FILTRACIÓN FILTRACIÓN FILTRACIÓN.
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- Joaquín Fuentes San Segundo
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2 114 La presencia de bacterias patógenas en el agua destinada a consumo humano es un riesgo siempre presente, ya que un agua contaminada puede ser la causa de una serie de enfermedades. Por ello existe la necesidad de realizar análisis rutinarios a partir de muestras de agua de distintas procedencias: fuentes, ríos, conducciones municipales, aguas de baño, manantiales, aguas embotelladas, etc. En España existen leyes que garantizan la disponibilidad de agua segura. Estas leyes determinan el nº y tipo de análisis a realizar, los métodos para llevarlos a cabo y los límites admisibles. La gran variedad de bacterias patógenas que pueden encontrarse en una muestra de agua y la complejidad de su aislamiento e identifi cación, hace inviable el control rutinario de todos los microorganismos con importancia sanitaria. Por ello ha sido necesario elegir unos microorganismos indicadores más fáciles de aislar y cultivar en el laboratorio, inocuos para hombre y animales y cuya presencia debe estar relacionada cualitativamente y cuantitativamente con la de los microorganismos de más difícil aislamiento. de cultivo líquido que ayude al crecimiento de las bacterias y en la preparación de una serie de diluciones de la muestra a analizar, de tal forma que permitan la observación del crecimiento en los tubos con menor dilución y del nulo crecimiento en los tubos con mayor dilución. Tras la incubación se calcula mediante tablas de probabilidad el número aproximado de microorganismos vivos que contenía la muestra. TÉCNICA DE A TRAVÉS DE MEMBRANA (MF) Se basa en hacer pasar la muestra de agua problema a través de un fi ltro de membrana microporosa en cuya superfi cie quedan retenidos los microorganismos. Tras incubar la membrana en un medio de cultivo adecuado, a la temperatura idónea y durante el tiempo necesario se cuentan directamente las colonias crecidas sobre la superfi cie de la membrana. La técnica de filtración a través de membrana (MF) presenta una serie de ventajas sobre la del número más probable (NMP): Los microorganismos indicadores que cumplen estos requisitos son los coliformes totales y fecales; y los estreptococos fecales. En la normativa se indica que debe haber ausencia de coliformes fecales y de estreptococos fecales. También deben controlarse los clostridios sulfito reductores, que son bacterias patógenas anaerobias y esporuladas, cuyo hábitat típico es el tracto intestinal de los herbívoros y por tanto son indicadores de contaminación fecal remota, sobretodo si sólo hay esporas. Al ser esporuladas son muy resistentes a los tratamientos de potabilización, lo que explica la importancia de su análisis. PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS Real Decreto 140/2003, de 7 de Febrero, por el que se establecen los criterios sanitarios de la calidad del agua de consumo humano. 