Proceedings of the Southern European Veterinary Conference and Congreso Nacional AVEPA

Transcripción

1 Proceedings of the Southern European Veterinary Conference and Congreso Nacional AVEPA Oct , Barcelona, Spain Next Conference: Oct , Granada, Spain Reprinted in the IVIS website with the permission of the SEVC - AVEPA

2 CÓMO TRATO... TIPIFICACIÓN DE SANGRE Y PRUEBAS CRUZADAS EN LA CLÍNICA Isabelle Goy-Thollot Dr Vet, Ph.D, Dipl ECVECC SIAMU, VetAgro Sup, Campus Lyon, 1 avenue Bourgelat, FRANCE TIPOS DE SANGRE CANINA Sistema de grupos sanguíneos del perro Actualmente, para los perros hay ocho grupos sanguíneos definidos. Se enumeran del 1 al 8 y van precedidos de la inicial DEA, que corresponde a la expresión en inglés Antígeno Eritrocitario Canino. El sistema de dos alelos DEA1 - (negativo) y DEA+ (positivo) es el más importante porque es el que tiene una antigenicidad más fuerte. Los perros DEA1+ son los más frecuentes (70-75%). Los perros DEA1- no reaccionan con sangre DEA1+ en la primera transfusión, porque no tienen anticuerpos naturales contra este antígeno. Pero el receptor desarrollará anticuerpos anti-dea1. Si un perro DEA1- recibe una transfusión por segunda vez con sangre DEA1+, presentará una grave reacción hemolítica debido a la producción de anticuerpos anti-dea1. Para estudiar los otros siete grupos se han desarrollado pocos medios, dada su baja antigenicidad. Sin embargo, existen anticuerpos naturales contra estos grupos que pueden inducir reacciones leves a las transfusiones. Dado que el antígeno DEA1 es el más inmunógeno, las técnicas de tipificación de sangre se basan en este. La tipificación de la sangre se basa en una reacción de aglutinación y el empleo de anticuerpos policlonales o monoclonales que reaccionan con antígenos de los eritrocitos. Al utilizar estos anticuerpos, la presencia o ausencia de aglutinación detecta la presencia (positivo) o ausencia (negativo) del antígeno eritrocitario que se esté analizando. Es aconsejable determinar, tanto en el donante como en el receptor, si es DEA1+ o DEA1-, o bien utilizar solo donantes DEA1- si no se conoce el grupo del receptor. En la práctica, los perros DEA1- deben recibir solo sangre DEA1-, y los perros DEA1+ pueden recibir sangre tanto DEA1+ como DEA1- en su primera transfusión. La prueba del antígeno DEA1 se puede realizar con muchos métodos, en un laboratorio de referencia o mediante el empleo de kits internos en la propia clínica. La tipificación de los antígenos distintos del DEA requiere el uso de antisueros policlonales, que solo se pueden conseguir en laboratorios especializados que analicen sangre (Animal Blood Resource International, EE.UU). La necesidad de analizar a fondo el tipo de sangre del donante está en discusión debido al bajo riesgo de reacciones graves a la transfusión relacionadas con estos antígenos; sin embargo, puede resultar extremadamente útil para conocer la posible incompatibilidad de grupos.

3 Tipificación de sangre canina Existen muchas técnicas, una de las cuales es una prueba rápida de Alvedia. La tipificación de la sangre con la Quick Test se basa en una inmunocromatografía. La tecnología se basa en la migración de eritrocitos sobre una tira de papel especialmente tratada, a la que se ha incorporado un anticuerpo monoclonal anti-dea1. Se une a DEA1+eritrocito, lo cual se puede visualizar mediante una línea roja delante de la marca DEA1. La Quick Test detecta cualquier nivel de expresión del antígeno DEA1, desde los más fuertes a los más débiles. Sea cual sea la intensidad de la línea, incluso con las más débiles, el perro se clasifica como DEA1+. Existe otra técnica de tipificación de sangre: la DMS (CARD), que se basa en una reacción de aglutinación con un anticuerpo anti-dea1 monoclonal. En estudios recientes en que se han comparado estas técnicas se ha observado una buena concordancia, con algunas diferencias en perros con anemia hemolítica autoinmune. GRUPOS SANGUÍNEOS DE LOS GATOS Sistemas de grupos sanguíneos de los gatos El sistema de grupos sanguíneos de los gatos se conoce como Sistema de grupos sanguíneos felinos AB y contiene tres tipos: el tipo A, el tipo B y el tipo AB (infrecuente). El alelo a es dominante respecto al alelo b. Los gatos con sangre de tipo A tienen el genotipo a/a, a/b y solo los gatos homocigotos b/b expresan el antígeno B en sus eritrocitos. Un tercer alelo es recesivo respecto a a y/o co-dominante con b y conduce a la expresión de sustancias tanto A como B en los eritrocitos en los casos extremadamente infrecuentes de los gatos AB. Así, los gatos AB no nacen de cruzar un tipo A con un tipo B a no ser que el gato A lleve el infrecuente alelo AB. El tipo AB se ha observado que tiene lugar en menos de un 1% de la población felina general. No obstante, esta incidencia podría ser más alta, ya que las nuevas tecnologías parecen detectar mejor estos gatos. Los porcentajes de estos tipos de sangre varían según la ubicación geográfica. En trabajos genéticos recientes se ha determinado que las mutaciones en la enzima t, hidroxilasa del ácido citidina monofosfo-n-acetilneuramínico (CMAH) son responsables del tipo de sangre B. Los gatos con el tipo A tienen ácido N-glucolilneuramínico (NeuGc) en la membrana de sus eritrocitos, mientras que los gatos con sangre de tipo B tienen ácido acetilneuramínico (NeuAc). La CMAH convierte el NeuA en NeuGc, de tal modo que la falta de esta enzima conduce a la acumulación de NeuA. Los gatos de tipo A pueden tener aloanticuerpos anti-b que pueden causar un acortamiento de la supervivencia de los eritrocitos si se utiliza un donante B. Los gatos de tipo B, no obstante, tienen anticuerpos anti-a muy fuertes y pueden presentar una reacción mortal con la transfusión de apenas 1 ml de sangre de tipo A. Los gatos de tipo AB no tienen aloanticuerpos contra sangre ni de tipo A ni de tipo B en sus sueros. Deben recibir sangre AB o A si necesitan una transfusión, debido a los fuertes anticuerpos anti-a que se encuentran en el suero B.

