Para uso diagnóstico in vitro. P0207(01) Para uso con el sistema BD MAX Español

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1 B MAX StaphSR Para uso diagnóstico in vitro P0207(01) Para uso con el sistema BD MAX Español 4 I USO PREVISTO El ensayo BD MAX StaphSR realizado en el BD MAX System (sistema BD MAX) es una prueba diagnóstica automatizada y cualitativa in vitro para la detección directa y la diferenciación de ADN de Staphylococcus aureus (SA) y ADN de Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina (SARM) en torundas nasales obtenidas en pacientes con riesgo de colonización nasal. Para el análisis se usan la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real para la amplificación de ADN de SARM/SA y sondas fluorogénicas de hibridación con diana específica para la detección del ADN amplificado. La prueba BD MAX StaphSR está destinada a ayudar a prevenir y controlar las infecciones por SARM y SA en entornos sanitarios. No está destinada al diagnóstico de infecciones por SARM o SA ni para guiar o monitorizar el tratamiento de las infecciones por SARM/SA. Un resultado negativo no descarta la colonización nasal. Se necesitan cultivos concomitantes para recuperar organismos para el tipado epidemiológico o para posteriores pruebas de sensibilidad. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL PROCEDIMIENTO El Staphylococcus aureus es una de las principales causas de infección intrahospitalaria, como las infecciones del torrente sanguíneo y las infecciones en el entorno quirúrgico, cuyas manifestaciones clínicas varían desde pústulas a septicemia y muerte 1. Se encuentra comúnmente en la nariz o la piel de individuos sanos (portadores asintomáticos). El tratamiento de las infecciones por Staphylococcus aureus se ha convertido en un verdadero reto al aparecer nuevas cepas resistentes a agentes antimicrobianos anteriormente eficaces. Las cepas resistentes a la meticilina de Staphylococcus aureus se encuentran frecuentemente en entornos sanitarios y representan cerca del 60 % de los aislados de Staphylococcus aureus de adquisición nosocomial en algunas instalaciones sanitarias de Norteamérica y Europa 2, 3. En entornos hospitalarios, el SARM se puede transmitir de paciente a paciente a través de las manos contaminadas del personal sanitario. Entre los factores de riesgo para la colonización por SARM en entornos sanitarios se encuentran la estancia hospitalaria prolongada, la proximidad a pacientes infectados por el SARM, la exposición a múltiples y prolongados tratamientos con antibióticos de amplio espectro y la cualidad de portador del SARM. La tasa de infección con SARM es superior en pacientes colonizados con SARM. El Staphylococcus aureus es una de las principales causas de infección en entornos quirúrgicos (SSI). Es responsable del 20 % al 56 % de SSI, entre las cuales la SARM representa hasta el 57 % de los aislados 4. La tasa de mortalidad asociada a ambos patógenos varía del 5 al 22 % 4, 5. En la mayoría de pacientes con SSI, las infecciones por Staphylococcus aureus son de orígenes endógenos 4, 6. Las técnicas tradicionales utilizadas para la detección de Staphylococcus aureus y SARM requieren el cultivo y aislamiento de colonias puras, seguidos de pruebas de aglutinación para la identificación de Staphylococcus aureus, así como pruebas de susceptibilidad a la oxacilina, de detección del gen de resistencia a la meticilina (gen meca) o de detección de la proteína de fijación a la penicilina (PBP 2a) para la identificación del SARM. Si se utilizan estos métodos convencionales, para resolver el estado de Staphylococcus aureus y SARM se necesita un mínimo de 24 horas con un tiempo medio de más de 48 horas. Debido al aumento de la morbimortalidad asociada a las infecciones por Staphylococcus aureus, la aparición de cepas sin meca y la propagación del nuevo gen resistente a la meticilina (es decir, el gen mecc), la posibilidad de detectar y diferenciar con rapidez Staphylococcus aureus y SARM en cuestión de horas en lugar de días representa una clara ventaja frente a las prácticas actuales 1

2 y permite tratar y gestionar a los pacientes con mayor eficacia. Se recoge una muestra nasal y se transporta al laboratorio con la torunda recomendada (consulte la sección Equipo y materiales necesarios pero no suministrados). La torunda se coloca en un tubo de tampón de muestras BD MAX StaphSR. El tubo de tampón de muestras se debe agitar en vórtex para liberar las células de la torunda en el tampón. El tubo de tampón de muestras se coloca en el sistema BD MAX y tienen lugar los siguientes procedimientos automatizados: Las células bacterianas se someten a lisis, se extrae el ADN en microesferas magnéticas y se concentra para, a continuación, añadir una alícuota del ADN eluido a reactivos para PCR que contienen cebadores específicos de SA y SARM, destinados a amplificar las dianas genéticas (si la hay). La prueba también incluye un control de procesamiento de las muestras. El control de procesamiento de muestras se encuentra en el tubo de extracción y se somete a los pasos de extracción, concentración y amplificación con el fin de supervisar la presencia de sustancias inhibidoras y detectar deficiencias en el proceso debido a errores del instrumento o los reactivos. No se requiere ninguna intervención por parte del operador una vez que la muestra clínica, la BD MAX Unitized Reagent Strip (tira de reactivos individual BD MAX) y la BD MAX PCR Cartridge (tarjeta de PCR BD MAX) se han cargado en el sistema BD MAX. El sistema BD MAX automatiza la lisis de las muestras, la extracción y concentración del ADN, la rehidratación de los reactivos, la amplificación de los ácidos nucleicos y la detección de la secuencia del ácido nucleico diana mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real. Las dianas amplificadas se detectan mediante sondas de hidrólisis marcadas con fluoróforos extinguidos. El sistema BD MAX lleva a cabo de forma automática la amplificación, detección e interpretación de las señales. PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO El sistema BD MAX utiliza una combinación de reactivos de lisis y de extracción diseñada para llevar a cabo la lisis celular y la extracción del ADN. Después de la lisis celular enzimática a alta temperatura, los ácidos nucleicos liberados se capturan en microesferas de afinidad magnética. Las microesferas con los ácidos nucleicos fijados se lavan y los ácidos nucleicos se eluyen por calor en un tampón de elución. El ADN eluido se neutraliza