Interacción Fisicoquímica entre Ranitidina y Midazolam en Mezclas Intravenosas
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- Victoria Henríquez Toledo
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1 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Hospital de Pediatría (S.A.M.I.C.) Prof. Dr. Juan P. Garrahan (Buenos Aires Argentina) Resumen Objetivos Luego de una anestesia general, es habitual la utilización de mezclas analgésicas en el postoperatorio inmediato. La literatura cita incompatibilidades de algunas mezclas de uso habitual. En éste trabajo analizamos la compatibilidad y estabilidad a las 24 horas (temperatura ambiente) de la mezcla - en concentración de 300 mcg/ml y 30 mcg/ml respectivamente. Materiales y Métodos La evaluación de la incompatibilidad física se realizó por microscopía óptica (aumento: 400 x) en busca de cristales. La evaluación de la incompatibilidad química se realizó por Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) en fase reversa C 18, fase móvil: Acetonitrilo: metanol: Solución Buffer de PO 4 H 2 K regulada a ph = 7,4 (40:20:40), flujo = 1 ml/minuto, λ = 254 nm con detector UV-visible a temperatura ambiente. Se analizaron testigos de (300mcg/ml), (30mcg/ml) y la mezcla de ambas, calculándose la disminución de las concentraciones de ambas drogas en la mezcla con respecto a la de los testigos. Análisis de los resultados Por microscopía no se observó formación de cristales. Los valores hallados experimentalmente muestran disminución porcentual en las concentraciones de y en la mezcla, a Hora cero: 5,5 y 3,0 % y a Hora 24: 4,3 y 3,0 % respectivamente. Conclusiones La mezcla se considera fisicoquímicamente estable ya que no hay formación de cristales y la disminución de las concentraciones resulta ser menor al 10 % de las obtenidas para cada droga por separado. Introducción Luego de una anestesia general, es habitual la utilización de mezclas analgésicas en el postoperatorio inmediato.
2 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Existe gran variedad de las mismas, por lo que cuando comenzamos a utilizarlas en nuestro Hospital los farmacéuticos, con criterio, nos preguntaron como validábamos estas mezclas, en cuanto a la estabilidad de las mismas con el correr de las horas y si la utilización conjunta de distintos medicamentos en un mismo frasco no producía la formación de algún compuesto por simple reacción química. De hecho la literatura farmacéutica cita la incompatibilidad de algunas de nuestras mezclas habituales. El criterio clínico de efectividad del tratamiento es el parámetro que seguimos utilizando en el Servicio de Anestesiología. Sin embargo hemos comenzado a trabajar en forma conjunta con el Área de Farmacia con el propósito de validar las mezclas que ya tenemos en uso, y en el futuro, todas las que se implementen. En este trabajo analizaremos la mezcla -. La bibliografía 1, 2 y 3 cita la formación inmediata de turbidez blanquecina a concentraciones de 50 mg./ml y 5 mg./ml respectivamente. Dado que al mezclar dichas drogas a concentraciones de 300 mcg/ml y 30 mcg/ml (concentraciones que se obtienen cuando se coloca en un sachet de solución fisiológica 0,9% de cloruro de sodio de 500 ml, 150 mg. de y 15 mg. de ) no se observa la incompatibilidad antes mencionada, decidimos verificar si se produce incompatibilidad física o química no observable a simple vista. En el primer caso mediante la observación microscópica óptica, buscando posible formación de cristales y para la segunda mediante la evaluación de la estabilidad en el momento de su preparación, así como también a las 24 horas de preparada en el sachet de 500 ml en las concentraciones citadas. Materiales y Métodos 4 A) Se preparan las siguientes soluciones: A 1 ) Preparación del testigo de 300 µg/ml: Se colocan 3 ampollas de (150 mg.) en un matraz aforado de 500 ml y se