4 El antígeno MiK se ha identificado más recientemente. La mayoría de gatos tienen este antígeno, pero en los gatos que no lo tienen, puede haber anticuerpos naturales que pueden conducir a una reacción hemolítica a la transfusión si se ha realizado una transfusión inicial incompatible. Tipificación de la sangre felina La tipificación inicial en los gatos se realizó con suero de tipo B con fuertes anticuerpos anti-a para detectar gatos de tipo A. Los anticuerpos anti-b son más débiles en el suero A, pero la lectina de Triticum vulgaris reacciona fuertemente con el antígeno del tipo B. Ahora existen dos kits comerciales de tipificación de sangre felina para uso interno en la clínica (Rapid VetH Feline, DMS laboratories, NJ [CARD] y Quick test A+B, Alvedia, Francia [CHROM]). En ambos se emplean anticuerpos monoclonales contra el tipo A y el tipo B. En un estudio reciente en el que se han comparado los métodos de tipificación de sangre felina, una aglutinación en tubo, una prueba CARD y una prueba CHROM dieron resultados idénticos en 52 de 58 gatos. La CARD mostró una exactitud global del 91,4%, y la CHROM, del 94,8%. En 2 de los 6 gatos con resultados discordantes, había infección por el VLeF. Se recomienda que los gatos B y AB se confirmen mediante un segundo método o en otro laboratorio. Actualmente no se dispone de ningún sistema de uso interno para el antígeno MiK. PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD Las pruebas de compatibilidad determinan la compatibilidad serológica entre la sangre del donante y la del receptor en función de una reacción de aglutinación, que permite detectar aloanticuerpos previamente formados o sensibilización previa. Las pruebas de compatibilidad no impiden que un animal pueda una reacción a la transfusión, hemolítica o no; por lo tanto, es fundamental realizar un seguimiento del receptor durante y después de la administración del producto. En las pruebas de compatibilidad mayor se comprueba la compatibilidad entre los eritrocitos del donante y el plasma/suero del receptor, mientras que en las de compatibilidad menor, se evalúa lo opuesto (plasma/suero del donante y eritrocitos del receptor). Las incompatibilidades menores preocupan más cuando deben administrarse grandes volúmenes de plasma o sangre completa. La autoaglutinación o hemólisis del receptor puede dar lugar a una incompatibilidad, de tal modo que deberá realizarse un control con los eritrocitos y el suero del receptor. Deben realizarse pruebas de compatibilidad en los perros antes de repetir una transfusión (<4 días), en caso de reacción a una transfusión previa o cuando no se sepa si el animal ha recibido previamente alguna transfusión. Teóricamente, en los gatos deben realizarse antes de la primera transfusión. La autoaglutinación o la hemoglobinemia grave descartan la prueba. Lavando tres veces la sangre con suero fisiológico se puede

5 dispersar la autoaglutinación y la formación de pilas de monedas. Dado que los perros de manera natural no disponen de aloanticuerpos, la primera prueba de compatibilidad entre un perro que nunca haya recibido una transfusión y su donante debería ser favorable. Una prueba de compatibilidad favorable en un perro no excluye la sensibilización contra células del donante en un plazo de 1 a 2 semanas. Un perro al que previamente se haya administrado una transfusión compatible de un donante puede resultar ser incompatible con el mismo donante 1-2 semanas después. Las pruebas de compatibilidad son técnicamente difíciles en los gatos, y no son fáciles de interpretar. Bibliografía 1. Acierno MM, Raj K, Giger U. DEA 1 Expression on dog erythrocytes analyzed by immunochromatographic and flow cytometric techniques. J Vet Intern Med 2014; 28: Davidow B. How to give blood transfusions safely: The type and cross match. In: Proceedings of the 18th International Veterinary Emergency and Critical Care Society; 2012: San Antonio, USA. 3. Giger U. Blood typing and cross-matching in ensure compatible transfusions. In: Bonagura JD, Twedt DC. eds. Kirk s Current Veterinary Therapy XIV. St Louis, MO: Saunders Elsevier; 2009, pp Seth M, Jackson KV, Winzelberg S, Giger U. Comparison of gel column, card, and cartridge techniques for dog erythrocyte antigen 1.1 blood typing. Am J Vet Res 2012; 73: Weinstein NM, Sink CA. Blood typing and cross matching, In: Burkitt Creedon JM, Davis H. eds. Advanced Monitoring and Procedures for Small Animal Emergency and Critical Care, 1st ed. Chichester UK: John Wiley & Sons; 2012, pp