Aminopenicilinas. Cefalosporinas 1G. Cefalosporinas 2G. Cloranfenicol. Eritromicina. Trimetoprim. XIII Reunion de la seimc, sevilla 2009
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- Inés Peña Piñeiro
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1 XIII Reunión SEIMC 3-5 de junio de 2009, Sevilla Infecciones por microorganismos multirresistentes Mecanismos de resistencia a antimicrobianos en A. baumannii Felipe Fernández Cuenca Servicio de Microbiología Hospital Universitario Virgen Macarena
2 Antimicrobianos con utilidad terapéutica 1. -lactámicos (carbapenemas) 2. Aminoglucósidos 3. Quinolonas 4. Tetraciclinas (tigeciclina) 5. Colistina
3 RESISTENCIA Natural o intrínseca Adquirida Cromosóma Plásmidos Transposones Integrones
4 Mecanismos de resistencia intrínseca Outer membrane permeability Porins LPS AmpC OXA-51 Chromosomic β-lactamase Aminopenicilinas Cefalosporinas 1G. Cefalosporinas 2G. Cloranfenicol RND family XIII Reunion de la seimc, sevilla 2009 Active efflux Eritromicina Trimetoprim
5 Permeabilidad de la membrana externa Obara and Nakae, JAC Inferior a E. coli y P. aeruginosa. 2. Escaso número de tamaño de poro pequeño. porinas y con un
6 -lactamasas cromosómicas Clase C Cefalosporinasa tipo AmpC (bla ADC ) (Acinetobacter-Derived Cephalosporinases) + Clase D Oxacilinasa subgrupo 51 (bla OXA-51 )
7 Grupo heterogéneo de enzimas AmpC (ADC) Regulación: IS Aba1 CF-1,CF-2, CF-3 y AZT Perfil de inhibición: TAZ Heterogéneo: OXA-66, OXA-69.. OXA-51 Regulación: IS Aba1 Penicilinas y Carbapenems (bajo nivel de hidrólisis) Perfil de inhibición: NaCL
8 Sistemas/bombas de expulsión adeabc A. baumannii BM4454 (adeabc) BM ( adeb) CMI (mg/l) Sophie Magnet et. al. AAC, 2001 GEN TOB AK OFX NOR TMP TET ERY CHL CTX Nº VECES adeijk (intrínseca no adquirida) Damier-Piolle et al. AAC, 2008 A. baumannii BM4579 (adeijk) BM4579 ( adeijk) CMI (mg/l) TIC CTX IMP CHL TET TIG ERY PEF LEV > Nº VECES >
9
10 MECANISMOS DE RESISTENCIA A β-lactamicos 1. Hiperproducción/adquisición de β-lactamasas 2. Pérdida de porinas MULTIFACTORIAL 3. Sobreexpresión de bombas de expulsión 4. Alteraciones en PBPs
11 1a) Adquisición de -lactamasasas Clase A Espectro reducido Espectro extendido TEM-1/2, CARB-5, OXA-21 PER-1, VEB-1, TEM-92, CTXM-2 OXA-ESBL (OXA-37) Clase D (Oxacilinasas) Clase B (MBL) CPasas Subgrupos OXA-23, OXA-24, OXA-58 IMP-1 a IMP-6, IMP-11 VIM-2
12 OXA-23 OXA-58 HLR LLR HLR
13
14 β-lactamasas de clase D (metalo-β-lactamasas) Zn 2+. Amplio espectro (FEP y CP), excepto AZT. Int-1. Problemas de detección fenotípica (Segal H, JCM Ikonomidis A, JCM 2005).
