Experiencia en reducción/inactivación de patógenos en Clínica Santa María, Santiago de Chile

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1 Experiencia en reducción/inactivación de patógenos en Clínica Santa María, Santiago de Chile TM. Fernando Aro Menares. Banco de Sangre Clínica Santa María Chile

2 Clínica Santa María, Santiago de Chile BANCO DE SANGRE

3

4 POLÍTICA DE SERVICIOS DE SANGRE (MINSAL 2013)

5 Objetivos centrales de la Política Mejorar, minimizar pérdidas y reducir costos Centralizar procesos productivos: Aumenta eficiencia del proceso, estandariza calidad producto y garantiza el abastecimiento. Cambiar el actual sistema de donación: de reposición a altruista. Racionalizar el uso de la práctica transfusional

6 MISIÓN BANCO DE SANGRE DE LA CSM Ser un Banco de Sangre a la vanguardia tecnológica y de seguridad, que se constituya en un respaldo terapéutico oportuno y confiable a las actividades clínicas que así lo requieran, dirigido a usuarios privados y públicos con un enfoque de calidad, seguridad y en un entorno de responsabilidad social tanto interna como externa, bajo una gestión moderna, flexible e innovadora que agregue valor.

7 Atención de Donantes: Obtención de sangre Identificación Registro Exs.Pre Ext. Entrevista Consentimiento Extracción Fidelizar Procesamiento a la sangre donada Exámenes a sangre donada Fraccionamiento CALIFICACIÓN INMUNOHEMATOLÓGICA ABO y RhD Estudio Acs. Irregulares Tipificación otros sistemas sanguíneos CALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA VIH HEP B HEP C CHAGAS SIFILIS HTLV I/II Sangre Total Uso restringido Glóbulos Rojos c/s leucorreducción C. Plaquetas c/s leucorreducción Plaquetas de aféresis. Plasma fresco congelado /Plasma sin factor VIII Crioprecipitados (Conc. Factor VIII) Validación y Etiquetaje Irradiación Inactivación Almacenamiento y Distribución UMT

8 DATOS ESTADÍSTICOS 2014 (SIBS Hematos) ATENCIÓN DE DONANTES 4637 Donaciones sangre 587 Donaciones plaquetas aféresis PRODUCCIÓN 4605 Glóbulos rojos 2715 Plaquetas estándar 4612 Plasmas 1100 Crioprecipitados

9 Otras actividades Biología molecular Genotipificación Preparación de Membranas amnióticas para procedimientos oftalmológicos. Preparación de PRP: traumatología, heridas, tratamientos dentales, oftalmología, etc. DESAFÍOS FUTUROS Criopreservación de sangre y tejidos Bancos de tejidos: Huesos, córneas, etc. Terapia Celular

10 INACTIVACIÓN/REDUCCIÓN DE PATÓGENOS EN PLAQUETAS

11 Riesgos de la transfusión sanguínea Donantes obligados Errores en la administración de HC. Contagio de enfermedades infecciosas. Infecciones virales (periodos de ventana) Contaminación bacteriana (obtención, almacenamiento, distribución, instalación) Las Reacciones Adversas Mediadas Inmunológicamente inmunomodulación, aloinmunización, EIVH, PPT, etc. Mediadas No Inmunológicamente SCC, SCFe, etc.

12 Riesgos de la transfusión sanguínea

13 ESTRATEGIAS Promover la donación altruista a repetición Disponer de normativas y técnicas de entrevista, que garanticen la selección de donantes seguros. Disponer de técnicas de tamizaje con capacidad de pesquizar en forma precoz periodos de ventana. Disponer de una Medicina Transfusional eficiente. Realizar hemovigilancia activa y permanente. Obtener sangre y componentes con dispositivos seguros de acuerdo a normas internacionales. Producir componentes gamma-irradiados Obtener productos leucorreducidos para minimizar el contagio de patógenos. Realizar Inactivación o reducción de patógenos.

14 QUÉ ES LA REDUCCIÓN DE PATÓGENOS? Un método orientado tanto a la eliminación de: Bacterias (Gram positivas y Gram negativas), como de virus (con y sin cápside), así como de parásitos. (Patógeno libre o asociado a células) Un método que: Proporcione mayor seguridad al paciente que va a ser Transfundido. No altere las funciones o la vitalidad de las células transfundidas Convenga desde el punto de vista económico.

15 Métodos Producto sanguíneo Método fotodinámico Método fotoquímico Otros métodos Plaquetas estándar o de Aféresis Riboflavina Fenotiazina (Tionona) Amotosaleno-HCL (S-59) ---- Glóbulos rojos Riboflavina Fenotiazina (1,9- dimetil-azul de metileno) ---- PEN110 (Inactina) S-303 (FRALE) Plasma fresco congelado Fenotiazina (azul de metileno) Amotosaleno-HCL (S-59) Solvente-detergente

16 Tratamiento fotoquímico con amotosaleno y luz UVA (INTERCEPT Blood System) Cloruro de Amotosaleno λ nm S-59

17 Tratamiento fotoquímico con amotosaleno y luz UVA (INTERCEPT Blood System) El mecanismo de acción del Amotosalen se basa en penetrar la membrana celular y nuclear, intercalándose en las regiones helicoidales de ADN y ARN, formando crosslinks en los pares de bases de los ácidos nucleicos y a la exposición de luz UVA, bloquea la replicación de DNA y RNA, inhibiendo la supervivencia de las células

