TRABAJO PRÁCTICO Nº 7. RESINAS. Objetivos - Determinar la presencia de cannabinoides y/o lignanos en muestras vegetales.

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PATAGONIA SAN JUAN BOSCO FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES DEPARTAMENTO DE FARMACIA CATEDRA DE FARMACOGNOSIA TRABAJO PRÁCTICO Nº 7. RESINAS. Objetivos - Determinar la presencia de cannabinoides y/o lignanos en muestras vegetales. Las resinas son productos amorfos de naturaleza química compleja. Suelen formarse en cavidades esquizógenas o esquizolisígenas y representan productos finales del metabolismo vegetal. Se las clasifican de distintas formas: - Desde el punto de vista químico: 1- Resinas propiamente dichas: pino (colofonia), jalapa, cáñamo, podófilo. 2- Oleoresinas: pino (miera), helecho macho, copaiba. 3- Gomoresinas: gutagamba. 4- Oleogomoresinas: mirra,incienso, azafétida. 5- Glicoresinas: jalapa, podófilo, escamonea mexicana. 6- Bálsamos: perú, tolú, benjuí, estoraque. - Desde el punto de vista del origen biosintético: 1- Orcinoles y floroglucionoles: vía del AcO/Mal: cáñamo, helecho macho. 2- Terpénicos: vía del AcO/Mev: pino, mirra, incienso, azafétida, copaiba. 3- Lignanos: vía del ac shikímico: podófilo, guayaco, cáñamo. 4- Ligninas: vía del ac shikímico: cúrcuma, jengibre. 5- Bálsamos: vía del ac shikímico: perú, tolú, benjuí, estoraque. A- CANNABINOIDES 1) Introducción. El cáñamo indiano está constituido por las inflorescencias femeninas desecadas de Cannabis sativa L. (Cannabinaceae). Recibe diversos nombres comunes según la forma de uso o de su presentación. Se lo llama marihuana en América cuando se lo usa para fumar, mezclado o no con tabaco. Esta especie vegetal es una de las más antiguas cultivadas por el hombre (5000 años atrás en Asia Central). Se la utiliza actualmente en el comercio por las fibras de su tallo, el aceite de sus semillas, y también estas últimas como alimento para pájaros. Se denominan cannabinoides a la serie de compuestos que existen en la resina de la marihuana y que están relacionados biosintéticamente con el THC. El compuesto activo más importante es el delta-9-tetrahidro-cannabinol ( 9-9- THC); posee además el cannabinol (CBN) y el cannabidiol (CBD). 105

2 Se han definido dos tipos de Cannabis sativa según la concentración de la principal substancia activa que contengan las inflorescencias ( 9-9-THC): - el tipo fibra, con bajo rendimiento en 9-9-THC, - el tipo droga con alto rendimiento en 9-9-THC (3,4-4,8 %) El THC es insoluble en agua, pero soluble en etanol y éter de petróleo. Se inactiva rápidamente por la presencia de O 2, luz, humedad, temperaturas altas. Es tres a cuatro veces más activo cuando se fuma que cuando se ingiere. 2) Parte práctica. Se trabajará con muestras de cáñamo y de la droga vegetal seca en estudio. a) Ensayo microscópico: colocar en un tubo de ensayo unos mg del polvo de las inflorescencias de Cannabis sativa y agregarle alrededor de 2 ml de líquido diafanizador. Dejar en contacto 20 minutos. Con una varilla de vidrio tomar y extender sobre un portaobjetos una gota, cubrir con un cubreobjetos. Observar al microscopio e informar. b) Ensayos químicos: 1) Colocar sobre un portaobjetos unos mg del polvo. Agregar sobre el mismo una gota de HCI. Observar el fenómeno producido e informar. (No se trata de una reacción específica). 2) Tomar 0,2 g de polvo seco y macerar 15 minutos con 5 ml de éter de petróleo, filtrar. Tomar 2 ml y llevarlos a sequedad. Una vez seco, agregar al residuo 0,2 ml de Reactivo de Beam (solución de KOH al 5 % en etanol). Colocar una gota sobre papel de filtro, dejar secar, y observar a la luz UV. Informar. 3) Efectuar la identificación de la marihuana que se esquematiza a continuación, según la FDA. 106

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4 B- PODÓFILO 1) Introducción. La podofilina es la resina obtenida del rizoma y raíz de Podophyllum peltatum, P. hexandrum (Berberidaceae), la cual se halla constituida por podofilotoxina, peltatinas y. Entre sus usos principales se encuentran: el tratamiento de verrugas y condilomas en piel; 108

5 derivados sintéticos (etopósido) en aplicación en oncología; purgante drástico: por efecto irritativo de la mucosa intestinal ocasionado por la podofilotoxina y derivados; los indios americanos la usaban como vermífugo y emético. 2) Parte práctica. Se analizarán los constituyentes de muestras conteniendo la resina mediante el siguiente sistema cromatográfico: Cromatofolio con las medidas adecuadas. Fase estacionaria: sílica gel 60 HF Fases móviles: 1- cloroformo-metanol (90:10) 2- cloroformo-acetona (65:35) Sustancia patrón o marcador: rutina. Muestras: 1- podofilina retomada en cloroformo. 2- muestra comercial cuyo principal componente es la podofilotoxina. 3-extracto clorofórmico de podófilo. Procedimiento: siembra puntual; desarrollo ascendente dejando correr los primeros 2,5 cm con la primera fase móvil y a continuación seguir 7,5 cm con la segunda. Revelado: ácido sulfúrico al 50 % en etanol y calentamiento en estufa a 100 C durante 5 minutos. Observar los perfiles al visible. Informe de los resultados: calcular los correspondientes Rf, compararlos con la bibliografía y establecer una conclusión. BIBLIOGRAFIA - Treasse-Evans, Farmacognosia, 13º Ed, Interamericana Mc Graw Hill. - Carpeta de Farmacognosia. UNC, Montes, M.; Wilkomirski, T. y Valenzuela, L.. Plantas Medicinales, Universidad de Concepción. - Bruneton, J, Farmacognosia. Fitoquímica. Plantas Medicinales. 2º Ed, Acribia S.A. - Wagner, H., Bladt, S., Zgainski, E.M., Plant drug analysis, Springer-Verlag, Alemania. 109