con tampón de neutralización y se transfiere al Master Mix Tube (tubo de mezcla maestra) para rehidratar los reactivos para PCR. El reactivo de amplificación reconstituido se dispensa en la tarjeta de PCR BD MAX. El sistema sella las microválvulas de la tarjeta BD MAX PCR antes de iniciar la PCR para evitar la evaporación y la contaminación por amplicones. Las dianas de ADN amplificadas se detectan mediante sondas de hidrólisis (TaqMan) marcadas con un colorante fluorescente de indicación (fluoróforo) en un extremo y con una porción extintora en el otro extremo. Se utilizan sondas etiquetadas con fluoróforos distintos para detectar un amplicón específico en la intersección del extremo derecho del SCCmec (MREJ), los genes de resistencia a la meticilina meca y mecc, el gen nuc que codifica una nucleasa termoestable del Staphylococcus aureus y amplicones del Control de procesamiento de muestras detectables en cuatro canales ópticos distintos del sistema BD MAX: Los amplicones de la MREJ se detectan en el canal FAM, los amplicones meca y mecc en el canal ROX, los amplicones nuc en el canal VIC y los amplicones del Control de procesamiento de muestras en el canal Cy5.5. Cuando las sondas están en su estado original, la fluorescencia del fluoróforo se extingue debido a su proximidad con el extintor. No obstante, en presencia de ADN diana, las sondas se hibridan con sus secuencias complementarias y se hidrolizan mediante la actividad de la 5' 3' exonucleasa de la ADN-polimerasa a medida que esta sintetiza la cadena incipiente a lo largo de la plantilla de ADN. Como resultado, los fluoróforos se separan de las moléculas extintoras y se emite fluorescencia. La cantidad de fluorescencia detectada en los cuatro canales ópticos que se utilizan con el ensayo BD MAX StaphSR es directamente proporcional a la cantidad de la sonda correspondiente que se hidroliza. El sistema BD MAX mide estas señales al finalizar cada ciclo de amplificación e interpreta los datos para proporcionar un resultado. REACTIVOS REF. Contenido Cantidad BD MAX StaphSR Master Mix (B7) (Mezcla maestra) Mezcla maestra deshidratada para PCR que contiene polimerasa, nucleótidos y sondas moleculares y 24 pruebas cebadores específicos junto con una sonda molecular específica para el control de procesamiento de muestras. BD MAX StaphSR Unitized Reagent Strip (Tira de reactivos individuales) Tira de reactivo individual que contiene todos los reactivos líquidos y las puntas de pipeta desechables que 24 pruebas se necesitan para el procesamiento de las muestras y la extracción de ADN. BD MAX StaphSR Extraction Tube (B8) (Tubo de extracción) Reactivo de extracción deshidratado que contiene microesferas de afinidad magnética al ADN, 24 pruebas acromopeptidasa y control de procesamiento de muestras. BD MAX StaphSR Sample Buffer Tube (Tubo de tampón de muestras) 24 pruebas Tapones con membrana 25 EQUIPO Y MATERIALES NECESARIOS, PERO NO SUMINISTRADOS Torunda sencilla o doble con líquido de Stuart BBL CultureSwab de BD (n.º de catálogo de Becton Dickinson o ), torunda sencilla o doble con líquido de Stuart Copan (Venturi) Transystem* (Copan, n.º de catálogo 141C o 139C) Vórtex para múltiples tubos de VWR (n.º de catálogo de VWR ) Soporte para viales criogénicos NALGENE (n.º de catálogo de VWR ) Guantes desechables sin talco Tijeras estériles (opcional) Gasa estéril Cronómetro o temporizador BD MAX PCR Cartridges (n.º de catálogo de BD Diagnostic Systems ) 2

3 ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES La prueba BD MAX StaphSR es para uso diagnóstico in vitro. Este producto solo se puede usar con el sistema BD MAX. No utilizar reactivos ni materiales caducados. No utilizar el kit si la etiqueta que sirve como precinto de la caja exterior está rota al recibirla. No utilizar los reactivos si, a su recepción, las bolsas protectoras están abiertas o rotas. No utilizar los reactivos si el desecante del interior de las bolsas de reactivos no se incluye o está roto. No retirar el desecante de las bolsas de reactivos. Cerrar inmediatamente las bolsas protectoras de los reactivos con el cierre rápido después de cada uso. Eliminar el exceso de aire de las bolsas antes de cerrarlas. Proteger los reactivos del calor y la humedad. La exposición prolongada a la humedad afectará al rendimiento del producto. No utilizar los reactivos si el precinto metalizado está roto o dañado. No mezclar reactivos de bolsas, kits o lotes distintos. No intercambiar ni reutilizar los tapones, ya que se podría producir contaminación y poner en riesgo los resultados del test. Comprobar que las tiras de reactivos individuales están correctamente llenas de líquido (comprobar que los líquidos están en el fondo de los tubos) (consultar la figura 1). Comprobar las tiras de reactivos individuales para garantizar que están presentes todas las puntas de pipeta (consultar la figura 1). Actuar con precaución al utilizar soluciones químicas ya que se puede alterar la legibilidad del código de barras de la mezcla maestra y del tubo de extracción. Para que esta prueba funcione correctamente, es esencial utilizar técnicas de laboratorio adecuadas. Debido a la alta sensibilidad analítica de este test, se debe actuar con extremo cuidado para preservar la pureza de todos los materiales y reactivos. En los casos en que se realicen otras pruebas mediante PCR en la misma zona general del laboratorio, es necesario tener cuidado para evitar la contaminación del ensayo BD MAX StaphSR, del resto de reactivos necesarios para las pruebas y del sistema BD MAX. Evitar en todo momento la contaminación de los reactivos con microorganismos y con desoxirribonucleasa (ADNasa). Es necesario cambiarse los guantes antes de manipular los reactivos y las tarjetas. Para evitar contaminar el entorno con amplicones, no romper las tarjetas de PCR BD MAX después de usarlas. Los sellos de las tarjetas de PCR BD MAX están diseñados para evitar la contaminación. El laboratorio debe llevar a cabo de forma habitual un control ambiental para minimizar el riesgo de contaminación cruzada. Las tarjetas de microfluidos BD MAX se pueden utilizar para un máximo de dos series. La realización de la prueba BD MAX StaphSR fuera de los plazos de tiempo recomendados puede producir resultados no válidos. Las pruebas que no se realicen dentro de los plazos de tiempo especificados deberán repetirse. Se pueden probar controles adicionales de acuerdo con las directrices o los requisitos de la normativa local, estatal, provincial o federal, o de las organizaciones de acreditación. Controlar siempre las muestras como si fueran infecciosas y de conformidad con procedimientos de laboratorio seguros tales como los descritos en el Documento M29 del CLSI 7 y en la publicación Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 8. Llevar indumentaria de protección y guantes desechables al manipular los reactivos. Lavarse bien las manos después de realizar el test. No pipetear con la boca. No fumar, beber, mascar ni comer en áreas en las que se manipulen muestras o reactivos del kit. Desechar los reactivos no utilizados y los desechos de conformidad con la normativa local, estatal, provincial o federal. Consultar el manual del usuario del sistema BD MAX 11 para obtener información sobre advertencias, precauciones y procedimientos adicionales. