RESUMEN. Palabras clave: cambio de uso de suelo, fertilizantes nitrogenados, biocidas. SUMMARY

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1 LA BIOMASA MICROBIANA EN SUELOS DE MONTAÑA CON DIFERENTES USOS: UN ESTUDIO DE LABORATORIO Miroil Biomss in Mountin Soils with Different Uses: Lortory Study A. Cruz Ruiz 1, E. Cruz Ruiz 1, L. I. Aguiler Gómez 2, H. T. Normn Mondrgón 3, S. Frno Mss 1, G. Nv Bernl 1, L. Dendooven 4 y B. G. Reyes Reyes 1 RESUMEN El uso gríol de los suelos del Prque Nionl Nevdo de Tolu (PNTT), onllev prátis omo l utilizión reiente de groquímios. Pr investigr el efeto de l pliión de fertilizntes nitrogendos y ioids de uso generlizdo en l zon de estudio sore l ioms miroin y l minerlizión del rono (C), se relizó un inuión de suelos del PNNT on diferentes usos: osque (jo l op de oymel (Aies religios)), destindos l pstoreo (prder) y ultivdo on míz. Con los siguientes trtmientos: sulfto de monio ( kg h -1 ), ure (250 kg h -1 ), 2, 4-D (1 L h -1 ), ptn (2 kg h -1 ) y suelos sin pliión. L minerlizión del C, el nitrógeno de l ioms miroin (NBM) y el rono de l ioms miroin (CBM) se midieron los 56 dís de inuión. Los resultdos mostrron que el mio de uso de suelo de osque ultivo disminuye l ioms miroin, l proporión de CBM y NBM en los suelos de ultivo fue menor en más del 55% en omprión on los suelos de osque. Los trtmientos 2, 4-D y ptn dieron lugr l deremento signifitivo del CBM en los suelos de osque, hst en un 40 %, on respeto l suelo sin pliión. L pliión de ptn fvoreió el inremento del CBM en los suelos de prder y ultivo. El NBM umentó en los tres suelos on diferente uso l plir ure. L diión de sulfto de monio, ure, 2, 4-D min o ptn us efetos diferenidos en 1 Instituto de Cienis Agropeuri y Rurles UAEMex. Crreter Tolu-Atlomulo km Tolu, Méxio. 2 Fultd de Cienis, 3 Fultd de Cienis Agríols, UAEMex. Crreter Tolu-Ixtlhu kilómetro 15.5, El Cerrillo, Piedrs Blns Tolu, Méxio. Autor responsle (r1010@hotmil.om) 4 Deprtmento de Biotenologí y Bioingenierí del CINVESTAV del IPN. Av. Instituto Politénio Nionl 2508, Col. Sn Pedro Zteno Méxio, D. F. Reiido: julio de Aeptdo: septiemre de Pulido en Terr Ltinomerin 30: los suelos de osque, prder y ultivo indindo que el impto de los ioids y fertilizntes está reliondo on l degrdión de los mismos. Plrs lve: mio de uso de suelo, fertilizntes nitrogendos, ioids. SUMMARY The griulturl use of soil of Prque Nionl Nevdo de Tolu (PNTT), involves frming prties suh s the growing use of grohemils. To investigte the influene of widespred pplition of nitrogen fertilizers nd ioides in the re, study ws onduted on miroil iomss nd minerliztion of ron (C). PNNT soils used for different purposes were inuted: forest soil under oymel (Aies religios) nopy (forest), soil under grsslnd for grzing livestok (grsslnd) or soil ultivted under mize (ultivted). The soils were mended with mmonium sulfte ( kg h -1 ) (mmonium tretment), ure (250 kg h -1 ) (ure tretment), 2, 4-D (1 L h -1 ) (2, 4-D tretment), ptn (2 kg h -1 ) (ptn tretment) nd soil with no mendment. Minerliztion of C, nitrogen miroil iomss (NMB) nd ron miroil iomss (CMB) were mesured fter 56 dys of inution. The results showed tht forest to griulturl lnd use hnge redues the proportion of CMB, nd NMB in griulturl soils ws 55% lower thn in forest soils. The 2, 4-D nd ptn tretments signifintly deresed CMB in forest soils; it ws lmost 40% less thn tht in soil without mendment. Cptn tretment inresed CMB in grsslnd nd ultivted soils. The ure tretment inresed NMB in three soils with different use. Addition of sulfte of mmonium, ure, 2, 4-D mine or ptn used differentited effets on soils of forest, grsslnd nd ultivtion, inditing tht the impt of the ioides nd fertilizers is relted to degrdtion. Index words: lnd use hnge, nitrogen fertilizers, ioides. 221