1. Escherichia coli, 0 UFC en 100 ml 2. Enterococcos, 0 UFC en 100 ml 3. Clostridium perfringens (incluidas las esporas), 0 UFC en 100 ml Muestreo mucho más representativo, ya que la membrana permite recuperar bajas concentraciones de microorganismos en grandes volúmenes de líquido, por tanto es muy útil en aguas habitualmente poco contaminadas. Resultados defi nitivos en menos tiempo. Enumeración de las colonias de forma más precisa y directa. Está indicado en aguas fuertemente mineralizadas que provocan falsas reacciones en la colimetría en medios líquidos. Conservación de los filtros durante largo tiempo, con fi nes testimoniales, médicos o legales. Ahorro considerable de espacio, mano de obra y material de laboratorio con respecto a la técnica del NMP. Esta técnica se ha adoptado también para control de aguas no destinadas a consumo humano, por ejemplo aguas de procesos de fabricación; así como en el control microbiológico de otras muestras líquidas, como por ejemplo zumos, leche, etc. Es también muy útil hacer un recuento total de bacterias aerobias a 37 C que nos indica la efi cacia del tratamiento de potabilización del agua. En ambientes hospitalarios y en agua embotellada debe controlarse también la ausencia de Pseudomonas aeruginosa. En la mayor parte de las normativas se contemplan dos técnicas para el análisis microbiológico de aguas: NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP) Es una estimación estadística de la población microbiana de la muestra. Esta metodología se basa en la elección de un medio A continuación le detallamos algunos de los productos que Scharlab le puede suministrar para llevar a cabo la técnica de fi ltración por membrana. 114 Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
3 115 PASOS A SEGUIR PARA EL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO MEDIANTE EL MÉTODO MF 1 TOMA DE MUESTRA PARA LA TOMA DE MUESTRA DEBEN EMPLEARSE SIEMPRE RECIPIENTES ESTÉRILES. PUEDEN UTILIZARSE BOTELLAS DE VIDRIO DE BOROSILICATO O DE PLÁSTICO NO TÓXICO RESISTENTE AL CALOR (POLIPROPILENO), O BOLSAS DE PLÁSTICO HERMÉTICAS QUE SE SUMINISTRAN ESTÉRILES Y SON DESECHABLES, O BIEN FRASCOS DE PLÁSTICO NO TÓXICO Y NO RESISTENTE AL CALOR (POLIESTIRENO), ESTERILIZADOS POR IRRADIACIÓN. SI LA MUESTRA ES DE AGUAS CLORADAS CON- VIENE OPTAR POR EL FRASCO QUE INCLUYE EL TIOSULFATO SÓDICO PARA INACTIVAR EL CLORO. VER MÁS INFORMACIÓN EN EL CAPÍTULO TOMA DE MUESTRAS Y OTRO MATERIAL FUNGIBLE DE LABORATORIO FRASCOS PARA LABORATORIO (FRASCOS ISO) FRASCOS CON TAPÓN DE ROSCA GL45 DE VIDRIO BOROSILICATO CON ANILLO DE VERTIDO REFERENCIA CAPACIDAD (ml) PRESENTACIÓN FRASCOS CON TAPÓN DE ROSCA GL45 DE VIDRIO BOROSILICATO CON ANILLO DE VERTIDO REFERENCIA CAPACIDAD (ml) PRESENTACIÓN
4 116 BOLSAS PARA TOMA DE MUESTRAS ESTÉRILES CON CIERRE METÁLICO Bolsas de polietileno de 80 a 100 µ de espesor. Ideales para la recolección, el transporte y el análisis de una gran variedad de muestras líquidas, semisólidas y sólidas. Facilitan la entrada y salida de la muestra mediante un máxima abertura sin sellados laterales; poseen doble sellado en la parte inferior para asegurar máxima protección, cierre mediante varillas metálicas. La capacidad que se indica es la capacidad máxima y es siempre mayor que la capacidad recomendada. La capacidad recomendada es un ±25% menos que la máxima. Presentación con o sin banda blanca para poder escribir. REFERENCIA CAP. (ml) MEDIDAS (cm) PRESENTACIÓN ,5x12, ,5x17, ,2x23, ,0x23, ,0x37, * 60 7,5x12, * 180 7,5x17,5 Con banda blanca * ,2x23,0 Con banda blanca * ,0x23,0 Con banda blanca 500 FRASCOS CUADRADOS CON TAPÓN DE ROSCA Frascos cuadrados de polietileno, ø boca 32 mm, base 80x65 mm, altura Caducidad 4 años. 120 mm. Esterilizados por irradiación. Caducidad 5 años. REFERENCIA CAPACIDAD PRESENTACIÓN 064-BA ml BA ml * BA ml BA ml * 15 PARA MUESTRAS DE AGUAS CLORADAS *RECOLECTOR DE AGUAS CLORADAS PARA ESTUDIO MICROBIOLÓGICO. CADA FRASCO CONTIENE 0,4 ML DE UNA SOLUCIÓN AL 3% DE TIOSULFATO SÓDICO. 116 Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
