EFECTO DEL TRATAMIENTO A LAS SEMILLAS CON QUITOSANA EN EL CRECIMIENTO DE PLÁNTULAS DE ARROZ (Oryza sativa L.) CULTIVAR INCA LP-5 EN MEDIO SALINO

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1 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo IS impreso: IS igitl: Ministerio e Euión Superior. Cu Instituto Nionl e Cienis Agríols EFECTO DEL TRATAMIENTO A LAS SEMILLAS CON QUITOSANA EN EL CRECIMIENTO DE PLÁNTULAS DE ARROZ (Oryz stiv L.) CULTIVAR INCA LP-5 EN MEDIO SALINO Effet of see tretment with hitosn on the growth of rie (Oryz stiv L.) seelings v. INCA LP-5 in sline meium Lisel Mrtínez González ), Ynelis Reyes Guerrero, Alejnro Flón Roríguez y Mirim Núñez Vázquez ABSTRACT. The hitosn is wiely use in griulture for hving strong fungistti effet, lso it hs other properties suh s extening the post hrvest life of fruits n vegetles n stimulting the plnt growth, mong others. However, the use of this iopolymer for inuing slinity tolerne hs een few stuie, so the ojetive of this work ws to hek if hitosn-trete sees re le to reverse the effets use y slinity in the rie seeling growth n some iohemil initors ssoite to this response. To o this, rie (Oryz stiv L.) sees vriety INCA LP-5 were trete for 24 hours with ifferent onentrtions of hitosn (, 1 n 5 mg L -1 ). The germinte sees were trnsferre to pots ontining ilute Hogln nutritive solution supplemente or not with NCl 1 mmol L -1 n they were ple in growth hmer with ontrolle onitions. The growth n iohemil initors were evlute eleven ys fter stress tretment. Sees trete with hitosn 1 mg L -1 stimulte shoot length n ry mtter in sline meium grown seelings n lowere mlonilehye n inrese proline levels. Both hitosn onentrtions enhne the tivities of tlse n peroxise enzymes, lthough higher effet ws otine with hitosn 5 mg L -1. RESUMEN. L quitosn es us mplimente en l griultur por su efeto fungistátio, emás lrg l vi postoseh e frutos y vegetles y estimul el reimiento e ls plnts. Sin emrgo, h sio poo estuio el uso e este iopolímero en l inuión e tolerni l slini, por lo que el ojetivo e este trjo fue ompror si el trtmiento ls semills on quitosn revertí los efetos inhiitorios el estrés slino en el reimiento e plántuls e rroz, sí omo en lgunos iniores ioquímios soios est respuest. Pr ello se trtron semills e rroz (Oryz stiv L.) vrie INCA LP-5, urnte 24 hors, on iferentes onentriones e quitosn (, 1 y 5 mg L -1 ). Ls semills germins se trnsfirieron potes, los que se les iionó soluión nutritiv Hogln ilui, suplement o no on NCl 1 mmol L -1 y se oloron en un urto e reimiento on oniiones ontrols. Ls evluiones e reimiento y los iniores ioquímios se relizron los one ís espués e estleio el estrés. El trtmiento ls semills on l onentrión e 1 mgl -1 e quitosn estimuló l longitu y l ms se e l prte ére e ls plántuls reis en meio slino, sí omo isminuyó los niveles e mlonilehío e inrementó los e prolin. En unto l tivi enzimáti ms onentriones e quitosn estimulron ls enzims tlss y peroxiss, sieno el efeto más notle on l onentrión e 5 mg L -1. Key wors: rie, growth, hitosn, slt stress Plrs lve: rroz, reimiento, quitosn, estrés slino INTRODUCCIÓN Instituto Nionl e Cienis Agríols (INCA), gvet postl 1, Sn José e ls Ljs, Myeque, Cu. CP 327. ) lisel@in.eu.u; ynelisrg@in.eu.u; lflon@in.eu.u; mnunez@in.eu.u L quitosn, es un ompuesto inouo y ioegrle, que se otiene, funmentlmente el exoesqueleto e ngrejo, mrón y lngost (1, 2). Es us por sus potenilies en iferentes mpos que inluyen l iotenologí, l griultur, l inustri limentii, y l frméuti (3, 4, 5). 143

