DEPARTAMENTO LABORATORIO BIOMÉDICO NACIONAL Y DE REFERENCIA

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1 FLUJOGRAMA PARA LA SEROLOGÍA Y CONFIRMACIÓN DE VIRUS HANTA DEPARTAMENTO LABORATORIO BIOMÉDICO NACIONAL Y DE REFERENCIA SUBDEPARTAMENTO DE ENFERMEDADES VIRALES SECCIÓN VIRUS HEPÁTICOS/EMERGENTES

2 ALERTA SANITARIA El 06 de febrero del año 2012, el Ministerio de Salud decretó Alerta Sanitaria por aumento de casos de Hantavirus para la Región del Bío Bío y la provincia de Malleco en la Región de La Araucanía.

3 INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA Desarrollar una red de laboratorio para la detección de virus Hanta mediante la Técnica de ELISA directa (Kit IgM Virus Andes), que cubra las necesidades de un diagnóstico mas oportuno de esta enfermedad emergente.

4 INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA Se han seleccionado los siguientes laboratorios de la red pública: Región de Valparaíso: Hospital Gustavo Fricke Región del Maule: Hospital de Talca Región del Bío Bío: Hospital Guillermo Grant Benavente Región de La Araucanía: Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena Región de Los Lagos: Hospital Base de Puerto Montt.

5 DESARROLLO 09 de Febrero: Hospital Guillermo Grant Benavente. 23 de Febrero: Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena. Hospital Base de Puerto Montt. 27 de Febrero: Hospital Gustavo Fricke. 07 de Marzo: Hospital Regional de Talca

6 OBJETIVOS Implementar Técnica de ELISA para diagnóstico inicial de Infección por Virus Hanta, que apoye el criterio para el diagnóstico clínico. Conocer el desempeño en la práctica clínica de un test que se encuentra verificado por ISP y que presenta una sensibilidad del 100% y una especificidad del 96% en los análisis realizados por la institución.

7 TÉCNICA El Test es una prueba de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) que permite la detección de anticuerpos IgM contra el virus Hanta (virus Andes y virus Sin Nombre) en muestras de suero o plasma humano.

8 Técnicas verificadas por ISP: Ventajas y desventajas Recalcar que el 100% de sensibilidad es con IgM captura Andes, pero que durante la fase aguda de la enfermedad, como también en la fase prodrómica, cuando la detección de inmunoglobulinas específicas es todavía negativa. Técnica ELISA al ser directa, puede tener falsos positivos. NOMBRE ENSAYO REAGENA POC PUUMALA IgM ANTI- HANTA VIRUS POOL 2 AMERICA IgM TIPO DE ENSAYO ANTIGENO SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD INMUNOCROMATOGRAFIA PUUMALA 82.6% 95.37% ELISA ANDES Y VSN 100% 96.2%

9 EQUIPAMIENTO para tecnica ELISA Micropipetas de 10, 100 y 1000 µl Lector de microplacas ELISA con filtros de 450 nm y 620 nm. Incubador de 37ºC lavador de microplacas.

10 CONSIDERACIONES El objetivo de la implementación de este test a nivel local, no es reemplazar la confirmación del ISP, sino permitir un diagnóstico inicial optimizando el tiempo de respuesta para la atención clínica Se recomienda centralizar a Nivel Regional la ejecución de esta metodología con la intención de mejorar el rendimiento del KIT. Se realizará estudio de concordancia de los resultados con el ISP con los diferentes laboratorios. Así mismo, recomendamos que la mantención de la técnica en dicho hospital sea responsabilidad de las autoridades locales, mientras que el ISP se compromete a otorgar la supervisión de la técnica implementada.