lleva a volumen con solución fisiológica de cloruro de sodio 0,9 %, se homogeneiza durante 1 minuto. A 2 ) Preparación del testigo de 30 µg/ml: Se coloca 1 ampolla de (15 mg.) en un matraz de 500 ml y se lleva a volumen con solución fisiológica de cloruro de sodio 0,9%, se homogeniza durante 1minuto. A 3 ) Preparación de la mezcla de - (300 µg/ml-30 µg/ml): Se colocan 3 ampollas de y 1 ampolla de en un matraz aforado de 500 ml y se lleva a volumen con solución fisiológica de cloruro de sodio 0,9 %, se homogeniza durante 1 minuto. A 4 ) Blanco para observación microscópica: Solución fisiológica 0,9 % de cloruro de sodio. El estudio fue dividido en dos días, Día 1 (Hora Cero) y Día 2 (Hora 24). Los análisis de las soluciones se realizaron como se indica a continuación:
3 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. La solución A 1 y A 2 fue analizada por HPLC, siendo preparadas nuevas el Día 1 y el Día 2. La soluciones A 3 fueron observadas microscópicamente y analizadas por HPLC en el momento de su preparación (Día 1), así como también a las 24 horas (Día 2). Conservándola en sachet de solución fisiológica, a temperatura ambiente. 1. Para la observación microscópica se utiliza un microscopio óptico con un aumento de 400 x. La mezcla se tratará de la siguiente forma: Una alícuota de 15 ml de la misma se centrifuga durante cinco minutos a revoluciones por minuto (rpm), el líquido sobrenadante se descarta y se añade 0,1 ml de solución fisiológica 0,9 % agitando suavemente para lograr la resuspensión de los posibles cristales formados, luego se toma con la ayuda de una pipeta Pasteur una gota de este líquido y se la coloca sobre un portaobjeto cubriéndola con un cubreobjeto. Este mismo procedimiento se realiza para la observación del Blanco (solución fisiológica 0,9 %). 2. Para cuantificar las soluciones y la posible formación de algún producto en la mezcla se utiliza un equipo de HPLC (High Performance Liquid Chromatrography) con detector UV-VISIBLE Agilent 1100 Series (equipado con un inyector manual de 20 mcl) el cual permite al operador realizar la separación de las drogas de la mezcla y cuantificar la cantidad de las mismas mediante el análisis del área bajo la curva de cromatograma obtenido. El sistema cromatográfico utilizado esta conformado por: - Fase estacionaria: Fase reversa C Fase móvil: Acetonitrilo: Metanol: Solución Buffer de PO 4 H 2 K regulada a ph = 7,4. (40: 20: 40) - Temperatura de la corrida: temperatura ambiente (25 ºC) - Velocidad de corrida: 1 ml/minuto - λ = 254 nm - Volumen de inyección: 20 mcl. A) Curva de calibración para la cuantificación de las correspondientes drogas: dicha curva se realiza con el objetivo de verificar que el sistema cromatográfico utilizado es lineal dentro del rango de concentraciones que se esta trabajando. Se realizaron soluciones de de las siguientes concentraciones: 100; 200; 300; 400; 500 mcg/ml en solución fisiológica de cloruro de sodio 0,9 %. Las soluciones de fuero de: 10; 20;30; 40; 60 µg/ml en solución fisiológica de cloruro de sodio 0,9 %.
4 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Estas soluciones se inyectaron por duplicado en el equipo de HPLC midiendo automáticamente el área bajo la curva (ABC) del cromatograma por integración valle a valle entre los picos y construyendo con dichos datos la curva de calibración, la cual quedó expresada como: Bajo la Curva en función de la Concentración de Droga (ABC vs. Cp). Así se pudo concluir que el método es lineal en los rangos de concentración antes mencionados (Fórmula de Regresión: y = 22,178x + 136,52 [R2 = 0,9998], Coeficiente de Variación f (%)=1,320), de esta forma se establece que existe una relación directamente proporcional entre el ABC arrojada por el integrador automático del equipo HPLC (Ley de Lambert-Beer). También se analizó la Variabilidad Intradía CV f (%) = 0,546 y la Variabilidad Interdía CV f (%) = 0,726. Análisis de los resultados 1- Determinación crotográfica por HPLC: TABLA 1 Relación entre Tiempos de retención, Área Bajo la Curva para los tres ensayos de los testigos por triplicado TESTIGOS HORA CERO HORA 24 (300mcg/ml) (30mcg/ml) (300mcg/ml) (30mcg/ml) ENSAYO 1 1, ,8 6, ,5 1, ,4 6, ,0 1, ,5 6, ,2 1, ,5 6, ,3 1, ,6 6, ,9 1, ,5 6, ,0 ENSAYO 2 1, ,9 6, ,7 1, ,4 5, ,0 1, ,4 6, ,0 1, ,3 5, ,3 1, ,5 6, ,4 1, ,7 5, ,3 ENSAYO 3 1, ,9 6, ,3 1, ,9 6, ,0 1, ,3 6, ,0 1, ,1 6, ,7 1, ,1 6, ,3 1, ,2 6, ,5