5 117 2 DE LA MUESTRA UNA VEZ TOMADA LA MUESTRA DEBE PASARSE A TRAVÉS DE UN FILTRO DE MEMBRANA MICROPOROSA. PARA ELLO NECESITAMOS UNA FUENTE DE VACÍO. SI EL NÚMERO DE MUESTRAS A ANALIZAR ES MUY BAJO, POR EJEMPLO UNA MUESTRA SEMANAL, PUEDE RECURRIRSE A UNA JERINGA AUTOCLAVABLE DE 100 ML Y UN SOPORTE DE FILTROS, CON ESTE SISTEMA NOS AHORRAMOS LA FUENTE DE VACÍO, YA QUE ES EL TÉCNICO QUIEN EJERCE LA PRESIÓN SOBRE LA JERINGA, PARA QUE LA MUESTRA PASE POR LA MEMBRANA ALOJADA EN EL INTERIOR DEL SOPORTE. SOPORTE PARA FILTROS Fabricado en polipropileno. Soporta temperaturas de 128 C por lo que puede ser autoclavado. Es muy útil para la técnica de filtración de membrana cuando el nº de muestras a analizar es bajo. Puede utilizarse también para esterilizar por filtración pequeñas muestras. Tiene capacidad para filtrar hasta un litro de muestra, dependiendo de la viscosidad de la misma. La entrada y salida del soporte se adapta a un cono Luer. DDPP Soporte para filtros de 47 mm 10 DDPP Soporte para filtros de 47 mm 2 JERINGAS Plástico autoclavable, cono Luer, sin aguja. 0012HL0100 Jeringa 100 ml 1 117
6 118 Si deseamos una mayor comodidad o el nº de muestras es mayor podemos utilizar como fuente de vacío una trompa de agua, o una bomba de baja potencia acoplada a un aparato de fi ltración de vidrio o al Gravi-Seal. TROMPAS DE AGUA PARA VACÍO CON VÁLVULA DE REBOTE REFERENCIA Ø OLIVAS LATERAL (mm) Ø OLIVAS CENTRAL (mm) PRESENTACIÓN /11 15/16 1 PARA VACÍO REFERENCIA Ø OLIVAS LATERAL (mm) Ø OLIVAS CENTRAL (mm) PRESENTACIÓN /11 15/16 1 MINIBOMBA DE VACÍO Caudal máximo: 6 litros/minuto Vacío fi nal: 240 mbar abs Sobrepresión máxima: 2,5 bar Peso: 2 Kg 130N86KN18 Minibomba de vacío KNF 1 BOMBAS DE MEMBRANA Caudal máximo: 30 litros/minuto. Vacío fi nal: 100mbar abs. Sobrepresión máxima: 4 bar. 0N035AN.18 Bomba de membrana KNF Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
7 119 EQUIPOS DE DE VIDRIO APARATO DE SIMPLE DE 47 MM Ø Completo Soporte filtro de 47 mm ø Embudo soporte 300 ml Q279-5 Pinza 1 APARATO DE UNIVERSAL DE 47 MM Ø REFERENCIA DESCRIPCIÓN MACHO HEMBRA PRESENTACIÓN Completo Soporte filtro 40/ Embudo soporte 300 ml Kitasatos de ml 40/ Q279-5 Pinza 1 EQUIPO DE DOSIFIL SCHARLAU 073-Q279-1 Pieza superior con oliva y llave de paso Q279-2 Soporte placa porosa con terminal macho 40/ Q279-3 Frasco 2,5 l con fondo cónico 1 073Q279-3A Frasco 2,5 l con fondo cónico ámbar Q279-4 Adaptador macho 40/38 para botellón Q279-5 Pinza de sujección metálica Frasco 2 l ámbar grad. Con tapón de rosca 45 1 EQUIPO DE SCHARLAU SCIENCE 073-SS1001 Equipo completo TF001 Pieza superior con oliva SS1003 Embudo con hembra 29/ Soporte filtro placa porosa y hembra 40/ Matraz Kitasato ml macho 40/ /2 Matraz Kitasato ml macho 40/ TDOS Tapón dispensador con 2 salidas Tapón Omnifit tres válvula 1 119