2 222 TERRA LATINOAMERICANA VOLUMEN 30 NÚMERO 3, 2012 INTRODUCCIÓN Los osques de montñ se rterizn por su iodiversidd y onstituyen el 26% de l superfiie forestl mundil (CDS, 2008). Améri Ltin y el Crie, junto on Áfri, están perdiendo un ritmo elerdo l iodiversidd y los háitts que se enuentrn en sus osques de montñ (FAO, 2007), omo onseueni de l degrdión provod por l deforestión, el pstoreo extensivo, los inendios y el mio de uso del suelo (Montño-Aris et l., 2001; FAO, 2007). En 2004, l deforestión y el mio de uso del suelo portron el 18% de ls emisiones mundiles de gses de efeto inverndero, lo que inidió en el mio limátio nivel mundil (Stern, 2006). Rzón por l ul es urgente el restleimiento de los osques degrddos y l ordenión forestl sostenile. Un estudio reiente punt que l retenión de rono medinte el mntenimiento y el restleimiento de los osques puede ser más efiz pr reduir ls emisiones de dióxido de rono que l utilizión de ls misms tierrs pr produir ioomustile on el propósito de sustituir los omustiles fósiles (Righelto y Sprklen, 2007). El uso gríol de los suelos del Prque Nionl Nevdo de Tolu (PNNT) que relizn los mpesinos, en él sentdos, onllev prátis de ultivo omo el reho y l pliión reiente de fertilizntes, fungiids y heriids (Tn, 2000). Ests prátis modifin propieddes del suelo, omo l estilidd de los gregdos y el ontenido de mteri orgáni; lo ul influye, su vez, en el tmño, omposiión y tividd de l ioms miroin (Elliot et l., 1996; Rth et l., 1998; Jones y Annyev, 2001; Genxu et l., 2004; M Kinley et l., 2005; Geissen et l., 2006) y sore l fertilidd y produtividd del suelo (Smith y Pul, 1990; Dorn y Prkin, 1994; Wester et l., 2001; Andrew et l., 2004); no ostnte, estudios reliondos on l modifiión de l ioms miroin en suelos de montñ on diferentes usos, uidos un ltitud myor que tres mil metros, son essos. El ojetivo de este trjo fue: onoer el omportmiento de l ioms miroin y l minerlizión del rono en suelos dyentes l Prque Nionl Nevdo de Tolu, on diferentes usos (osque, prder y ultivo) y on diión de diferentes groquímios, en ondiiones de lortorio. MATERIALES Y MÉTODOS El áre de estudio se lolizó en l lder norte del Prque Nionl Nevdo de Tolu, en l provini fisiográfi Sistem Volánio Trnsversl (18 59 y N, y O). El lim predominnte es templdo, suhúmedo on lluvis en verno C (w2) (w) (i ), on un tempertur promedio que osil entre los 13.5 y 30.1 C. L preipitión totl nul es de 800 mm. Los suelos perteneen ls suuniddes Regosol éutrio y Andosol úmrio y háplio (Vrgs, 1997; Mrtínez y Vienio, 1998). Dos omuniddes fueron seleionds pr relizr l olet de ls muestrs de suelo. Se tomó omo se de seleión l ltitud de ls misms, on el fin de ptr ls vriiones de l ioms miroin. L primer omunidd se llm Ros Mord y l segund Diltd, uids un ltitud de 3000 y 3290 m, respetivmente. Ls muestrs de suelo se tomron, por triplido un profundidd de 0-10 m, en suelos on diferente uso: ultivdo on míz, osque [jo l op de oymel (Aies religios)] y prder nturl. Ls muestrs de suelo de prder y ultivo se tomron en zig-zg on un pl ret, d muestr ompuest se formó on 15 sumuestrs. En el so del suelo de osque se relizron los siguientes psos: primero, se identifiron tres ároles on ltur y grosor de trono semejntes, que no estuviern lejdos entre sí más de 100 m; un vez identifidos, on un pl ret se tomron utro sumuestrs de suelo un metro de distni de d árol