1972 Kerr Wyllie Currie

Transcripción

1 Muerte celular

2 Necrosis Nuclear swelling Cell Swelling Disruption of Organelles Rupture of cell and release of cellular contents Inflammatory response 1972 Kerr Wyllie Currie Apoptosis Chromatin condensation Cell Shrinkage Preservation of Organelles and cell membranes Rapid engulfment by neighboring cells preventing inflammation Biochemical Hallmark: DNA FRAGMENTATION

3 Necrosis: (muerte accidental,no fisiológica) Exposición a procesos de injuria severos: Isquemia, hipertermia sostenida o trauma químico. No existe un patrón común de cambios, la membrana plasmática es el sitio crítico donde se produce la injuria temprana. Lisis Celular: Exacerba las respuestas inflamatorias liberación de DAMPs o alarminas (ácido úrico, ATP, Proteínas de shock térmico, RNA, DNA genómico)

4 Apoptosis Muerte programada genéticamente programa muy flexible Patrón de cambios conservado en los diferentes tipos celulares Es mediada a través de la activación de caspasas Membrana citoplasmática permanece intacta Las células apoptóticas son rápidamente removidas

5 TNF-, IL-1 IL-6 LPS Fas-FasL Glucocorticoides IL-10 Apoptosis NF-kB GM-CSF Bax/Mcl-1 Complejos Inmunes Acídosis Intersticial

6 Alteraciones morfológicas observadas en las células apoptóticas Neutrófilos viables Disminución en el tamaño celular Colapso nuclear: marcada condensación de la cromatina Neutrófilos apoptótico

7 Alteraciones morfológicas observadas en las células apoptóticas Fragmentación del DNA CT Cél. Apoptóticas endonucleasas 200 pb Nucleosomas CAD---ICAD Caspasas 3 y 7

8 Alteraciones morfológicas observadas en las células apoptóticas La membrana plasmática no sufre pérdida de la integridad o alteraciones en su permeabilidad. La misma se caracteriza por la presencia de dos procesos: Flip-Flop Zeiosis Célula viable Célula apoptótica Fosfatidilserina Flip-Flop Zeiosis

9 Ioduro de Propidio Control IgGi 6% 2% TNF- TNF- +IgGi 8% 50% Annexina V

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11 Alteraciones morfológicas observadas en las células apoptóticas Fagocitosis Fagocitos Profesionales y no profesionales Fagocito Receptor-lectina like CD36 v 3 R de Fs ABC1 SR-A CD14 R de complemento fosfatidilserina Célula apoptótica

12 Apoptosis y homeostasis de la respuesta inmune

13 Apoptosis de neutrófilos Resolución de los procesos inflamatorios agudos Viable No libera el contenido autotóxico Pérdida de la funcionalidad Apoptótico Fagocitosis

14 Resolución de la inflamación Remoción de los neutrófilos y demás leucocitos apoptóticos por parte de los macrófagos Diferentes C3b, C3bi receptores de Activación n del Opsoninas células Complemento apoptóticas C3b, C3bi C3a y C5a Activación n del Opsoninas Anafilotoxinas Complemento C3b, C3bi Foco infeccioso QUIMIOATRACTANTES Activación n del C3a y Opsoninas C5a bacteriano Anafilotoxinas Complemento TGF IL-10 Foco infeccioso bacteriano Péptidos formilados QUIMIOATRACTANTES C3a y C5a LTB4 Anafilotoxinas IL-8 Macrófago Macrófago HISTAMINA Macrófago HISTAMINA HISTAMINA Vénula post- capilar Vénula post- capilar Vénula post- capilar P-selectina P-selectina P-selectina Foco infeccioso bacteriano Inhibición de Péptidos la secreción de citoquinas formilados proinflamatorias: TNF, IL-1 Moléculas de adhesión QUIMIOATRACTANTES IL-1, LTB4 TNF, IL-6 Permeabilidad vascular Respuesta de fase aguda IL-8 ICAM-1 VCAM-1 Péptidos formilados IL-1, LTB4 TNF, IL-6 Moléculas de adhesión Permeabilidad vascular ICAM-1

15 ONTOGENIA B T

16 Activación de linfocitos T naive

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22 Mecanismos responsables de la inducción de apoptosis Caspasas Citocromo C Proteínas pertenecientes a la flia BCl2

23 Caspasas Apoptosis Inflamación

24 Apoptosis Caspasas Inflamación Caspasas 3, 6 y 7: efectoras Actúan sobre un panel de 400 proteínas intracelulares apoptosis Caspasas 8, 9 y 10: inductoras activan a las caspasas efectoras Caspasas inflamatorias: procesamiento de citoquinas inflamatorias (IL-1 e IL-18)

25 Caspasas: Conjunto de cistein-proteasas 12 caspasas 2 con actividad apoptótica Residuos de aspártico Asp-xxx Procaspasa-3 Prodominio:dominio de reclutamiento N-terminal p20 p10 Caspasa-3 activa

26 Tres mecanismos de activación a) Clivaje proteolítico: mediado por otras caspasas y prevalece en las caspasas 3,6 y 7 y por proteasas no caspasas como granzima B b) Reclutamiento o agregación de multiples procaspasas: mecanismo autocatalítico (caspasa 8) c) Asociación con un cofactor: formación de holoenzima (caspasa 9)

27 Citocromo C 1.Retenido en la mitocondria 2.Su acceso al citosol está regulado por las proteínas de flia BCl2 3.En el citosol se asocia con la procaspasa 9 y APAF-1: apoptosoma (caspasa 9 activa)

28 Miembros de la familia Bcl-2 Grupo I: poseen actividad antiapoptotica (Bcl-2, Bcl-Xl, Mcl-1, Bfl-1/A1, Bcl-W, Bcl-G) Grupo II y III: poseen actividad proapoptotica (Bax, Bak, Bok, Bad, Bid, Bik, Bim, Bcl-Xs, Krk, Mtd, Nip3, Nix, Noxa, Bcl-B) Pueden formar homodímeros y heterodímeros. BH4 BH3 BH1 BH2 TM GRUPO I Bcl2 GRUPO II GRUPO III Bax Bid Bik

29 Familia de proteínas BCL-2 Inhiben o promueven la liberación mitocondrial de citocromo c

30 Cómo los miembros de la familia Bcl-2 regulan la permeabilidad de la membrana mitocondrial

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32 DOS VÍAS EN LA INDUCCIÓN DE APOPTOSIS VIA EXTRÍNSECA: RECEPTORES (FAS, TNFR1 Y TRAIL). Conduce a la activación de caspasas 8 y 10. VIA INTRÍNSECA: radiación quimioterapia, deprivación de nutrientes, etc. Conduce a la activación de caspasa 9.

33 Vía extrínseca y vía intrínseca del proceso apoptótico CD95 FADD Pro-caspasa8 c-flip Bid Caspasa-8 Pro-caspasa-3 Bid truncado Citocromo c AIF Caspasa-3 Apoptosoma Pro-Caspasa-9 Apaf-1 Smac/Diabolo IAPs Sustratos Apoptóticos

34 Sólo existen dos vías de muerte?

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36 Piroptosis

37 Diferentes inflamasomas conducen a la producción de IL-1

38 NETosis Neutrófilos y eosinófilos Liberación de DNA cromosomal y proteasas (traps) Potente acción microbicida que se acompaña de muerte celular Estallido respiratorio Desintegración de la envoltura nuclear