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Las muestras recogidas deben mantenerse entre 2 y 25 C durante el transporte. Proteja las muestras de la congelación o la exposición a un calor excesivo. Las muestras se pueden guardar a 25 ± 2 C durante un máximo de 48 horas o a 2 8 C durante un máximo de 120 horas (5 días) antes de realizar la prueba. Los reactivos y componentes del ensayo BD MAX StaphSR son estables a 2 25 C hasta la fecha de caducidad indicada. No utilice componentes caducados. La mezcla maestra BD MAX StaphSR y los tubos de extracción se suministran en bolsas precintadas. Para proteger el producto de la humedad, precíntelas de nuevo inmediatamente después de abrirlas. Los tubos de reactivos son estables durante un máximo de 14 días a 2 25 C después de abrir y cerrar la bolsa por primera vez. Los tubos de reactivos de extracción y mezcla maestra no reconstituidos se mantienen estables hasta 5 horas a 2 25 C después de sacarlos de la bolsa protectora. 3

4 INSTRUCCIONES DE USO Recogida y transporte de las muestras Utilice un dispositivo de transporte en torunda recomendado (consulte la sección Equipo y materiales necesarios, pero no suministrados). Las muestras nasales deben obtenerse según los procedimientos normalizados de trabajo de la institución y del laboratorio o bien los siguientes: 1. Humedecer las torundas con dos gotas (aproximadamente 50 µl) de solución fisiológica salina estéril o utilizarlas en seco. 2. Insertar cuidadosamente la(s) torunda(s) en la fosa nasal del paciente (la punta de la torunda debe introducirse como máximo 2,5 cm desde el borde del orificio nasal). 3. Hacer girar las torundas sobre la mucosa del interior de las fosas nasales 5 veces. 4. Insertar las mismas torundas en la otra fosa nasal y repetir los pasos 2 y Colocar las torundas en su tubo de transporte. 6. Rotular el tubo de transporte. 7. Transportar las torundas al laboratorio siguiendo los procedimientos operativos habituales de la institución y el laboratorio (consulte la sección Conservación y estabilidad). Preparación de las muestras NOTA: Para cada muestra y cada control externo que se vaya a analizar, se necesita un (1) tubo de tampón de muestras, un (1) tapón con membrana, una (1) mezcla maestra (B7), un (1) tubo de extracción (B8) y una (1) tira de reactivos. NOTA: Para realizar un cultivo de las muestras clínicas antes de realizar el ensayo BD MAX StaphSR, consulte la sección Cultivo de muestras clínicas. 1. Obtener el número de tubos de tampón de muestras correspondiente al número de muestras y controles externos que se vayan a realizar. 2. Etiquetar cada tubo de tampón de muestras con la identificación correcta del paciente, asegurándose de no obstaculizar, escribir ni colocar la etiqueta encima de los códigos de barras. 3. Quitar el tapón del tubo de tampón de muestras. 4. Retirar la torunda del tubo de transporte de muestras y colocarla en el correspondiente tubo de tampón de muestras. 5. Sostener la torunda por el vástago cerca del borde del tubo (utilizar una gasa estéril para minimizar el riesgo de contaminación). Levantar la torunda aproximadamente un (1) cm del fondo del tubo de tampón de muestras y doblar el vástago contra el borde del tubo para romperlo. Método alternativo: usar unas tijeras estériles para cortar el vástago. 6. Cerrar el tubo de tampón de muestras con un tapón con membrana. 7. Colocar el tubo de tampón de muestras en un soporte para viales criogénicos NALGENE y agitar a máxima velocidad durante un (1) minuto en el vórtex para múltiples tubos. Con este vórtex se pueden procesar hasta 24 muestras de forma simultánea. Funcionamiento del sistema BD MAX NOTA: consulte el Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para obtener instrucciones detalladas (sección Funcionamiento). NOTA: El análisis del ensayo BD MAX StaphSR se debe realizar inmediatamente después del paso de agitación con vórtex indicado arriba (Preparación de las muestras, paso 7). Si es necesario repetir el análisis, vuelva a mezclar en el vórtex las muestras. 1. Encienda el sistema BD MAX (si no está encendido) e introduzca su <nombre de usuario> y <contraseña> para iniciar sesión. 2. Es necesario cambiarse los guantes antes de manipular los reactivos y las tarjetas. 3. Extraiga el número necesario de tiras de reactivos individuales del kit BD MAX StaphSR. Golpee suavemente cada tira de reactivos individual sobre una superficie dura para asegurarse de que todos los líquidos queden en el fondo de los tubos. 4. Extraiga los tubos de extracción y los tubos de mezcla maestra necesarios de sus bolsas protectoras. Elimine el exceso de aire de las bolsas y ciérrelas con el cierre rápido. 5. Por cada muestra que se vaya a analizar, coloque una (1) tira de reactivos individual en la gradilla del sistema BD MAX, empezando por la posición 1 de la gradilla A. 6. Monte un (1) tubo de extracción (envoltorio metalizado blanco) en la posición 1 de cada tira de reactivos individual como se muestra en la figura Monte un (1) tubo de mezcla maestra (envoltorio metalizado verde) en la posición 2 de cada tira de reactivos individual como se muestra en la figura 1. 4

