Aspectos generales de los sarcomas. Clasificación y grados de diferenciación ENRIQUE DE ALAVA
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- Alba Botella Blanco
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1 Aspectos generales de los sarcomas. Clasificación y grados de diferenciación ENRIQUE DE ALAVA UNIVERSIDAD DE SALAMANCA-CSIC España
2 Los sarcomas Raros (2,5/ año) Niños y adultos Grupo heterogéneo de tumores Algunos con histogénesis conocida Casi todos con etiología desconocida Hemos llegado a un tope en nuestra capacidad terapéutica.
3 Cómo se diagnostican los tumores en la era molecular Una buena historia clínica Un correcto estudio de imagen Una biopsia/citología adecuada Es benigno o maligno? Qué línea de diferenciación sigue? Todo tipo de técnicas
4 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina Diagnóstico
5 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ Diagnóstico
6 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina Material congelado H&E, IHQ Diagnóstico
7 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ Material congelado RT-PCR Diagnóstico
8 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Material congelado RT-PCR FISH Diagnóstico
9 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Material congelado RT-PCR -omica FISH Diagnóstico
10 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tomar para ME o ME Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Diagnóstico Material congelado RT-PCR -omica FISH
11 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tomar para ME o Cultivo celular ME Citogenética metafase Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Diagnóstico Material congelado RT-PCR -omica FISH
12 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tomar para ME o Cultivo celular ME Citogenética metafase Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Diagnóstico Material congelado RT-PCR -omica FISH Banco tumores
13 Datos clínicos/imagen Biopsia/resección/citología Examen macroscópico Tomar para ME o Cultivo celular ME Citogenética metafase Tejido Incluido En parafina H&E, IHQ FISH Diagnóstico Material congelado RT-PCR -omica FISH Banco tumores
14 Guión de la charla Lo que aporta el estudio morfológico Lo que aporta la Inmunohistoquímica Lo que aporta la Patología Molecular
15 Material diagnóstico representativo PAAF BAG Biopsia
16 Clasificación Un mundo dinámico
17 Hay muchos tipos de tumores mesenquimales...
18 ...Hueso y tejidos blandos
19 ...Benignos y malignos
20 ...Diversos patrones microscópicos fusocelular epitelioide Células redondas alveolar
21 La clasificación está basada en el tipo de diferenciación Osteosarcoma Condrosarcoma MFH Leiomiosarcoma Rabdomiosarcoma Angiosarcoma Liposarcoma MPNST Sarcoma Sinovial -?? Sarcoma Ewing /PNET -??
22 que no es lo mismo que célula de origen (=histogénesis)
23 Tumor que forma matriz condroide, benigno (En)condroma
24 Condrosarcoma
25
26 Mejor definición de potencial biológico Malignidad intermedia Localmente agresivo: fibromatosis Idem+Lesión raramente metastatizante: HF angiomatoide Fibrohistiocitoma plexiforme Benignos Algunas lesiones morfológicamente benignas pueden metastatizar (TCG difuso)
27 Tumor lipomatoso Atípico = LPS bien diferenciado Malignidad intermedia: Lesión localmente agresiva
28 Hemangiopericitoma = tumor fibroso solitario
29 Tumor miofibroblástico inflamatorio ALK Malignidad intermedia: Lesión localmente agresiva
30 Mixofibrosarcoma Maligno: <35% metástasis Grado 1-3
31 Hemangioendotelioma epitelioide Pasa a ser considerado maligno (20-30% metástasis) Hemangioendotelioma fusiforme Benigno
32 Tumores de diferenciación incierta Benignos. P.ej. Mixoma Intermedio raramente metastatizante. HF angiomatoide Maligno. PEComa
33 Factores pronósticos/predictivos Estadio (TNM) Grado de diferenciación Respuesta al tratamiento de inducción Algunos factores moleculares?
