1 Médico Veterinario Zootecnista. Asesor Investigador. Grupo de investigación GIPSA. Universidad de la Amazonia. Caquetá Colombia.
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- Bernardo Sevilla Coronel
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1 REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN Expresión del receptor HER2/neu mediante inmunohistoquímica IHQ en carcinosarcoma mamario canino: - Expression of the HER2 / neu receptor by IHC immunohistochemistry in canine mammary carcinosarcoma: description of a clinical case Sánchez Rojas, Ivan 1*., Giraldo Herrera, Sebastian 2., Hernández Paniagua, Kelly 2., Hernández Ramírez, Mauricio 2., Oliveros Lugo, Sergio 2., Varón Sarrias, Julian 2. 1 Médico Veterinario Zootecnista. Asesor Investigador. Grupo de investigación GIPSA. Universidad de la Amazonia. Caquetá Colombia. 2 Estudiante, Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad de la Amazonia. Florencia, Caquetá Colombia. * camilo.sanchez23@hotmail.com Resumen Los tumores mamarios humanos y caninos guardan gran semejanza y dentro de las carácterísticas similares se incluyen la presencia de algunos receptores, morfologia de las células tumorales y capacidad de metástasis. La expresión del factor de crecimiento epidérmico humano (HER2) ha sido estudiada recientemente como un factor pronóstico importante en el cáncer de mama en mujeres. En caninos, recientemente se han informado resultados discrepantes sobre la relación de HER2 con la prognosis de la enfermedad. Se describe el presente trabajo de caso clínico donde se diagnosticó mediante histopatología un tumor mixto maligno (carcinosarcoma mamamario) en un paciente canino hembra de 8 años de edad. Mediante inmunohistoquímica se determinó la expresión del marcador HER2 para lo cuál se empleó el anticuerpo monoclonal humano (trastuzumab). El laboratorio de diagnóstico veterinario informó que la muestra tumoral remitida expresó una inmunomarcación debil (1+). Palabras clave: Canino HER2 Carcinosarcoma mamario Inmunohistoquímica. Abstract Human and canine mammary tumors have great similarity and within the similar characteristics they include the presence of some receptors, morphology of tumor cells and capacity of metastasis. Expression of human epidermal growth factor (HER2) has recently been studied as an important 1
2 prognostic factor in breast cancer in women. In canines, discrepant results have recently been reported on the relationship of HER2 to the prognosis of the disease. We describe the present case study where a mixed malignant tumor (mammary carcinosarcoma) was diagnosed in an 8 year old female canine patient. Immunohistochemistry expression of the HER2 marker was determined for which the human monoclonal antibody was used (trastuzumab). The veterinary diagnostic laboratory reported that the remitted tumor sample expressed a weak (1+) immunostaining. Keywords: Canine HER2 Mammary carcinosarcoma Inmunohistochemistry. Introducción Las semejanzas entre los tumores de glándula mamaria humana y del canino, como a) la morfología del tumor (fijo o movil, sólido o quístico), b) presencia de receptores de estrógenos, receptores de progesterona y receptor del factor de crecimiento epidermico humano (HER2) y c) la metástasis a otros órganos (Fernandes., et al 2012; Burrai., et al 2015), motivan el estudio comparativo procurando enriquecer la informacion cientifica concerniente a carcinogénesis y tratamiento. Las altas tasas de morbilidad y mortalidad de los tumores de la glándula mamaria en humanos y animales domésticos (Ramotar & Mata, 2016; Sanchez., et al 2017) han despertado un necesario interés sobre el análisis biomolecular del cancer y de sus precursores dado que se ha logrado con ello mejorar el entendimiento sobre la carcinogénesis y lo relacionado con pronóstico y enfoque terapéutico (Zepeda., et al 2008). De manera consecuente Pereira., et al (2017) menciona que la heterogenidad de los tumores de la glándula mamaria (diversos