2 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo L quitosn, h sio mplimente us en l griultur priniplmente por poseer tivi ntifúngi y ntimiroin (6, 7). Es pz e estimulr l prouión e enzims relions on respuests efensivs en ls plnts omo quitinss, glunss y fenillnin monio liss (PAL) (8). Se h omproo, emás, que estos ompuestos, en epeneni e su onentrión y gro e etilión, son pes e tivr l enzim PAL y otros omponentes e l resisteni inui en plnts (9). L slini es un estrés iótio que us j proutivi en l myorí e los ultivos en too el muno (1). Este estrés provo un isminuión e l germinión y un emergeni no uniforme e ls plántuls, por lo que isminuye l ensi e polión, speto que reperute en el estleimiento e los ultivos. Por otr prte, se onoe que l slini inhie el reimiento e ls plnts osiono, en un primer fse, por l reuión en l sorión e gu por ls ríes, lo que se le enomin fse e estrés osmótio o e éfiit hírio (11). Existe po informión er e l utilizión e l quitosn pr mitigr los efetos versos que osion l slini en el reimiento e ls plnts y no se tiene onoimiento e nteeentes en el ultivo el rroz. Por este motivo, el ojetivo e este trjo fue evlur si el trtmiento ls semills on quitosn er pz e revertir los efetos versos usos por l slini en el reimiento e plántuls e rroz e l vrie INCA LP-5, sí omo l evluión e lgunos iniores ioquímios relionos on est respuest. MATERIALES Y MÉTODOS Semills e rroz (Oryz stiv L.) e l vrie INCA LP-5 se trtron, urnte 24 hors, on iferentes onentriones (, 1 y 5 mg L -1 ) e un polímero e quitosn, que posee ls siguientes rterístis: ms moleulr 93,3 kd y 31,69 % e gro e etilión. Posteriormente, ls semills trts se oloron en pls Petri on gu estil pr su germinión en l osuri 25±2 o C. A ls 48 hors, ls semills germins se trnsfirieron potes, los ules se les iionron 5 ml e soluión nutritiv Hogln ilui (1:2), suplement o no on NCl 1 mmol L -1. Se utilizron 2 semills por pote y seis potes por trtmiento, es eir, 12 plántuls. Los potes se oloron en un urto e reimiento on fotoperíoo e 12 hors y un tempertur e 24±,2 o C. One ís espués, se miieron ls longitues e ls ríes y e l prte ére e 25 plnts por trtmiento y se onformron ino muestrs e ino plnts un, pr evlur l ms se e l prte ére y e ls ríes. En este mismo momento se relizron lguns eterminiones ioquímis. Pr ello, se tomron,25 g e tejio freso e trtmiento y se merron en nitrógeno líquio, iionánole 2,5 ml e tmpón fosfto 1 mmol L -1, ph 7 y entrifugánose posteriormente 1 rpm por 2 minutos 4 ºC. Con el sorennte otenio se estimó l peroxiión lipíi meinte l untifiión el mlonilehío (MDA) (12), l tivi e ls enzims peroxiss totles (13) y tlss (14) y ls proteíns solules totles por el métoo e MiroLowry (15). Aemás, pr l eterminión el minoáio prolin se tomron,25 g e tejio freso e trtmiento y se merron en nitrógeno líquio, iionánole 1 ml e gu 1 ºC. El ontenio e prolin se untifió por el métoo e Btes (16), utilizno L-prolin (Sigm) omo ptrón. El experimento se repitió en os osiones on omportmientos similres. Se muestrn los resultos e un e ls repetiiones. Los tos otenios se proesron estístimente utilizno un Análisis e Vrinz e Clsifiión simple y ls meis se omprron meinte el test e Rngos Múltiples e Tukey p<,5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN En l Figur 1 se presentn los resultos el omportmiento e ls vriles el reimiento e ls plántuls e rroz ultivr INCA LP-5, reis tnto en soluión nutritiv sol y en soluión nutritiv suplement on NCl. Como se puee oservr, l preseni e NCl 1 mmol L -1 isminuyó signifitivmente l longitu y l ms se e l prte ére; sin emrgo, no tuvo efeto en ls