5 Tubos insertables Depósito de desechos Puntas de pipeta n.º1 n.º2 n.º3 Tubo de lisis Tubo de extracción StaphSR Master Mix (Mezcla maestra) Tampón de elución Tampón de lavado Tampón de neutralización Figura 1: Coloque los tubos de mezcla maestra y de extracción BD MAX StaphSR en las tiras de reactivos individuales. 8. Haga clic en el icono Serie e introduzca el número de lote del kit correspondiente al análisis BD MAX StaphSR (por motivos de trazabilidad de lotes) escaneando el código de barras o introduciéndolo manualmente. NOTA: Repita el paso 8 cada vez que utilice un kit nuevo. 9. Vaya a la lista de trabajo. En el menú desplegable, seleccione <BD MAX StaphSR 55>. 10. En la lista de trabajo, introduzca el ID del tubo de tampón de muestras, el ID de paciente y el número de acceso (si procede) de forma manual o escaneando el código de barras con el lector. 11. Seleccione el número de lote del kit correspondiente (situado en la caja exterior) en el menú desplegable. 12. Repita los pasos 9 a 11 con los tubos de tampón de muestras restantes. 13. Coloque los tubos de tampón de muestras en las gradillas del sistema BD MAX correspondientes a las tiras de reactivos individuales que ha montado en los pasos 5 a 7. NOTA: Coloque los tubos de tampón de muestras en las gradillas de muestras con las etiquetas de código de barras 1D hacia fuera (esto facilita la lectura del código de barras de los tubos de tampón de muestras durante el registro de las muestras). 14. Coloque el número necesario de tarjetas de PCR BD MAX en el sistema BD MAX (consulte la Figura 2). En cada tarjeta caben 2 series de hasta 12 muestras, con un total de 24 muestras. El sistema BD MAX seleccionará automáticamente la posición y la fila de la tarjeta de PCR para cada serie. Las tarjetas de PCR BD MAX se pueden usar varias veces hasta que se hayan empleado todas las pistas. Para aprovechar al máximo las tarjetas de PCR BD MAX, en el modo de muestras, seleccione Asistente de serie en la pestaña Lista de trabajo para ver las asignaciones de pista. Consulte el Manual del usuario del sistema BD MAX para saber más. Figura 2: Cargue las tarjetas de PCR BD MAX. 5

6 15. Cargue las gradillas en el sistema BD MAX (Figura 3). Lado A Lado B Figura 3: Cargue las gradillas en el sistema BD MAX. 16. Cierre la tapa del sistema BD MAX System y haga clic en <Iniciar> para iniciar el procesamiento. 17. Al final de la serie, compruebe los resultados inmediatamente o almacene los tubos de tampón de muestras a 2 8 C durante un máximo 5 días O BIEN a 25 ± 2 C durante un máximo de 48 horas hasta la comprobación de los resultados. NOTA: Si se ha dañado algún tapón de membrana durante la serie, sustitúyalo por uno nuevo antes de guardar la muestra. NOTA: Los tubos de tampón de muestras de BD MAX StaphSR que se hayan preparado pueden almacenarse a 2 8 C durante un máximo de 120 horas (5 días) O BIEN a 25 ± 2 C durante un máximo de 36 horas después de haber añadido la muestra al tubo de tampón de muestras. Si se obtiene un resultado Indeterminado (IND), No resuelto (UNR) o Incompleto (INC), o si se produce un error en un control externo, se debe repetir la prueba del tubo de tampón de muestras preparado dentro de este plazo de tiempo (consulte la sección Procedimiento de repetición de la prueba). CONTROL DE CALIDAD Los procedimientos de control de calidad sirven para controlar el rendimiento de la prueba. Los laboratorios deben establecer el número, el tipo y la frecuencia de realización de tests de materiales de control según las directrices o los requisitos de la normativa de las organizaciones de acreditación locales, provinciales, estatales, federales o nacionales. Para obtener asesoramiento general acerca del control de calidad, el usuario puede consultar CLSI MM3 y EP12 9, BD no suministra los materiales para controles externos. El software del sistema BD MAX no utiliza controles externos positivos y negativos para interpretar los resultados del análisis de las muestras. Los controles externos se tratan como si fuesen muestras de pacientes. (Consulte la tabla de la sección Interpretación de los resultados para interpretar los resultados de las pruebas de control externo). 2. Se deberá ejecutar por lo menos un (1) control externo positivo y un (1) control externo negativo a diario hasta lograr una validación correcta del proceso en el sistema BD MAX en cada entorno de laboratorio. Si se realizan las pruebas de control con menor frecuencia, se deberá hacer de conformidad con toda la normativa aplicable. 3. El control externo positivo se usa para detectar un error considerable de los reactivos. El control externo negativo sirve para detectar la contaminación (o el arrastre) de los reactivos o el entorno por los ácidos nucleicos diana. 4. Las cepas de control se deben analizar conforme a las directrices o los requisitos de las normas o las organizaciones de acreditación locales, estatales o federales para supervisar la eficacia de todo el proceso de análisis. 5. Se recomienda usar varios tipos de controles externos para que el usuario pueda seleccionar el más adecuado para el programa de control de calidad de su laboratorio. a. Control externo negativo: Material de control disponible en el mercado (por ejemplo, una cepa de Staphylococcus aureus [ATCC 12228]) o una muestra previamente caracterizada y confirmada como negativa. BD recomienda que el control externo negativo se prepare antes que el control externo positivo para reducir la posibilidad de contaminación como resultado de la preparación del control. b. Control externo positivo: Los materiales de control disponibles en el mercado (por ejemplo, se puede usar una cepa de SARM de referencia [ATCC 43300], y una cepa de Staphylococcus aureus susceptible a la meticilina [como ATCC 29213]) o una muestra previamente caracterizada y confirmada como positiva. 6

7 Para preparar suspensiones del control externo, vuelva a suspender los aislados en solución salina hasta que tengan una turbidez 0,5 en la escala de McFarland (~1 x 10 8 UFC/mL). Realice diluciones en serie con solución salina hasta obtener una suspensión final de ~1,0 x 10 4 UFC/mL. Sumerja una torunda en la suspensión bacteriana diluida, escurra el líquido y coloque la torunda en el tubo de tampón de muestras correspondiente. Procésela y analícela como una muestra (consulte las secciones Preparación de las muestras y Funcionamiento del sistema BD MAX ). 6. Todos los controles externos deberán generar los resultados previstos (positivos para el control externo positivo y negativos para el control externo negativo) sin que falle ningún control externo (con resultado No resuelto o Indeterminado). 7. Un control externo negativo con un resultado positivo indica un problema de manipulación o contaminación de las muestras. Revise la técnica de manipulación de muestras para evitar que se mezclen o se contaminen. Un control positivo externo con un resultado negativo indica un problema de manipulación o preparación de las muestras. Revise la técnica de manipulación/ preparación de muestras. 