11 Red de laboratorio Virus Hanta Red Central Confirmación de casos U.A.V I.S.P P.U.C Araucanía Los Ríos Los Lagos Resto del País En caso requerido CONFIRMACIÓN Red Regional Acercamiento al diagnóstico clínico Métodos verificados por el ISP (Puumala y test de ELISA que utiliza antígeno Andes y antígeno Virus Sin Nombre) Región Valparaíso: Hospital de Viña del Mar Región del Maule: Hospital de Talca Región de Bío Bío: Hospital Guillermo Grant Benavente Región Araucanía: Hospital de Temuco Región Los Lagos: Hospital de Puerto Montt Nivel Local Acercamiento al diagnóstico clínico Laboratorios que realizan Test Rápido Puumala Centros Asistenciales que no disponen de Test Rápido y pertenecen a las Regiones V, VII,VIII,IX y X; enviar sus muestras a laboratorio regional Centros Asistenciales que no disponen de Test Rápido y pertenecen a otras regiones del país

12 CONDICIONES Horario de Recepción de muestras: de Lunes a Domingo las 24 horas. Horario de procesamiento de muestras: de lunes a viernes. En estado de alerta sanitaria: de lunes a sábado y domingo muestras urgentes. Tipo de muestra: sangre total sin anticoagulante en tubo estéril tapa rosca o de goma. (tubo tapa roja ) y además envío de tubo tapa lila con sistema de extracción al vacío (EDTA) Adultos: 5-8 ml Pediátricos: 3-4ml En caso de paciente fallecido enviar: tejidos en tubo estéril tapa rosca y muestra de punción cardiaca.

13 CONDICIONES Conservación de la Muestra: conservar las muestras refrigeradas a 4ºC, por un tiempo no mayor a 7 días Transporte: enviar en frío con unidades refrigerantes. Temperatura 2-8ºC en sistema de triple embalaje.

14 IMPORTANTE Comunicar por mail la vía de transporte, día y hora del despacho de la muestra para el examen de Hantavirus. Cada tubo debe estar identificado con el nombre del paciente, tipo de muestra y fecha de obtención. Las muestras deben ser acompañadas con los antecedentes del paciente en el Formulario de Notificación y Envío de Muestras, el cual debe consignar claramente la fecha de toma de muestra, fecha de inicio de los síntomas, y demás antecedentes clínicos solicitados en el formulario. Envío de todos los datos, y el SEGUIMIENTO CLINICO, y diagnóstico en base a antecedentes: clínicos, epidemiológicos y de laboratorio

15 Correo electrónico responsable ANTECEDENTES CLÍNICOS: Fecha de primeros síntomas: / / Fecha de 1 Consulta / / / Fecha de Hospitalización: / / Establecimiento: Estado del Paciente: Fallecido ( ) Fecha de Defunción: / / Grave ( ) No Grave ( ) Diagnóstico Clínico: Enfermedad leve por Hantavirus: ( ) Síndrome Cardiopulmonar por Hantavirus: ( ) Signos y Síntomas (Marque con una X lo que corresponda a): Fiebre Si ( ) No ( ) S.Gastrointestinales: Si ( ) No ( ) Recuento Blancos m3 Cefalea Si ( ) No ( ) Compromiso respiratorio: Si ( ) No ( ) c/desviación Izquierda: Si ( ) No ( ) Mialgia: Si ( ) No ( ) Rx. Tórax con infiltrados: Si ( ) No ( ) Hematocrito elevado: Si ( ) No ( ) Linfocitosis atípica: Si ( ) No ( ) Trombocitopenia: Si ( ) No ( ) Resultado Test local: ( ) Positivo / ( )Negativo Inmunocromatografía ( ) ELISA ( )* (inmunoblastos >10%) (< mm3) EXAMENES DE LABORATORIO Fecha toma muestra: Sangre total sin anticoagulante Fecha : / / Fecha Envío Laboratorio / / Sangre con EDTA Fecha: / / Enviado a Laboratorio: ISP ( ) Necropsia (Especifique). Fecha: / / U.Austral Valdivia ( ) Otros (Especifique) Fecha: / / U. Católica ( )

16 Gracias

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