8 120 EMBUDO DE REUTILIZABLE GRAVI-SEAL Su diseño único de sellado por gravedad permite el manejo de sus dos únicas piezas con una sola mano, sin peligro de que se desplace la membrana o de tener fugas de muestra. Es muy estable, sólido y sin coste de mantenimiento, puesto que no tiene piezas de recambio. Tanto el embudo como la base son de polisulfona, material autoclavable y de amplia compatibilidad química. Está graduado hasta 350 ml con intervalos de 50 ml. El embudo Gravi-Seal está disponible en polisulfona para muestras acuosas. El embudo de polisulfona tiene tapa, es autoclavable y químicamente resistente para cultivos celulares y aplicaciones en microbiología. El embudo de polipropileno tiene buena tolerancia para los reactivos químicos. PFC Embudo de filtración Gravi-Seal de polisulfona completo 1 PFC Embudo de filtración Gravi-Seal de polisulfona completo 3 PFF Embudo de polisulfona 1 PFB Base de polisulfona 1 PPC Embudo de filtración Gravi-Seal de polipropileno completo 1 PPC Embudo de filtración Gravi-Seal de polipropileno completo 3 PPF Embudo de polipropileno 1 PPB Base de polipropileno Juego de 3 juntas Guko para adaptar el Gravi-Seal al kitasatos de 500 ml, 1 l y 2 l (ILMABOR) 1 Cuando el número de muestras es alto utilizaremos una rampa de filtración y una bomba de mayor potencia, de esta forma nuestro análisis será más rápido y cómodo. RAMPAS DE Rampas de acero inoxidable, disponibles con 3 y 6 embudos de fi ltración. Estos embudos pueden ser de 100 ml y 500 ml de capacidad pudiendo controlarse individualmente el vacío en cada uno de ellos mediante la llave de paso situada en la parte inferior de cada embudo. Las fritas de acero inoxidable aseguran la distribución homogénea de las bacterias o partículas retenidas en la superficie del filtro. Adecuadas para filtros de 47 mm de diámetro. ESPECIFICACIONES TÉCNICAS Velocidad de flujo (valores típicos medidos con agua, 90% de vacío): 0,45 µ ml/min 0,22 µ ml/min Compatibilidad química: Resistente a la mayoría de disolventes. Área de filtración: 12,5 cm 2 Materiales: La rampa, el embudo, la tapa, el tapón, la abrazadera y la frita de acero inoxidable. La junta del conector de PTFE. El cierre de la tapa, anillas y conectores de silicona. continua en la página siguiente 120 Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
9 121 RAMPAS DE Límite de presión: Vacío Esterilización: Autoclave a 121 C o a 134 C, o calor seco a 180 C, o bien puede fl amearse. 00RF Rampa de filtración, 3 embudos, 100 ml 1 00RF Rampa de filtración, 3 embudos, 500 ml 1 00RF Rampa de filtración, 6 embudos, 100 ml 1 00RF Rampa de filtración, 6 embudos, 500 ml 1 TRAMPA DE DE 2 L 073-0Q6416 Cabeza frasco lavador 10 l GL Frasco ml tapón rosca ISO ILMABOR Caperuza de unión roscada Tubo de goma látex 8 mm ø x 12 mm ø 1 MEMBRANAS ESTÉRILES DE Scharlab le ofrece membranas Osmonics (MSI) de nitrocelulosa, estériles por irradiación y empaquetadas individualmente. Están disponibles con o sin almohadilla absorbente. Las membranas son cuadriculadas y se suministran en dos colores: blanco y negro. Las blancas están aconsejadas para el análisis de aguas ya que están diseñadas para la recuperación y retención de E. coli en aguas, así como de otros análisis microbiológicos. Las negras tienen la ventaja de ofrecer un mejor contraste de las colonias tanto de bacterias, como de levaduras y mohos y por tanto ayudan a dar un recuento más preciso en tiempos cortos. NUEVA ES Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µm, blancas, bolsa unitaria, sin almohadillas 100 NUEVO E02WG047S1 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,22µ, blancas, bolsa unitaria, sin almohadillas 200 E02WG047S4 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,22µ, blancas, bolsa unitaria, sin almohadillas E02WG047S2 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,22µ, blancas, bolsa