CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN
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- Vicente Herrero Bustamante
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1 CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN MATERIALES EN CONTACTO CON ALIMENTOS Proyecto de modificación de la Directiva 84/500/CEE: Implicaciones Analíticas Mª Eugenia Cirugeda Servicio de Contaminantes Jornadas de Referencia sobre Análisis de Alimentos - Servicio de Contaminantes 6 junio 2013
2 MODIFICACIÓN DIRECTIVA 84/500/CEE - Método analítico para la situación actual: Directiva 84/500/CEE. - Implicación Laboratorio Europeo de Referencia de Materiales en Contacto con Alimentos (EURL), reunión 21 de febrero de Validación método analítico adaptado a la situación futura.
3 DIRECTIVA 84/500/CEE Límites Directiva en vigor: 84/500/CEE y límites propuestos por la Comisión Europea Categoría del objeto (84/500/CEE) 1ª objetos no llenables o llenables cuya profundidad interna entre el punto más bajo y el borde superior sea inferior o igual a 25 mm. Límites actuales Limites propuestos (84/500/CEE) Pb Cd Pb Cd 0,8 mg/dm 2 0,07 mg/dm 2 2,0 µg/dm 2 1,0 µg/dm 2 2ª objetos llenables 4,0 mg/l 0,3 mg/l 10,0 µg/l 5,0 µg/l 3ª utensilios de cocción y objetos llenables de capacidad superior a 3 l. 1,5 mg/l 0,1 mg/l 3,8 µg/l 1,9 µg/l
4 DIRECTIVA 84/500/CEE Método analítico Directiva 84/500/CEE Ensayo cesión: Ácido acético 4 % Temperatura: (22 ± 2) ºC Tiempo: (24 ± 0,5) horas Estufa refrigerada y data logger cali- brados, ambos con tolerancia de ± 1 ºC
5 DIRECTIVA 84/500/CEE Parámetros exigidos al método instrumental de cuantificación: Límites de detección: Plomo 0,1mg/l Cadmio 0,01mg/l Exactitud (80-120) % Especificidad Espectrometría de Absorción Atómica de llama.
6 DIRECTIVA 84/500/CEE Cumplimiento límites máximos: Resultado muestra sobrepasa el límite en NO más del 50 % Cumple SI Se analizan tres objetos idénticos y el resultado medio no sobrepasa el límite máximo y ninguno de los tres rebasa dicho límite por encima del 50 %. Ejemplo Pb categoría 2ª: Muestra: 6, 0 mg/l. Resultados 3 muestras idénticas: (2,0; 4,0; 6,0) mg/l ó (1,0; 5,0; 6,0) mg/l Media n=3 = 4,0 mg/l CUMPLE
7 DIRECTIVA 84/500/CEE Consecuencia bajada drástica de los límites: 1- Modificación método de cuantificación 2- Modificación ensayo previo de cesión? Encuestas previas: Condiciones de ensayo semejantes al uso real (uso repetido) EURL: establecimiento método adecuado a dicha propuesta de límites (final 2013)
8 IMPLICACIÓN EURL Objetivo: Identificación de método de ensayo adecuado a los nuevos límites propuestos de discusión. Aspectos considerados el reunión de 21 de febrero de Establecimiento del simulante y condiciones de tiempo y temperatura de ensayo. 2- Uso repetido. 3- Materiales variados (vidrio, esmaltes y materiales vidriados). 4- Bordes. 5- Técnicas cerámicas.
9 IMPLICACIÓN EURL Condiciones de simulante, tiempo y temperatura Método actual (ácido acético 4 %, 22 ºC, 24 horas) + _ - Método ampliamente aceptado para los límites actuales. - Se ha asumido que representa las condiciones peores de uso. -Condiciones de uso repetido: 3 días de ensayo. - Si se aumenta la temperatura: riesgo de evaporación simulante.
10 IMPLICACIÓN EURL Método alternativo (ácido cítrico 0,5 %, 70 ºC, 2 horas) - Ácido más común en alimentos - Menor concentración de ácido - Menor capacidad de evaporación (permite establecer condiciones aceleradas de ensayo) - Se aumenta la temperatura y disminuye el tiempo para lograr efectos semejante al ensayo actual - Condiciones de uso repetido: tiempo inferior Implicación del EURL: Confirmación experimental de la relación de resultados entre ambos métodos.