seleiondo, en direiones perpendiulres orientds hi los puntos rdinles; finlmente, ls sumuestrs de d uno de los ároles se mezlron pr otener un muestr ompuest (Reyes et l., 2003). Ls muestrs se seron l somr y tempertur miente (18±2 C); un vez ses, se molieron on un mzo de mder, se homogeneizron y se hiieron psr por un tmiz de ero inoxidle (mll 10) on ertur de 2 mm de diámetro y se lmenron en olss de plástio tempertur miente (±18 o C) en osuridd, hst su rterizión. El ontenido de humedd se determinó de uerdo l NOM-021-RECNAT-2000 (SEMARNAT, 2002) y l pidd de retenión de gu (CRA) omo lo estlee Reyes et l. (2003), se lulron por grvimetrí. El ontenido de nitrógeno totl se determinó por el método de Kjeldhl (Bremner, 1996) y el de mteri

3 CRUZ ET AL. LA BIOMASA MICROBIANA EN SUELOS DE MONTAÑA 223 orgáni del suelo (MOS), on el método de Wlkley y Blk modifido (Nelson y Sommers, 1996). Determinión de l Respirión Bsl Pr estimr l respirión sl se determinó l minerlizión del rono (C), se pesron poriones de 30 g de d un de ls muestrs y se oloron en frsos trnsprentes de 100 ml, se les gregó gu destild pr lnzr el 40% de su CRA y se preinuron por 7 dís tempertur miente (18±2 ºC). Al término de l preinuión, se pliron los siguientes trtmientos, por triplido: sin pliión, sulfto de monio ( kg h -1 ), ure (250 kg h -1 ) 2, 4-D min (mr Dow Agrosienes: 1 L h -1 ) y ptn (50 PH mr Byer: 2 kg h -1 ). Cd uno de los frsos se oloó dentro de un trro de vidrio ámr, on pidd de 1 L, dentro del ul se depositron, en form previ, 10 ml de gu y un frso gotero de 50 ml on 20 ml de NOH 1 N. Los trros se errron hermétimente y se inuron tempertur miente (18±2 ºC), en osuridd durnte 56 dís. Pr evitr neroiosis, los frsos se destpron durnte 10 min d terer dí. Al onluir el periodo de inuión se tomron tres líuots de 5 ml de NOH 1 N, de d uno de los frsos gotero, previmente inudos, inluyendo los lnos, y se trnsfirieron mtres Erlenmeyer de 125 ml. Con gu destild se justó el volumen 50 ml, proximdmente, y se tituló on HCl 0.01N utilizndo fenolftleín omo indidor (Jenkinson y Powlson, 1976). L ntidd de CO 2 produido se otuvo on l fórmul de Stotzky (1965). Pr otener l ts de minerlizión, el totl de C-CO 2 umuldo se dividió entre los 56 dís de inuión trnsurridos. Determinión de l Bioms Miroin Tres sumuestrs de 20 g de d sitio y trtmiento se extrjeron on 80 ml de K 2 SO M (suelo no fumigdo). Tres sumuestrs de 20 g de suelo se fumigron por 30 min on loroformo lire de etnol en l osuridd 22 C y extrído on 80 ml de K 2 SO M (Müller et l., 1992). L ioms miroin (rono ioms miroin y nitrógeno ioms miroin) se determinó en los extrtos de suelos (Jenkinson y Powlson, 1976), fumigdos y no fumigdos (Müller et l., 1992; Joergensen, 1995). L difereni entre ls onentriones de C orgánio untifidos en los extrtos de un mismo suelo, fumigdo y no fumigdo, multiplid por 2.64 permitió lulr el CBM (Vne et l., 1987); pr otener el NBM se multiplió l difereni del N retivo l ninhidrin en un mismo suelo, fumigdo y no fumigdo, por 4.6 (Oio et l., 1991). L onentrión de rono orgánio se determinó, por triplido, en los extrtos de los distintos trtmientos, fumigdos y no fumigdos, omo lo estleen Vne et l. (1987) y Müller et l. (1992). Asimismo, l onentrión de nitrógeno retivo ninhidrin en los extrtos de suelos, fumigdos y no fumigdos, se otuvo on el método propuesto por Joergensen y Brookes (1990), Crter (1991) y Oio et l. (1991). Los dtos otenidos fueron sometidos un nálisis de vrinz, medinte el pquete estdístio STATGRAPHICS plus (1995). Se empleó l prue de omprión del Método de l mínim difereni signifitiv (LSD) pr evlur l difereni entre ls medis de los trtmientos. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Cpidd de Retenión de Agu, Mteri Orgáni y Nitrógeno de los Suelos Los suelos on ultivo de míz presentron los vlores signifitivmente más jos (P < 0.05), tnto en su pidd pr retener gu (CRA), omo en su proporión de N y MOS (Cudro 1) en omprión los otros usos de suelo. L difereni en el porentje de MOS fue 2.3 vees menor en los suelos jo ultivo, en omprión on los suelos de osque. En los suelos de prder se enontró que los ontenidos de MOS y N estn Cudro 1. Vlores promedio de rterístis fisioquímis de suelos on diferentes usos del Prque Nionl Nevdo de Tolu, Méxio. Uso del suelo Cpidd de retenión de gu Mteri orgáni Nitrógeno totl % Bosque Prder Cultivo Cd vlor es el promedio de nueve determiniones. Vlores en l mism olumn on letrs igules son estdístimente semejntes (P < 0.05).

4 224 TERRA LATINOAMERICANA VOLUMEN 30 NÚMERO 3, 2012 signifitivmente disminuidos, en omprión on los suelos de osque; sin emrgo, según los riterios de SEMARNAT (2002) el ontenido de MO en mos suelos puede onsiderrse omo muy lto. Wng et l. (2004), menionn que después de vrios ños de ultivo, l ntidd de MOS disminuye. L onversión de suelos de osque suelos de ultivo ondue un reduión del ontenido de MOS (Mnn, 1986; Reyes et l., 2002), y que, l lrnz fet el tmño de los reservorios de MOS (Nissen y Wnder, 2003). En el so del N, en este estudio l onentrión fue estdístimente diferente (P < 0.05) entre los suelos on diferentes usos (vlores promedio entre 0.29 y 0.55 %). El ontenido de nitrógeno totl (N) se enontró signifitivmente disminuido en el suelo de ultivo en omprión on el suelo de prder y osque, el resultdo es ongruente on el hllzgo de Yng et l. (2008), quienes indin que existen pérdids de nitrógeno undo el suelo de osque de montñ es destindo diferentes usos. Crono Bioms Miroin L proporión de rono ioms miroin (CBM) en los suelos de osque fue signifitivmente myor (P < 0.05) on respeto los otros usos de suelo (Figur 1). Est difereni est reliond on el ontenido de MOS (r = 0.22), omo lo menion Tn (2000). Asimismo, en l Figur 1 se oserv que el ontenido promedio de CBM en suelos de prder es myor l enontrdo en los suelos on ultivo. Lo nterior se dee que ls poliones miroins y su tividd son myores en suelos no lrdos que en suelos on griultur onvenionl (Smith y Conen, 2004). Por otr prte, l j onentrión de CBM en los suelos de ultivo puede triuirse un deremento en l disponiilidd de rono y nitrógeno en l MOS, omo onseueni de l elerd minerlizión de l mism y l lixiviión de nutrientes minerles, proesos que son fvoreidos por l destruión de los gregdos del suelo (Gregorih et l., 1997; Brdy y Weil, 1999; Chplot et l., 2005). Cundo se plió sulfto de monio y ure se oservó, en generl, un disminuión del CBM (Figur 1). Lo nterior se dee que existe un modifiión de l omunidd miroin, lo que onuerd on ls oserviones de Böhme et l. (2005), quienes reportron efetos negtivos de los fertilizntes nitrogendos. En mio, undo se diionron ioids se tuvieron efetos dispres (Figur 1). En los tres suelos on diferentes usos, el trtmiento 2, 4-D min provoó un deremento del CBM en omprión on los suelos sin pliión, lo nterior puede deerse l 1000 Conentrión de CBM (mg C kg ss -1 ) testigo sulfto de monio ure 2, 4 D min ptn Trtmiento osque prder ultivo Figur 1. Conentrión de rono ioms miroin (CBM) en suelos on diferentes usos del Prque Nionl Nevdo de Tolu, jo diferentes trtmientos (n = 9), inudos 56 dís 18 ºC±2. Ls letrs diferentes en l mism lse de gregdos indin diferenis signifitivs on P < 0.05.

