboratory) FUNDAMENTO: Se basa en detectar un aun anticuerpo llamada reagina en suero de pacientes con sífilis al hacerlo reaccionar con su antígeno especifico cardiolipina, colesterol, lecitina) MATERIAL BIOLÓGICO: Sangre venosa MATERIAL: 2 tubos de Palillos de Placa para Gradilla ensaye madera VDRL TÉCNICA: 1.- Se prepara el suero problema mediante la técnica ya conocida 2.- Se incuba el suero a 64 o centígrados por 3 minutos 3.- Ya inactivado el suero problema se agrega una gota el la placa 4.- Posteriormente se añade una gota del antígeno (cardiolipina) 5.- Se agita por rotación durante 4 min. los antígenos

14 14 La aglutinación se puede observar microscópicamente por reflejo en luz o al microscopio de 40 a 100 aumentos Interpretación: Partículas repartidas uniformemente o aglomeración muy ligera es considerada NEGATIVA Partículas agrupadas en pequeños grumos es POSITIVA DEBIL Partículas agrupadas en grumos medianos y grandes es POSITIVA Positiva positiva débil Negativa REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADO: REVISADO FECHA:

15 15 ANTIDOPING PRACTICA No Drug-Test de Instant-View, nos permite detectar el consumo de 5 drogas de abuso, a través de una muestra de saliva humana. Dicha muestra es obtenida directamente a través de la almohadilla de recolección integrada al inmunoensayo de prueba. Luego de haberse recolectado la muestra, tan solo es necesario esperar 5 minutos para obtener resultados específicos para cada una de las drogas detectables ya sean estos: positivo o negativo. Puntos de Corte Anfetaminas (AMP) 50 mg/ml Benzodiazepinas (BZD) 20 mg/ml Cocaína (COC) 20 mg/ml Marihuana (THC) 40 mg/ml Opiáceos (OPI) 12 mg/ml Nota: la técnica o tipo de droga a determinar puede variar dependiendo la marca de la prueba REPORTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADOS: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: REVISADO: FECHA:

16 16 PRUEBAS CRUZADAS PRACTICA No INTRODUCCIÓN Una de las aplicaciones más importantes en la determinación de grupos sanguíneos es la que se refiere a la preparación para transfusiones. Esto significa que la sangre del receptor y la del donador deben estudiarse con mucho cuidado antes de cada transfusión, tantas veces transfusiones se practiquen, aunque se trate del mismo donador y receptor. Se recomienda que las pruebas cruzadas deban efectuarse mediante tres métodos cuando menos: Prueba en tubo con solución salina Prueba de Coombs Indirecta Prueba con proteína concentrada MATERIAL BIOLÓGICO: Sangre del donador, sangre del receptor MATERIAL DE TRABAJO: área blanca 8 tubos de ensaye 4 pipetas Pasteur 1 bombilla 2 jeringas de 5 ml. o vacutainer torniquete galón con cloro 2 pipetas de 1 ml. y una de 10 ml. 1 gradilla De acuerdo con su importancia relativa, las pruebas cruzadas se dividen en: PRUEBA MAYOR Y PRUEBA MENOR TÉCNICA: (Todos los pasos se realizan en donador y receptor simultáneamente) 1. Extraer 5 ml. de sangre venosa del donador y receptor 2. Depositar la mitad de sangre en un tubo de ensaye con anticoagulante (tubo con ) y la otra mitad en tubo sin anticoagulante (tubo sin ) 3. Centrifugar ambos tubos y eliminar el plasma del tubo con y obtener el paquete de glóbulos rojos 4. Del tubo sin obtener el suero 5. Lavar el paquete de glóbulos 3 veces con solución salina isotónica 6. Preparar 2.5 ml. de la suspensión de glóbulos rojos al 4.5% del donador y receptor (0.11 ml de suspensión y 2.4 ml. de s. salina) 7. Los tubos del receptor se colocan en el extremo izquierdo de la gradilla y los del donador en el extremo derecho 8. Marcar 2 tubos de la siguiente manera: Prueba mayor (+) SR/ED -Dos gotas de suero del receptor -Dos gotas de suspensión de eritrocitos del donador Prueba menor ( - ) SD/ER -Dos gotas de suero del donador -Dos gotas de suspensión de eritrocitos del receptor

17 17 sr er ed sd + _ 9. Centrifugar por un minuto, mezclar e incubar a 37º C por 30 min. 10. Volver a centrifugar por un minuto INTERPRETACIÓN: Aglutinación o hemólisis (+) Compatibilidad incompatibilidad Prueba Mayor (-) Prueba Menor (-) 100 % 0 % Prueba Mayor (-) Prueba Menor (+) 75 % 25 % Prueba Mayor (+) Prueba Menor (-) 25 % 75 % Prueba Mayor (+) Prueba Menor (+) 0 % 100 % La sangre ideal para transfusiones no presenta aglutinación en ninguna de las dos pruebas, en caso de extrema urgencia se puede usar sangre que sea 75% compatible con la del receptor, pero en ningún caso cuando muestra mayor incompatibilidad. OJO Se deben realizar pruebas testigo y nunca deberán presentar aglutinación REPORTE: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: NOMBRE DEL RECEPTOR: NOMBRE DEL DONADOR: RESULTADO: REVISADO FECHA:

18 18 PRACTICA No VIH El VIH es el virus que debilita el sistema inmunitario y produce el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Existen dos pruebas que se utilizan para diagnosticar la infección causada por el VIH: una detecta la presencia de anticuerpos específicos frente al VIH, que el organismo produce como respuesta al virus, y la otra identifica la presencia del virus propiamente dicho. La prueba es un inmunoensayo rápido para la detección cualitativa de anticuerpos anti VIH tanto en sangre entera como en suero o plasma humano. TECNICA: Agregar una gota de suero o plasma en la concavidad que tiene la prueba, la cual viaja por capilaridad, si se utiliza sangre completa adicionar una gota de solución salina R ESULTADO: POSITIVO NEGAT IVO N U LO NULO C T C C C T T T C = CO NTROL T = T EST (P R UEBA) REPORTE: NOMBRE DEL PACIENTE: RESULTADOS: NOMBRE DEL ESTUDIANTE: REVISADO FECHA:

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