- Citogenética y FISH en Gammapatías Monoclonales.
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- Fernando Martín Arroyo
- hace 6 años
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1 Contribución y avances del laboratorio en el diagnóstico y seguimiento de Leucemias agudas - Citogenética y FISH en Gammapatías Monoclonales. Prof. Adj. Dr. Pablo López. Departamento de Laboratorio de Patología Clínica. Hospital de Clínicas. Médico Citogenetista. Área de Hematología de la Asociación Española.
2 Exposición Generalidades de Citogenética y FISH Evolución Clonal de las Gammapatías Hallazgos Citogenéticos Pronóstico de los marcadores Conclusiones
3 Citogenética y FISH en Leucemias Agudas. Técnicas especializadas que evalúan la composición genética del individuo. Citogenética: Ordenamiento y Análisis del componente cromosómico. FISH: Hibridación In Situ Fluorescente. Técnica que permite detectar ganancias, pérdidas y reordenamientos génicos específicos.
4 Resolución 1 banda cromosómica de más o menos pares de bases (10 7 ). 1 sonda de FISH alrededor de a pares de bases (10 5 ).
5 Conceptos Hiperpliodía Hipoploidía Trisomias Monosomías Delecciones Amplificaciones COMO LO PODEMOS DETECTAR?? ESTUDIO CITOGENÉTICO ESTUDIO CITOGENÉTICO CONVENCIONAL-HEMATOLÓGICO ESTUDIO CITO- MOLECULAR O FISH
6 Citogenética Cultivos celular Detención con Colchicina Extendidos en portaobjetos Bandeo Tripsina-Giemsa Captura- Análisis Interpretación Telómeros p=brazo corto Centrómero q=brazo largo Telómeros
7 Utilidad de la Citogenética Necesidad de Proliferación Celular
8 Utilidad de la Citogenética Necesidad de Proliferación Celular Baja sensibilidad Análisis Genómico Global Muy útil en la evaluación del seguimiento (SMD post tto) Plasmocitos 13%
9 Hibridación in situ Fluorescente (FISH) Técnica Cito-Molecular Región Específica Sonda Fluorescente complementaria a la región
10 Ventajas de la Hibridación In Situ Fluorescente FISH No necesita proliferación celular Se puede realizar en metafases y en núcleos interfásicos Se puede realizar técnicas de purificación de plasmocitos
11 Mosaico Infiltración del 100% Infiltración del 50% Infiltración del 10% Población del 13q 10% Población 13q 20% Población 13q 100%
12 Estudio de las Gammapatías Monoclonales Célula normal Clon Estadío de proliferación clonal limitada MGUS. Mieloma asintomático (Smoldering Myeloma o SMM) Mieloma Múltiple Mieloma Múltiple Avanzado
13 Frecuencia de Anomalías cromosómicas GMSI Cel Plasmáticas Normales 90% MM Cel Plasmáticas Normales 5% o menos Células Plasmáticas purificadas CD138 77% de los GMSI 96% de los MM
14 Clasificación Citogenética del MM Anomalías Citogenéticas Primarias Mielomas con trisomías (3,5,7,9,11,15,17) Hiperploides Mielomas con traslocaciones involucrando 14q32 Mieloma 14q+ Sin anomalías trisómicas o traslocaciones 14q En general NO SON SOLAPABLES
15 Citogenética y FISH Estadios de la Gamapatía Monoclonal Célula normal Clon Estadío de proliferación clonal limitada MGUS. Trisomía Clonal Mieloma asíntomático (Smoldering Myeloma o SMM) Trisomía Clonal Mieloma Múltiple Mieloma Múltiple Avanzado
16 Clasificación Citogenética del MM Anomalías Citogenéticas Estructurales Secundarias Monosomía 13 o delección 13q (50% MGUS y muy frecuente en SMM) Delección 17p o monosomía 17. Aparición tardía Aparición temprana Alto riesgo de progresión a MM Mal pronóstico de Sobrevida total y libre de enf. Amplificación 1q21-40% de SMM y MM. 0% de MGUS
17 Evolución Clonal Blood Cancer Journal (2015) 5, e365; doi: /bcj
18
19 Patrones de Citogenéticos Mieloma Hallazgos en la progresión GMSI Hallazgos precoces
20 Revised International Staging System (R- ISS)
21 Pronóstico International Myeloma Working Group
22 Laboratorio Clínico Citogenética FISH t(4;14) t(14;16) t(4;14) del 17p del 13q
23 Conclusiones El estudio de FISH es hoy en día de elección en el análisis de las aberraciones cromosómicas halladas en las gammapatías monoclonales, ya que muchas son no visibles citogenéticamente. La utilidad del estudio de FISH dependerá directamente de la posibilidad de purificación de células plasmáticas y la disponibilidad de sondas. El estudio citogenético complementa el análisis del FISH, fundamentalmente en el estudio de trisomías no evaluadas por FISH. Son estudios de fundamental importancia en el establecimiento de factores pronósticos.
24 MUCHAS GRACIAS Dr. Pablo López Prof. Adj. Inmunología y Biología Molecular
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