unitaria, con almohadillas 100 E02WG047S5 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,22µ, blancas, bolsa unitaria, con almohadillas E04WG047S1 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, blancas, bolsa unitaria, sin almohadillas 200 E04WG047S4 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, blancas, bolsa unitaria, sin almohadillas E04WG047S2 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, blancas, bolsa unitaria, con almohadillas 100 E04WG047S5 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, blancas, bolsa unitaria, con almohadillas E04BG047S1 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, negras, bolsa unitaria, sin almohadillas 200 E04BG047S4 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, negras, bolsa unitaria, sin almohadillas E04BG047S2 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, negras, bolsa unitaria, con almohadillas 100 E04BG047S5 Membranas filtrantes ø 47mm, poro 0,45µ, negras, bolsa unitaria, con almohadillas Para colocar la membrana en el sistema de filtración utilizaremos unas pinzas de punta plana, que tendremos sumergidas en alcohol. Antes de manipular la membrana fl amear los bordes de las pinzas. Abrir la bolsa, coger la membrana y colocarla en el sistema de fi ltración elegido con la cuadrícula hacia arriba. Una vez fi ltrada la muestra, desconectar el vacío y retirar el embudo. Coger la membrana con las pinzas fl ameadas y colocarla con la cuadrícula hacia arriba en la placa de Petri. 121
10 122 PINZAS REFERENCIA DESCRIPCIÓN LARGO TOTAL (mm) PRESENTACIÓN Recta punta roma Recta punta fina Curva punta roma Curva punta fina VER MÁS PINZAS EN EL CAPÍTULO OTRO MATERIAL FUNGIBLE DE LABORATORIO 3 MEDIOS DE CULTIVO PARA El medio de cultivo puede ser un agar o un caldo. La elección de uno u otro depende de lo indicado en la normativa vigente, de la disponibilidad e incluso de las preferencias personales. Si se utilizan medios sólidos deshidratados deben distribuirse en placas de Petri de mm de diámetro. Si se utilizan caldos deben distribuirse a razón de 2 ml sobre una placa de Petri de 55 mm que contenga una almohadilla absorbente. PLACAS DE PETRI PARA Placas de Petri fabricadas en poliestireno de alta transparencia. REFERENCIA DIÁMETRO ALTURA DESCRIPCIÓN PRESENTACIÓN UNIDADES A 55 mm 14,2 mm Aséptica, 3 vientos Bolsas de E 55 mm 14,2 mm Estéril, 3 vientos Bolsas de UNIDADES Placa Petri ø 55 mm + almohadilla absorbente Embolsadas de 10 en Esterilizadas por irradiación 122 Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
11 123 MEDIOS DESHIDRATADOS Mencionamos a continuación los medios más usuales utilizados para esta técnica (Ver más información en el capítulo Medios de cultivo ). DESCRIPCIÓN REFERENCIA PRESENTACIÓN DETECCIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C Chapman TTC Agar (Tergitol 7 Agar) g (ISO :2000) g Endo Agar g g Coliformes Fecales Agar (FC Agar) g g Endo LES Agar g g Endo DEV Agar g g M 7 h. FC Agar g g E. coli Direct Agar g g Endo Membrana Filtrante Caldo g g Coliformes Fecales Caldo (FC Caldo) g g DETECCIÓN DE ESTREPTOCOCOS FECALES Slanetz-Bartley Agar g (ISO :2001) g Slanetz Bartley modificado Agar g g KF Estreptococos Agar g g KF Estreptococos Caldo g g Biliar Esculina Azida Agar g (ISO :2001) g RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS Nutritivo Agar g g Recuento en Placa Agar (PCA) g g Triptona y Soja Agar (TSA) g g Nutritivo DEV Agar g g R2A Agar g g Triptona Extracto de Levadura Agar g (ISO 6222:1999) g m-tge Caldo g g DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS Clostridium Perfringens Agar Select g g Hierro Sulfito Agar g g m-cp (Clostridium Perfringens) Agar Base g (RD 140/2003) (Directiva Europea 12767/97) g DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS Pseudomonas Agar Select. (Cetrimide Agar) g g CN Pseudomonas Agar Base Selectivo g g continua en la página siguiente 123
