Diagnóstico de enfermedades vegetales

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Francisco José Lara Serrano
hace 8 años
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1 Diagnóstico de enfermedades vegetales Curso: Diagnóstico de enfermedades vegetales. Facultad de Agronomía, UDELAR Ing. Agr. Vivienne Gepp, MSc. 28 de abril de 2011 INTRODUCCIÓN Objetivo general del curso: Lograr los conocimientos, criterios y habilidades para realizar diagnósticos de enfermedades en plantas de interés agrícola. Unidades temáticas: Metodología del curso Introducción. Clínica. Laboratorio. Etapas de diagnóstico. Bibliografía. Publicación de resultados. Diagnóstico de enfermedades causadas por hongos. Diagnóstico de enfermedades causadas por bacterias. Diagnóstico de enfermedades causadas por virus. Diagnóstico preliminar de enfermedades causadas por nematodos. Diagnóstico preliminar de enfermedades causadas por factores ambientales. Continuación del práctico Clase teórica Lectura Bibliografía Informe Clase práctica Guías de estudio Clase Nº Mes abril día 28 Hs pres. Temario Teórico: Introducción. Diagnóstico. Clínicas de Diagnóstico: sectores, equipamiento y asepsia. Diagnóstico de enfermedades bióticas y abióticas. Práctico: Recorrida de las instalaciones de Fitopatología. Análisis de casos de enfermedades bióticas y abióticas. Tarea domiciliaria: Análisis de casos. Teórico: Microscopía básica. Taxonomía de hongos. Práctico: Observación de estructuras de hongos. Identificación de hongos. Tarea domiciliaria: Identificación de hongos. Teórico: Inoculación de fitopatógenos Práctico: Inoculación de hongos, bacterias y virus. Tarea domiciliaria: Registrar y analizar resultados de las inoculaciones. Teórico: Esterilización de material y de sustancias. Medios de cultivo. Práctico: preparación, esterilización y dispensado de medios. Tarea domiciliaria: Continuar con registro y análisis de resultados de las inoculaciones. Teórico: Diagnóstico de enfermedades causadas por hongos: observación, aislamiento e identificación. Práctico: aislamiento e identificación de hongos. Tarea domiciliaria: Registro y análisis de resultados. Bibliografía Básica General Por factor patogénico Por cultivo o tipo de cultivo 6 / Teórico: Diagnóstico de bacterias: observación, aislamiento e identificación. Práctico: aislamiento, identificación de bacterias. Tarea domiciliaria: Registro y análisis de resultados. 7 Teórico: Serología, microscopio electrónico y métodos moleculares para el diagnóstico de fitopatógenos. Diagnóstico de virus. Métodos tradicionales y más modernos. Práctico: Análisis y discusión de resultados de trabajos realizados. 8 Teórico: Diagnóstico de enfermedades causadas por nematodos: taxonomía, aislamiento, observación e inoculación. Práctico: observación de síntomas y signo de nematodos fitopatógenos. Visita un laboratorio de nematología. 2 Prueba final 1

Unidades temáticas: Metodología del curso Introducción. Clínica. Laboratorio. Etapas de diagnóstico. Bibliografía. Publicación de resultados. Diagnóstico de enfermedades causadas por hongos.

2 DIAGNÓSTICO = Niveles de confianza de un diagnóstico Proceso mediante el cual se llega a determinar la causa de una enfermedad. Diagnóstico positivo Diagnóstico correcto Diagnóstico útil Diagnóstico indicativo Diagnóstico excluyente 100% confiable >99% confiable 95-99% confiable 85-95% confiable 100% confiable El resultado de este proceso. Especialistas diagnostican 50-75% de las muestras Fuente: Shurtleff & Averre (1997). Metodología general de diagnóstico. PASOS DEL DIAGNOSTICO Secuencia de pasos:...? IDENTIFICACIÓN Metodología general de diagnóstico.... conocer el vegetal! Conocer las enfermedades que afectan a la especie vegetal Y... 2

confiable 100% confiable El resultado de este proceso. Especialistas diagnostican 50-75% de las muestras Fuente: Shurtleff & Averre (1997).