5 CRUZ ET AL. LA BIOMASA MICROBIANA EN SUELOS DE MONTAÑA 225 efeto tóxio de este groquímio sore los miroorgnismos del suelo, l respeto Joshi y Deep (2008), señlron que este heriid interfiere en l densidd polionl terin y fúngi. En el trtmiento on ptn se oservó un inremento signifitivo (P < 0.05) del CBM en los suelos de prder y jo ultivo, y un disminuión del 75% en suelos de osque. Siendo los hongos l polión predominnte en suelos de osque, lo nterior puede ser onseueni del efeto fungiid del ptn sore l omunidd miroin, su CBM se ve notlemente disminuido (Vys, 1988). Nitrógeno Bioms Miroin L onentrión de nitrógeno ioms miroin (NBM), en los suelos de osque (Figur 2) fue signifitivmente myor (P < 0.05) que en los suelos de prder y on ultivo. Prsd et l. (1995), menionn que l onversión del osque diversos usos del suelo llev l pérdid del NBM del mismo. Asimismo, l ure modifió l proporión de NBM, de mner signifitiv (P < 0.05), en los distintos suelos que se estudiron. Este resultdo puede triuirse l hidrólisis de l ure en suelos forestles; demás, del efeto que tiene en el umento del número y tividd de los miroorgnismos heterotrófios (Stotzky y Bollg, 1996). Cundo se plió 2, 4-D min el NBM en suelos de osque y prder fue myor que en el suelo sin pliión; no sí en los suelos jo ultivo (Figur 2). Los inrementos oservdos en los suelos de osque y de prder pueden triuirse l utilizión de 2, 4-D min omo fuente de energí por los miroorgnismos, lo que us un inremento en su tividd. Al respeto Shinner et l., (1983), identifiron que l pliión de diho heriid us un inremento en l tividd miroin deido l resisteni o dptión de los miroorgnismos. L diión de ptn inrementó signifitivmente (P < 0.05) el ontenido de NBM en los suelos de osque, prder y on ultivo en relión los suelos sin pliión. El efeto he suponer, por un prte, l modifiión de l omunidd miroin omo onseueni del dño provodo por el ptn sore ls poliones fúngis y l proliferión de teris y, por otr, l utilizión del fungiid omo sustrto (Vys, 1988). Los resultdos otenidos son ontrrios los hllzgos de Chen et l. (2001), quienes enontrron menor proporión de NBM en los suelos trtdos on ptn, que en los suelos sin trtr. Ts de Minerlizión de Crono Se identifiron diferenis signifitivs (P < 0.05) en l ts de minerlizión (t m ) de rono en los suelos sin pliión; el vlor myor orrespondió los suelos de osque y el menor los suelos jo ultivo (Figur 3). L mgnitud de l t m de C, en los suelos en estudio, 175 Conentrión de NBM (mg N kg ss -1 ) testigo sulfto de monio ure 2, 4 D min ptn Trtmiento osque prder ultivo Figur 2. Conentrión de nitrógeno ioms miroin (NBM) en suelos on diferentes usos del Prque Nionl Nevdo de Tolu, jo diferentes trtmientos (n = 9), inudos 56 dís 18 ºC±2. Ls letrs diferentes en l mism lse de gregdos indin diferenis signifitivs on P < 0.05.

