Sebastián Gómez Talquenca. EEA Mendoza INTA

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Fernando Alcaraz Calderón
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1 Virus que atacan la vid Sebastián Gómez Talquenca EEA Mendoza INTA

2 Argentina 1955 Degeneración Infecciosa a 1968 Enrollamiento b 1995 GLRaV-1, GLRaV-3, ArMV, RpRSV c a Vega & Alcalde (1955) IDIA 85:3-21 g ( ) b Nadal (1968) Virus de la vid c Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33

(1955) IDIA 85:3-21 g ( ) b Nadal (1968) Virus de la vid c

3 1999 PID FONCyT Esquema de certificación sanitaria Programa de investigación como soporte 2004 PN INTA Identificación de especies presentes en el país Caracterización molecular Desarrollo de métodos de diagnóstico

Identificación de especies presentes en el país

4 Degeneración infecciosa (1955) Grapevine Fanleaf Virus (1966) a Arabis Mosaic Virus (1995) b Raspberry Ringspot Virus g strain (1995) c a Vega & Alcalde (1955) IDIA 85:3-21 g ( ) b Feldman (1966) RIA III(5):33-46 c Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33

c a Vega & Alcalde (1955) IDIA 85:3-21 g ( ) b Feldman (1966) RIA

5 Enrollamiento (1968) Grapevine Leafroll associated virus 1 (1995) a GLRaV-2 (2003) b GLRaV-3 (1995) a GLRaV-5 (2008) c GLRaV-6 (2006) d GLRaV-9 (2011) e GLRaV-De (2011) e GVA (1995) a a Worlock et al. (1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33 b Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG p c Gómez Talquencaet al(2009) Virus Genes, d Gómez Talquenca et al (2006) XV Meeting ICVG e Gómez Talquenca (2012) Tesis Doctoral

(1995) IX Jornadas Fitosanitarias Argentinas p33 b Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG p c Gómez

6 Ocurrencia de enfermedades virales Relevamientos Dirigidos Aleatorios Zonales Programa de certificación

7 Country GLRaV-1 GLRaV-2 GLRaV-3 Reference Brasil 6.9% 0% 14.7% (Fajardo et al., 2002) Chile 4.08% 14.84% 6.17% (Fiore et al. 2008) Croatia 24.3% N/D* 72.3% (Poljuha et al., 2004) Czech Republic 28.2% 0.9% 2.7% (Kominek, 2006) Egypt 1,8% 1,4% 55,9% (Ahmed et al., 2004) Italy 24.4% 6.9% 27% (Zorloni et al., 2004) Syria 47.3% 90% 9.0% 23.9% (Mslmanieh et al., 2006) Tunez 9.1% 6.3% 76.3% (Mahfoudhi et al., 2008) Turkey 8.4% 2.4% 5.8% (Akbas et al., 2007) USA 2.6% 0.3% 6.3% (Martin et al., 2005)

7% (Kominek, 2006) Egypt 1,8% 1,4% 55,9% (Ahmed et al., 2004) Italy 24.4% 6.9% 27% (Zorloni et al., 2004) Syria 47.3% 90% 9.

8 Ocurrencia en Argentina / / Zona Sur ELISA Zona Norte Indexing RT-PCR ELISA ELISA Infectado 23% 33% 36% 63% 35% 97% GFLV 19% 11% NT 93% NT ArMV 15% 0% 36% NT NT NT RpRSV 18% 0% NT NT NT GLRaV-1 28% 9% 0% 10% 0% 3% GLRaV-2 NT NT 0% 25% 1% 12% GLRaV-3 5% 14% 0% 38% 6% 88% GLRaV 4-9 NT NT NT 33%? NT 12% GVA 33% 4% 0% NT NT NT RSPaV NT NT 64% NT NT NT