ríes. L quitosn l onentrión e 1 mg L -1 logró un estimulión signifitiv en l longitu y l ms se e l prte ére e quells plántuls uys semills fueron trts on el polímero (Figur 1A y C). En unto l ms se e ls ríes, el trtmiento on quitosn 1 mg L -1 isminuyó est vrile en ls plántuls estress (Figur 1D). Es interesnte estr que el trtmiento ls semills on quitosn no tuvo efeto en el reimiento e ls plántuls reis en soluión nutritiv. Este resulto puier eerse ls onentriones utilizs, y que se h oservo que ls onentriones que estimuln el reimiento son menores. L quitosn, emás, e tener efetos ontr hongos ptógenos, en generl, tmién tiene efetos promotores en el reimiento, unque estos se enuentrn menos estuios. Algunos utores plnten el inremento el renimiento e los ultivos uno se trtn ls semills on quitosn. 144

3 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo A B Longitu (m) Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit =,53*** Longitu (m) Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit =,47** +NCl +NCl C D Ms se (mg plnt -1 ) Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit =,48*** 8 Es x =,226** NCl +NCl Meio e ultivo Meio e ultivo Ms se (mg plnt -1 ) Letrs omunes no ifieren entre sí según prue e Tukey (p,5) n=25. A. Longitu prte ére. B. Longitu e ls ríes. C. Ms se e l prte ére. D. Ms se e ls ríes. Figur 1. Influeni el trtmiento on quitosn en lguns vriles el reimiento e plántuls e l vrie e rroz INCA LP-5 reis en soluión nutritiv suplement (+NCl) o no () on NCl 1 mmol L -1. El renimiento e fres y rroz umentó un 2-3 % espués e l spersión folir y el trtmiento ls semills on quitosn, respetivmente (17, 18). Al nlizr el efeto e los trtmientos on quitosn ls semills se oservó un efeto positivo e este polímero en el reimiento e ls plántuls e rroz vrie INCA LP-5 en meio slino. Se estó, el trtmiento e 1 mg L -1 que revirtió totl y prilmente el impto negtivo e l sl en l ms se y longitu e l prte ére, respetivmente (Figur 1). Estuios nteriores enontrron un omportmiento similr en plnts e Isgol (Plntgo ovt Forsk) one l quitosn (,2 %) estimuló l longitu el tllo y ls ríes y l ms se e ests últims en oniiones e estrés slino (19). Con l pliión e quitosn plántuls e soy jo estrés slino se oservron, tmién, inrementos en l ms se e ls misms (2). Igulmente el trtmiento ls semills e ártmo (Crthmus tintorius L.) on quitosn inrementó el reimiento e ls plántuls en oniiones e éfiit hírio (2). Algo similr informron Zeng y Luo, quienes enontrron que el reurimiento e ls semills on quitosn inrementó l veloi e germinión y el reimiento e plnts e trigo en oniiones e sequí (21). Otros utores hn informo que l trtr semills e míz on quitosn,5 % se mejor l veloi e germinión y se inrement l longitu y l ms se e l ríz y el tllo e ls plántuls sometis estrés e temperturs js (22). El mlonilehío (MDA) es uno e los proutos finles e j ms moleulr e l esomposiión e los hiroperóxios lipíios. Este ompuesto es el más utilizo omo mei e l peroxiión lipíi en l memrn elulr. 145

4 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo Como se puee oservr en l Figur 2A, ls plántuls reis en soluion nutritiv on NCl mostrron myores niveles e MDA. Este umento e l onentrión e MDA nte iferentes tipos e estrés está mplimente esrito en l litertur (23, 25) y es un onseueni iret e l ión e ls espeies retivs e oxígeno (EAO). mmol TBARS g -1 MF µg Pro g -1 MF 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1,5,5,4,3,2,1 Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit =,57*** +NCl Meio e ultivo Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit =,31*** Letrs omunes no ifieren entre sí según prue e Tukey (p,5) n=6. Figur 2. Influeni el trtmiento on quitosn en los niveles e mlonilehío (A) y prolin (B) e plántuls e l vrie e rroz INCA LP-5 reis en soluión nutritiv suplement (+NCl) o no () on NCl 1 mmol L -1. El trtmiento ls semills on ms onentriones e quitosn isminuyó los niveles e MDA en ls plántuls estress. Resultos similres hn sio informos por otros utores en plnts e girsol (26). Tmién, se h oservo l isminuion el ontenio e MDA en plntuls e tomte sperjs folirmente on quitosn 15 mg L -1 y sometis estrés slino (27). Aemás el pretrtmiento on oligoquitosn,625 %, tmién A B Meio e ultivo +NCl isminuyó los niveles e MDA en plnts e trigo reis en oniiones e slini (28). Igulmente, onentriones e quitosn (hst,5 %) isminuyeron los niveles e MDA en plántuls e ártmo sometis estrés osmótio (2). En oniiones e js temperturs el trtmiento on quitosn tmién isminuyó el ontenio e MDA en plnts e míz (22). Ls plnts superiores pueen umulr L-prolin (Pro) en respuest iversos estrés meiomientles. En este experimento el estrés slino umentó l onentrión e este minoáio en ls plántuls e rroz on respeto l ontrol. El trtmiento on quitosn l onentrión e 1 mg L -1 umentó ún más estos niveles. Nótese, que est mism onentrión isminuyó signifitivmente este inior en ls plántuls no estress. Aunque el ppel exto e l prolin en el estrés slino es ontroversil, puesto que no siempre los umentos e este minoáio hn orreliono on myor tolerni l estrés (29), en los últimos ños se h emostro que l pliión exógen e prolin proporion un ión protetor ontr el ño oxitivo inuio por el estrés slino (3, 32). Aemás, se h emostro que l umulión e prolin estiliz ls memrns y los omponentes suelulres, inluyeno el omplejo II e l en e trnsporte eletrónio mitoonril. Existen estuios que proponen l prolin omo eptor finl e los riles lires (33) y estilizor el potenil reox por reprovisionmiento e l provisión e NADP + (34). Los resultos e este trjo mostrron que el trtmiento on quitosn umentó los niveles e prolin en oniiones slins; sin emrgo, solmente l onentrión e 1 mg L -1 inrementó signifitivmente este inior on relión l trtmiento ontrol. Un inremento e l prolin h sio enontro en plnts e tomte y trigo sometis estrés slino (27, 28); mientrs que en plnts e girsol el trtmiento ls semills on quitosn proujo un efeto ontrrio (26). L onentrión e proteíns totles isminuyó on el estrés slino y el trtmiento on quitosn guizó este omportmiento (Figur 3A). Contrrio este resulto se enontró que el trtmiento on js onentriones e quitosn plántuls e ártmo sometis estrés hírio umentó l onentrión e proteíns solules (2). Es interesnte notr ómo el trtmiento on el polímero l onentrión e 5 mg L -1 en ls plántuls no estress isminuyó tmién el ontenio e proteíns. Resultos similres se enontrron en plántuls e ártmo provenientes e semills trts on quitosn (2). Entre ls priniples enzims que remueven oxintes tóxios se enuentrn ls peroxiss y ls tlss. 146

5 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo En l Figur 3 (B y C) se puee oservr que el estrés slino, en el so el trtmiento ontrol, isminuyó l tivi e ls enzims peroxiss (POX) y no tuvo influeni en ls tlss (CAT). Conentrión e proteíns (mg prot g-1 PF) POX (umol H 2 O 2 min -1 mg -1 prot) CAT (umol H 2 O 2 min -1 mg -1 prot),6,5,4,3,2,1,5,4,3,2,1,12,9,6,3 Control 1 mg L -1 Quit 5 mg L -1 Quit e =,56*** +NCl Letrs omunes no ifieren entre sí según prue e Tukey (p,5) n=6. Figur 3. Influeni el trtmiento on quitosn en l onentrión e proteíns solules totles (A), en ls tivies