8. Un control externo que dé lugar a un resultado del test No resuelto, Indeterminado o Incompleto indica la presencia de un error en un reactivo o en el sistema BD MAX. Compruebe el registro de mensajes de error en el monitor del sistema BD MAX. Consulte la sección Resumen de errores del sistema del Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para conocer la interpretación de los códigos de advertencia y error. Si el problema persiste, utilice reactivos de una bolsa sin abrir o utilice un kit de prueba nuevo. 9. Cada tubo de extracción contiene un control de procesamiento de muestras, que es un plásmido que contiene una secuencia de ADN diana sintético. El control de procesamiento de muestras monitoriza la eficacia de la captura, el lavado y la elución de ADN durante los pasos de procesamiento de la muestra, así como la eficacia de la amplificación y la detección del ADN durante el análisis de PCR. Si el control de procesamiento de muestras no se ajusta a los criterios de aceptación, el resultado de la muestra será No resuelto. No obstante, se notificarán resultados positivos (POS) y no habrá resultados negativos (NEG) para ninguna diana. Un resultado No resuelto indica una inhibición asociada a la muestra o el error de un reactivo. Repita el análisis de cualquier muestra con resultado No resuelto de conformidad con las indicaciones de la sección Procedimiento de repetición de la prueba. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS Los resultados están disponibles en la pestaña Resultados de la ventana Resultados del monitor del sistema BD MAX. El software del sistema BD MAX interpreta automáticamente los resultados de los tests. El resultado de una prueba puede ser SA NEG, MRSA NEG (negativo); SA POS, MRSA POS (positivo por SARM); SA POS, MRSA NEG (positivo por SA), o SA UNR, MRSA UNR (no resuelto), en función del estado de amplificación de la diana y del control de procesamiento de muestras. Los resultados IND (Indeterminado) o INC (Incompleto) se deben a errores en el sistema BD MAX. Los resultados se basan en el siguiente algoritmo de decisión (Tabla 1): Tabla 1: Interpretación de resultados de la prueba BD MAX StaphSR Resultado de prueba notificado SA POS MRSA POS SA POS MRSA NEG SA NEG MRSA NEG SA UNR MRSA UNR IND INC Interpretación de los resultados Se ha detectado ADN de SARM Se ha detectado ADN de SA; no se ha detectado ADN de SARM No se ha detectado ADN de SA ni de SARM No resuelto: muestra inhibidora o error de los reactivos, sin amplificación de diana o control del procesamiento de muestras Resultado indeterminado debido a un error del sistema BD MAX (con códigos de advertencia o error a ) Serie incompleta (con códigos de advertencia o error a ) a Consulte la sección Solución de problemas del Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para obtener información sobre la interpretación de los códigos de advertencias y errores. SA POS, MRSA POS (ADN de SA y SARM detectado) Se ha detectado una señal de fluorescencia de las dianas MREJ (específicas de Staphylococcus aureus) y meca o mecc, y El gen diana nuc puede o no haber sido detectado, pues se ha observado que, en raras ocasiones, el gen nuc puede estar ausente para SARM 12, y El control de procesamiento de muestras no se tiene en cuenta, puesto que la amplificación de la diana de SARM anula este control. SA POS, MRSA NEG (ADN de SA detectado; ADN de SARM no detectado) Se ha detectado una señal de fluorescencia correspondiente únicamente al gen nuc (indicativo de una cepa de SA); o bien Se ha detectado una señal de fluorescencia correspondiente al gen nuc y las dianas meca o mecc en ausencia de secuencias MREJ (indicativo de una cepa de SA presente con co-colonización de una cepa bacteriana resistente a la meticilina distinta de SA), o bien Se ha detectado una señal de fluorescencia correspondiente a las dianas del gen nuc y MREJ (indicativo de una variante de cassette vacío), o bien 7

8 Se ha detectado una señal de fluorescencia correspondiente únicamente a la diana MREJ (indicativo de una variante de cassette vacío de Staphylococcus aureus). MREJ es específico de Staphylococcus aureus y, por consiguiente, un indicador de cepa SA. La detección del gen nuc no es necesaria para obtener un resultado SA POS, MRSA NEG para una variante de cassette vacío, y El control de procesamiento de muestras no se tiene en cuenta, puesto que la amplificación de la diana de SA anula este control. SA NEG, MRSA NEG (ADN de SA y SARM no detectados) No se ha detectado ninguna señal de fluorescencia del ensayo BD MAX StaphSR de ninguna diana (dianas nuc, meca, mecc y MREJ) y se ha detectado una señal de fluorescencia del Control del procesamiento de muestras, o bien Se ha detectado señal de fluorescencia del gen meca o mecc solamente (los genes meca y mecc no son únicos de la especie Staphylococcus aureus y se pueden encontrar en otros géneros de bacterias como, p. ej., Staphylococcus epidermidis). SA UNR, MRSA UNR (resultado no resuelto) No se ha detectado señal de fluorescencia de las dianas del gen nuc, meca, mecc o MREJ, y No se ha detectado señal de fluorescencia del Control de procesamiento de muestras (muestra inhibidora o error en un reactivo). IND (Resultado indeterminado) Error del sistema BD MAX con códigos de advertencia o error. Consulte la sección Solución de problemas del Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para conocer la interpretación de los códigos de advertencia y error. INC (serie incompleta) Error del sistema BD MAX con códigos de advertencia o error. Consulte la sección Solución de problemas del Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para conocer la interpretación de los códigos de advertencia y error. PROCEDIMIENTO DE REPETICIÓN DE LA PRUEBA NOTA: En el tubo de tampón de muestras del sistema BD MAX hay volumen suficiente para repetir la prueba solamente una vez. Para tubos de tampón de muestras almacenados a 25 ± 2 C, la repetición de la prueba se debe hacer en un plazo de 36 horas tras los pasos descritos en la anterior sección Preparación de las muestras. Alternativamente, para tubos de tampón de muestras almacenados a 2 8 C, la repetición de la prueba se puede hacer en un plazo de 120 horas (5 días) de los pasos descritos en la sección Preparación de las muestras anterior. NOTA: Las muestras nuevas pueden analizarse con las muestras repetidas en la misma serie. RESULTADO NO RESUELTO Pueden obtenerse resultados no resueltos en el caso de que exista una sustancia inhibidora o que falle un reactivo, lo que impide la amplificación correcta de la