34 Gradar los sarcomas lo mejor es enemigo de lo bueno?
35
36 Necrosis
37 Mitosis/10 CGA
38 Diferenciación
39 Cancer 2000;88:
40
41 Superfluo? =3 =1
42 Sarcoma Alveolar de partes blandas Imposible?
43 Condrosarcoma mixoide Equívoco?
44 MPNST Inútil?
45
46 Respuesta al tratamiento Diagnóstico Post-tratamiento Ewing/PNET S.Osteogénico
47 Guión de la charla Lo que aporta el estudio morfológico Lo que aporta la Inmunohistoquímica Lo que aporta la Patología Molecular
48 Inmunohistoquímica
49 Sarcomas que expresan citoqueratinas. Diferenciación epitelial AE3 AE1 CAM 5.2
50 Sarcomas que expresan citoqueratinas. Diferenciación epitelial AE3 AE1 CAM 5.2
51 Sarcomas que expresan citoqueratinas. Diferenciación aberrante TDCPR Ewing Rabdom. CAM 5.2 Desmina NSE
52 EMA S. sinovial Perineurioma
53 Diferenciación muscular Desmina. Rabdomiosarcoma.
54 Diferenciación muscular 2 MSA Fascitis nodular
55 Miogenina Foto rabdo myod1 02b0773
56 Marcadores musculares Cuál emplear? Marcador Específico? Especifico? Sensible? Marca también Marca Desmina Moderada Mucho Rabdo y leio Actina HHF35 Poco Moderada Rabdo y leio Mioglobina Mucho Poco Rabdo muy diferenciado MyoD1/miogenina Mucho Moderada Rabdo Indiferenciado Caldesmón Mucho Mucho Leio (sólo)
57 S-100 Schwannoma benigno Schwannoma maligno
58 Marcadores melanocíticos HMB45 MelanA Tirosinasa MiTF Angiomiolipoma HMB45
59 Marcadores vasculares CD34 CD31 Factor VIII
60 Marcadores vasculares Marcador Especifico? Sensible? Marca también Ulex Alta Moderada Epitelios CD34 Moderada Alta T. Fibroso solitario, sarcoma epitelioide, DFSP CD31 Alta Alta Macrófagos Mod. de Enzinger y Weiss 4ª Ed.
61 CD99 Ewing TDCPR S. sinovial
62 Otros. CD99 Sarcoma de Ewing/TNEP 96% Linfoma linfoblástico 90% Timoma (linfocitos reactivos) 90% Rabdomiosarcoma alveolar* 12% Rabdomiosarcoma embrionario* 24% Tumor desmoplásico de c.pequeñas y redondas 15% Neuroblastoma, meduloblastoma 0% Sarcoma sinovial 18% Sarcoma alveolar de partes blandas 33% Histiocitoma fibroso maligno 42% Mesotelioma 58% Adenocarcinomas (pulmón, colon) 26% Melanoma 13% Appl Immunoh 1994;2:
63 Otros. CD68
64 Otros. c-kit, MDM2
65
66 Tumor de células redondas Citoqueratinas S-100 ALC CD99 Desmina-miogenina Vimentina* Melanoma Linfoma Ca. de células pequeñas Rabdomiosarcoma Ewing Sarcoma sinovial*
67 Sarcoma fusocelular Citoqueratinas/EMA S-100 Desmina Colágeno IV Sarcoma sinovial Neurofibrosarcoma Fibrosarcoma Leiomiosarcoma
68 Tumor epitelioide Citoqueratinas Vimentina LCA CD30 S-100 CD31 CD34 Carcinoma Melanoma Linfoma B Linfoma anaplásico de células grandes Sarcoma epitelioide Sarcoma sinovial
69 Guión de la charla Lo que aporta el estudio morfológico Lo que aporta la Inmunohistoquímica Lo que aporta la Patología Molecular
70 Patología Molecular. Tumores de partes blandas Tumores con translocaciones específicas y cariotipos sencillos Tumores con cariotipos complejos, sin translocaciones específicas t(12;16)(q13;p11)
71 Patología Molecular. Tumores de partes blandas Tumores con translocaciones específicas y cariotipos sencillos Tumores con cariotipos complejos, sin translocaciones específicas Aprox 1/3 de los tumores Quince tipos de tumores y 30 tipos de translocaciones Fusiones génicas: proteínas quiméricas expresadas en todas las células: Factores de transcripción Quinasas alteradas Aprox 2/3 de los tumores Inestabilidad genómica, disfunción de los telómeros