enzimátis e peroxiss (B) y tlss (C) e plántuls e l vrie e rroz INCA LP-5 reis en soluión nutritiv suplement (+NCl) ó no () on NCl 1 mmol L -1. A B C =,86*** +NCl =,15*** +NCl Meio e ultivo El trtmiento on quitosn umentó l tivi e ms enzims en ls plántuls estress y este efeto fue epeniente e l onentrión. Es interesnte señlr que en ls plántuls no estress l onentrión e 1 mg L -1 isminuyó ms tivies enzimátis; sin emrgo, l onentrión e 5 mg L -1 umentó signifitivmente l tivi e ests enzims. Esto puier eerse que un onentrión myor, ponrí l élul en esto e lert, potenino ls efenss. Existen numerosos estuios sore los efetos el estrés slino en ls enzims ntioxintes e ls plnts, pero estos, en osiones, son ontritorios. En unto ls peroxiss, el estrés slino ument l tivi e est enzim en plnts e rroz (23, 35, 36). L tivi e ls peroxiss e llos e pp se inrementó jo estrés slino, pero lts onentriones (NCl 15 mmol L -1 ) est tivi isminuyó (37). Igulmente, en lgoón, se h informo que ls POX se inrementn en los ultivos tolerntes l sl y se reue o permnee onstnte en los sensiles iho estrés (38, 4). Sin emrgo, en trigo, l slini isminuyó l enzim POX, emás e umentr los niveles e MDA y l prouión el ril superóxio (41), similr lo otenio en este trjo. En el so e l enzim tls ourre lgo similr, pues lgunos utores hn enontro estimulión e l tivi e est enzim trvés e l tivión e los genes Ct2 y Ct3 (42). Sin emrgo, otros utores enontrron isminuión en l CAT en hojs e rroz por trtmiento on NCl (43, 44). Por otr prte, tmién se h oservo que est enzim no vrí nte estrés slino en plántuls e rroz (45). En unto l estimulión e l tivi enzimáti e l CAT por el trtmiento on quitosn se hn otenio resultos similres en plántuls e tomte sperjs on quitosn y sometis estrés slino (27). Tmién en plántuls e trigo trts on oligoquitosns y sometis estrés se enontrron umentos e ls tivies enzimátis e ls POX, CAT y superóxios ismutss (SOD) (28). Sin emrgo, en oniiones normles se h enontro estimulión e l tivi POX y CAT en plántuls e girsol espués el trtmiento on quitosn, pero en oniiones slins ests misms onentriones usron isminuión e ms tivies enzimátis (26). Aemás, se h enontro que el trtmiento on quitosn estimul l tivi enzimáti ntioxinte en plnts sometis otros tipos e estrés omo temperturs js en plnts e míz (22) y estrés hírio en plnts e trigo (21). Reientemente, l quitosn h reiio un espeil tenión por su pi omo ntioxinte, l ul epene e l ms moleulr y el gro e 147

6 Cultivos Tropiles, 215, vol. 36, no. 1, pp enero-mrzo etilión (46). Vrios estuios hn onfirmo que l quitosn puee tener potenil omo trpor e riles lires (46, 47). Este ompuesto puee trpr el ril hiroxilo y el superóxio y h sio informo que tiene propiees protetors el ADN (48). El menismo por el ul tú l quitosn puier triuirse su estrutur on un grn número e grupos hiroxilo y minos isponiles pr reionr on ls espeies tivs e oxigeno EAO (49). De form generl, el trtmiento on quitosn proujo l tivión e ls enzims ntioxintes POX y CAT en plántuls reis en meio slino, on lo que isminuyó l peroxiión lipíi en l memrn. Por otr prte, unque l quitosn tmién inrementó los niveles e prolin en ls plántuls reis en meio slino, solmente l onentrión e 1 mg L -1 inujo un inremento que se iferenió estístimente el resto e los trtmientos, oiniieno on l onentrión que revirtió l inhiiión que l slini proujo en el reimiento e l prte ére e ls plántuls, lo que sugiere l importni e este metolito en ests oniiones, y que es onoio que l prolin puee tur omo ntioxinte y omo soluto osmótimente tivo. Tenieno en uent, que estos son los