11 IMPLICACIÓN EURL Propuesta de la Comisión Europea: Uso repetido: Industria: realizar solo la primera migración previa demostración de cumplimiento en la tercera. Ej. Pb 1ª migración 100 µg/l demostración de cumplimiento de 10 µg/l en la tercera migración (factor de 10): - Demostración para cada metal. - No solo en simulantes, también en alimentos de comportamiento más agresivo y en las condiciones peores de uso Implicación: EURL Confirmación: dependerá del nº y tipo de muestras estudiada. Estudio adicional con un alimento (reconocido como el más desfavorable)
12 IMPLICACIÓN EURL Método de cuantificación - Espectrometría de absorción atómica con cámara de grafito (FG-AAS) - Espectrometría de emisión óptica de plasma acoplado inductivamente (ICP-OES) - Espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS)
13 IMPLICACIÓN EURL Implicación del EURL - Método capaz de cuantificar en la tercera migración los límites propuestos, con el suficiente nivel de confianza, para distintos metales y distintos materiales. (Incertidumbre adecuada al nivel propuesto de discusión) Propuesta: LC: (1-5) µg/l Pb LC: (0,5-1) µg/l Cd - Realización de ensayo colaborativo voluntario con soluciones ciegas para: Evaluar capacidad analítica Precisión en los niveles propuestos
14 IMPLICACIÓN EURL Calendario propuesto para 2013 (EURL y otras partes interesadas): Recolección de datos (de ambos métodos, identificación de lagunas de conocimiento): abril-junio Pruebas preliminares: abril junio Obtención de muestras (industria): junio Diseño experimental: junio
15 IMPLICACIÓN EURL Trabajo experimental centrado principalmente en el ensayo y simulantes: junio-noviembre 2013 Ensayo uso repetido (tres migraciones) Comparación entre los dos ensayos principales Definición de las muestras en el rango más amplio posible, en colaboración con la industria Si existe consenso en un alimento representativo (ej. puré tomate a cierto ph) se ensayará en paralelo Priorización (diferentes muestras, metales, niveles) datos mínimos en 2013
16 VALIDACIÓN CNA Actualmente acreditación para Directiva 84/500/CC (R.D. 891/2006, de 21 de junio, BOE nº 174 de 22 julio 2006) (F-AAS) Año 2012 Estudio interno CNA de cesión Pb, Cd en objetos cerámicos destinados a entrar en contacto con alimentos (MCA) Ampliación de la validación del método acreditado para la determinación de Pb, Cd en simulantes (MCA ) y alimentos, por ET- AAS bajada Límite Cuantificación y comprobación aplicación a objetos cerámicos
17 VALIDACIÓN CNA Validación inicial Resolución sobre papel y cartón del Consejo de Europa (CoE) de 2002* establece límites de restricción para plomo y cadmio a niveles de µg/l (entre otros parámetros). Muestras vasos, platos y servilletas de papel. Extracto acuoso (según el CoE se siguió la Norma UNE-EN 645, junio 1994): se trocean las muestras, se sumergen en agua destilada y se realiza la extracción a (23 ± 3) ºC durante (24 ± 0,5) horas. La extracción también con ácido acético 3 % en los vasos de cartón. Estufa refrigerada y data logger calibrados (tolerancia de ± 1 ºC).
18 VALIDACIÓN CNA Cuantificación FG-AAS con corrector de fondo Zeeman, modelo AAnalyst 600 de Perkin- Elmer. Longitudes de onda 283,3 nm (Pb) y 228,8 nm (Cd) Tubos pirolíticos de calentamiento transversal end cup Inyección 30 µl de los cuales 10 µl corresponden al modificador de matriz (dihidrógenofosfato de amonio al 0,67 % (p/v) + nitrato de magnesio al 0,03 % (p/v), en ácido nítrico al 1 % (v/v)
19 VALIDACIÓN CNA Etapa nº Temperatura ºC Tiempo rampa (s) Tiempo mantenido (s) Flujo argón (ml/min) Pb Cd Pb Cd Pb Cd Pb Cd Condiciones de tiempo y temperatura de la cámara de grafito para plomo y cadmio
20 VALIDACIÓN CNA Se evaluaron: Linealidad, límite de cuantificación (LC) y exactitud (precisión y veracidad) tanto para extracto acuoso como acético 3 %. Linealidad : Se construyeron rectas de calibrado en el rango de (0-50) µg/l para plomo y de (0-3) µg/l para cadmio, en cuatro días diferentes. La linealidad se estimó como la desviación típica relativa de la pendiente, de acuerdo a la siguiente ecuación: Sb relativo % = 100 x Sb/b
21 VALIDACIÓN CNA Exactitud (precisión y veracidad) Se realizaron al menos 6 extracciones en distintos días, analizando cada muestra por duplicado (EUR EN- 1ª ed.)*. Se adicionó al extracto diferentes cantidades de plomo y cadmio para obtener tres niveles diferentes de concentración en cada una de ellas: Equivalente al límite de restricción (QM) indicado en la Resolución del CoE (Pb: 0,003 mg/dm 2 y Cd. 0,002 mg/dm 2 ). 1/5 del límite de restricción Entre 1/15 para plomo y 1/20 para cadmio del límite de restricción (LC). Para cada nivel se calculó la veracidad expresada como % de recuperación, y la precisión (repetibilidad y la reproducibilidad interna) expresados como desviación típica relativa. *
22 VALIDACIÓN CNA Criterios de aceptación resultados: Linealidad: valores de Sb relativo 5 %. Veracidad 90 % a 110 % resultados a nivel del límite establecido en las Reglamentaciones/Normas/Guías internacionales 80 % al 120 % para el resto de concentraciones. Precisión en todos los casos fue el derivado de la ecuación de Horwitz- Thompson al nivel de concentración de interés.