patrones histológicos y comportameitno divergente) sustentan la identificación de factores pronósticos y predictivos mediante análisis de biomarcadores (oncógenes, proteínas) sobre la superficie de membrana tumoral. Dentro de las características biológicas del tumor que recientemente se han planteado estudiar a profundidad se incluye el tipo y grado histológico, invasión vascular, actividad proliferativa, presencia de receptores hormonales y marcadores genéticos (Morales., et al 2008). De acuerdo con Romero & Salas (2017) los marcadores tumorales son sustancias producidas por las células del organismo como respuesta al cáncer y suelen encontrarse en sangre, orina, materia fecal e incluso el mismo tejido tumoral. El factor de crecimiento epidermico humano (HER2), cuya importancia clínica y pronóstica en animales aún es controversial, es una glicoproteína de membrana asociada a tirosina quinasa empleada como indicador pronóstico que fue identificada por primera vez en 1984 en tumores cerebrales en ratas 2
3 y posteriormente, en el año 1985, se identifico en células cancerigenas de humanos (Colomer, et al 2001). HER2 se halla ubicado en la membrana plasmática celular, en el cromosoma 17 posición 17q21, y se le atribuyen funciones como regulación del crecimiento, división, diferenciación y muerte celular y en la comunicación célula-célula y célula-estroma (González., et al 2001). Benítez., et al (2011) menciona que la sobreexpresión del marcador HER2 señala un alto nivel de proliferación celular, peor grado histológico, mayor agresividad biológica y mayor riesgo de metástasis. El biomarcador HER2 ha sido identificado en perros en el 50% de los tumores mamarios benignos y 19,1% de los malignos (Burrai., et al 2015). En medicina humana, entre el 20-30% de canceres de mama muestran sobreexpresión de HER2 (Pereira., et al 2014). El marcador HER2, que se expresa en distintos tumores (ovario, tracto gastrointestinal y mama) y animales (Ortega., et al 2013), puede identificarse empleando métodos de detección como inmunohistoquímica IHQ, hibridación fluorescente in situ FISH, hibridación cromogénica in situ CISH y reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real PCR (González., et al 2007). Debido a que autores como Benitez., et al (2011) aseguran una inexistencia de relación entre el marcador HER2 con el pronóstico, malignidad y agresividad de los tumores de glandula mamaria en caninos se muestra el presente trabajo con el fin de enseñar los resultados obtenidos luego de un estudio de inmunohistoquimica para determinar la expresión del marcador HER2 en un carcinosarcoma mamario grado III en una perra mestiza de 8 años de edad. Materiales y metodología. Paciente canino mestizo, hembra, estado reproductivo entero de 8 años de edad. Se evidenció el desarrollo de una masa anormal sobre la última mama inguinal izquierda con progreso de 12 meses. Imagen 1. Expresión mediante IHQ de HER2. Se observa inmunomarcación débil en la muestra analizada. 3
4 El diagnóstico histopatológico fue sugestivo de carcinosarcoma mamario maligno tipo III. El estudio de inmunohistoquimica para HER2 se llevó a cabo tras la fijación con formol y parafina se sometió la muestra de carcinosarcoma mamario a los cortes finos del micrótomo. Para lograr identificar la expresión del marcador HER2 (Imagenes 1, 2 y 3) se empleó el anticuerpo monoclonal humano trastuzumab- que se comercializa en Colombia (Herceptin ). Imagen 2. Expresión mediante IHQ de HER2. Se observa inmunomarcación débil en la muestra analizada. Imagen 3. Expresión mediante IHQ de HER2. Se observa inmunomarcación debil en la muestra analizada. El trastuzumab se fija selectivamente a HER2 que se halla presente en la superficie membranal tumoral; se observó una inmunomarcación débil (1+) en la muestra analizada según lo informado por el laboratorio de diagnóstico veterinario. La marcación 1+ se considera clínica y patológicamente como negativa. Resultados y discusión Los tumores mamarios