3 Conocer el huésped Identificar el síntoma Primario o secundario Síndrome Mosaico o variegado? Importancia de describir síntomas Manchas foliares en vid Cancros y gomosis Mirar todo el vegetal Varias causas posibles 3

Importancia de describir síntomas Manchas foliares en

4 Distribución en el cultivo Historia del cultivo Signo? Causa biótica o abiótica? Pistas - abiótica Cuáles son las pautas que indican que el síntoma es provocado por un factor abiótico? Momento de aparición, evolución rápida o no existente Borde nítido de mancha foliar Distribución el cultivo: En todo el cultivo En bandas o según manejo realizado En zonas con determinada característica Distribución en las plantas Igual posición en todas Distribución en predio o zona: en plantas de especie Sin signo

Momento de aparición, evolución rápida o no existente Borde nítido de mancha foliar Distribución el cultivo: En todo el

5 Causa biótica o abiótica? Clínica de Diagnóstico Actividades: 1. Recepción - Formulario de diagnóstico 2. Análisis primario - Laboratorio sucio 3. (Almacenaje). Análisis - Laboratorio limpio 5. Resultado Laboratorio: áreas Recepción y examen inicial Área de recepción y laboratorio sucio Lavado, esterilización, preparación de medios. Almacenaje e incubación Laboratorio limpio Inoculación de plantas u órganos Mesada Pileta con agua corriente Baldes, coladores, bandejas Serrucho, tijeras, cuchillo, etc. Bolsas de plástico, y papel, recipientes con tapa Lupa de mano, bisturís y pinzas Papel y lápiz Lupa estereoscópico Microscopio Laboratorio principal Laboratorio Amplio, seguro, bien iluminado y libre de polvo 5

Almacenaje e incubación Laboratorio limpio Inoculación de plantas u órganos Mesada Pileta con agua corriente Baldes, coladores, bandejas Serrucho, tijeras, cuchillo, etc.

6 Laboratorio: equipamiento Lupa Microscopio Refrigerador Autoclave Horno esterilización Incubadora Área de trabajo estéril Materiales básicos Waller, Ritchie & Holderness (1998): Agua destilada o deionizada Alcohol Hipoclorito de sodio Hidróxido de sodio al 10% Acido acético o láctico al 10% Lactofenol y ác. láctico con y sin colorante azul Lactofuchsina Agar Medios nutritivos Materiales básicos Inoculación Unidad de Fitopatología: Agua destilada o deionizada Alcohol Hipoclorito de sodio Hidróxido de sodio al 10% Acido acético o láctico al 10% Lactofenol y ác. láctico con y sin colorante azul Lactofuchsina Agar Medios nutritivos Evitar contaminaciones Limpieza Desinfección (etanol 70%, Hipoclorito %) Superficies lisas Apertura mínima de ventanas, etc. Sistema de ventilación con filtros limpios Persianas exteriores Armarios hasta el techo Seguridad en el laboratorio Orden y limpieza Alimentos Ropa Equipo de protección Cámara Evitar madera, superficies rugosas Evitar mobiliario, documentos u objetos innecesarios 6

láctico con y sin colorante azul Lactofuchsina Agar Medios nutritivos Materiales básicos Inoculación Unidad de Fitopatología: Agua destilada o láctico con y sin colorante azul Lactofuchsina Agar

7 Bibliografía FOX, F. T. V Principles of diagnostic techniques in plant pathology. Wallingford : CAB International, 213p. 632 FOXp FRENCH, E.R. y HERBERT, T Métodos de investigación fitopatológica. Libros y materiales educativos, nº 3. San José, Costa Rica, IICA. 289p. 632 FREm SHURTLEFF, MALCOLM C.& AVERRE CHARLES W The plant disease clinic and field diagnosis of abiotic diseases, St. Paul: American Phytopathological Society, 25 p. R SHUp THE COMMONWEALTH MYCOLOGICAL INSTITUTE Plant pathologist`s pocketbook. Kew Surrey : CAB, 267p. 632 PLA 1968 WALLER, J.M.; RITCHIE, B.J.; HOLDERNESS, M Plant Clinic Handbook. CAB INTERNATIONAL. Oxford. 9 p. Deberes Describir síntomas. Analizar un reporte de una enfermedad. 7

The plant disease clinic and field diagnosis of abiotic diseases, St. Paul: American Phytopathological Society, 25 p. R 632.08 SHUp THE COMMONWEALTH MYCOLOGICAL INSTITUTE. 1968.

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