diana o el control de procesamiento de muestras. El análisis de las muestras puede repetirse a partir de los tubos de tampón de muestras correspondientes en el plazo definido anteriormente. Agite en vórtex las muestras durante un (1) minuto y reinicie el proceso siguiendo la sección Funcionamiento del sistema BD MAX. RESULTADO INDETERMINADO Se pueden obtener resultados indeterminados en caso de que se produzca un error en el sistema. El análisis de las muestras puede repetirse a partir de los tubos de tampón de muestras correspondientes en el plazo definido anteriormente. Agite en vórtex las muestras durante un (1) minuto y reinicie el proceso siguiendo la sección Funcionamiento del sistema BD MAX. Para obtener información sobre la interpretación de los mensajes de advertencia o códigos de error, consulte el Manual del usuario del sistema BD MAX 11 (sección Solución de problemas ). RESULTADO INCOMPLETO Los resultados incompletos pueden surgir en el caso de que se produzca un código de advertencia o error que interrumpa la serie o en el caso de que durante la preparación de las muestras o la PCR no se hayan cumplido los tiempos esperados. Los resultados incompletos se pueden aplicar a una serie o una pista. El análisis de las muestras puede repetirse a partir de los tubos de tampón de muestras correspondientes en el plazo definido anteriormente. Agite en vórtex las muestras durante un (1) minuto y reinicie el proceso siguiendo la sección Funcionamiento del sistema BD MAX. Para obtener información sobre la interpretación de los mensajes de advertencia o códigos de error, consulte el Manual del usuario del sistema BD MAX 11 (sección Solución de problemas ). ERROR DEL CONTROL EXTERNO El análisis de los controles externos debe generar los resultados previstos. Si es necesario repetir el análisis de las muestras debido a un resultado incorrecto del control externo, se deberán repetir a partir de los tubos de tampón de muestras junto con controles externos recién preparados y en los plazos de tiempo definidos anteriormente. Agite en vórtex las muestras durante un (1) minuto y reinicie el proceso siguiendo la sección Funcionamiento del sistema BD MAX. CULTIVO DE MUESTRAS CLÍNICAS Para llevar a cabo pruebas de sensibilidad a antimicrobianos o de tipado epidemiológico, las muestras clínicas se pueden cultivar a partir del dispositivo de recogida (torunda) antes de llevar a cabo el procedimiento Preparación de las muestras (utilizando el método de extensión en placa) o después del procedimiento Preparación de las muestras (utilizando un método de caldo de enriquecimiento). Inmediatamente después de finalizar la serie de PCR inicial, las torundas se pueden almacenar a 2 8 C durante un máximo de 36 horas en los tubos de tampón de muestras antes de realizar el cultivo, siguiendo para ello los procedimientos del hospital. 8

9 LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Este producto está indicado para su uso con muestras de torundas nasales obtenidas mediante los dispositivos de recogida y transporte de muestras indicados en la sección de "Equipo y materiales necesarios pero no suministrados". No se ha determinado el rendimiento del ensayo BD MAX StaphSR con el dispositivo de transporte de torunda sencilla o doble con líquido de Amies. Este producto solo debe utilizarse con el sistema BD MAX. Se pueden producir resultados analíticos negativos por una recogida, manipulación o conservación incorrectas de las muestras, un error técnico, la confusión de muestras o porque el número de microorganismos de la muestra es inferior a la sensibilidad analítica del test. Es necesario cumplir estrictamente las instrucciones del prospecto y el Manual del usuario del sistema BD MAX 11 para evitar resultados erróneos. Los criterios de cribado determinan el estado de colonización en un momento determinado. La colonización puede variar según el tratamiento del paciente (como, p. ej., el régimen de descolonización), el estado del paciente (por ejemplo, si se trata de una colonización transitoria de SA o SARM), o la exposición a entornos de alto riesgo (como el contacto con portadores de SA/SARM o una hospitalización prolongada). El estado de colonización debe controlarse de acuerdo con las normas de la institución. Un resultado positivo de la prueba BD MAX StaphSR no indica necesariamente un fracaso del tratamiento de erradicación, ya que puede persistir la presencia de ADN. Un resultado negativo después de un resultado positivo anterior puede indicar el éxito del tratamiento de erradicación o puede deberse a una colonización intermitente. Un resultado positivo en la prueba no indica necesariamente la presencia de organismos viables. Un resultado positivo indica la presencia de ADN de SA o SARM. El ensayo BD MAX StaphSR detecta simultáneamente el gen meca o mecc contenido en el cassette SCCmec y una secuencia específica de Staphylococcus aureus situada en la intersección del cassette SCCmec y el gen orfx (MREJ). El ensayo BD MAX StaphSR también detecta el gen nuc específico de Staphylococcus aureus. El ensayo BD MAX StaphSR está diseñado para detectar los genotipos de MREJ i, ii, iii, iv, v, vi, vii, ix, xiii, xiv y xxi, lo que representa la mayoría de cepas de SARM con meca y mecc (pertenecientes a distintos tipos SCCmec/MREJ) y abarca más del 98 % de las cepas de alcance mundial probadas por BD hasta la fecha. Se desconoce la capacidad del ensayo BD MAX StaphSR de detectar otros genotipos de MREJ. El ensayo BD MAX StaphSR no registra Staphylococcus aureus de resistencia dudosa a la oxacilina (BORSA) como SARM (solo lo registrará como SA). El mecanismo de resistencia a la oxacilina en cepas BORSA se debe a un aumento en la producción de β-lactamasas y no al gen meca o mecc. Las cepas BORSA son infrecuentes. El rendimiento del ensayo BD MAX StaphSR para detectar Staphylococcus aureus modificado (MOD-SA) es desconocido, ya que esas cepas no se han evaluado. El mecanismo de resistencia a la oxacilina en cepas MOD-SA se debe a cambios en la afinidad de las proteínas que enlazan la penicilina por la oxacilina. Las cepas MOD-SA son raras. El ensayo BD MAX StaphSR generará un resultado positivo falso para SARM al analizar una muestra nasal co-colonizada que contenga un Staphylococcus resistente a la meticilina y negativo para la coagulasa (SRMNC) y una variante de SA de cassette vacío y susceptible a la meticilina. La co-colonización por SRMNC y un SA de cassette vacío y susceptible a la meticilina es infrecuente. Igual que sucede con todas las