Int. Cl. 7 : A61K 31/ Agente: Ponti Sales, Adelaida

Transcripción

1 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 Número de publicación: Int. Cl. 7 : A61K 31/38 A61P 31/00 12 TRADUCCIÓN DE PATENTE EUROPEA T3 86 Número de solicitud europea: Fecha de presentación : Número de publicación de la solicitud: Fecha de publicación de la solicitud: Título: Utilización de anetola-ditioletiona para la prevención y tratamiento de toxicidad en el tendón inducida por un medicamento. Prioridad: FR Titular/es: Solvay Pharma S.A.S. 42, rue Rouget de Lisle 92 Suresnes, FR 4 Fecha de publicación de la mención BOPI: Inventor/es: Christen, Marie-Odile; Warnet, Jean-Michel y Rat, Patrice 4 Fecha de la publicación del folleto de la patente: Agente: Ponti Sales, Adelaida ES T3 Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 ES T3 1 DESCRIPCIÓN Utilización de anetola-ditioletiona para la prevención y tratamiento de toxicidad en el tendón inducida por un medicamento. La presente invención se refiere a una nueva utilización de la anetol-ditioletiona (o anetol tritiona). Las quinolonas, y especialmente las quinolonas de segunda generación, las fluoroquinolonas, son unos antibióticos de síntesis que, a causa de su gran actividad, son muy ampliamente utilizadas. Dichos productos son relativamente bien tolerados; sin embargo, se ha evidenciado un efecto secundario desde los años 90. Se trata de tendinopatías, que reagrupa tendinitis y rupturas tendinosas que se presentan en la mayoría de los casos a nivel del tendón de Aquiles, pero pueden afectar igualmente al tendón cuadricipital, o, a nivel de la espalda, al tendón superespinoso. La duración de invalidez es de un promedio de 62 días para tendinitis simples y de 98 días para rupturas. (Simonin y otros, Antimicrobial agents and chemotherapy, 44 (4), Abril 00, ). Otras moléculas parecen tener efectos similares, tales como las estatinas. En efecto, ciertos casos de tendinopatías y de rupturas de tendón han sido catalogadas con la simvastatina (Zocor o Lodales ) pero también con las nuevas generaciones de estatinas recientemente comercializadas. Este fenómeno de tenotoxicidad era hasta el presente mal conocido y no existían productos para ponerle remedio La célula constitutiva del tendón es el tenocito; en el tendón, dichas células están organizadas en columnas entre las fibras de colágeno. Los autores de la presente invención han estudiado en un modelo celular de tenocito el efecto citotóxico de las fluoroquinolonas. Inmediatamente han comprobado en este modelo que la anetol-ditioletiona (Sulfarlem ), probada en pretratamiento con puesta en contacto con dichos xenobióticos, protege de manera sorprendente y única contra dicha tenotoxicidad, mostrando el interés de esta molécula en la prevención y el tratamiento de la tenotoxicidad inducida por medicamentos tales como las quinolonas o las estatinas. La anetol-ditioletiona puede ser utilizada, por tanto, como medicamento administrado solo o en administración conjunta con el antibiótico o la estatina en prevención de la tenotoxicidad inducida por xenobióticos tales como las quinolonas o las estatinas. La presente invención tiene por objeto, por tanto, la utilización de la anetol-ditioletiona para la preparación de un medicamento destinado a la prevención y al tratamiento de la tenotoxicidad inducida por medicamentos tales como las quinolonas o las estatinas, que contienen la anetol-ditioletiona sola o una mezcla o una asociación con un medicamento inductor. La anetol-ditioletiona puede ser utilizada bajo una forma que contenga de a 0 mg y puede ser administrada a dosis de a 0 mg/día. A continuación se expondrán los resultados de ensayos que ponen en evidencia el efecto de protección de la anetolditioletiona. La prueba efectuada es una prueba MIFALC (Microtiración Fluorimetic Assay on Living Cells) de tipo II, es decir que todas las etapas, comprendidas incluso la detección/revelación, se hacen sobre células vivas, utilizando la prueba una detección fluorimétrica en luz fría, a fin de obtener la sensibilidad y la especificidad de detección máxima necesaria para los estudios intracelulares. Los ensayos se llevan a cabo sobre una línea de tenocitos inmortalizados, denominados TENO (Teno Cell Line). Preparación de los cultivos Los cultivos se llevan a cabo en frascos de 7 cm 3 para la multiplicación celular y en placas de 96 pozos con fondo plano para cultivo. 6 Los tenocitos son puestos en suspensión con un poco de tripsina. Cuando las células se desprenden, la acción de la tripsina es bloqueada por adición de medio de cultura que contenga suero fetal de ternera. Después de centrifugación, el fondo se recupera con medio completo HAM F-12, luego las células son contadas con ayuda de un hemocitómetro de Malassez o de Thoma. Se prepara a continuación una solución con 2700 células/ml en un medio de cultivo completo y se depositan 0 µl en cada uno de los pozos centrales de las microplacas de 96 pozos. Así se tienen 00 células por pozo. Las placas se ponen a incubar a 37ºC en atmósfera húmeda aire/co 2 (9%/%). La prueba se realiza después de 48 horas cuando las células se adhieren al soporte. 2

3 ES T3 Prueba 1 Las diferentes fluoroquinolonas (o estatinas) son utilizadas en solución yendo de 0,1 µm a 1 mm en un disolvente adaptado cuya inocuidad ha sido verificada previamente. La tenotoxicidad de dichas moléculas ha sido estudiada según diferentes protocolos: sin pretratamiento o con pretratamiento con la anetol-ditioletiona ( a la dosis de µm), 72 horas antes de la puesta en contacto con los xenobióticos; las células son colocadas entonces en cultivo en microplacas directamente en suspensión en las soluciones de la anetol-ditioletiona. El día de la prueba, después de haber observado la confluencia y el estado microscópico de las células, se elimina el medio de cultura por inversión de las placas y se distribuyen en cada pozo 0 µl de una solución µmolar de dihidro-diclorofluoresceína diacetato (H 2 DCF-DA), sonda fluorógena que penetra en las células y permanece localizada en su citosol; este producto es utilizado en rutina para evaluar los radicales libres producidos por la célula. Las placas son colocadas entonces en estufa a 37º durante minutos. Después de eliminación de la sonda por inversión de las placas, los pozos son tratados con las diferentes soluciones de xenobióticos y colocadas en la estufa. Se colocan a continuación las placas en el fluorímetro equipado con el filtro de emisión de 3 nm y con el filtro de excitación de 48 nm. Las unidades de fluorescencia son leídas después de minutos. Resultados 2 Los resultados están expresados en porcentaje de fluorescencia con relación al testigo. 1. Prueba con la Pefloxacina

4 ES T3 2. Prueba con la Norfloxacina Prueba con la Ciprofloxacina

5 ES T3 4. Prueba con la Ofloxacina

6 ES T3 REIVINDICACIONES 1. Utilización de la anetol-ditioletiona para la fabricación de un medicamento para la prevención o el tratamiento de la tenotoxicidad inducida por un medicamento inductor. 2. Utilización, según la reivindicación 1, para la fabricación de un medicamento que contenga de a 0 mg de anetol-ditioletiona