18 Experiencia en Banco de Sangre Clínica Santa María

19 Se incorpora Inactivación de patógenos en BS CSM Plaquetas aféresis, suspendidas en plasma 2013 Se incorpora PAS Cultivo de plaquetas de aféresis (liberación a las 24 hrs) Se adquieren Kits de Inactivación para Plaquetas en Solución Aditiva Se inactiva el 53,8 %de la producción de plaquetas de Aféresis Se efectúa estudio de productos inactivados

20 PROCEDIMIENTOS DE INACTIVACIÓN DE UNIDADES DE PLAQUETOFÉRESIS % % % 10.5% % 60.0% Histórico PRODUCTOS INACTIVADOS (%) 15.5% 17.2% 10.5% 53.8% 60.0% 25.4% TOTAL PRODUCTOS INACTIVADOS TOTAL DE AFERESIS OBTENIDAS

21 En la búsqueda de mejorar las condiciones de almacenamiento plaquetario y la calidad de éstas, se han creado las soluciones aditivas (PAS) e Inactivadores de patógenos, los cuales garantizan la calidad de este producto sanguíneo, aumentando la viabilidad y disminuyendo en el riesgo de contaminación microbiológica.

22 Se planteó la idea de ser pioneros en Chile en utilizar Solución Aditiva (PAS) y el Inactivador de Patógenos (Amotosalen). Estos elementos, ya estudiados en el extranjero y que son probados en el Banco de Sangre de Clínica Santa María, para evaluar: Contaminación bacteriana de CP uso para prevención EIVH (revisión bibliográfica) tiempo de almacenamiento (estudio)

23 Contaminación bacteriana de CP e Inactivación representa la enfermedad infecciosa más frecuentemente transmitida a través de transfusiones, y el riesgo clínico fundamental cuando se infunden estos concentrados es la sepsis postransfusional en el receptor, complicación que se asocia a mortalidades en torno al 20%.

24 EICH e Inactivación Se produce por una respuesta inadecuada y autodestructiva del organismo frente a la incorporación y proliferación de linfocitos T presentes en los componentes sanguíneos. Por su mecanismo de acción, el sistema inhibe la capacidad proliferativa de las células T, siendo una alternativa a la radiación gamma para prevenir la enfermedad injerto contra huésped asociada a la transfusión (EICH-AT).

25 Tiempo de almacenamiento Evaluar plaquetas de aféresis para prolongar tiempo de almacenamiento post Inactivación, para demostrar sus características y así lograr obtener concentrados con óptimos estándares de calidad hasta el 7 y 9 días de almacenamiento.

26 Antecedentes: La FDA y AABB expresan que las plaquetas pueden ser almacenadas sólo hasta el 7 día, si se usa algún método de detección o reducción de la contaminación bacteriana. Hay cambios cualitativos y cuantitativos en la plaqueta, como cambios morfológicos, con expresión de P-Selectina y fosfatidilserina en la membrana, disminución de glucosa y aumento de lactato, disminución de ph. Importantes pérdidas en la viabilidad de las plaquetas y baja recuperación en posteriores transfusiones

27 PROCEDIMIENTO TÉCNICO

28 Kit de Inactivación

29 Procedimiento de Inactivación

30 Qué estudiamos?: Comparación de plaquetas con PAS vs plaquetas con PAS inactivadas En relación a lo descrito que: Existe un deterioro con el tiempo de almacenamiento, y que se refleja en la disminución del recuento y la sobrevida de las plaquetas in-vivo, inhibiendo la respuesta de agregación e incrementando la activación plaquetaria

31 Cuáles fueron nuestros objetivos? Objetivo General: Demostrar que las plaquetas obtenidas por aféresis resuspendidas en solución aditiva y tratadas con Amotosalen, muestran una mejor recuperación y viabilidad durante el período de almacenamiento. Objetivos Específicos: 1.Evaluar los factores y/o parámetros cualitativos y cuantitativos durante el almacenamiento de las plaquetas. 2.Correlacionar la lesión en las plaquetas por el almacenamiento prolongado.

32 Algoritmo de trabajo Plaquetoféresis Control: PQFs en plasma Muestra: PQFs +PAS Almacenamiento a 22 C, en agitación constante Con Inactivación Sin Inactivación Día 1 Día 5 Día 7 Día 1 Día 5 Día 7 Día 9 Volumen, ph, Recuentos celulares (plaquetas, Leucocitos residuales), Torbellino óptico, HSR, CF (Expresión P-selectina), Parámetros metabólicos (Glucosa, LDH, PO2 y PCO2), Estudio Microbiológico

33 CONCLUSIONES Se observó que en ninguno de los 3 grupos de muestra: concentrados plaquetarios en plasma, concentrados plaquetarios con solución aditiva, ni en concentrados plaquetarios con solución aditiva tratadas con Amotosalem hubo desarrollo bacteriano al momento de realizar el estudio microbiológico. Se demostró que los concentrados plaquetarios obtenidos por aféresis con solución aditiva, muestran una mejor recuperación y viabilidad, manteniendo un metabolismo estable durante el período de almacenamiento en comparación a las plaquetas suspendidas en plasma.

34 CONCLUSIONES El estudio de los concentrados con PAS, realizados al 9 día, demostró que existen cambios metabólicos severos, que afectaron la viabilidad plaquetaria, no haciendo recomendable su uso. Las plaquetas con solución aditivas hasta el 7 día presentaron buenos estándares de calidad, concordantes con estudios internacionales realizados. Se comprobó que las plaquetas de aféresis con solución aditiva tratadas con Amotosalem se correlacionan bastante bien con las plaquetas que sólo presentan solución aditiva, pudiendo extender su utilización hasta 7 días.

35 MUCHAS GRACIAS!!

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