CITOMETRIA DE FLUJO EN EL MIELOMA MÚLTIPLE. Carmen Pastoriza Cruz C.H.U. Ourense

Transcripción

1 CITOMETRIA DE FLUJO EN EL MIELOMA MÚLTIPLE Carmen Pastoriza Cruz C.H.U. Ourense

2 Características de la muestra para el estudio de CMF Diagnóstico de la célula plasmática por CMF Inmunofenotipos aberrantes Papel de la CMF en MGUS y MM smoldering Diferencias en la cuantificación de células plasmáticas (CP) CMF en la EMR en Mieloma Múltiple

3 La CMF se ha convertido en una herramienta indispensable en el manejo de las patologías hematológicas. Utilidades de la CMF: Estudio de gran número de células en un corto periodo de tiempo. Análisis simultáneo de múltiples parámetros en una misma célula. Almacenamiento de datos IF y comparación con análisis de muestras posteriores. Evaluación cuantitativa de células con determinada expresión antigénica. Combinación en el estudio de antígenos de superficie e intracelulares. Y en las alteraciones de células plasmáticas (CP)?: diferenciación CP normal vs patológica.

4 Tipo de muestra: médula ósea Volumen: 1,5 ml Anticoagulante: EDTA Número de eventos a adquirir:

5 Cómo definimos la célula plasmática por CMF?

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7 IF CP Normal IF CP Atípica CD /+ CD CD CD CD CD /+d CD28 -/+d ++ CD CD Inmunoglobulinas Kc/Lc policlonalidad restricción clonal Backbones markers

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9 No existen marcadores tumorales específicos

10 Eventos CD38++/ CD138++

11 Plasmáticas normales Plasmáticas aberrantes

12 Infra-expresados

13 Infra-expresados

14 Sobre-expresados

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17 CP normales CP atípicas

18 Mujer, 52 años. AP: Dislipemia. Remitida para estudio de pico monoclonal sérico No anemia Bioquímica sin alteraciones Dolor óseo lumbar de 2 meses de evolución. Proteinograma: CM 2 g/dl Inmunoglobulinas: Ig G 2,400 mg/dl, sin inmunoparesia PC a realizar: - Estudio de MO. - Serie ósea. - Estudio orina de 24h.

19 Estudio orina 24h: no pico monoclonal. IFE negativa. BJ negativa. Medulograma: 6-7% de cél plasmáticas, no acúmulos. CMF MO: 3,5% célula plasmáticas. 95% de las mismas con IF aberrante. Serie ósea: no evidencia de lesiones líticas. Osteoporosis MGUS

20 MGUS Alteración MM asintomático/q Criterios CM sérico < 3 g/dl Plasmáticas clonales <10% en MO Ausencia de CRAB CM sérico >=3 g/dl y/o Plasmáticas clonales >10% en MO Ausencia de CRAB

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24 MGUS pueden evolucionar a MM (1% año). Herramientas para determinar el riesgo de progresión de cada paciente. Scores pronósticos.

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26 MGUS N= 500 pacientes. MGUS 407 MMa 93 Seguimiento 56 meses (24-187). MMa

27 MGUS >95% apc+ Aneuploidia MMa >95% apc+ Inmunoparesia

28 Mujer, 53 años. Revisión rutinaria en consulta: astenia. Hemograma: Hb 9,5 g/dl Bioquímica: Creatinina 1,3 g/dl. Albúmina 4,2 mg/dl. B2 Microglobulina 5,8 mg/l. Persiste dolor óseo lumbar. Proteinograma sérico: CM 4,9 g/dl Inmunoglobulinas: Ig G 5,100 mg/dl Ratio k/l libre 4,20 Bence Jones: negativa PC a realizar: Estudio de MO. Serie ósea.

29 Medulograma: 40-42% células plasmáticas. No evidencia de plasmoblastos. Citometría de flujo: 31% de eventos con IF de célula plasmática. El 97% IF aberrante. Serie ósea: lesiones líticas en bóveda craneal y diáfisis humeral. JC: Mieloma Múltiples ISS III Inicia tratamiento: CyBORD Bifosfonatos

30 Eventos CD38++/ CD138++

31 IF atípico: CD45-/ CD19-/ CD56+ CD27-/ CD81-/ Lambda ++

32 CITOMETRIA MORFOLOGIA

33 El gold estándar sigue siendo el recuento morfológico. Diferencias cuantitativas importantes entre citología e CMF. Se han postulado varias hipótesis: Muestras de mo distintas. Contaminación por sangre periférica de la muestra. Existencia de acúmulos de CP. Pérdida de CD38/ CD138 durante el procesamiento de la mo. CD56 y adherencia al microambiente

34 Se han realizados estudios para comparar los recuentos de CP por morfología y por CMF. Se usaron muestras de mo del distintos aspirados. Sin embargo, el porcentaje de CP medido por CMF era el mismo que el detectado morfológicamente en las muestras de las citocentrífugas. HEMODILUCIÓN Paiva et al. Haematologica 2009; 94:

35 Recibe 6 ciclos de CyBorD Recogida de stem cells tras 4º ciclo Tipo de respuesta CM: no evidencia de PM sérico/urinario Ig G 1649 mg/dl IFE sérica: población Ig G kappa MO: 3% céls plasmáticas CMF: 0,01% IF aberrante. VGPR TASPE (Melfalan-200) sin intercurrencias

36 : n= 295 pacientes MM RP d+100 Taspe

37 n= 295 pacientes MM RP d+100 Taspe

38 N= 397 pacientes d+100 TASPE Subgrupo 241 pacientes

39 Hemograma sin citopenias. NO CRAB. Proteinograma: no evidencia de pico monoclonal Ig G mg/dl IF s/u: negativa. Ratio K/L normal MO: 1% céls plasmáticas CMF MO: no fenotipos aberrantes en la población plasmática. RC estricta

40 Habría cambiado nuestra actitud si EMR+ a día +100 post TASPE? RC RC Estricta IF NO

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42 La CMF permite la distinción de la CP patológica a través de su IF aberrante. Posible papel en scores de progresión de MGUS/MMq a MM. Cuantificación distinta que la morfología, principalmente por hemodilución. Determinación de RC estricta definida por IMWG. La calidad de la respuesta al tratamiento, medida a través de la EMR.

43 Muchas gracias