NT NT NT RpRSV 18% 0% NT NT NT GLRaV-1 28% 9% 0% 10% 0% 3% GLRaV-2 NT NT 0% 25% 1% 12%

9 Incompatibilidad de injerto GLRaV-2 (2003) a a Gómez Talquenca et al (2003) XIV Meeting ICVG

10 Nota a los viveristas vitícolas ONIVINS:. Se ha identificado en algunos clones la presencia de GLRaV- 2, lo cual no se traduce en el viñedo francés de ninguna manifestación grave, a la excepción de la incompatibilidad de injerto sobre Kober 5BB. Dado que la Unión Europea no tiene una posición en particular frente a este virus. Se recomienda que los clones involucrados sean reservados para ventas en el territorio nacional.. ONIVINS, Le Progres Agricole et Viticole 119, nº8

manifestación grave, a la excepción de la incompatibilidad de injerto sobre Kober 5BB.

11 Clones involucrados Cabernet Franc 312, 326, 330, 331 Sauvignon Blanc 316, 317 Cinsaut 104, 255, 257, 321 Niellucio 902, 904 C. Sauvignon 191, 336, 340, 341, 337

12 Ocurrencia en Argentina Clone ELISA GLRaV-1 GLRaV-2 GLRaV-3 samples RT-PCR RT-PCR RT-PCR tested ELISA ELISA ELISA (no.) positive Pos. Neg. positive Pos. Neg. positive Pos. Neg. CS 337 La Consulta 180-0% - 2/ % 2/2 2/2-0% - 2/2 SB Agrelo 164-0% - 2/ % 3/3 2/ % 1/1 2/2 CF 326 La Consulta 180-0% - 2/2 8 44% 4.4% 3/3 2/2 3 17% 1.7% 3/3 2/2 SB 316 Agrelo % 3/3 2/ % 3/3 2/ % 3/3 2/2 CS Agrelo 175-0% - 2/ % 3/3 2/2-0% - 2/2 CS Barrancas 180-0% - 2/ % 3/3 2/ % 3/3 2/2 CS BS Luján de Cuyo % 2/2 2/ % 3/3 2/2 0 0% - 2/2 Total 1, % 0.6% % 14 12% 1.2%

6% 1/1 2/2 CF 326 La Consulta 180-0% - 2/2 8 44% 4.4% 3/3 2/2 3 17% 1.7% 3/3 2/2 SB 316 Agrelo 185 5 2.7% 3/3 2/2 24 13.0% 3/3 2/2 7 5.

14 Decaimiento del Syrah

15 Los virus son la respuesta a todo lo raro!!! Distribution of Rupestris stem-pitting-associated virus variants in two Australian vineyards showing different symptoms. Habili et al (2006) Workshop Syrah Decline Davis 2007 Patológico (virus, viroides, fitoplasmas, hongos de madera), genético, ambiental, manejo Deep sequencing analysis of RNAs from a grapevine showing Syrah decline symptoms reveals a multiple li l virus infection that includes a novel virus. Al Rwahnih.et al (2009) Congreso de Virus de Vid Dijon 2009: Viral sanitary status and genetic diversity of Rupestris stem pitting associated virus in French Syrah clones exhibiting various susceptibility levels to decline. Beuve et al (2009) Preliminary investigations on a Syrah decline in Central Italy. Bianco et al (2009) Syrah decline: no evidence for viroid etiology. Renault-Spilmont et al (2009) Genomic study td and detection ti of a new variant of grapevine rupestris ti stem pitting associated itdvirus in declining i California Pinot noir grapevines. Lima et al (2009) First report of grapevine virus sequences highly similar to grapevine syrah virus-1 from Washington Vineyards. Mekuria & Naidu (2010) Rugose wood-associated viruses do not appear to be involved in Shiraz (Syrah) decline in South Africa. Goszczynski (2010)

showing Syrah decline symptoms reveals a multiple li l virus infection that includes a novel virus. Al Rwahnih.