23 VALIDACIÓN CNA Analito Plomo Cadmio Exactitud Concentración 2 µg/l (LC*) 6 µg/l 30 µg/l 1 µg/l (LC) 2 µg/l 20 µg/l Repetibilidad RSD r % 3,5 4,0 1,6 2,9 1,8 2,0 Precisión Reproducibilidad RSD R % 17,1 7,3 4,3 5,9 5,1 3,9 Veracidad (% recuperación) 103,3 102,0 102,8 103,8 98,7 101,9 Incertidumbre % (factor de cobertura k= 2 y nivel de confianza de aproximadamente 95 %) 34,3 14,7 8,7 11,9 10,3 7,9 Nº de extracciones (muestras duplicadas) Resultados validación de plomo y cadmio en extracto acuoso en muestras de papel/cartón.
24 VALIDACIÓN CNA Analito Plomo Cadmio Concentración 2 µg/l (LC) 6 µg/l 30 µg/l 1 µg/l (LC) 2 µg/l 20 µg/l Exactitud Precisión Repetibilidad RSD r % Reproducibilidad RSD R % 4,6 4,0 1,4 2,8 2,3 2,0 14,7 11,9 5,8 6,9 3,6 3,6 Veracidad (% recuperación) 91,2 97,3 101,0 104,3 102,0 103,7 Incertidumbre % (factor de cobertura k= 2 y nivel de confianza de aproximadamente 95 %) 29,3 23,8 11,5 13,8 7,1 7,2 Nº de extracciones (muestras duplicadas) Resultados validación de plomo y cadmio en extracto ácido acético 3 % en muestras de papel/cartón.
25 VALIDACIÓN CNA Ampliación de la validación Pb, Cd (objetos cerámicos destinados a entrar en contacto con alimentos): Validación de los nuevos límites de cuantificación (LC). Comprobación de los criterios de control de calidad establecidos en el método validado. El simulante utilizado fue ácido acético al 4 % y los niveles adicionados fueron de (1, 2 y 10) µ/l para el plomo y (0,2, 1 y 2) µ/l para el cadmio.
26 VALIDACIÓN CNA Analito Plomo Cadmio Concentración 1 µg/l (LC) 2 µg/l 10 µg/l 0,2 µg/l (LC) 1 µg/l 2 µg/l Exactitud Repetibilidad 6,1 4,5 3,4 4,0 2,3 1,4 Precisión RSD r % Reproducibilidad 8,2 4,6 6,0 6,9 7,1 3,5 RSD R % Veracidad (en % recuperación) 103,7 99,0 100,4 98,8 104,4 103,7 Incertidumbre % (factor de cobertura k= 2 y nivel de confianza de aproximadamente 95 %) 16,5 9,2 11,9 13,7 14,2 7,1 Nº de muestras Resultados de la validación del LC y comprobación de parámetros de validación de plomo y cadmio en ácido acético 4 % en muestras de cerámica.
27 VALIDACIÓN CNA El método de determinación de plomo y cadmio por FG-AAS utilizado para la validación de MCA (papel y cartón), tanto en el extracto acuso como en acido acético 3 %, es válido para la determinación de plomo y cadmio por FG-AAS en acido acético al 4 % utilizado para cerámicas de uso alimentario. Los nuevos LC tanto de plomo como de cadmio se han rebajado para adecuarlos a los nuevos límites propuestos para materiales cerámicos destinados a entrar en contacto con los alimentos. La incertidumbre obtenida para materiales cerámicos mejora respecto a los extractos de papel y cartón.
28 Gracias por su atención Dolores Sánchez Tfno Juana Bustos Tfno Mª Eugenia Cirugeda Tfno
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