caninos representan una entidad oncológica bastante frecuente en la clínica de pequeños animales siendo los malignos los de mayor presentación (84,78%) en comparación a los benignos (15,22%) (Pereira., et al 2014). El factor de crecimiento epidérmico humano (HER2) induce la activación de tirosina quinasa que a su vez inicia una cascada de señales que promueven la division celular, migración o inhibición de apoptosis (Preciado., et al 2011) siendo por esto tal vez su importancia clínica y diagnóstica. La expresión del receptor (HER2) ha sido estudiada recientemente como un factor pronóstico importante en el cáncer de mama en mujeres (Colomer., et al 2001; Fernandes., et al 2012). Quizá el alto interés sobre el estudio de 4
5 HER2 en cáncer pueda deberse a las afirmaciones de Gonzáles., et al (2007) quien manifiesta que las células epiteliales sanas poseen entre a receptores de membrana mientras que las células neoplásicas llegan a expresar cerca de de receptores HER2 en membrana. Luego de la utilización de trastuzumab (Herceptin ) para determinar la expresion de HER2 se observó una inmunomarcación transmembranal débil (1+) (considerada negativa según Hsu., et al 2009) en las células neoplásicas epiteliales del carcinosarcoma mamario (tumor mixto- bifásico) canino. Este resultado coincide con los de Pereira., et al 2017 quien encontró, en un estudio de 99 tumores de mama en humanos, que el 19,19% tuvo expresion 1+ en contraste con el 13,13% y 0% que expresaron 2+ y 3+ respectivamente. Por otra parte, el resultado obtenido en el presente caso discrepa de los informados por Pereira., et al (2014) quien asegura haber observado inmunomarcación positiva en 100% de tumores mixtos mamarios en caninos. Los reportes de expresión y sobreexpresión de HER2 en humanos son diversos y por ende no puede establecerse un patrón fijo y es necesario estandarizar el marcador para caso partícular y en cada especie. En cuanto a sobreexpresión de HER2 (2+,3+) Arrechea., et al (2011) comunicó un 9,9% en cancer de mama de humanos, Roa., et al (2013) y Preciado., et al (2011) informaron 11,9% y 22,1% en muestras de cancer gástrico y Reigosa., et al (2015) encontró positividad en 22,22% de muestras de cancer de cólon. La expresion de HER2 y su interpretación como factor pronóstico sigue siendo muy controversial. Morales., et al (2008) encontró, en un estudio de cancer de mama en humanos, que el 48,3%, 37,9% y 13,8% tuvieron nula expresión, sobreexpresión y debil expresión, respectivamente, y además concluyó afirmando que la sobreexpresión está directamente relacionada con una tendencia a la quimiorresistencia, reducción del intervalo libre y supervivencia global. Contrario a ello, se citan los trabajos de Benítez., et al 2011 y Pereira., et al (2017) que afirman haber una inexistencia de relación entre pronóstico y la expresión de HER2 en tumores mamarios. En tumores mamarios caninos falta una estandarización mas exahustiva sobre HER2. Con base en los resultados del presente caso, en el que hubo una inmunomarcación débil (1+) de HER2 en carcinosarcoma mamario, puede afirmarse que no existe una relación entre la malignidad del tumor y la expresión del receptor ni tampoco con el pronóstico o enfoque clínico dado que luego de realizar escision de la masa tumoral el paciente canino ha sobrellevado una condición clínica y de bienestar favorable y aceptable. Pereira., et al (2014) sustenta lo anterior afirmando que es normal encontrar inmunomarcación débil en tumores mamarios malignos en perros y que éstos muestran un mejor pronóstico y sobrevida. No debe considerarse desafortunado el resultado del presente caso puesto que incluso en cancer mamario en humanos se ha descrito mayor porcenteje 5