pruebas diagnósticas in vitro basadas en PCR, es posible detectar la presencia de niveles sumamente bajos de la diana, incluso por debajo del LdD de la prueba, pero los resultados pueden no ser reproducibles. La tobramicina puede provocar inhibición en el ensayo BD MAX StaphSR (consulte la sección Sustancias interferentes para obtener más detalles). Pueden producirse resultados negativos falsos a causa de pérdidas de ácidos nucleicos debidas a una recogida, un transporte o un almacenamiento incorrectos de las muestras, o debido a una lisis celular bacteriana incorrecta. El control de procesamiento de muestras se ha añadido a la prueba con el fin de ayudar a identificar las muestras que contienen inhibidores de la amplificación de la PCR y como control de la integridad de los reactivos y del sistema de ensayo en su conjunto. El control de procesamiento de muestras (CPM) no indica si el ácido nucleico se ha perdido debido a procesos de recogida, transporte o almacenamiento inadecuados de las muestras, o si la lisis de las células bacterianas ha sido correcta. En un cultivo mixto, la detección del SARM o SA es variable en presencia de concentraciones muy elevadas de SERM. Se ha observado la competencia con SERM con una proporción de SARM:SERM de 1: 1 x 10 2 y una proporción de SA:SERM de 1: 1 x En un cultivo mixto, la detección del SARM es variable en presencia de concentraciones elevadas de SASM. Se ha observado la competencia con SASM con una proporción de SARM:SASM de 1: 1 x A veces los resultados del ensayo BD MAX StaphSR puede ser Unresolved (No resuelto) debido a un control de procesamiento de muestras no válido, Indeterminate (Indeterminado) o Incomplete (Incompleto) debido a un error del instrumento y puede ser necesario repetir la prueba, lo cual retrasa la obtención de los resultados finales. Las mutaciones o los polimorfismos en las regiones de fijación de los cebadores o de las sondas pueden afectar a la detección de variantes nuevas o desconocidas de SARM o SA, provocando un resultado falso negativo con el ensayo BD MAX StaphSR. Al igual que ocurre con todas las pruebas diagnósticas in vitro, los valores pronóstico positivos y negativos dependen en gran medida de la prevalencia. El rendimiento del ensayo BD MAX StaphSR puede variar en función de la prevalencia y de la población analizada. El ensayo BD MAX StaphSR requiere usar cuatro (4) canales ópticos del sistema BD MAX: FAM ( nm), ROX ( nm), VIC (530/565 nm) y Cy5.5 (680/715 nm). No se ha determinado el rendimiento de los demás canales ópticos en relación con esta prueba. 9

10 VALORES PREVISTOS En un estudio clínico del ensayo BD MAX StaphSR se obtuvo un total de resultados aptos para informar, procedentes de muestras aptas en el nivel de muestra y de PCR, en 3 centros en lugares geográficos distintos que se compararon con el cultivo directo enriquecido. La población del estudio se agrupó en dos categorías: pacientes hospitalizados y pacientes externos. El número y el porcentaje de casos positivos determinados mediante el ensayo BD MAX StaphSR se presentan en la Tabla 2. Tabla 2: Resumen de participación en el ensayo clínico por grupos de pacientes Grupo Pacientes hospitalizados Pacientes externos Número total de muestras a Número de positivos por SARM Número de positivos por SA Total a a Número de muestras total basado en los resultados aptos para PCR. Porcentaje de positivos por SARM 10,2 % (172/1.683) 3,9 % (28/710) 8,4 % (200/2.393) Porcentaje de positivos por SA 32,4 % (545/1.683) 25,6 % (182/710) 30,4 % (727/2.393) CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO Rendimiento clínico Las características de rendimiento clínico del ensayo BD MAX StaphSR se determinaron en un estudio prospectivo multicéntrico de investigación. En dicho estudio participaron 3 centros de investigación. Para ser incluidos en el estudio, los pacientes tenían que ser idóneos para la prueba de SARM o SA según las normas institucionales. Los requisitos de elegibilidad para la valoración de dianas según las políticas de los centros clínicos incluyeron, entre otros: pacientes ingresados en el sistema de salud en particular, pacientes ingresados en la unidad de cuidados intensivos, pacientes transferidos a la unidad de cuidados intensivos, pacientes en preoperatorio de una intervención programada y pacientes ingresados procedentes de instalaciones de cuidados crónicos. Las muestras de pacientes incluidos anteriormente en el estudio se excluyeron. El método de referencia de comparación consistió en el cultivo directo complementado por cultivo enriquecido. El análisis de cultivos enriquecidos se completó para todas las muestras negativas para SARM o SA por cultivo directo. Las presuntas colonias de Staphylococcus aureus observadas en un medio selectivo (Staphylococcus aureus) y cromógeno se subcultivaron después en agar sangre (AS). La identificación se confirmó con una prueba de aglutinación, mientras que la resistencia a la meticilina se confirmó mediante una prueba de sensibilidad por difusión con disco de cefotixina (30 μg). En los casos en los cuales no se confirmó la presencia de SARM o SA mediante el método de cultivo directo inicial, se llevó a cabo el enriquecimiento en caldo de triptona y soja con un 6,5 % de NaCl (TSB 6,5 % NaCl). Se utilizó caldo TSB 6,5 % NaCl turbio para inocular medio cromógeno y placas de AS adicionales. Asimismo, la confirmación del SARM se llevó a cabo según el método descrito anteriormente. Resultados obtenidos con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia En total se incorporaron al estudio muestras. De ellas, 94 se consideraron no aptas según los criterios del protocolo y cuatro (4) muestras totalmente aptas dieron resultados de PCR no notificables. Se utilizaron los resultados de muestras en total para determinar el rendimiento clínico del ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia (Tablas 3 a 6). En comparación con el método de referencia (cultivo directo/enriquecido), el ensayo BD MAX StaphSR identificó el 93,1 % de las muestras positivas de SARM y el 97,8 % de las muestras negativas de SARM (Tablas 3 y 4). Para la población analizada, esto dio lugar a un valor pronóstico negativo (VPN) del 99,5 % y a un valor pronóstico positivo (VPP) del 75,5 %. Tabla 3: Resultados obtenidos para SARM con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia Todos los centros Método de referencia SARM Positivo Negativo Total Positivo a 197 Ensayo BD MAX StaphSR Negativo 11 a Total Sensibilidad: 93,1 % (149/160) (IC 95 %: 88,1 %, 96,1 %) Especificidad: 97,8 % (2.145/2.193) (IC 95 %: 97,1 %, 98,3 %) VPP: 75,5 % (IC 95 %: 70,0 %, 80,5 %) VPN: 99,5 % (IC 95 %: 99,1 %, 99,7 %) a Las muestras con resultados discordantes entre el método de referencia y el ensayo BD MAX StaphSR se estudiaron más detalladamente. 11 de 48 muestras que dieron resultado positivo falso para SARM con BD MAX StaphSR también dieron resultado positivo después de repetirlo con el método de referencia 5 de 11 muestras que dieron resultado negativo falso para SARM con BD MAX StaphSR también dieron resultado negativo después de repetirlo con el método de referencia 10