12 124 MEDIOS DESHIDRATADOS DESCRIPCIÓN REFERENCIA PRESENTACIÓN RECUENTO MICROORGANISMOS HETEROTRÓFICOS m-hpc g g DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS Manitol Hipersalino Agar g g DETECCIÓN DE MOHOS Y LEVADURAS Sabouraud Dextrosado Agar g g Sabouraud Cloranfenicol Agar g g MEDIOS SÓLIDOS PREPARADOS Scharlab le suministra la placa de filtración ya preparada, en cajas de 30 unidades repartidas en 5 blister de 6 placas cada uno. Cada blister va a su vez introducido en una bolsa totalmente sellada. Este embalaje prolonga la vida de las placas, evitando la deshidratación y contaminación.en el proceso de fabricación se utilizan todos los materiales estériles, pero si el medio lo permite, una vez terminado el proceso se irradian las cajas completas. DETECCIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C 064-PF0003 (ISO :2000) Chapman TTC Agar (Tergitol 7 Agar) 30 p. 55 mm ø 064-PF0024 Coliformes Fecales Agar (FC Agar) 30 p. 55 mm ø 064-PF0009 Endo Agar 30 p. 55 mm ø DETECCIÓN DE ESTREPTOCOCOS FECALES 064-PF0004 (ISO :2001) Slanetz-Bartley Agar 064-PF0008 (ISO :2001) Biliar Esculina Azida Agar 30 p. 55 mm ø 30 p. 55 mm ø RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS 064-PF0001 Nutritivo Agar 30 p. 55 mm ø 064-PF0007 Recuento en Placa Agar (PCA) 30 p. 55 mm ø 064-PF0026 Triptona y Soja Agar (TSA) 30 p. 55 mm ø 064-PF0013 (ISO 6222:1999) Triptona Extracto de Levadura Agar 30 p. 55 mm ø DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS 064-PF0002 Clostridium Perfringens Agar Select. (SPS) 30 p. 55 mm ø 064-PF0030 m-cp (Clostridiums Perfringens) Agar 30 p. 55 mm ø 064PF0030C (RD 140/2003) m-cp (Clostridiums Perfringens) Agar 12 p. 55 mm ø DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS 064-PF0005 Pseudomonas Agar Selectivo (Cetrimide Agar) 30 p. 55 mm ø DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS 064-PF0025 Manitol Hipersalino Agar 30 p. 55 mm ø DETECCIÓN DE MOHOS Y LEVADURAS 064-PF0022 Sabouraud Cloranfenicol Agar 30 p. 55 mm ø 064-PF0006 Sabouraud Dextrosado Agar 30 p. 55 mm ø 124 Tel. de pedidos: Fax de pedidos:
13 125 MEDIOS LÍQUIDOS PREPARADOS Medio de cultivo en prácticas ampollas (goteros) monodosis de 2 ml. DETECCIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C 064PF00024 m-fc (Coliformes Fecales, Caldo) PF0260V Laurilsulfato MUG Caldo PF0003V Tergitol 7 Caldo (Chapman TTC Caldo) 25 DETECCIÓN DE ESTREPTOCOCOS 064PF0004V Slanetz Bartley Caldo 25 RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS 064PF0001V Nutritivo Caldo PF0010V Recuento Total Caldo 25 DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS 064PF0002V SPS Caldo (Clostridium Perfringens Caldo Selectivo) 25 DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS 064PF0005V m-cetrimide Caldo 25 DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS 064PF0025V Manitol Hipersalino Caldo
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