15 1b) Hiperproducción de -lactamasas mediada por secuencias de inserción (ISAba) ISAba1 bla ampc ISAba1 bla OXA-51 ISAba3 bla OXA-23 ISAba3 bla OXA-58
16 Tienen las OXAs del subgrupo 51 algún papel en la resistencia a carbapenems? RT-PCR tiempo real La expresión de bla OXA-66 está incrementada 50 veces en A2 respecto a A1
17 2) Pérdida/disminución de la expresión de porinas ISAba Porina P Porina? int CarO ( kda) Omp kda OprD-like (43 kda) Limansky AS, JCM 2005 Mussi MA, AAC 2005 Clark RB, JCM 1996 Tomás M, AAC 2005 Dupont M, JPR 2006
18 Relevancia inactivación genes de porinas por ISs? Peso específico de cada porina sobre la resistencia?
19 3) Sobreexpresión de Bombas de expulsión activa (adeabc) Poco estudiado Resistencia cuando se asocia con OXAs
20 4) Alteraciones en Proteinas fijadoras de penicilina (PBPs) Pocos estudios Aumento expresión de una PBP de 24 kda Disminución expresión de PBP2 (73.2 kda) Gehrlein M, Chem 1991 Fernández Cuenca F, JAC 2003
21 MECANISMOS DE RESISTENCIA A AMINGLUCOSIDOS
22 Enzimas modificantes Acetilasas Adenilasas Fosfotransferasas Sistemas de expulsión activa ( AdeABC y AbeM) Alteraciones en la proteina diana del ribosoma Metilasas 16s rrna (arma)
23 1) Enzimas modificadoras de aminoglucósidos 1. Diversidad de enzimas y combinaciones. 2. Integrones de calse 1 aacc1* aada* aadb* aaca4* apha1 * Integrones apha6 EMA Gm Sm, Spc Sustrato Gm, Tob, Amk Tob, Amk Kan, Neo Kan, Neo, Amk
24 2) Bombas/Sistemas de expulsión adeabc Cepa CMI (mg/l) GEN TOB AK BM4454 (adeabc) BM ( adeb) Nº VECES AbeM
25 MECANISMOS DE RESISTENCIA A QUINOLONAS
26 Cambios en la diana DNA girasa (gyra) Topoisomerasa IV (parc) Reducción en la acumulación intracelular permeabilidad de la ME (porinas) Sobreexpresión de bombas de expulsión activa
27 1) Cambios en la diana CMI (mg/l) Cambio de aminoácido CIP NAL GyrA ParC Ser-83 Asp-87 Ser-80 Glu Leu Asp Ser Glu >1024 Leu Asp Leu Glu
28 2) Sobreexpresión de bombas de expulsión activa adeabc Cepa BM4454 (adeabc) BM ( adeb) CMI (mg/l) OFX NOR Nº VECES 16 8
29 Resistencia a levofloxacino FENOTIPO NAL CIP LEV MECANISMO FRECUENCIA R R ADI gyra bombas Frecuente R R R gyra y parc bombas Frecuente
30 MECANISMOS DE RESISTENCIA A TIGECICLINA
31 (ISAba1) Expresión adea
32 MECANISMOS DE RESISTENCIA A COLISTINA Desconocidos
33 LPS COLISTIN RESISTANCE 1. A. baumannii ATCC Col S (0.5 mg/l) 2. A. baumannii ATCC Col R (256 mg/l) Comunicación personal del 1 2 Dr. Jordi Vila
34 OUTER MEMBRANE PROTEINS ATCC wt 2. ATCC Col ATCC Col 2 4. ATCC Col ATCC Col ATCC Col 128 OMP W OMP??? MALDI-TOFF Comunicación personal del Dr. Jordi Vila
35 Islas de resistencia
36 Islas de resistencia Plásmidos o cromosoma Genes de resistencia (antimicrobianos, biocidas) y genes de virulencia Elementos genéticos móviles (transposones,integrones, Iss) Cepa AYE Cepa SDF
37
38 Genes de resistencia a antisépticos en AbaR1 (AYE strain)
39 Genes de resistencia a antisépticos en AbaG1 (SDF strain)
40
41 CONCLUSIONES 1. El principal mecanismo de resistencia a -lactámicos es la hiperproducción de AmpC mediada por ISAba1. 2. La resistencia a carbapenems está mediada (hiper)produccionproduccion de oxacilinasas mediada por ISAbas. por 3. La sobreexpresión de bombas de expulsión contribuyen en aumentar los niveles de resistencias a aminoglucósidos (EMAs), quinolonas (mutaciones en gyra y/o parc) y tigeciclina. 4. La resistencia a colistina se asocia con alteraciones en OMPs y del LPS. 5. Las islas de resistencia constituyen un reservorio de genes de resistencia y de elementos genéticos móviles. la
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