11 Tabla 4: Rendimiento obtenido para SARM por centro con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia Centros clínicos Prevalencia a Sensibilidad (IC 95 %) b Especificidad (IC 95 %) b Centro 1 4,3 % (41/960) Centro 2 5,8 % (38/650) Centro 3 10,6 % (81/765) General 6,7 % (160/2.375 c ) a Prevalencia basada solamente en el método de referencia b Intervalo de confianza c 2375 muestras eran aptas para el método de referencia 92,7 % (38/41) (80,6 %, 97,5 %) 86,8 % (33/38) (72,7 %, 94,2 %) 96,3 % (78/81) (89,7 %, 98,7 %) 93,1 % (149/160) (88,1 %, 96,1 %) 99,0 % (909/918) (98,1 %, 99,5 %) 98,6 % (584/592) (97,4 %, 99,3 %) 95,5 % (652/683) (93,6 %, 96,8 %) 97,8 % (2.145/2.193) (97,1 %, 98,3 %) En comparación con el método de referencia (cultivo directo/enriquecido), el ensayo BD MAX StaphSR identificó el 92,0 % de las muestras positivas de SA y el 93,2 % de las muestras negativas de SA (Tablas 5 y 6). En la población estudiada, esto significó un VPN del 96,9 % y un VPP del 83,8 %. Tabla 5: Resultados obtenidos para SA con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia Todos los centros Ensayo BD MAX StaphSR Método de referencia SA Positivo Negativo Total Positivo a 714 Negativo 52 a Total Sensibilidad: 92,0 % (599/651) (IC 95 %: 89,7 %, 93,9 %) Especificidad: 93,2 % (1.587/1.702) (IC 95 %: 92,0 %, 94,3 %) VPP: 83,8 % (IC 95 %: 81,3 %, 86,1 %) VPN: 96,9 % (IC 95 %: 96,0 %, 97,6 %) a Las muestras con resultados discordantes entre el método de referencia y el ensayo BD MAX StaphSR se estudiaron más detalladamente. 28 de 115 muestras que dieron resultado positivo falso para SA con BD MAX StaphSR también dieron resultado positivo después de repetirlo con el método de referencia 23 de 52 muestras que dieron resultado negativo falso para SA con BD MAX StaphSR también dieron resultado negativo después de repetirlo con el método de referencia Tabla 6: Rendimiento obtenido por centro para SA con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con el método de referencia Centros clínicos Prevalencia a Sensibilidad con un IC 95 % b Especificidad con un IC 95 % b Centro 1 27,2 % (261/960) Centro 2 27,5 % (179/650) Centro 3 27,8 % (213/765) General 27,5 % (653/2.375 c ) a Prevalencia basada solamente en el método de referencia b Intervalo de confianza c muestras eran aptas para el método de referencia 90,0 % (235/261) (85,8 %, 93,1 %) 91,5 % (162/177) (86,5 %, 94,8 %) 94,8 % (202/213) (91,0 %, 97,1 %) 92,0 % (599/561) (89,7 %, 93,9 %) 96,3 % (672/698) (94,6 %, 97,4 %) 90,9 % (412/453) (88,0 %, 93,3 %) 91,3 % (503/551) (88,6 %, 93,4 %) 93,2 % (1.587/1.702) (92,0 %, 94,3 %) Resultados obtenidos con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo En total se incorporaron al estudio 2451 muestras. De ellas, 54 se consideraron no aptas según los criterios del protocolo y seis (6) muestras totalmente aptas dieron resultados de PCR no notificables. Se utilizaron 2391 resultados de muestras en total para determinar el porcentaje de concordancia positiva y negativa del ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo (Tablas 7 a 10). En comparación con el cultivo directo, el ensayo BD MAX StaphSR identificó el 96,5 % de las muestras positivas para SARM y el 97,2 % de las muestras negativas para SARM (Tablas 7 y 8). 11

12 Tabla 7: Resultados obtenidos para SARM con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo Todos los centros Cultivo directo Positivo Negativo Total Positivo BD MAX StaphSR Negativo Total Concordancia porcentual positiva: 96,5 % (137/142) (IC 95 %: 92,0 %, 98,5 %) Concordancia porcentual negativa: 97,2 % (2.186/2.249) (IC 95 %: 96,4 %, 97,8 %) Tabla 8: Rendimiento obtenido por centro para SARM con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo Centros clínicos Porcentaje de concordancia positiva con IC 95 % a Porcentaje de concordancia negativa con IC 95 % a Centro 1 Centro 2 Centro 3 General a Intervalo de confianza 100 % (35/35) (90,1 %, 100 %) 93,5 % (29/31) (79,3 %, 98,2 %) 96,1 % (73/76) (89,0 %, 98,6 %) 96,5 % (137/142) (92,0 %, 98,5 %) 98,7 % (912/924) (97,7 %, 99,3 %) 98,0 % (587/599) (96,5 %, 98,9 %) 94,6 % (687/726) (92,7 %, 96,0 %) 97,2 % (2.186/2.249) (96,4 %, 97,8 %) En comparación con el cultivo directo, el ensayo BD MAX StaphSR identificó el 95,1 % de las muestras positivas para SA y el 91 % de las muestras negativas para SA (Tablas 9 y 10). Tabla 9: Resultados obtenidos para SA con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo Todos los centros Cultivo directo Positivo Negativo Total Positivo BD MAX StaphSR Negativo Total Concordancia porcentual positiva: 95,1 % (564/593) (IC 95 %: 93,1 %, 96,6 %) Concordancia porcentual negativa: 91,0 % (1.637/1.798) (IC 95 %: 89,6 %, 92,3 %) Tabla 10: Rendimiento obtenido por centro para SA con el ensayo BD MAX StaphSR en comparación con cultivo directo Centros clínicos Centro 1 Centro 2 Centro 3 General a Intervalo de confianza Porcentaje de concordancia positiva con IC 95 % a Porcentaje de concordancia negativa con IC 95 % a 93,0 % (213/229) (89,0 %, 95,7 %) 94,9 % (149/157) (90,3 %, 97,4 %) 97,6 % (202/207) (94,5 %, 99,0 %) 95,1 % (564/593) (93,1 %, 96,6 %) 93,4 % (682/730) (91,4 %, 95,0 %) 88,6 % (419/473) (85,4 %, 91,1 %) 90,1 % (536/595) (87,4 %, 92,2 %) 91,0 % (1.637/1.798) (89,6 %, 92,3 %) De muestras de torundas nasales analizadas con el ensayo BD MAX StaphSR que cumplían las condiciones en los niveles de muestra y de PCR, 17 (0,7 %) se consideraron no resueltas en la primera prueba. Después de repetir la prueba, la tasa de no resueltas fue del 0,1 % (3/2.399) (Tabla 11). Tasa de no resueltas inicial 0,7 % (17/2.399) a (IC 95 %: 0,4%, 1,1 %) Tabla 11: Tasas de muestras con resultado "No resuelto" Tasa de no resueltas después de la repetición 0,1 % (3/2.399) (IC 95 %: 0 %, 0,4 %) a Número total basado en las muestras que cumplían los requisitos y en los resultados del ensayo BD MAX StaphSR 12