5 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Gráfico de corrida para el testigo de (300 mcg/ml) por HPLC Gráfico de corrida para el testigo de (30 mcg/ml) por HPLC
6 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. TABLA 2 Relación entre Tiempos de retención, Bajo la Curva para los tres ensayos de la mezcla por triplicado MEZCLA HORA CERO HORA 24 ENSAYO 1 1, ,3 6, ,3 1, ,1 6, ,4 1, ,1 6, ,6 1, ,6 5, ,4 1, ,0 6, ,0 1, ,5 6, ,8 ENSAYO 2 1, ,6 6, ,9 1, ,1 6, ,7 1, ,8 6, ,5 1, ,0 5, ,4 1, ,5 6, ,3 1, ,9 5, ,7 ENSAYO 3 1, ,7 6, ,9 1, ,2 6, ,3 1, ,7 6, ,0 1, ,3 6, ,4 1, ,0 6, ,2 1, ,7 6, ,9 TABLA 3 Valores que relacionan el ABC, concentración y disminución del porcentaje de concentración para los testigos y la Mezcla en el momento de la preparación. Testigo Mezcla (300 mcg/ml) (30 mcg/ml) Hora cero Factor de Respuesta Factor de Respuesta CC (mcg/ml) Disminución CC (%) CC (mcg/ml) Disminución CC (%) E ,3 1281,2 6504,8 1320,6 E ,9 1465,7 6430,0 1289,9 E ,3 1281,2 6470,5 1294,7 Prom 6846,8 0, ,7 0, ,4 283,4 5,5 1301,7 29,1 3,0 E = Ensayo
7 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Cáceres Gui do P. A. Farmacéutico del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan Gráfico de corrida para la mezcla: (300 mcg/ml) - (30 mcg/ml) por HPLC TABLA 4 Valores que relacionan ABC, concentración y disminución del porcentaje de concentración para los testigos, preparados en el momento, y la Mezcla a las 24 horas de su preparación Testigo Mezcla (300 mcg/ml) (30 mcg/ml) Hora 24 Factor de Respuesta Factor de Respuesta CC (mcg/ml) Disminución CC (%) CC Disminución (mcg/ml) CC (%) E ,5 1403,4 6454,1 1330,2 E ,5 1398,5 6469,7 1373,6 E ,4 1389,7 6444,4 1357,9 Prom 6741,8 0, ,2 0, ,1 287,2 4,3 1353,9 29,1 3,0 2_ Observación microscópica óptica: Ausencia de cristales Conclusiones La observación microscópica no mostró formación de cristales, por lo que se descarta una posible interacción de características físicas de - a concentraciones de de 300 mcg/ml y 30 mcg/ml. Esta diferencia respecto a la bibliografía o estudios antes mencionados puede deberse al gran volumen en el cual están disueltas dichas drogas.
8 Valora P. D. Farmacéutico y Bioquímico, Jefe del de Farmacia del Hospital de Pediatría (SAMIC) Prof. Dr. Juan P. Garrahan. Con relación a la evaluación de la estabilidad química de la mezcla, se la considera estable tanto al momento de su preparación, como también a las 24 horas, dado que los valores de concentraciones de y aparecen dentro de los límites aceptados de estabilidad, con una disminución menor al 10 % de la concentración de y cuando se los disuelve por separado en solución fisiológica 0.9 % de cloruro de sodio (Testigos). Esto se observa en las tablas 3 y 4 donde los valores de disminución de la concentración de y son de 5,5 % y 3 % para Hora cero y 4,3 % y 3 % para Hora 24. Bibliografía 1. Forman JK & Souney PF: Visual compatibility of midazolam hydrochloride with common preoperative injectable medications. Am J Hosp Pharm 1987; 44: Handbook on Injectable Drugs ASHP Trissel (1996). 3. Micromedex Healthcare Series Integrated Index Ruiz Caldes, M.J., San Martín Ciges, E., Ezquer Borras, J., Rodilla Calvelo, F., Ferriols, F. Hospital Clínico Universitario de Valencia (Farm Hosp. 1995; 19 (1):41-44).
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