6 226 TERRA LATINOAMERICANA VOLUMEN 30 NÚMERO 3, 2012 Ts de minerlizón de C (g C dì -1 kg ss -1 ) testigo sulfto de monio ure 2,4 D min ptn Trtmiento osque prder ultivo Figur 3. Ts de minerlizión de rono en suelos on diferentes usos del Prque Nionl Nevdo de Tolu, durnte 56 dís y jo diferentes trtmientos. Ls letrs diferentes en l mism lse de gregdos indin diferenis signifitivs on P < el indidor del estdo iológio de los suelos (Nnnipieri et l., 1990) se onservó omo osque myor que prder, prder myor que ultivo, on los diferentes trtmientos. Los utro trtmientos provoron que l t m del C se inrementr signifitivmente (P < 0.05) en los suelos de osque y prder on respeto l suelo sin pliión; pero no en los suelos on ultivo. En onordni on Meng et l. (2005), el umento en l t m de C fue myor en los suelos on fertilizntes que en quellos on ioids; sin emrgo, l difereni entre los trtmientos no fue signifitiv (P > 0.05). Shinner et l. (1983) y Chen et l. (2001), otuvieron resultdos similres y los triuyeron l efeto de los fungiids sore ls poliones de hongos y sore l tividd de iertos grupos de hongos, lo que gener un reduión en l respirión y en l ioms miroin tiv (West et l., 1986); por otr prte, los miroorgnismos muertos por los ioids servirín de sustrto los orgnismos que sorevivn. CONCLUSIONES Los resultdos otenidos, en este trjo, en relión ls rterístis iológis de los suelos, señln que l pliión de fertilizntes nitrogendos (sulfto de monio y ure), l igul que l diión de los ioids (2, 4-D min y ptn), en suelos de osque y prder, del Prque Nionl Nevdo de Tolu, ltern signifitivmente l tividd miroin del suelo y fvoreen l pérdid del rono lmendo en los suelos de estos eosistems. L ts de minerlizión de C se mntiene estle on l diión de ure, sulfto de monio, 2, 4-D min y ptn en suelos on ultivo de míz, degrddos por el loreo. L ioms miroin [(rono de l ioms miroin (CBM) y nitrógeno de l ioms miroin (NBM)] es fetd negtivmente por l onversión de suelos de osque tierrs de ultivo, por lo nterior tnto CBM y NBM pueden ser utilizds omo un indidor del estdo de degrdión de los suelos de osque de montñ. AGRADECIMIENTOS Al CONACYT por l e otorgd pr eder los estudios de postgrdo. A l Universidd Autónom del Estdo de Méxio por el poyo finniero pr l relizión de este trjo, integrdo l proyeto UAEMEX 2341/2006U. Al Instituto de Cienis Agropeuris y Rurles (ICAR-UAEMex), en uyos lortorios se efetuó el trjo experimentl.

7 CRUZ ET AL. LA BIOMASA MICROBIANA EN SUELOS DE MONTAÑA 227 LITERATURA CITADA Böhme, L., U. Lnger, nd F. Böhme Miroil iomss, enzyme tivities nd miroil ommunity struture in two Europen long-term field experiments. Agri. Eosyst. Environ. 109: Brdy, N. C. nd R. Weil The nture nd properties of soils. Prentie Hll. Upper Sddle River, NJ, USA. Bremner, J. M Nitrogen-Totl. pp In: D. L. Sprks (ed.). Methods of soil nlysis Vol. III, Chemil methods. ASA-SSSA. Mdison, WI, USA. Crter, M. R Ninhydrin-retive N relesed y the fumigtion-extrtion method s mesure of miroil iomss under field onditions. Soil Biol. Biohem. 23: CDS (Comisión sore el Desrrollo Sostenile) Sinopsis de los progresos hi el desrrollo sostenile: exmen de l ejeuión del Progrm 21, del Pln pr su ulterior ejeuión y del Pln de Apliión de ls Deisiones de Johnnesurgo, ONU Informe E/CN.17/2008/16-18, do/undoc/gen/n08/229/95/ (Consult: ril 27, 2009). Chplot, V., C. Rumpel, nd C. 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