primeros resultos que se otienen el efeto e l quitosn en el reimiento e plántuls e rroz en meio slino y muy prtiulrmente, en l vrie INCA LP-5, se sugiere ontinur profunizno en estos estuios, sore too, si se onsier l importni que tiene est vrie en l prouión un e rroz y el inremento vez myor que existe e áres fets por l slini. BIBLIOGRAFÍA 1. Rmírez, M. A.; Crer, G.; Gutiérrez, A. y Roríguez, T. Metoologí e otenión e quitosn prtir e quitin e lngost. Cultivos Tropiles, 2, vol. 21, no. 1, pp IS El Hrmi, A.; Am, L. R.; El Hrmi, I. y Dyf, F. Chitosn in Plnt Protetion. Mrine Drugs, 21, vol. 8, pp IS Lárez, C. Alguns potenilies e l quitin y el quitosno pr usos relionos on l griultur en Ltinoméri. Revist UDO Agríol, 28, vol. 8, no. 1, pp IS Xi, W.; Liu, P.; Zhng, J. y Chen, J. Biologil tivities of hitosn n hitooligoshries. Foo Hyroollois, 211, vol. 25, no. 2, pp IS 268-5X. 5. Dutt, J.; Tripthi, S. y Dutt, P. K. Progress in ntimiroil tivities of hitin, hitosn n its oligoshries: systemti stuy nees for foo pplitions. Foo Siene n Tehnology Interntionl, 212, vol. 18, no. 1, pp IS Flón, A.; Crer, J. C.; Costles, D.; Rmírez, M. A.; Crer, G.; Toleo, V. y Mrtínez-Téllez, M. A. The effet of size n etyltion egree of hitosn erivtives on too plnt protetion ginst Phytophthor prsiti. Worl Journl of Miroiology n Biotehnology, 28, vol. 24, pp IS Yin, H.; Zho, X. y Du, Y. Oligohitosn: A plnt iseses vine. A review. Crohyrte Polymers, 21, vol. 82, pp IS Hongyin, Z.; Renping, L. y Weimin, L. Effets of Chitin n Its Derivtive hitosn Posthrvest Dey of Fruits: A Review. Int. J. Mol. Si., 211, vol. 12, pp IS Flón Roríguez, A. B.; Costles, D.; Crer, J. C. y Mrtínez Téllez, M. A. Chitosn physio-hemil properties moulte efense responses n resistne in too plnts ginst the oomyete Phytophthor niotine. Pesti. Biohem. Physiol., 211, vol. 1, p IS Álvrez, A.; Bños, R. y Otero, L. Slini y uso e gus slins pr l irrigión e ultivos y forrjes en Cu. Cieni y Tenologí Gner, 28, vol. 2, no. 1, pp IS Munns, R. y Tester, M. Mehnisms of slinity tolerne. Annul Review of Plnt Biology, 28, vol. 59, pp IS Hoges, M. D.; DeLong, J. M.; Forney, C. F. y Prnge, R. K. Improving the thiorituri i-retive-sustnes ssy for lipi peroxition in plnt tissues ontining nthoynin n other interfering ompouns. Plnt, 1999, vol. 27, pp IS Bergmeyer, H. U. Peroxise. En: Methos of Enzymti Anlysis. Bergmeyer, H. U. Eitor. New York y Lonon: Aemi Press In. 1974, pp ISBN Aei, H. Ctlse in vitro. Methos in Enzymology, 1984, vol. 15, pp IS Sun, S. MiroLowry in methos in Plnt Moleulr Biology n Agriulturl Biotehnology. Asin Vegetle Reserh n Development Center Counil of Agriulture, 1994, pp IS Btes, L. S.; Wlren, R. P. y Tere, I. D. Rpi etermintion of free proline for wter stress stuies. Plnt Soil, 1973, vol. 39, pp IS Ael-Mwgou, A. M. R.; Tntwy, A. S. El-Nemr, M. A. y Sssine, Y. N. Growth n Yiel Responses of Strwerry Plnts to Chitosn Applition. Europen Journl of Sientifi Reserh, 21, vol. 39, no. 1, pp IS X. 18. Boonlertnirun, S.; Boonrung, C. y Suvnsr, R. Applition of Chitosn in Rie Proution. Journl of Metls, Mterils n Minerls, 28, vol. 18, no. 2, pp IS Mhvi, B. See germintion n growth responses of Isgol (Plntgo ovt Forsk) to hitosn n slinity. Interntionl Journl of Agriulture n Crop Sienes, 213, vol. 5, no. 1, pp IS X. 2. Mhvi, B.; Snvy, S. A. M. M.; Aghlikhni, M.; Shrifi, M. y Doltin, A. Chitosn Improves Osmoti Potentil Tolerne in Sfflower (Crthmus tintorius L.) Seelings. Journl of Crop Improvement, 211, vol. 25, no. 6, pp IS

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