72 Patología Molecular. Tumores de partes blandas Tumores con translocaciones específicas y cariotipos sencillos Tumores con cariotipos complejos, sin translocaciones específicas Aprox 1/3 de los tumores Quince tipos de tumores y 30 tipos de translocaciones Fusiones génicas: proteínas quiméricas expresadas en todas las células: Factores de transcripción Quinasas alteradas Aprox 2/3 de los tumores Inestabilidad genómica, disfunción de los telómeros BUENOS MARCADORES DIAGNÓSTICOS NO MARCADORES DIAGNÓSTICOS
73 Patología Molecular. Tumores de partes blandas Tumores con translocaciones específicas y cariotipos sencillos Tumores con cariotipos complejos, sin translocaciones específicas Ewing Sarcoma sinovial Tumor desmoplásico de células pequeñas y redondas Rabdomiosarcoma alveolar Sarcoma alveolar de tejidos blandos Liposarcoma mixoide Tumor miofibroblástico inflamatorio Etc. Osteosarcoma Sarcoma Epitelioide Leiomiosarcoma Fibrosarcoma (adulto) Condrosarcoma (la mayor parte) Liposarcoma ( Bien diferenciado) Angiosarcoma Etc.
74 Translocación
75 Las translocaciones son específicas de cada tumor Desmoplastic small round cell tumor Ewing tumor Alveolar rhabdomyosarco ma Embryonal rhabdomyosarco ma Wilms tumor
76 No sólo tumores pediátricos o de células redondas Tumor de Ewing Tumor desmoplásico de células pequeñas y redondas Liposarcoma mixoide/de células redondas Condrosarcoma mixoide extraesquelético Rabdomiosarcoma alveolar (Sarcoma sinovial) Sarcoma sinovial Sarcoma de células claras de partes blandas Dermatofibrosarcoma protuberans Fibrosarcoma congénito / Nefroma mesoblástico Sarcoma alveolar de partes blandas Tumor miofibroblástico inflamatorio Sarcoma del estroma endometrial
77 Dos técnicas de rutina Amplificación Hibridación IHQ
78 RT-PCR RNA EWS FLI REVERSE TRANSCRIPTION cdna EWS FLI PCR Amplified DNA EWS FLI
79 RT-PCR para EWS-FLI Control negativo 2. Neuroblastoma 3. Rabdomiosarcoma e T. de Ewing 7. Control Positivo
80 Bancos de tumores
81 Técnicas de Hibridación FISH (et al.)
82 FISH der (11) der (22) EWS FLI-1 5 3
83 FISH tipo fusión FISH tipo separación
84 FISH tipo separación
85
86 Cuándo?
87 Varón, 17a CD99
88 Útil para Subtipos morfológicos diferentes Presentaciones clinicopatológicas no habituales Descartar cosas que no son sarcomas
89 Útil para Subtipos morfológicos diferentes Presentaciones clinicopatológicas no habituales Descartar cosas que no son sarcomas
90 Útil para Subtipos morfológicos diferentes Presentaciones clinicopatológicas no habituales Descartar cosas que no son sarcomas
91 Varón de 56 años con tumor en el pulgar izquierdo
92
93 HMB45 S-100
94 Fusión EWS-ATF M 1, 2, 4, 5. Controles (-) 3. Sarcoma de células claras de tejidos blandos. RT-PCR Ann T: 66C
95 Nos vale el material de parafina?
96 Técnicas de rutina para detectar translocaciones Congelado Citología/ Impronta RT-PCR +++ Interfase FISH +++ Parafina Usa ambos
97 Lab. PMD-BT Teresa Hernández Verónica Iglesias Montse Arroyo Susana Fraile Gracias! NEO-BNADN Juan Manuel Sánchez Lab. PMS Ana Pastora Otero Ana Sofía Martins Carlos Mackintosh Daniel Osuna David Herrero Gemma Caballero José Luis Ordóñez Juan Madoz Victoria Sevillano Universidad de Salamanca
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