16 Dispersión de virus en Argentina

17 Los virus se transmiten por Injerto Material de propagación (mugrón) Vectores (específicos)

18 Degeneración infecciosa Nepovirus Nematodos Grapevine Fanleaf Virus Arabis Mosaic Virus Raspbery Ringspot Virus Nepovirus Europeos y Americanos

19 Xiphinema index Xiphinema spp Longidorus spp No son vectores Meloidogyne spp.

20 Factores que afectan la dispersión Presencia de plantas infectadas Dispersión del nematodo Biología del nematodo Tipo de suelo / riego Persistencia en raíces guachas Tratamientos químicos Portainjertos tolerantes

del nematodo Tipo de suelo / riego Persistencia en

22 Familia Closteroviridae Enrollado Ampelovirus: Cochinilla harinosa Closterovirus: Pulgones Crinivirus: Mosca Blanca

23 Vectores GLRaV-3 Planococcus ficus P. citri Pseudococcus longispinus i Ps. viburni Ps. calceolariae Ps. maritimus Heliococcus boemicus Phenacoccus aceris Pulvinaria vitis

24 Transmisión en Argentina Grapevine leafroll virus 3 Planococcus ficus

26 Dispersión por cochinillas

27 Dispersión por material de propagación

42 Métodos de diagnóstico Bioquímicos Basados en proteínas ELISA Basados en ácidos nucléicos PCR (RT) Biológicos i Indexage

43 Investigación Desarrollo Servicios Degeneración Infecciosa ELISA Indexing ELISA Enrollado RT-PCR, ELISA Indexing ELISA Madera Rugosa RT-PCR Indexing RT-PCR Enfermedades Emergentes RT-PCR Indexing

44 Control Una planta a campo no puede ser curada Mecanismos de defensa de la planta actúan en los momentos iniciales de la infección No hay fuente natural de resistencia a virus Imposibilidad de resistencia por cruzamientos Reticencia a uso de transgénicos

45 Control Evitar que el virus ingrese al cuartel Material de propagación Evitar que el virus se disperse en el cuartel Control de vectores Nemátodes Cochinillas harinosas

46 Material de propagación Resolución 742/2001 SAGPyA Normativa para viveros de vid Dos categorías de material de propagación Estándar Certificado

47 Material estándar Selección masal Trazabilidad mínima Ausencia de síntomas en los planteles de plantas madres

48 Material certificado Selección clonal Trazabilidad máxima Análisis exahustivo de enfermedades

49 Esquema nacional de certificación Cabeza de clon Recuperación: Termoterapia Microinjerto Testeo ELISA Indexage Biológico Eliminación del sistema Indexage por injerto leñoso Indexaje por injerto herbaceo Clon certificado

50 Selección sanitaria Prospección de viñedos Observación de síntomas 2011 Análisis ELISA 2012 Indexage leñoso a campo 1º Año Indexage leñoso en túnel º Año Indexage herbáceo º Año 24 meses 3 meses 2015

51 Certificación Planta certificada Plantel de madres de certificadas Plantel de premultiplicación Colección fundadora Planta original

52 Incidencia de costos Implantación/Ha $ $ Plantas (2.200/Ha) $4,00 $8,00 $4,80 $9,60 $8.800 $ $ $ Incidencia 12% 25% 15% 30% Impacto en el costo 3-5%

53 Incidencia de costos Rendimiento/Ha 200qq 160qq 200qq Precio /qq $1,80 $1,80 $1,20 $/Ha $ $ $ Disminución 20% 33% Impacto en el costo 3-5%

54 Material Certificado Malbec Malbec INTA 02 Malbec INTA 09 Malbec INTA 12 Malbec INTA 27 Syrah Syrah INTA 84 Syrah INTA 89 Syrah INTA 100

55 Otras variedades Chardonnay Barbera Torrontés Riojano Bonarda Tempranillo Portainjertos

56 Grupo de investigación Carlos de Borbón Melisa Lanza Volpe S. Gómez Talquenca A.Soto D.Lijavetzky C.Muñoz L.Martinez Financiación FONCyT INTA CONICET

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