6 de inmunomarcación debil 1+ (90,76%) con respecto a la sobreexpresión de HER2 (9,23%) (Esquivel., et al 2012) y en estudios similares en perros se encontró que una proporción considerable de muestras de tumores mamarios malignos expresan inmunomarcación débil (35,9%) como la observada en el presente caso. Agradecimientos. A la Corporación Patología Veterinaria NIT (CORPAVET ), Bogotá D.C Colombia. Referencias. 1. Arrechea, M; García, V; Córdoba, A; Ibáñez, B; Santamaría, M; Guillén, F Subtipos moleculares del cáncer de mama: implicaciones pronósticas y características clínicas e inmunohistoquímicas. An. Sist. Sanit. Navav, 34 (2). Pp Benítez, J; Alfaro, N; Insfrán, R; Merlo, W; Rosciani, A Eficacia pronóstica de la determinación de los receptores moleculares ERα y Her2-neu en tumores mamarios caninos. Rev. Vet, 22(2). Pp Burrai, G; Tanca, A; De Miglio, M; Abbondio, M; Pisanu, S; Polinas, M; Pirino, S; Mohammed, S; Uzzau, S; Addis, M; Antuofermo, E Investigation of HER2 expression in canine mammary tumors by antibodybased, transcriptomic and mass spectrometry analysis: is the dog a suitable animal model for human breast cancer?. Tumor Biol. P Colomer, R; Montero, S; Ropero, S; Menéndez, J; Cortés, H; Solanas, M; Escrich, E El oncogén HER2 como ejemplo del progreso diagnóstico y terapéutico en cáncer de mama. Rev Senología y Patol Mam 2001, 14(1). Pp Esquivel, O; Castelan, E; Espinoza, M Expresión de Her-2/neu en adenocarcinoma gástrico. Experiencia de 10 años ( ) en la Unidad Médica de Alta Especialidad No. 25, Centro Médico Nacional Noreste. Patología, 50(2). Pp Fernandes, C; José, M; Junqueira, R; Mesquita, L; Martínez, M Estudio histológico, inmuno-histoquímico y de cultivo celular de mamas humana y canina normal y cancerosa. Rev.MVZ Córdoba 17(2). Pp González, L; Ávila, A; Echeverri, C; Jaramillo, S; Salazar, R; Aristizábal, B Cáncer de mama: HER2/neu, métodos diagnósticos y consideraciones clínicas. Rev Colomb Cancerol, 11(1). Pp Morales, L; Reigosa, A; Caleiras, E; Mora, R; Marrero, N; Payares, E; Molina, K; Sucre, L Expresión del HER2/neu en pacientes venezolanas con cáncer de mama localmente avanzado. Investigación Clínica, 49(1). Pp
7 9. Ortega, M; Galán, J; Millán, Y; Sánchez, R; Martín de las Mulas, A Clasificación en subtipos moleculares de tumores de mama de pequeños animales mediante métodos inmunohistoquímicos. Sanid. Mil, 69 (1). Pp Pereira, M; Mantica, F; Fidanza, M; Gonzalez, S; Artese, J; Baratzabal, F; Mira, G Diagnóstico histopatológico y su relación con la expresión del oncogén Her2-neu en cáncer mamario. Vet Arg. 320: Pereira, N; Aparecida, A; Castro, I; Meziara, T; Almeida, T; Batista, M Fatores de prognóstico em carcinomas mamários caninos e sua relação com expressão de HER2. Acta Scientiae Veterinariae. 45: Preciado, J; Alvarado, C; Aponte, D; Sabaggh, L Detección de sobreexpresión del Oncogen HER2 como blanco molecular en cáncer gástrico: un paso más hacia la terapia biológica dirigida. Rev.Medica.Sanitas, 14(2). Pp Ramotar, P; Mata, D Incidencia del carcinoma ductal infiltrante en la consulta de mastología. Rev Venez Oncol, 28(4). Pp Reigosa, A; Garcia, G; Ramos, W Relación de la expresión del oncogén HER2/neu con factores clínico-patológicos en pacientes con cáncer de colon. Salus, 19(2). Pp Roa, I; Slater, J; Carvajal, D; Schalper, K; Toro, G; Ares, R; Game, A; León, J; Aretxabala, X Expresión y amplificación del gen HER2 en el cáncer gástrico avanzado. Rev Med Chile. 141: Romero, L; Salas, Y Marcadores tumorales en el cáncer de mama canino y su similitud con el cáncer de mama humano. Mens. Bioquim. 41: Sánchez, I; Bolaños, A; Marulanda, F; Perdomo, J; Perdomo, N; Yepes, O Carcinoma ductal multiforme mixto de malignidad histológica tipo II en un canino mestizo hembra: a propósito de un caso clínico. REDVET, 18(6). Pp Zepeda, E; Recinos, E; Cuéllar, M; Robles, C; Maafs, E Clasificación molecular del cáncer de mama. Cir Ciruj.76: REDVET: 2018, Vol. 19 Nº 1 Este artículo Ref _REDVET ( Ref. prov _expresiondelreceptor) está disponible en concretamente en REDVET Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización. Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org y con REDVET - 7
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